超广谱β-内酰胺类抗生素的耐药性与耐药质粒介导

目的：观察超广谱β-内酰胺类抗生素的敏感性与耐药质粒的关系,探讨耐药质粒在细菌之间传递的方式。方法：(1)配制耐药质粒提取试剂;(2)对LB细菌培养液进行耐药质粒的提取与检测;(3)对从12株ESBL细菌中提取的质粒进行质粒转化、质粒接合传递及药敏试验。结果：(1)此12株ESBL细菌中提取的耐药质粒进行电泳显示此质粒较大,约20．0kb。(2)质粒转化后,其转化子对β-内酰胺类抗生素全部耐药,对氨基糖甙类、喹诺酮类和磺胺类全部敏感。质粒结合传递体的耐药谱与以上相同。结论：β-内酰胺类抗生素的敏感性与耐药质粒介导密切相关,耐药质粒能把耐药基因传递给其他细菌,在细菌之间相互传递。     

阴沟肠杆菌对β—内酰胺类抗生素耐药的机制

阴沟肠杆菌对β－内酰胺类抗生素日益严重的耐药引起人们的重视,其耐药机制主要有：外膜微孔蛋白的缺失或减少;细菌产生β－内酰胺酶（ｂｌａ）;细菌的青霉素结合蛋白（ＰＢＰｓ）改变导致其对β－内酰胺类抗生素亲和力下降,其中以细菌产生ｂｌａ为最主要的机制。近年来的研究在阴沟肠杆菌Ｉ型ｂｌａ（即可诱导的染色体介导的ｂｌａ）的基因调控方面取得了突破性进展。     

呼吸监护室下呼吸道铜绿假单胞菌β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的了解呼吸监护室下呼吸道分离的铜绿假单胞菌中β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法自呼吸监护室下呼吸道感染患者的痰标本中分离37株铜绿假单胞菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因(TEM、SHV、OXA-1群、OXA-10群、PER、VEB、GES、CARB、IMP、VIM、SPM、GIM、DHA和oprD2)。结果37株铜绿假单胞菌中CARB阳性15株(40.5%),oprD2基因缺失33株(89.2%),其余基因均阴性。结论呼吸监护室下呼吸道分离的铜绿假单胞菌CARB基因携带率高,oprD2基因缺失严重。     

不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药分析及其检测

不动杆菌是重要的条件致病菌,对β-内酰胺类抗生素的耐药性在逐年增加,给治疗带来了很大的困难,因此对其耐药机制和检测方法的了解很有必要。     

转录活化基因的DNase—1超敏感特性

真核生物细胞基因的活化有复杂的调控机制，包括顺式作用序列和反式作用因子的相互作用。这种相互作用使ＤＮＡ在染色质水平对ＤＮａｓｅ－１消化起敏感。本阐述基因活化与ＤＮａｓｅ－１超敏感特性之间的关系，指出ＤＮａｓｅ－１超敏感位点分析有助于发现潜在的控制基因活化的位点。     

铜绿假单胞菌耐消毒剂-磺胺基因及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sulⅠ)及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法自临床分离40株Pa,采用聚合酶链反应(PCR)检测qacE△1-sulⅠ基因及12种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因(TEM、SHV、OXA-10群、CTX-M-1群、PER、VEB、GES、CARB、IMP、VIM、DHA和oprD2)。结果40株中qacE△1-sulⅠ基因阳性19株(47.5%),CARB基因阳性18株(45.0%),oprD2基因缺失35株(87.5%),其余基因均阴性。结论临床分离的铜绿假单胞菌多重耐药严重,qacE△1-sulⅠ基因及CARB基因携带率高,oprD2基因缺失严重。     

一株产多种β-内酰胺类抗生素酰化酶菌株的筛选

为了从大量的候选菌株中快速筛选头孢菌素酰化酶产生菌,设计并合成了一系列头孢菌素酰化酶的底物类似物。这些酰胺类的底物类似物由二部分组成,一部分为与头孢菌素相同或相似的侧链,另外一部分为发色基团或便于检测的基团。它们被酰化酶水解酰胺键以后可以方便快速的检测,因此用于对大量菌株进行快速筛选。采用这些化合物筛选到6株酰化酶阳性菌株。其中菌株ZH0650能够同时水解GL-7ACA和多个底物类似物。进一步研究表明,该菌至少产生3种酰化酶,AD-NABA酰化酶,青霉素G酰化酶和头孢菌素C酰化酶。我们初步纯化了AD-NABA酰化酶和青霉素G酰化酶,并对头孢菌素C酰化酶的活力进行了鉴定。这是首次报道的可以产生青霉素G酰化酶和头孢菌素酰化酶等多种酰化酶的菌株,具有良好的应用前景。     

肠杆菌科细菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究现状

肠杆菌科细菌是革兰阴性杆菌中最常见的一类细菌,在一定条件下可引起医院和社区感染。临床首选β-内酰胺类抗生素来抗感染,但由于抗生素的不合理使用导致肠杆菌科细菌产生相应的灭活酶及水解酶或菌株细胞结构改变,从而破坏β-内酰胺环使其对抗生素作用的敏感性下降甚至耐药,给临床抗感染治疗带来了极大的挑战;为更好地指导临床用药,拟就肠杆菌科细菌的耐药表型、对β-内酰胺类抗生素的耐药机制做一综述。     

β—内酰胺酶抑制剂：他佐巴坦

他佐巴坦是一个新的β－内酰胺酶抑制剂,在舒巴坦的结构基础上增加了一个三氮唑环,具有广泛的抑酶活性,与哌拉西林组成的联合制剂的临床试验结果表明是安全可靠有效的,不良反应少。     

β—内酰胺抗生素与葡萄球菌青霉素结合蛋白的相互作用

β－内酰胺抗生素攻击的目标是细菌中的青霉素结合蛋白（ＰＢＰ）。葡萄球菌中有４种ＰＢＰ（ＰＢＰ１～４）,只要有１种存在即能合成细胞壁。葡萄球菌的耐药机理有多种：由于β－内酰胺酶的产生,ＰＢＰ的改变,对耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）则由于另一种ＰＢＰ２ａ的产生。ＰＢＰ２ａ有合成细胞壁的功能,但对β－内酰胺抗生素亲和力低。此ＰＢＰ由ｍｅｃＡ基因编码,有认为这是一个外基因与自身β－内酰胺酶基因重     

耐β-内酰胺类抗生素肺炎链球菌青霉素结合蛋白PBPs的氨基酸基因变异

目的 通过对台州地区耐β-内酰胺类抗生素肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因PBPs的研究,分析肺炎链球菌的耐药机制.方法 收集2009年至2010年浙江台州地区63例肺炎链球菌临床分离菌株,进行培养、鉴定及药敏试验,PCR扩增耐药株青霉素结合蛋白PBPs基因并测序分析结果.结果 PBPs基因的变异位点主要集中在保守序列STMK,SSN区域及其附近.与以往报道相一致.结论 肺炎链球菌的PBPs基因变异与β-内酰胺类抗生素耐药性密切相关.     

β—葡聚糖酶的分离纯化和特性研究

对里木霉所产β－葡聚糖酶粗酶液通过饱和硫酸铵沉淀、Sephadex G-100柱层析和DEAE－Sephadex A-50柱层析进行纯化,比活提高14．60倍,活力回收6．62％。酶特性研究表明,最适温度和pH分别为60℃和5．0,在pH低于5．0时酶较稳定,酶的热稳定性在60℃以下。Cu^2 、Mn^2 、Mg^2 、Fe^3 和K^ 对酶有抑制作用,Zn^2 、Ca^2 、Co^2 和Fe^2 有激活作用。     

应用酶联免疫竞争层析技术检测乳品中β-内酰胺类抗生素残留

目的:开发乳品中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测系统.方法:应用酶联免疫竞争层析技术,开发了BioQuick快速检测系统.通过绘制检测曲线推算灵敏度,通过重复试验确定精确度,通过与非β-内酰胺类抗生素反应确定交叉反应率.结果:通过与国外同类型试剂的实验对比分析,该检测系统在使用方便性、检测灵敏度、精密度以及交叉反应数据方面具有优势,是一种操作简便、快速,灵敏度和精密度能够达到检测要求,符合国际标准,并优于国外同类型检测试剂.结论:该检测系统适用于我国各奶牛场、乳品企业以及食品安全监控机构.     

2009年温州市主要医院不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性分析

目的测定温州市5家医院不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率,为临床治疗提供参考。方法搜集2009年温州市5家医院不动杆菌,并进行药敏试验。结果除头孢哌酮/舒巴坦钠外,不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性几乎都超过50%。对亚胺培南及美罗培南的耐药率超过50%。结论不动杆菌β-内酰胺类抗生素的高度耐药性需引起临床工作者的高度警惕,应合理用药。     

真菌β—内酰胺次级代谢调控的分子机制

真菌中青霉素和头胞菌素生物合成起始于共同前体,异青霉素N是这两合成途径的分叉中间体,经各自合成途径分别转化为青霉素和头孢菌素。在转录及转录后水平上,β－内酰胺生物合成基因表达受多种顺式作用元件与反式作用因子以及营养源等多方面的调控。     

大肠埃希菌临床分离株CTX—M型超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的了解我院临床分离大肠埃希菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因型分布情况。方法收集我院临床分离大肠埃希菌200株,按美国临床和实验室标准协会2006年制订的标准确定ESBLs表型。PCR扩增CTX—M耐药基因,扩增产物测序,测序结果与GenBank比对,确定CTX．M基因型。结果200株大肠埃希菌中有94株ESBLs阳性,其中92株CTX-M基因扩增阳性。测序结果表明,大肠埃希菌CTX．M基因型以CTX．M14为主,占67．4％,同时CTX—M3占27．2％,5株未分型。结论大肠埃希菌中产CTX．M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX．M14和CTX．M3型为主。     

一株产多种β-内酰胺类抗生素酰化酶菌株的筛选

为了从大量的候选菌株中快速筛选头孢菌素酰化酶产生菌,设计并合成了一系列头孢菌素酰化酶的底物类似物。这些酰胺类的底物类似物由二部分组成,一部分为与头孢菌素相同或相似的侧链,另外一部分为发色基团或便于检测的基团。它们被酰化酶水解酰胺键以后可以方便快速的检测,因此用于对大量菌株进行快速筛选。采用这些化合物筛选到6株酰化酶阳性菌株。其中菌株ZH0650能够同时水解GL7ACA和多个底物类似物。进一步研究表明,该菌至少产生3种酰化酶,ADNABA酰化酶,青霉素G酰化酶和头孢菌素C酰化酶。我们初步纯化了ADNABA酰化酶和青霉素G酰化酶,并对头孢菌素C酰化酶的活力进行了鉴定。这是首次报道的可以产生青霉素G酰化酶和头孢菌素酰化酶等多种酰化酶的菌株,具有良好的应用前景。     

β-内酰胺的合成方法

本方法是以(R)-3-羟基丁酸甲酯为初始原料,合成β-内酰胺(简写4-AA)的一条路线,它的优点是:其初始原料(R)-3-羟基丁酸乙酯是通过生物发酵生产的具有天然手性的P3hb通过高温高压裂解得来的。去除了以往纯化学合成手性拆分的麻烦,大大缩短了合成路线,而且此路线成本较低,有利于工业化。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子遗传标记及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的了解分离自ICU耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPa)中Ⅰ类整合子及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法自临床分离12株IRPa,采用PCR方法检测Ⅰ类整合子遗传标记(intI1和qacE△1-sul1基因)及15种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因。结果12株IRPa中,所检测的17种基因intI1、qacE△1-sul1、oprD、blaIMP、blaVIM、blaTEM、blaSHV、blaOXA-10群、blaCARB、blaPER、blaVEB、blaGES、blaDHA、blaOXA-1群、blaOXA-2群、blaBEL-1和blaCTX-M-1群均阴性。结论临床分离的IRPa中不存在Ⅰ类整合子,oprD基因缺失突变是其对亚胺培南耐药的主要原因。     

超广谱β—内酰胺酶的研究进展

β内酰胺酶是细菌对β－内酰胺类抗生素耐药的主要原因。超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）是其中重要的一种,其发生率呈上升趋势,在世界各地多次引起医院内感染的暴发流行,而在临床常被漏检。本文综述了ＥＳＢＬｓ的特性、流行病学、分子结构、耐药机制及检测方法。