肾上腺糖皮质激素对体外培养的人体肝癌细胞的影响 一、对细胞生长及DNA合成的抑制

一些研究工作证明,肾上腺糖皮质激素对其相应的靶组织或靶细胞的生长、分化有诱导功能,能诱导大鼠肝或离体培养的肝癌细胞专一性地合成某些酶,并抑制DNA的合成(Loeb 1973);离体培养的大鼠肝癌细胞膜     

激活T细胞的培养上清液对肝癌细胞毒性作用的电镜观察

外周血液E-玫瑰花环阳性的淋巴细胞由PHA-P刺激而产生无白细胞介素-1(Interleukin-1)的培养上清液,在体外对大鼠肝癌细胞的杀伤效应敏感,通过光学显微镜观察,激活T细胞培养上清液引起肝癌细胞胞浆的收缩、分离。电子显微镜观察这些细胞显示出溶酶体残留的致密小体形成和线粒体肿胀,细胞浆内以及贴邻的细胞膜之间出现大量空泡。这种现象提示了激活T细胞培养上清液有侵袭肝癌细胞的特性,导致细胞溶解。     

甲胎蛋白在体外对人肝癌细胞生长的影响

本文用MTT比色法观察了甲胎蛋白(AFP)在体外对人肝癌细胞生长的影响。结果表明,AFP能促进SMMC-7721人肝癌细胞的生长。当AFP与AFP抗体合用时,AFP抗体能减弱AFP对SMMC-7721细胞生长的促进作用;AFP抗体单用对此种细胞的生长亦有抑制作用。另一方面,在相同的实验条件下,AFP和AFP抗体对HL-60人白血病细胞的生长无明显影响;提示AFP的促生长作用具有一定的肿瘤细胞特异性,并非一种蛋白质对培养细胞的非特异性营养作用。此外,AFP亦能促进MCF-7人乳腺癌细胞的生长,AFP抗体对此种细胞的生长有抑制作用。由于MCF-7细胞存在功能性AFP受体,也能合成和分泌AFP。这就提示,人肝癌细胞中的AFP很可能与其受体特异性结合,产生促生长效应。确切机制尚待进一步阐明。     

人体肝癌细胞(BEL-7402系)体外生长行为的显微缩时电影观察

恶性肿瘤有丝分裂行为之异常,早在本世纪初就已被注意到(Lambert,1913;Boveri,1914)。自那时以来,许多肿瘤病理学及生物学工作者曾围绕着这一课题开展了大量的工作,并已在临床手术标本以及动物的原发灶与移植性肿瘤的种种材料中观察到异常有丝分裂的各类图形。然而,这些资料大多来自固定、染色的标本,而对其演变过程的动态分析则付缺如。直至五十年代前后起,随着细胞培养术的进展并借助显微缩时电影术,才陆续见有一些     

吡喹酮在体外培养中对日本血吸虫童虫超微结构影响的电镜观察

吡喹酮(Praziquantel,PZ)是目前最优良的非锑类抗血吸虫药,实验证明,PZ对埃及、曼氏及日本血吸虫病疗效均佳,对体外培养的日本血吸虫成虫、曼氏血吸虫成虫及自由生活期幼虫均有很强的杀灭作用。有关PZ对血吸虫作用的文献很多,但迄今尚未见有关PZ在体外培养中对日本血吸虫童虫超微结构影响的文献报道。本文报道利用血吸虫童虫体外培养技术,在超微结构水平观察PZ对日本血吸虫肝门型童虫形态学影响。     

人体耳蜗扫描 电镜观察图像

人体耳蜗是听觉系统的末梢部位,它深藏于颞骨岩部之中,由于颞骨岩部异常坚硬和耳蜗形态特别复杂,因此解剖比较困难。人体耳蜗底部直径约3—4毫米、高约2—3毫米,整个耳蜗为两圈半螺旋。在耳蜗骨螺旋板的边缘分布着许多感觉细胞,其中内毛细胞有一排约3500个,外毛细胞3—4排共约12000个。在骨螺旋板中共有螺旋神经节细胞约     

用整装电镜技术观察体外培养的人体鼻咽癌上皮细胞(CNE 细胞)的细微结构

培养细胞具有复杂的细胞骨架三维结构,包括微丝、微管和中等纤维三种主要的胞质纤维。使用抗体标记技术在光学显微镜和超微结构水平对这些纤维的结构蛋白的定位有过许多工作,但在方法学上还具有不足之处。光学显微镜能观察样品的范围大,但解像力差。常规电镜虽然可用于观察细胞结构,但样品必须切片,因此对细胞内的成分很难重组出立体的概念。近年发展起来的整装电镜术,在研究细胞结构     

血管紧张素Ⅱ对肾上腺糖皮质激素分泌的影响

本工作观察了血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）对豚鼠和狗的肾上组织皮质醇分泌量的影响。结果表明,当ＡⅡ浓度≥１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ时孵育液中皮质醇含量显著增加（Ｐ〈０．０１）,并且具有较明显的量效关系和时效关系。ＡⅡ以及促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）与肾上腺组织或细胞一同孵育时,皮质醇的分泌量明显高于ＡⅡ和ＡＣＴＨ单独存在时的分泌量（Ｐ〈０．０５）。孵育液内游离钙减少时ＡⅡ促皮质醇分泌的作用有所降低（Ｐ〈０．０５）     

人体肝癌细胞系(SMMC-7721)糖皮质激素受体的半衰期

用抑制蛋白质合成的方法,测定了人体肝癌细胞系(SMMC-7721)糖皮质激素受体(GCR)的半衰期。结果显示,在蛋白质合成被抑制79.30±3.69%的情况下,GCR的半衰期为3.5±0.3h,降解速度常数为0.200±0.017h~(-1)。如果正常细胞GCR也具有如此短的半衰期,则提示GCR对内外环境的变化可做出迅速的反应,可能在靶细胞对激素反应的调节中起着活跃的作用。     

Taxol对培养的人成纤维细胞内微管组装的影响

本实验用微管的PAP免疫酶细胞化学方法,研究了培养的小儿包皮成纤维细胞及其分离的中心体在taxol的作用下对微管组装的影响。实验结果表明taxol对低温(4℃)和微管解聚药物的处理具有拮抗作用,它阻止微管解聚,对微管具有稳定作用,并观察到taxol可降低中心体对微管组装所需的管蛋白临界浓度,增强中心体对微管的组装能力。Taxol对细胞内微管的影响,主要表现在促使微管呈束状浓集化,并随处理时间的延长,这种浓集化表现愈益明显,导致破坏胞质CMTC的正常分布。由于taxol能使微管浓集化,抑制其解聚,使得细胞从G_2期进入M期后,微管不解聚,从而不能形成正常的纺锤体,胞质不分裂,最后导致细胞微核化。用秋水仙酰胺处理后再加taxol时,我们观察到细胞CMTC与正常未经处理的细胞CMTC比较,呈相反的分布现象,这可能与秋水仙酰胺促使中心体与细胞核分离和taxol增强中心体对微管的组装有关。     

BEL-7404人肝癌细胞甲胎蛋白基因表达的原位杂交与免疫细胞化学研究

本文用地高辛标记的甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｃＤＮＡ探针原位杂交和免疫细胞化学方法观察到,几乎所有的ＢＥＬ－７４０４人肝癌细胞均能表达ＡＦＰｍＲＮＡ和相应的蛋白。     

丁酸对体外培养的人鼻咽癌上皮细胞的影响

无论是自发的、病毒引起的或致癌物诱发的恶性转化的哺乳类细胞的体外培养,其形态多发生改变,总是变得近似圆形,边缘突起短而少,细胞致密和折光性强,同时失去生长接触抑制,降低细胞与细胞之间和细胞与生长底物之间的粘着性等特性。近年报道了关于短链脂肪酸如丁酸(或丁酸钠)对细胞能产生明显的影响,能抑制培养细胞的分裂,可诱发一些上皮性细胞产生形态的改变,可使转化的细胞     

氧胁迫对人肝癌细胞生长分化和凋亡的影响

采用不同浓度的抗坏血酸(50—800μmol/L)和硫酸亚铁(2.5—40μmol/L)系统生成以羟自由基为主的各种程度氧胁迫,使之作用于人肝癌细胞。本文所采用的不同程度的氧胁迫均能抑制癌细胞的生长。低水平氧胁迫可使肝癌细胞失去某些恶性特征,趋向分化,表现为细胞表面对Con-A的凝集力、甲胎蛋白含量、γ-谷氨酰转肽酶和酪氨酸-α-酮戊二酸转氨基酶活性都朝着分化方向变化,差异显著。分化后的细胞克隆形成能力显著降低。在分化过程中,出现一定量的凋亡细胞。随着氧胁迫程度的增高,凋亡细胞增多,表现为非贴壁细胞增多,细胞体积变小,染色质凝缩在核膜边缘,呈新月形,核碎裂,但质膜完整。细胞核中DNA降解成大约21.2kbp大小的大片段DNA。有望通过严格控制氧胁迫程度来减慢肝癌细胞增殖,促进分化和凋亡,使恶性细胞逆转成良性细胞。     

人胎垂体生长激素样免疫反应细胞的发育

为探讨人胎垂体生长激素细胞发育规律,本文用免疫细胞化学结合图像分析,研究１９例不同胎龄人胎垂体生长激素细胞的形态、大小、光密度变化。结果如下：①胎１６周已存在生长激素免疫反应细胞,随胎龄增加,细胞多排列成团或索,并由周边部向远侧部的中央延伸。②随胎龄增加,生长激素样免疫反应细胞数量逐渐增多,细胞逐渐增大,胞浆逐渐增多,核浆比值逐渐变小。至胎龄３２周,生长激素样免疫反应细胞以大型细胞为主,多为圆形或卵圆形。③生长激素样免疫反应细胞的光密度随胎龄增加而逐渐增高,２６周达高峰,以后呈下降趋势,但仍高于２４周的水平,结果提示：垂体生长激素细胞的发育是从幼稚到成熟的过程,生长激素细胞的功能在胎２４－２６周最旺盛。     

木黄酮对人催乳素瘤细胞增殖及其凋亡影响的实验研究

目的：观察木黄酮（genistein,GST)对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法：将CST、β-雌二醇（E2）作用于体外培养的人催乳素瘤细胞,测定MTT值及^3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果：不同浓度的GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖,并存在着剂量效应,10^-5mol.L^-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的55.3%上升为90.3%;不同浓度的E2以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖,并使G2期的细胞比例从对照组的15.6%上升为41.8%,GST和E2的共同作用仍可抑制催乳素瘤细胞的增殖,但抑制程度降低,不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡,E2对GST的促凋亡作用无明显影响。结论：GST在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖,并促进其凋亡,E2可部分拮抗GST的抑制增殖作用,但对其促凋亡作用无明显影响。     

丁酸钠对大鼠肝癌细胞(CBRH—7919)的增殖和甲胎蛋白合成的影响

本文报道丁酸钠对大鼠肝癌细胞(CBRH—7919)的形态、生长和甲胎蛋白合成产生的影响。5mM丁酸钠作用24小时后,细胞体积增大,形态改变呈现上皮样;细胞生长率降低;~3H-TdR脉冲标记细胞,显示细胞的标记指数明显下降;扫描电镜观察细胞的表面形态,结构特点近似于这株细胞的G_1期,说明细胞生长受抑制与细胞被阻止在G_1期有关。此时,免疫荧光和免疫沉淀方法显示细胞内合成的甲胎蛋白受抑制。除去丁酸钠作用后,细胞的形态和生长率恢复,甲胎蛋白合成增多,表明CBRH-7919细胞的甲胎蛋白合成能力与细胞的增殖分裂有平行关系,丁酸钠通过控制细胞周期进程抑制细胞的增殖,可以调节肝癌细胞的甲胎蛋白合成。     

促肾上腺皮质激素释放激素对人早期胎盘组织绒毛膜促性腺激素释放的调节作用

为探讨人早期胎盘组织产生的促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）的生物学作用及其绒毛膜促性腺激素（hCG）合成和释放的调控机制,在人早期胎盘组织体外孵育模型上研究了CRH及其拮抗剂（α－HelicalCRF9-41）对hCG基础分泌和由GnRH刺激的hCG分泌的影响。结果表明,10-10～10-7mol／L的外源性CRH可明显抑制hCG的基础释放（P＜0.05）,而以10-7mol／L作用最显著（P＜0．001）;加入10-7mol／L的CRH4小时后,hCG释放量开始有所下降,但尚无统计学差异,到加药后8小时,CRH组已明显低于相应的对照组（P＜0．05）,以加药后16小时抑制作用最明显（P＜0．001）,到24小时抑制作用趋于减弱,但与同期对照相比仍有显著差异（P＜0．05）;10-7mol／L和10-5mol／L的α-HelicalCRF9-41可明显刺激hCG的分泌（P＜0.001）;2×10-7mol／L和2×10-6mol／L的α－HelicalCRF9-41可完全逆转CRH对hCG释放的抑制作用;2×10-9～2×10-7mol／L的CRH对由GnRH诱导的hCG释放有明显的抑制作用。这些结果提示,由胎盘的合体滋养层产生的CRH,通过受体介导机制,不仅对hCG基础分泌,且对由GnRH诱导的hCG分泌都有明显的抑制作用,且这种作用具有特定的时间依赖性和剂量依赖性．CRH可能是参与hCG分泌调控的生理性负调节团子之一.