国家卫生研究院推迟许可第一个人体基因转化:用于TIL细胞的标记

7月29日,基因治疗迈出了一小步。国家卫生研究所(NIH)的重组DNA咨询委员会(RAC)的人体基因治疗小组要求在人体内进行第一次基因转化之前附加动物试验。在进行标记基因插入人体TIL纳胞的工作以前,必须由NIH院长James Wyngaarden、RAC、基因治疗小组及尽可能地由卫生部卫生助理Robert Windom许可。 TIL细胞—肿瘤渗透性淋巴细胞是癌症病人抑制肿瘤并受白细胞介素-2刺激的自身白细胞。在体外增殖以后,他们重新转入病人体内以攻击恶性生长。     

科学家反对有关邮寄r-DNA分子方面的禁令

美国国立卫生研究所(NIH)重组DNA顾问委员会(RAC)于1984在NIH的《涉及重组DNA分子的研究的有关准则》一书的附录H中,草拟了一项决议——“包含在有机体或病毒中的重组DNA分子,只能作为病原载运”。这项决议,在实施过程中,现在出现了矛盾,又回过头来纠缠RAC的成员了。 10月3日,RAC以提出一个更好的方式定     

RAC批准了5种新的治疗方法

国立卫生研究所(NIH)的重组DNA咨询委员会(RAC)在其9月11～12日的会议上批准了5种新的基因治疗方法。 第一个试验经批准将在田纳西大学(Memphis,TN)和Vanderbilt大学(Nashville, TN)进     

利用r-干扰素对黑素瘤进行基因治疗已经开始

Viagene公司(San Diego,CA)已开始治疗恶性黑素瘤的第一期临床试验,给患者注射的自身癌细胞经遗传改造后能表达γ-干扰素(γ-IFN)。在这项于今年七月由NIH重组DNA顾问委员会(RAC)批准的方案中,将有20位患者接受治疗。     

高歇病糖蛋白可能会成为Genzyme公司的主要产品

Genzyme公司在近两年内可能会在市场出售一种用于治疗高歇病的葡糖脑苷脂酶。几年前,Genzyme与国立卫生研究院(NIH)合作,研制一种修饰型天然葡糖脑苷脂酶。Genzyme公司在相当长的时间里一直为NIH临床试验提供产品。年初,公司开始了一系列新的临床试验。如果食品和药物管理局(FDA)同意的话,Genzyme公司就获得该药的独立药物资格,给它专有的美国市场销售权。     

Rac1、Rac2参与调节人单核细胞趋化和NADPH氧化酶活性

为了探讨小分子GTP酶蛋白Rac1和Rac2在人单核细胞中趋化迁移以及还原型辅酶II（NADPH）氧化酶活性中的作用,采用小分子干扰siRNA对人单核细胞中RAC1、RAC2分别进行特异性抑制,采用实时定量PCR技术、免疫印迹技术在RNA和蛋白质水平上确认抑制效果,使用甲酰三肽(formyl-met-leu-phe,fMLP)、人单核细胞趋化因子（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）诱导单核细胞趋化;用血清调理的酵母多糖（serum opsonized zymosan,ZOP)、佛波酯（phosphomolybdic acid, PMA）激活单核细胞NADPH氧化酶活性,诱导活性氧(Reactive oxygen species, ROS)产生,以此对Rac1和Rac2作用进行研究. 结果表明,小分子干扰siRNA能够在mRNA水平和蛋白质水平分别有效抑制目的基因表达;使用Chamber assay方法发现,仅Rac1参与了fMLP、MCP-1诱导的人单核细胞趋化. Rac激活实验确证,Rac1参与MCP-1诱导的趋化;细胞色素C还原法表明,Rac1和Rac2均参与PMA和ZOP诱导人单核细胞ROS生成. 在人单核细胞中,RAC1和RAC2基因沉默模型的成功建立以及初步研究显示,Rac1和Rac2的不同作用结果将为深入研究它们在人单核细胞中的功能奠定了良好基础.     

高胆固醇血症的基因治疗;试验已扩展到一些年轻患者

密歇根大学医药中心(Ann Arbor,MI)的 James Wilson 在进行基因治疗时似乎具有一种 Midastouch。他的最后一项治疗囊性纤维变性的方法已获得重组 DNA 咨询委员会(RAC)的批准,其治疗罕见的血胆固醇疾病的方法给 RAC 留下了极深的印象,致使该委员会允许 Wilson 在此项研究中对4名患者进行试验。该新闻大概是基因治疗的暂短发展史中最有意义的事件。Wilson 在家族性高胆固醇血症(FH)的研究过程中积累了15或更多例基因治疗的原始记录,第一次证实了“基因疗法”能够真正地治疗人类疾     

表皮生长因子对neu基因表达的诱导作用(简报)

Shih等首次通过NIH/3T3细胞转染试验在乙基亚硝脲(ENU)诱导的大鼠神经胶质纤维瘤中分离鉴定出一种转化基因,称之为neu基因,其表达可导致培养的NIH/3T3细     

Genzyme公司同国立卫生研究院签订酶合同以治疗高歇氏病和Fabry病

Genzyme公司(波士顿,马萨诸塞州)同国立卫生研究院(NIH)签订了两项为期三年的合同,打算生产两种由NIH进行的用于临床和临床前试验的酶,以便治疗高歇氏病和Fabry病。假如这些试验能成功,Genzyme公司打算获得食品及药物管理局(FDA)的批准,以便出售这两种酶,通过这些合同所得的联合收入是152万美元。高歇氏病是由于缺少大量的葡糖脑苷脂酶(GCR)引起的。这种慢性遗传病起初折磨     

火箭电泳法进行人用狂犬病疫苗抗原的检测

应用火箭电泳法(RIE)建立并优化了人用狂犬病疫苗抗原的检测方法。以传统的动物NIH法对电泳结果进行验证,实验结果显示该方法特异、重复性好、简便易行,与NIH法有较好的相关性。适用于人用狂犬病疫苗中间品抗原的检测,对人用狂犬病疫苗的生产及质量控制有重要意义。     

TPA完成临床试验

经美国国家卫生院(NIH)批准,Genentech公司进行了TPA(tissue plasminogen activator,血纤蛋白溶酶原激活剂)的试验。试验报告说,TPA能溶解三分之二以上心脏病患者的凝块;而通常使用的链激酶(St-eptokinase)只能溶解37％病人的凝块。     

改良抗体结合实验检测灭活狂犬病疫苗效价

目的:建立抗体结合试验检测狂犬病疫苗(aG株)效价的方法。方法:将待检测疫苗与疫苗标准品梯度稀释后分别加入人抗狂犬病毒免疫球蛋白国家标准品中和1 h,之后加入80%感染剂量的狂犬病毒CVS-11,体外中和1h后接种BSR细胞,培养24 h后免疫荧光染色,在显微镜下观察结果,通过检测剩余病毒量计算待检疫苗的效价,同时与小鼠中和试验法(NIH法)测定狂犬病疫苗效价进行比较。结果:2种方法对8个样品效价的检测结果无显著统计学差异(P=0.997,配对t检验)。结论:初步建立了改良抗体结合试验,可用于狂犬病疫苗中间产品的质量控制。     

具潮霉素B抗性的NIH3T3细胞饲养层的制备

[目的]建立具有潮霉素B(hygromycinB)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2-human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。[方法]通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和southernblot鉴定。[结果]经300ug/ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。[结论]本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。     

双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较

通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫 苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代 NIH动物法。将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12～14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹 心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关 系图并计算出疫苗效力值E-NIH。结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M- NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2．41～5．85之间,而相应的M-NIH值在5．11～ 10．19之间。从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、 成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的。     

美国农业部通过推动机器人计划来改善农业生产ISAAA信息

<正>美国农业部(USDA)国家粮食与农业研究所(NIFA)宣布下拨300万美元经费来推动机器人在美国农业生产中的使用。这项经费是"国家机器人计划(NRI)"的一部分,"国家机器人计划(NRI)"是国家粮食与农业研究所(NIFA)、美国国家科学基金会(NSF)、国家卫生研究院(NIH)、美国国家航空航天局(NASA)和国防部的合作研究     

人肺癌DNA转化细胞系I2及其供体和受体细胞的形态结构的观察

本文用相差显微镜、扫描电镜和透射电镜对 NIH3T3、人肺腺癌细胞系 AGZY-83-a 及转化细胞 i_2(系 AGZY-83-a 基因组 DNA 和有抗性标记的载有 neo 基因的质粒 pSV_2-neoDNA 共转染 NIH3T3所得)进行了形态结构的比较观察。结果发现转化细胞呈纤维状,能重叠生长,细胞表面微绒毛明显细长,核形不规则,粗面内质网、核糖核蛋白体丰富等在形态结构上显示了恶性特征。     

佛波酯促进NIH3T3细胞的铺展和聚焦粘附激酶的酪氨酸磷酸化

100nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphobol-13-acetate,TPA)能明显促进NIH3T3细胞在纤连蛋白(Fn)上的铺展,该作用能分别被酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)抑制剂4′,5,7-三羟基异黄酮(genistein)和蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)抑制剂calphostinC和神经鞘氨醇(sphingosine)所抑制.TPA作用于结合到Fn上的NIH3T3细胞,使其聚焦粘附激酶(focaladhe-sionkinase,FAK)的酪氨酸磷酸化程度较未处理细胞升高,于30min时达对照的204.0%,并存在浓度依赖性;该变化分别被上述抑制剂所拮抗;未经TPA处理的NIH3T3细胞和纤连蛋白结合诱导的FAK酪氨酸磷酸化亦分别被上述抑制剂所抑制.细胞松弛素D则无论TPA作用与否,都能完全阻断NIH3T3细胞的铺展和FAK的酪氨酸磷酸化.以上结果提示,TPA促进NIH3T3细胞在Fn上铺展的信号转导机制,与PKC的激活有关,进一步则可能通过影响FAK的酪氨酸磷酸化来实现,同时需要细胞骨架的参与;NIH3T3细胞和Fn结合并诱导FAK酪氨酸磷酸化的过程亦依赖于PKC和完整的细胞骨架.     

世界生物医学顶级研究机构NIH

美国国立卫生研究院(NIH)是世界顶级的生物医学研究与资助机构,百年来为美国乃至世界的生物医学发展发挥了重要的作用,在生物医学研究和管理方面均处于世界领先水平。本文从NIH发展历史和社会机制角度入手,对NIH的研究实验室、组织机构、科研资助机制、与其他机构的合作关系以及所取得的成就等进行了初步研究。     

肺癌基因疗法待批准

马里兰的 Genetic Therapy Inc.(GTI)公司宣布,该公司的肺癌治疗新方案(基因疗法)已得到重组 DNA 顾问委员会(RAC)的认可,只要美国食品药物管理局(FDA)一点头,就着手实施。这一雄心勃勃的治疗方案是针对“非小细胞肺癌”制订的,该病每年都要使10万美国人受累。患者的     

NIH实施最新策略加速临床医学发展

为提高医学研究能力,加速基础医学研究成果向临床应用的转化(from the bench to the bedside),美国国立卫生研究院(National institutes of Health,NIH)院长Elias A.Zerbouni博士于2003年10月1 口公布了一系列的改革方案,总称为“NIH医学研究指南”(the NIH Roadmap for Medical Re-search)。该研究指南体现的是以疾病为导向的、崭新的研究模式。