中国新疆维吾尔自治区不明原因发热人群中Tahyna病毒感染状况调查

本研究通过对新疆地区不明原因发热人群血清Tahyna病毒抗体进行检测,以了解Tahyna病毒在当地的感染状况及分布特征。通过间接免疫荧光方法对新疆维吾尔自治区南部喀什地区、北部伊犁地区742例不明原因发热患者急性期血清标本进行Tahyna病毒抗体检测,并对IgM抗体阳性标本平行进行Tahyna病毒、Snowshoe hare病毒和Inkoo病毒三种抗原性相似的布尼亚病毒的蚀斑减少中和试验。研究结果显示新疆南部喀什地区采集不明原因发热患者急性期血清中,IgM抗体阳性率5.3%,IgG抗体阳性率18.3%;新疆北部伊犁地区采集的急性期患者血清标本中并未发现TAHV IgM抗体阳性;蚀斑减少中和试验结果显示,TAHV IgM抗体阳性患者血清中Tahyna病毒中和抗体滴度较其它两种布尼亚病毒中和抗体滴度升高明显。本研究证实新疆南部地区不明原因发热人群存在Tahyna病毒的急性感染和既往感染,为相关疾病的进一步监测提供基础。     

ELISA间接法检测呼吸道合胞病毒和副流感病毒血清IgM和IgA抗体

建立了检测呼吸道合胞病毒(RSV)和副流感病毒(PFV)血清特异性IgM和IgA抗体的间接ELISA方法。在方法统一的基础上比较了检测IgG、IgM和IgA抗体的结果,证明检测血清IgM和IgA可以作为RSV和PFV感染的早期诊断指标。检测了120份临床急性下呼吸道感染患儿的血清,RSV-IgM检出率为33.3％,RSV-IgA为36.7％;PFV-IgM为27.5％,PFV-IgA为31.6％。提出了对RSV和PFV感染以检测特异性IgA替代IgM或两者互补的设想。     

呼吸道合胞病毒IgM抗体AlphaLISA快速检测方法的建立

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)属于副粘液病毒科,是一种下呼吸道感染最主要的RNA病毒.呼吸道合胞病毒感染是引起全球婴幼儿高致死率的呼吸道感染病原,仅次于疟疾,但用于检测RSV感染的选择相对较少.本文通过抗原抗体结合原理,建立呼吸道合胞病毒(RSV)IgM抗体AlphaLISA快速检测方法.小鼠抗人IgM单克隆抗体偶联的受体微球与临床血清样品中RSV特异性IgM抗体结合,RSV特异性IgM抗体再与生物素标记的RSV抗原结合,生物素连接偶联链霉亲和素的供体微球;受体微球和供体微球的距离被拉近小于200nm,680nm荧光激发供体微球生成单线态氧,扩散给受体微球,发射波长为520～620nm的荧光,荧光强度与血清中RSV特异性IgM抗体呈正比.结果显示,该方法批内变异系数与批间变异系数均小于10％,不与其他呼吸道病原体发生交叉反应,与间接免疫荧光法具有较好的一致性,总符合率达83.33％.该方法具有微量检测、快速省时、操作简便等优势,可快速检测RSV的IgM抗体,为早期确诊RSV感染提供高效可行方案.     

抗体抗病毒作用的新认识

本文简要综述了近年来通过抗体缺陷病人和抗体缺陷动物模型研究抗体抗病毒作用的研究进展,以及抗体控制病毒感染作用的一些新认识.抗体缺陷病人的感染原分析显示抗体在控制病毒感染性疾病中发挥重要作用,抗体缺陷动物模型实验进一步证实IgM型天然抗体能控制病毒在体内的播散,并促进特异性免疫应答的产生;获得性抗体在病毒初次感染的急性期与细胞免疫协同作用控制病毒的感染,而对同一病毒的再攻击,抗体能单独发挥作用,阻止病毒再感染疾病的发生.     

国内首次自患者标本中同时分离的登革2型和3型病毒的鉴定

采用间接免疫荧光方法 ,检测患者血清标本中的抗登革病毒IgM和IgG抗体 ;同时将病人急性期血清接种C6 36细胞进行病毒分离。从分离的病毒悬液中提取RNA ,进行RT PCR扩增和序列测定。结果显示 ,该患者血清中存在抗登革病毒的IgM和IgG抗体。从病人血清中分离的病毒 ,经RT PCR和序列测定证实为登革 2型和 3型病毒的特异序列。表明该患者为登革 2型和 3型病毒混合感染     

人巨细胞病毒pp65特异性抗体测定在原发感染诊断中的应用

目的 通过测定患者单份血清人巨细胞病毒(HCMV)pp65特异性IgM抗体和IgG亲和指数(AI),建立HCMV原发感染的临床判断标准.方法 从临床收集40份患儿血清和尿标本,以本室自制的pp65为抗原,运用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标本中HCMV pp65特异性IgM抗体;同时通过尿素变性实验,以6M尿素作为温和蛋白变性剂,测定HCMVpp65 IgG AI.尿标本常规处理后接种人胚成纤维(HF)细胞进行病毒分离,观察HCMV特异性细胞病变效应(CPE),聚合酶链反应(PCR)试验检测细胞培养物UL83基因,间接免疫荧光试验检测细胞玻片HCMV抗原.并将病毒分离结果 同血清学方法 进行比较.结果 40例标本中,IgM阳性13例,IgG阳性30例,其中,仅IgM阳性4例,病毒分离结果 亦为阳性,可诊断为原发感染;30例IgG阳性标本中,2种抗体均为阳性9例(A组),其中,5例AI＜50﹪,病毒分离结果 均为阳性,判断为原发感染;1例AI在50﹪与60﹪之间,为可疑原发感染,需要进一步鉴定;3例AI＞60﹪,判断为继发感染.IgG阳性21例(B组),其中仅3例(14.29﹪)AI＜50﹪,但病毒分离结果 为阴性,提示患者不久前曾发生HCMV原发感染,特异性IgM抗体已经转阴,病毒进入潜伏状态;余18例患者AI均＞60﹪,判断为继发感染;2种抗体均为阴性的标本有6例,病毒分离结果 亦为阴性,说明患者未被感染.统计学分析,A组与B组之间差异有统计学意义(P＜0.05).血清学方法 与病毒分离比较,一致率为75.49﹪,该方法 灵敏度为100﹪,特异度为87.10﹪,准确度为90.00﹪.结论 以HCMV pp65重组蛋白为抗原检测特异性抗体以及相应IgG AI的ELISA,可快速诊断HCMV原发感染和继发感染;该方法 具有高度特异性与敏感性,操作简便,重复性好,具有良好的临床应用前景.     

大学新生戊型肝炎病毒现/近期隐性感染的筛查

为了解大学新生戊型肝炎病毒(HEV)现/近期隐性感染的状况,探讨引起隐性感染与急性戊型肝炎(HE)的HEV毒株间有无差异,本实验利用ELISA一步法检测了正常大学新生血清标本中抗-HEV IgM,对抗-HEV IgM阳性者检测抗-HEV IgG,并进行HEV逆转录-巢式PCR(RT-nPCR). 结果2223份血清中抗-HEV IgM阳性18份,阳性率0.8%,P/N值在2.0~3.0之间.17份标本抗-HEV IgM、IgG同时阳性,1份抗-HEV IgM单独阳性,但用RT-nPCR检测抗-HEV IgM阳性标本, HEV RNA均阴性.提示正常大学新生中存在HEV现/近期隐性感染,应注意感染者作为传染源的可能性;HEV隐性感染时,产生的抗体滴度或亲和力较低,病毒血症时间短,病毒滴度低,或毒株的基因序列与引起急性HE的毒株的序列有一定差异.     

甲肝和乙肝的唾液诊断

<正>由于很多甲肝患者缺乏黄疸或其他特征性病症及难以收集血样,常导致很多漏诊并形成甲肝病毒流行病学假象。通过检测唾液中病毒特异性IgG的存在可准确评定对数种病毒的免疫状态及进行近期感染的诊断。本文描述了用唾液诊断急性或近期甲肝和乙肝感染的IgM抗体捕捉放射免疫测定法(MACRIA)的最佳条件。也提供了有关本测定法特异性及唾液中抗甲肝IgM持久性的资料。 试验对象、样品和方法 试验对象与试样:研究的试验对象包括已知的甲肝或乙肝易感者;已知的甲肝或乙肝免疫者;以及由于临床黄疸而进入传染病院的甲肝或乙肝患者。唾液试样收集后对其进行最初的抗HAV IgG或     

抗ToRCH-IgM型抗体临床对比检测研究

ToRCH系列病原微生物(包括弓形虫Tox、风疹病毒RuV、巨细胞病毒CMV、单纯疱疹病毒HSV I/Ⅱ等)是一组具有致畸作用的病原体,孕妇感染可导致流产、早产、畸形甚至死胎.目前ToRCH IgM型抗体的检测都在不同程度上受到非特异性的干扰,采用有效方法消除干扰对ToRCH IgM型抗体检测的准确性至关重要.为此我们对比了多种消除IgM检测中非特异性干扰的方法,并以最佳方法对256例女性献血者、143例正常妊娠和61例异常妊娠标本进行ToRCH IgM抗体的对比检测.结果显示健康人群中ToRCH活动性感染率较高,健康孕妇ToRCH IgM的总阳性率高达23.1%(其中Tox5.6%、CMV9.8%、RuV8.4%、HSV4 9%);而异常妊娠则显著上升(p＜0.01),其中Tox、CMV、RuVIgM阳性率上升明显(p＜0.05),分别为19.7%、26.2%、24.6%.由此可见孕期ToRCH病原微生物活动感染是致异常妊娠的主要因素之一,应严密监视孕期ToRCH病原微生物活动性感染,特别是弓形虫、风疹病毒和巨细胞病毒的感染.     

41例新型冠状病毒肺炎患者血清抗体检测分析

目的比较新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019, COVID-19)不同临床分型患者血清中新冠病毒(SARS-CoV-2)特异性IgM和IgG抗体的差异和不同时期的浓度变化,并以抗体水平变化判断核酸复阳是否为二次感染。方法选取2020年2—3月南华大学附属南华医院收治的41例COVID-19患者,共收集其患病15-65天血清标本126份;作为对照,同时选取91例发热门诊核酸检测阴性患者采集血清各1份。采用化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay, CLIA)检测血清中新冠病毒IgM和IgG抗体水平,经组间t检验和Mann-Whitney U检验对抗体浓度变化进行统计学分析。结果无症状感染者IgM和IgG抗体平均浓度高于阴性对照组,低于普通型和重型患者,差异均具有统计学意义(P0.05);普通型患者IgM和IgG抗体浓度均低于重型患者,IgM抗体差异有统计学意义(P0.05),但IgG抗体差异没有统计学意义(P=0.06);COVID-19患者急性期的IgM和IgG抗体浓度均高于康复期,差异均有统计学意义(P0.05)。复阳后,患者体内IgM和IgG抗体浓度没有增加,持续下降。结论 COVID-19患者的SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体浓度,依无症状感染、普通型、重症型患者临床类型逐次升高,康复期逐渐降低,但大部分体内仍存在较高水平的IgG抗体。核酸复阳之后的SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体浓度并未增高,说明未发生二次感染。     

大学新生戊型肝炎病毒现／近期隐性感染的筛查

为了解大学新生戊型肝炎病毒(HEV)现／近期隐性感染的状况,探讨引起隐性感染与急性戊型肝炎(HE)的HEV毒株间有无差异,本实验利用ELISA一步法检测了正常大学新生血清标本中抗—HEV IgM,对抗—HEV IgM阳性者检测抗—HEV IgG,并进行HEV逆转录一巢式PCR（RT-nPCR)。结果 2223份血清中抗—HEV IgM阳性18份,阳性率0．8％,P/N值在2．0—3．0之间。17份标本抗—HEV IgM、IgG同时阳性,1份抗—HEV IgM单独阳性,但用RT-nPCR检测抗—HEV IgM阳性标本,HEV RNA均阴性。提示正常大学新生中存在HEV现/近期隐性感染,应注意感染者作为传染源的可能性;HEV隐性感染时,产生的抗体滴度或亲和力较低,病毒血症时间短,病毒滴度低,或毒株的基因序列与引起急性HE的毒株的序列有一定差异。     

用捕捉ELISA法检测类脊髓灰质炎患者血清中肠道病毒71型IgM抗体以进行早期诊断

以肠道病毒71型(EV71)感染Vero细胞制备的EV71抗原,用于IgM捕捉ELISA法检测类脊髓灰质炎(类脊灰)患者血清中EV71 IgM抗体,特异性高,敏感性及稳定性良好。154例脊髓灰质炎(脊灰)病毒IgM阴性的可疑脊灰患者血清中EV71 IgM抗体阳性检出率为14.9％(23/154)。病后第2天的标本即可测出EV71 IgM,5至12天者抗体滴度较高,病后第40天的标本尚可测出EV71 IgM。本法是EV71感染的早期快速诊断方法,可用于与脊灰的鉴别诊断。     

检测巨细胞病毒(CMV)DNA及其即刻早期抗原、pp65和pp67在肾移植受者术后巨细胞病毒感染早期诊断中的价值

目的探讨检测巨细胞病毒(CMV)DNA及其即刻早期抗原(IE)、巨细胞病毒pp65和pp67抗体对肾移植受者术后巨细胞病毒感染早期诊断的临床应用价值。方法按肾移植术受者术后3个月外周血是否出现CMV抗原,将71例患者分为CMV感染组(56例)和CMV未感染组(15例),肾移植术受者手术前和术后第1个月每周检查1次,第2、3个月每2周检查1次外周血巨细胞病毒pp65和巨细胞病毒pp67、即刻早期抗原(immediate early antigen,IE),巨细胞病毒DNA和IgM、IgG,共8次;以监测与分析评价肾移植术受者手术前后各项指标变化。结果肾移植术前71例肾移植受者PP65、PP67、IE、CMV DNA均为阴性;肾移植术后CMV感染组的pp65、pp67、IE、CMV DNA阳性率分别为67.8%(38/56)、66.1%(37/56)、64.2%(36/56)和48.2%(27/56),CMV未感染组4项指标值分别为0%、0%、13.3%(2/15)、和0%,两组差异均有统计学意义(P均0.01)。肾移植术后CMV感染组(56例)和CMV未感染组(15例)CMV IgG均为阳性,而IgM阳性率在CMV感染组仅为3.5%(2/56),在CMV未感染组为0%,IgM表达率在CMV感染组和未感染组无统计学差异(P0.05)。观察期内感染组与未感染组相比,术后CMV pp65,pp67,CMV DNA和IE指标出现阳性的例数及阳性出现的具体时间均有显著性差别(P均0.01),而IgM和IgG则均无显著性差别(P均0.05)。结论肾移植术后患者外周血CMV DNA,IE,pp65和pp67抗原检测阳性与其术后巨细胞病毒感染相关。检测CMV DNA、IE、pp65和pp67抗原可能更早更准确反映器官移植术后CMV活动性感染。而CMV IgG和IgM不能作为肾移植后患者CMV感染的诊断指标。     

儿童呼吸道合胞病毒感染情况研究

摘要 目的：检测2011-2021年期间住院患儿血清中的呼吸道合胞病毒抗体IgM，分析并探讨呼吸道合胞病毒的流行病学特征。方法：应用酶联免疫分析方法定性检测患儿血清中的呼吸道合胞病毒抗体IgM，采用卡方检验对不同年份、性别、年龄及季节的感染率进行分析。结果：呼吸道合胞病毒总感染率为4.3%，每年女性患儿比男性患儿感染率高，性别之间无明显统计学差异（P>0.05）。在不同年龄段上，从2011-2014年及2020年，RSV感染率主要集中在0-8岁之间，随着年龄增长，住院患儿几乎没有感染RSV。从2015-2019年，0-13岁基本上每个年龄里都有RSV的感染；在2021年，RSV感染率主要是1-3岁。在每年的四季中，呼吸道合胞病毒感染率各不相同，一般在冬季感染率较高，依次是春季、秋季和夏季，各个季节之间无明显统计学差异（P>0.05）。结论：呼吸道合胞病毒感染可引起儿童毛细支气管炎，是引起儿童哮喘的重要原因，并且可加重哮喘的症状，掌握儿童呼吸道合胞病毒流行病学特征，有助于了解儿童感染特点，有利于儿童疾病的诊断与治疗。     

病毒特异性IgM抗体定性检测试剂性能研究要点概述

病毒特异性IgM抗体检测是发现病原体早期感染的重要手段之一,目前该类产品定性体外诊断试剂尚无行业标准发布。本文依据体外诊断试剂现行法规和此类试剂自身特点,分析其产品性能研究要求,对该类试剂主要原材料研究、主要生产工艺及反应体系研究、最低检测限(分析灵敏度)、分析特异性、精密度、钩状效应、稳定性研究等方面进行解析,阐述病毒特异性IgM抗体定性检测试剂性能研究要点,为从事该类产品注册申报前性能研究的行业人员提供参考。     

用抗人IgM（μ链）单克隆抗体早期诊断风疹病毒感染

风疹病毒（Rubellavirus）感染引起风疹,该病一般症状较轻,有的甚至不出现明显症状,预后良好。但孕妇受感后,病毒可经血液通过胎盘感染胎儿,除引起流产、早产或死股外,活产者大约有20％表现先天性风疹综合症,导致先天畸形［IJ。因此,对风疹病毒感染的早期诊断与优生优育、提高出生人口素质有极为重要的关系。本研究用抗人IgM（u链）单克隆抗体（MCAb）作标记抗体,采用间接ELISA检测血清中抗风疹病毒特异性IgM抗体,进行早期诊断,结果报道如下。材料与方法1病毒抗原将风疹病毒（GtXi株）接种到BHKl细胞,按文献（则制备粗…     

抗—HEV的临床意义

为了探索散发性戊型肝炎抗体的临床意义.采用ELISA方法检测.结果为102份抗-HEV阳性血清中抗-HEV·IgM+72份(占70.6%)、IgG+21份(占20.6%)、双阳性9份(占8.8%);IgM阳性与急性期病程和ALT异常呈现正相关.认为抗-HEV·IgM/IgG临床判断IgM为诊断标志、IgG为感染标志;疫区急性期内再感染可能性极少;城市散发戊肝食源性感染是主要传播方式之一;提示应加强饮食服务卫生管理.     

发热伴血小板减少综合征病毒感染Balb/C小鼠和金黄地鼠的免疫病理反应

发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome irus,SFTSV)是新发传染病发热伴血小板减少综合征的致病病原,为布尼亚病毒科白蛉病毒属的一种新型病毒。为了分析SFTSV感染Balb/C小鼠和金黄地鼠引起的免疫病理反应,本研究采用两个攻毒剂量组分为高剂量组(105 TCID50),低剂量组(103TCID50),以及溶剂对照组,并采用经静脉、肌肉、脑、和腹腔4种途径分别进行攻毒。在攻毒后不同时间点取血样,应用全自动血细胞计数仪检测血细胞亚群,Real-time PCR实验检测血液中病毒RNA拷贝数,悬浮芯片实验检测血浆中IgG和IgM抗体水平。在攻毒后第14d处死动物,收集心、肝、脾、肺、肾、小肠、肌肉和脑8种组织器官进行HE染色,观察组织病理改变。研究结果显示,SFTSV可感染Balb/C小鼠和金黄地鼠,在攻毒后第7d检测到病毒特异性IgM和IgG,其中IgM在第7d达到峰值后下降,IgG在攻毒后第14d达到峰值。组织病理学分析显示病毒感染Balb/C小鼠和金黄地鼠的肝组织和肾组织出现明显病变。本研究揭示SFTSV可以感染不同品系的啮齿类动物,引起相似的免疫抗体反应和组织病理变化。     

肠道病毒EV71 IgM抗体参考品的建立

目的建立肠道病毒EV71 IgM抗体检测用参考血清盘。方法通过收集手足口病感染早期患者的咽拭子和血清,对咽拭子病毒进行分离、鉴定、基因分型,通过血清中和试验及酶联免疫吸附试验(捕获法)的验证,确定EV71 IgM抗体阳性样品,组建EV71 IgM抗体参考血清盘,并经3家实验室对该参考血清盘进行协同标定和确认。结果 12名患儿的咽拭子中均分离到EV71病毒,在RD细胞上引起细胞病变。通过套式PCR扩增、序列测定后进化树分析确认均为流行的C4基因亚型。每名患儿的双份血清均可中和EV71病毒,抗体效价为1∶512~1∶2048。通过捕获法进行EV71 IgM抗体检测结果均为阳性。以此12份样品为原料制备EV71 IgM抗体阳性参考品,同时以12份EV71 IgM抗体阴性血清制备阴性参考品,建立了由12份阳性参考品、12份阴性参考品、1份最低检出限参考品和1份精密性参考品组成的肠道病毒EV71 IgM抗体参考血清盘。通过3家实验室协同标定,各实验室间差异均无统计学意义。结论建立了EV71 IgM抗体检测参考血清盘,为相关检测试剂的质量控制和评价提供了参考标准。     

EB、巨细胞病毒

<正>现在一般用测定血清抗体价的方法诊断EB病毒和巨细胞病毒(CMV)感染症,在诊断CMV时同时由尿分离病毒(接种于人胎肺细胞,由细胞病变判断)。在感染初期,IgM抗体的出现具有特异诊断价值,但在初期感染之后便100%的呈现潜伏状。由于免疫抑制等宿主方面的原因常见病毒的再活动化。90%以上的日本人感染该二病毒,由健康人的唾液分离出EBV、尿液分离出CMV也不罕见。在AIDS(艾兹病)、器官移植等高度免疫抑制时,常常出现伴随EBV、CMV活动化的重笃感染。DNA诊断的优点是迅速和判断客观,最近建立了多聚酶链反应法(PCR),使大幅增加检测敏感度成为可能。但是对于EBV、CMV这样的在健康人就存在的病原体,既使检测敏感度增加到能检出微量病毒DNA的程度,也很难判定是否果真是病原体。本文介绍DNA诊断的现状及未来。各种检测方法的实例描述于CMV项。