四类不同倍性鲫鱼在胚胎发育期间同工酶基因表达的比较分析

用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳比较分析了单倍体、二倍体、三倍体和复合四倍体4类不同倍性鲫鱼以及单倍体和二倍体鲤鱼在胚胎发育时期4种同工酶(EST,LDH,MDH,SOD)酶谱。结果表明,单倍体鲫鱼和单倍体鲤鱼胚胎与各自的二倍体胚胎相比,同工酶酶谱看不出差异;天然三倍体银鲫胚胎的MDH和SOD同工酶酶谱与二倍体鲫相似,但EST和LDH同工酶比二倍体增多了酶带,有的酶带如EST5和EST6还可在鲤鱼胚胎中找到相应的表达产物,提供了天然雌核发育三倍体银鲫杂交起源的证据;复合四倍体由于含有鲤鱼的一个外来基因组,其胚胎的基因表达有些与杂种类似,在所分析的4种同工酶酶谱中,都可观察到来自鲤鱼基因的影响。此外,在由源于不同复合四倍体个体的卵子发育形成的胚胎间,还观察到同工酶基因表达的异质性。     

异精效应在雌核发育彭泽鲫胚胎发育中的同工酶证据

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术 ,对同源和异源精子激发雌核发育彭泽鲫子代胚胎发育过程中四种同工酶 (EST ,LDH ,MDH ,ME)的表达情况进行了比较研究。结果表明同源和异源精子激发的胚胎在MDH和LDH同工酶表达上存在明显差异。MDH同工酶的差异主要表现为 :在孵出期 ,异源精子激发的胚胎比同源精子激发的胚胎多出两条谱带MDH4’和MDH5’ ;LDH同工酶的差异表现为 :在原肠中期至肌肉收缩期的五个时期中 ,异源精子激发的胚胎比同源精子激发的胚胎多出 4条谱带 (LDH9’— 12’)。这种差异说明同源与异源精子对子代胚胎发育过程中同工酶表达的影响不同 ,可能属于“异精生物学效应”的一种表现形式     

东方铃蟾不同发育阶段乳酸脱氢酶同工酶的变化

东方铃蟾乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的表达在不同发育阶段以及不同的组织有其特异性。心脏中以LDH-1占优势,骨骼肌和肝脏中以LDH-5占优势,脑中LDH-1与LDH-5的相对含量接近。从鳃盖期至成体,心、肝、骨骼肌的LDH同工酶谱型不发生转换。心脏的LDH同工酶含量无阶段间的差异;肝、骨骼肌的LDH同工酶相对含量变化发生在从尾退化期至成体这一时期。在尾退化期,脑中LDH同工酶谱型发生转换,但LDH同工酶相对含量变化的幅度较小。     

镉对蟾蜍的4种器官乳酸脱氢酶同工酶的影响

以腹腔注射法对蟾蜍(Bufo bufo gargarizans)给镉,处理一周后,观察了4种镉中毒浓度(0．1、0．2、0．4、0．8mg／kg)条件下的蟾蜍心、肝、肾和睾丸中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的变化。结果表明：随着镉中毒浓度的升高,心脏LDH同工酶的活性明显升高,睾丸LDH同工酶的活性明显下降,肝中的LDH1、LDH2、LDH3、LDH5在0．4、0．8mg／kg浓度组酶活性明显增加,而LDH4则明显减弱,肾中LDH1的活性随镉浓度的升高而明显升高,其它各酶带活性出现先增强而后又逐渐减弱的现象。结果提示了镉对蟾蜍主要器官LDH同工酶的影响具有组织差异性。     

四种园蛛同工酶的比较研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对叶斑园蛛、角类肥蛛(黑、白2种体色)、大腹园蛛、黑斑园蛛4种园蛛科蜘蛛的酯酶(EST)同工酶、乳酸脱氢酶(LDH)同工酶、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶进行了比较研究。结果表明,4种园蛛的EST、LDH具有明显的种族特异性,而SOD在种间基本没有差别。不同种蜘蛛都有各自的EST、LDH同工酶谱型,可以用它们作为识别物种的附加指标。     

中国林蛙早期胚胎发育过程同工酶的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对中国林蛙（Rana chensinensis)早期胚胎发育过程中（受精后0－512h)乳酸脱氢酶（LDH）同工酶和酯酶（EST）同工酶进行了研究,结果表明：1．LDH同工酶在受精卵及早期胚胎发育过程中一直存在,并且在胚胎发育的不同时期差异显著,LDH1同工酶在胚胎发育的各个阶段都占绝对优势,而DH5活性从尾芽期开始增强,LDH2,LDH3,LDH4 3种同工酶的活性较;低同时也发现LDH1,LDH3,LDH4同工酶各亚带也发育阶段的特异性,2．EST同工酶在开口期才开始出现。     

斯氏并殖吸虫乳酸脱氢酶,苹果酸脱氢酶及酯酶同工酶的研究

本文采用Disc-PAGE电泳,首次对我国独有的斯氏并殖吸虫(Paragonimus skrjabini Chen,1959)成虫、童虫、囊蚴的乳酸脱氢酶(以下简称LDH)、苹果酸脱氢酶(以下简称MDH)和酯酶(以下简称EST)同工酶进行了研究。 在成虫、童虫、囊蚴间,LDH、MDH、EST同工酶在酶带数、排列型式、Rf值、相对活性和优势酶带的位置都存在差异。 根据虫体和宿主组织同工酶谱的不同,可以认为是本虫本身所具有。 同工酶作为其分类指标时,不仅要比较不同虫种成虫稳定的同工酶谱,也要比较同工酶在个体发育型式间的差异。     

中国大鲵及鳖不同组织LDH同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺薄层垂直板状凝胶电泳、特异性的组织化学染色及光密度薄层扫描研究的心、肝、肾、眼球、小肠、胸肌、脾脏、卵巢、胰腺、胃肌、血浆等12种组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的酶谱。并与爬行类动物鳖不同组织的LDH同工酶作了比较。结果表明中国大鲵的胸肌、肝脏、肾脏具有LDH~(100)、LDH~(60)、LDH~(50)3种同工酶;胃肌有LDH~(100)、LDH~(70)、LDH~(60)同工酶,其它组织只有LDH~(100)、LDH~(60)2种。故按组织特异性区分,大鲵组织的LDH同工酶具有3种谱型,它们的含量及相对活力也有很大的差异。鳖的LDH同工酶迁移率比大鲵的低,是一组阴极性同工酶,其等电点比大鲵的高,但其LDH同工酶与中国大鲵的有很大的差异,且两种动物都具有LDH~(50)。     

东方田鼠乳酸脱氢酶同工酶的研究

目的研究乳酸脱氢同工酶在3种东方田鼠不同器官的分布.方法以大鼠和小鼠作对照,用聚丙烯酰胺凝胶电泳对3个不同地区的东方田鼠(Microtusfortis)血清、红细胞、肝脏、肾脏、肺中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行分析.结果东方田鼠血浆中只有LDH5,血清中湖南洞庭湖地区、宁夏青铜峡地区的东方田鼠也只有LDH5,而东北地区的东方田鼠则含有LDH1和LDH5,3个地区的东方田鼠肾脏和肺中都有5种LDH同工酶,肝脏中除东北地区的东方田鼠含5种LDH同工酶外,其余两种东方田鼠均以LDH5为主(LDH5占95%以上).结论东北地区东方田鼠乳酸脱氢酶同工酶谱与其他两地的东方田鼠不相同.     

金鱼(Carassius auratus L.)同工酶的发生遗传学研究 Ⅱ.金鱼胚胎发育不同时期乳酸脱氢酶同工酶分析

采用垂直平板淀粉胶电泳方法,对西吉彩鲫、红高头金鱼胚胎发育不同时期乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行分析比较。研究结果表明,在游动期以前,各个发育阶段的LDH同工酶谱带基本相似。而在游动期以后,随着肝组织的形成,LDH同工酶谱带开始增加,出现了偏向负极的显示肝组织特征的谱带。这表明,细胞分化期间,LDH同工酶的特异性在一种或多种细胞类群中存在。组织和器官的分化与某些基因的活动有关。西吉彩鲫、红高头金鱼在胚胎发育时期LDH同工酶谱带差异不明显,从整个发育时期LDH同工酶发展趋势上看十分相似。这也为金鱼起源于野生的红、黄色金鲫提供了直接的根据。     

移植非洲爪蟾胚胎细胞核引起花背蟾蜍成熟卵单性发育的研究

将非洲爪蟾胚胎细胞核移入花背蟾蜍成熟未受精卵后,得到了发育至各期的胚胎。对发育不同的时期的胚胎,进行了乳酸脱氢酶同工酶谱及染色体组型分析,结果一显示其均与受体一致。根据实验分析认为,非洲爪蟾的胚胎细胞进入花背蟾蜍成熟卵后,引起的是花背蟾蜍的单性发育。     

激光照射对中华大蟾蜍早期胚胎染色体的影响

应用YAG倍频激光器对中华大蟾蜍四细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育,并对激光照射致畸的胚胎在尾芽期用压片法进行染色体分析。实验结果表明：激光照射后正常的胚胎其染色体无变化,激光照射致畸的胚胎其染色体有丢失和加倍等变化。     

红藻氨酸和GABA受体在中华大蟾蜍卵母细胞的表达

本文报道了利用中华大蟾蜍卵母细胞作为外源性膜蛋白的表达及其功能特性研究的模式系统。将大鼠脑的mRNA微量注入蟾蜍卵母细胞(每个卵母细胞注射50ng),在19℃下经48h以上培养后,由外源mRNA表达的大鼠脑的红藻氨酸和γ-氨基丁酸受体被整合到了卵母细胞膜上。红藻氨酸(5×10~(-5)mol/L)和γ-氨基丁酸(10~(-4)mol/L)所诱导的膜电流分别达到294.0±6.4nA(n=5)和309.5±4.9nA(n=4)。红藻氨酸浓度在10~(-3)mol/L时,其诱导的膜电流达最大值。进而,注射mRNA的卵母细胞,~(36)Cl~-流入速度比对照组高一倍多。这些结果表明,中华大蟾蜍卵母细胞,如同爪蟾卵母细胞一样,能表达具有功能的外源膜蛋白(受体蛋白和离子运输蛋白)。     

Cytoplasmic Influence on Lethality in Nucleocytoplasmic and Natural Hybrids between Bufo Calamita Laur and Bufo Bufo L. (Amphibia, Anura)

Nucleocytoplasmic interactions have been studied through nuclear and cytoplasmic grafts. Bufo bufo nuclei transplanted in Bufo calamita eggs provoked 95% lethality during gastrulation. Influence of the cytoplasm in such a nucleocytoplasmic incompatibility has been studied through cytoplasmic fractionation and grafting of the fractions obtained. Fractionation of egg cytoplasm gave three fundamental fractions: lipid, hyaline cytoplasm and vitellus. After injection of B. calamita fractions into B. bufo fertilized eggs, the hyaline cytoplasmic fraction provoked a gastrulation block in the same ratio (95%) as in the interspecific nuclear graft experiment. Influence of the hyaline cytoplasmic fractions of both species has been tested on nucleocytoplasmic and natural hybrid developments. The B. calamita hyaline cytoplasmic fraction provoked in each case a developmental block at the beginning of gastrulation. The B. bufo hyaline cytoplasmic fraction acts later at the yolk plug stage and in some cases partially corrects the developmental bolck or exogastrulation of young hybrid gastrula. It can be generalized that in both kinds of hybrids, the hyaline cytoplasmic fraction of B. calamita exerted a lethal effect on B. bufo nucleus.     

中华大蟾蜍输卵管促受精因子的实验分析

在孕酮作用厂,切除卵巢的中华大蟾蜍输卵管上皮细胞不仅能够使外源移植的卵母细胞在输卵管中正常运行,还保证卵母细胞正常受精。根据输卵管卷曲部分泌物的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,存在依赖孕酮的３３ｋＤ蛋白质。经兔抗３３ｋＤ蛋白抗体处理具输卵管分泌物的卵母细胞,受精率受到显著抑制·提示该蛋白有促受精活性。输卵管分泌物介入受精涉及复杂的多种因子。     

不同能量激光照射后中华大蟾蜍早期胚胎发育及其蛋白质谱变化的研究

应用YAG倍频激光器选择不同能量密度激光微束对中华大蟾蜍4细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育状况,统计出膜率、畸胎率和死亡率。实验结果表明：低能量激光照射明显地提高了胚胎的孵化速度,且使畸变率降低;而高能量激光对胚胎发育有明显抑制作用,而且使畸变率增高。不同能量密度激光微束照射中华大蟾蜍早囊胚,0．5h后制备样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析。结果显示激光照射对蛋白质点数及其分布有影响,影响程度与照射激光密度有关。结论：激光照射可以影响胚胎发育和蛋白质的合成。     

四种除草剂对中华大蟾蜍蝌蚪红细胞微核及核异常的影响

研究了除草剂精克草星、苯磺隆、使它隆和乙草胺单独及联合作用时对中华大蟾蝌蚪红细胞微核及核异常的影响。结果表明,处理２４小时时,单独作用的除草剂均可不同程度地引起微核率及核异常细胞率等遗传指标的上升。而且,在一定的浓度下各指标分别有高峰期,其中微核率与对照组差异极显著（Ｐ〈０．０１）或显著（Ｐ〈０．０５）。微核率与除草剂浓度之间无显著相关,不表现出剂量－效应关系。四种除草剂联合作用的微核率等指标反而     

Glutathione transferase activity during Bufo bufo development

High levels of glutathione transferase activity were measured during the development of the embryos of Bufo bufo including unfertilized eggs. After stage 4 glutathione transferase activity gradually decreased until stage 25 when the minimum was reached. No change in the number of isozymes was noted during development according to isoelectric focusing analysis performed on the cytosolic fractions of selected stages.