发生类坏死蝌蚪皮肤在诱导并分化为角膜过程中的超微结构

本研究以花背蟾蜍后肢芽期的蝌蚪为材料,以0.001 mol/L氨水(氨水组)和0.01mol/L醋酸(醋酸组)处理皮肤使之发生类坏死,研究发生类坏死的皮肤移植片,在被诱导并分化为角膜过程中的超微结构变化。结果发现:各组细胞表面粘液经历了由少到多,再到少的过程;在皮肤片细胞去分化中,黑色素颗粒逐步消失,其中以氨水组最快,醋酸组次之;细胞间隙在氨水组及醋酸组中均较对照组为窄;实验组胶原纤维趋于均匀的速度较对照组为快。作者认为:类坏死处理导致去分化的加速,粘液的增多,细胞间隙的变窄,以及促进胶原纤维趋于均匀等,与皮肤片透明的加速之间有一定的关系。本文对类坏死与加速皮肤片被诱导和分化为角膜进程间的可能关系进行了讨论。     

花背蟾蜍蝌蚪发生类坏死的皮肤在恢复过程中的超微结构

本实验以花背蟾蜍后肢芽期的蝌蚪为材料,用0.001 mol/L氨水(氨水组)和0.01mol/L醋酸(醋酸组)处理皮肤使之发生类坏死。以细胞核、细胞表面、细胞质及细胞间隙等的超微结构变化为指标,研究了各组皮肤发生类坏死后恢复过程中的可逆变化。结果观察到:两组均能引起核染色质浓缩,粘液分泌,液泡增多,线粒体及内质网膨大变形,细胞间隙变窄;醋酸还引起张力原纤维的凝集及紊乱等。恢复过程中,细胞核内染色质的分布趋于均匀,粘液的分泌渐正常,液泡减少,线粒体及内质网的形态逐步恢复,但细胞间隙一直很??窄;醋酸组中张力原纤维恢复成束且排列较整齐。作者认为氨水及醋酸引起蝌蚪皮肤发生类坏死后,在一定时间内是可以恢复的,而且此可逆变化也反映在超微结构的变化上。     

花背蟾蜍蝌蚪表皮移植片在角膜诱导中的扫描电镜研究

扫描电镜研究表明,花背蟾蜍蝌蚪在角膜诱导过程中表皮移植片外表面的主要变化是:当移植片细胞中色素消失时,细胞的分泌活动变旺盛,表现在细胞外分泌物增多,这可能与排色素有关。同时移植片细胞表面的微突起和边界嵴日趋细小,移植片透明时它更类似正常角膜。在此期间移植片内表面的主要变化是:细胞外基质不断增加,尤其是胶原纤维的增多和逐渐排列整齐,以及可能由于GAG的合成形成的颗粒状结构的出现和消失,这些都与移植片向角膜上皮分化相关联。由于眼球诱导作用引起的上述变化,都可促进表皮移植片转变为透明的角膜。     

花背蟾蜍蝌蚪皮肤的结构与发育

为研究花背蟾蜍(Bufo raddei)蝌蚪在变态发育期皮肤的显微结构特点,选取G19、G22、G26、G36、G41、G43和G46共7个发育期蝌蚪的连续石蜡切片及成体的背部皮肤切片,采用H.E和AB-PAS染色方法,观察了皮肤各层结构的发育时序并进行了相应的测量.结果表明,在G19、G22和G26蝌蚪表皮均为1层细胞;G36蝌蚪皮肤细胞形态和层数在背腹部出现了显著的区别;在G41基本完成了表皮2层细胞的构建;G43期完成完整的真皮构建,其中分布有毛细血管和2种皮肤腺.G46皮肤在厚度、腺体和毛细血管分布等方面表现出了明显的区域性差异,并与成体皮肤结构有明显的差别,显示出蝌蚪在发育过程中皮肤结构的变化与其生存环境之间紧密的关联性.     

自体骨髓间充质干细胞为种子细胞构建组织工程化全层皮肤

利用自体骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)为种子细胞分别在体外一定条件下向表皮细胞和真皮成纤维细胞诱导分化, 并且和Ⅰ型胶原膜复合后移植修复裸鼠皮肤创面, 观察以自体BMSCs为种子细胞构建组织工程化全层皮肤的可行性. 研究发现, 将分离纯化的BMSCs接种于表皮细胞诱导体系中, 3天后细胞即发生形态改变, 汇合成表皮细胞特有的“铺路石”状; 透射电子显微镜观察到张力原纤维、黑色素小体和透明角质颗粒; 诱导分化细胞表达表皮细胞表面标志CK19和CK10, 且CK19的诱导分化效率达到60%, 表明诱导分化的细胞大部分为表皮干细胞; 通过检测细胞诱导前后紫外线照射诱发的凋亡状况, 证实诱导后的细胞具有抵抗紫外线照射的功能; 另一方面, BMSCs在真皮成纤维细胞诱导体系作用下, 超微结构观察到细胞外胶原微纤维的沉积, RT-PCR证实诱导分化细胞具有分泌Ⅰ型胶原的功能; 放射免疫法检测到诱导后的细胞还具有分泌细胞因子IL-6与IL-8的功能, 其最高分泌量分别为115.06 pg/mL和0.84 ng/mL. 体内移植实验也证实, BMSCs与生物支架材料复合后具有明显促进皮肤缺损创面愈合的作用. 研究结果表明, BMSCs具有向表皮细胞和成纤维细胞分化的潜能, 以及作为种子细胞构建具有生物学功能的组织工程化全层皮肤的可行性, 并且自体来源的BMSCs构建的皮肤组织无免疫排斥风险, 具有广阔的临床应用前景.     

花背蟾蜍角膜早期形态发生的超微结构研究

本文用透射电镜对花背蟾蜍角膜早期形态发生(18期至25期即肌肉感应期至鳃盖完全封闭期)过程中超微水平的变化进行了细致的研究。结果表明:从19期至21期(心跳期至胚胎开口期)角膜处于尚无特异分化的预定角膜阶段,其结构与邻近表皮无明显区别;22期至24期末(尾血循环期至右侧鳃盖封闭期)是角膜上皮分化阶段,主要变化是角膜上皮变薄、上皮细胞中的色素颗粒被酶解和经粘液泡排出、上皮下层的形成以及内角膜基质原基细胞层数的增加;25期后进入透明的蝌蚪期角膜,此期上皮下层仍不被间质细胞侵入,内皮和基质是以内角膜基质原基的形式存在。     

维甲酸对人神经母细胞瘤SK—N—SH细胞形态结构和分化标志物表达的影响

目的：观察维甲酸对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞形态与超微结构及其相关标志物表达的影响,以鉴定其对神经母细胞瘤细胞终末分化的诱导作用。方法：1μmol／L维甲酸处理SK—N—SH细胞,光镜、电镜和免疫细胞化学检测研究SK—N—SH细胞处理前后细胞形态、超微结构变化和神经元相关标志物的表达变化。结果：光镜与电镜观察结果显示,SK—N—SH细胞经1μmol／LRA处理后,细胞形态和超微结构产生了细胞呈极性状、伸出多个轴突树突状突起、细胞逐渐变小变圆并融合在一起形成类似神经节样结构、细胞表面微绒毛减少、核仁变少变小、常染色质增多、细胞器丰富发达等显著变化;免疫细胞化学检测显示经RA处理后SK-N-SH细胞NSE、MAP2、Synaptophysin的表达较对照组细胞明显加强。结论：维甲酸能改变SK—N—SH细胞形态和超微结构恶性表型特征,并促进与神经细胞相关的终末分化指标的表达,从而对人神经母细胞瘤细胞的终末分化具有显著的诱导作用。     

离子胁迫诱导洋葱鳞茎内表皮细胞凋亡

通过不同浓度离子胁迫诱导剂(NaCl、CaCl2)对洋葱鳞茎内表皮细胞进行不同时间的处理,发现0.1M、0.5M的NaCl和CaCl2处理2小时即可诱导出细胞凋亡现象,随处理时间延长直至10小时,细胞核凋亡的形态学变化和凋亡小体更加明显,基因组DNA降解更加梯状条带化。本实验对离子诱导的洋葱鳞茎内表皮细胞凋亡现象做了较系统的描述,为植物细胞凋亡的研究及细胞凋亡实验教学提供了经济、快捷、有效的诱导方法。     

应用基因芯片技术检测SDS对人表皮细胞TNF信号通路基因差异表达的影响

目的:应用基因芯片技术,检测十二烷基硫酸钠(SDS)处理人表皮细胞不同时间对肿瘤坏死因子(TNF)信号通路基因差异表达的影响。方法:通过MTT试验确定表皮细胞的铺板密度和SDS的处理浓度,保证细胞的存活率;将人皮肤表皮细胞用SDS分别处理0.5、1.0、1.5、2和4 h后,提取其总RNA,反转录后通过基因芯片技术检测,比较不同处理与空白组TNF信号通路中基因表达量的差异。结果:接种细胞密度19 000/cm2、SDS在处理体系中的浓度为0.550μg/m L;SDS处理人皮肤表皮细胞0.5、1.0、1.5、2和4 h后,TNF信号通路基因差异表达的数量依次为4、10、12、8和3个。结论:SDS处理人皮肤表皮细胞1.5 h可以作为考察其对TNF信号通路影响的时间;通过基因芯片技术可以筛选SDS皮肤刺激性差异表达基因。     

灵武长枣果实发育结构特征研究

采用石蜡切片法,研究不同发育时期灵武长枣果实的结构特征。结果表明:(1)缓慢生长期细胞增长缓慢,外果皮细胞5~6层,表皮细胞由1层薄壁细胞构成,呈长矩形或长椭圆形,表皮细胞以内的薄壁细胞不断增生,形成内表皮细胞。果实体积增大伴随着空腔的出现,中果皮维管束数量多;(2)第一次快速生长期细胞增长迅速,表皮细胞排列疏松,中果皮中的空腔增大速度最快,维管束主要分布在靠近外果皮和内果皮的中果皮部位;(3)减缓生长期表皮细胞变成圆形或椭圆形等不规则形状,细胞排列松散,内表皮细胞形状、大小不一,细胞排列疏松。中果皮中的空腔继续增大,维管束数目逐渐减少,但变化幅度较小;(4)第二次快速生长期外果皮细胞层数减少到3~4层,表皮细胞和内表皮细胞难以区分,空腔随着果实体积的增大达到最大,许多细胞单列排成网状结构,形成更大的腔,果皮中的维管束分布最少。在灵武长枣果实发育过程中,不同发育时期的不同部位其果实的形态解剖特征不同。     

Developmental changes in the heterocellular epidermis of Pelobates syriacus integument.

Changes in characteristic components of the skin epidermis of the large tadpole of Pelobates syriacus were studied throughout its development. The fate of two specific cells in the skin epidermis was followed, from the young tadpole to the adult was studied. It was found that flask-shaped type cells in the tadpole epidermis which are PAS-positive, stain with peanut lectin (PNA). There is no detectable band 3 in the premetamorphosed stages, and mitochondria-rich cells are very rare. This pattern of staining changes completely upon metamorphosis: the PAS-positive cells, specific to the tadpole epidermis disappear, and the mitochondria-rich (MR) cells in the adult skin epithelium react with polyclonal anti-band 3 antibody. Western blot analysis showed the presence of a band 3-like protein of about 95 kDa, only in the adult epithelial extract, corroborating the immunocytochemical observations. The finding of the presence of band 3-like protein in the MR cells of Pelobates, is similar to the observations made in the skin of other amphibian species. On the other hand, the binding of peanut lectin to MR cells is species-specific, since it does not react with the MR cells in the skin epithelium of Pelobates syriacus.     

花背蟾蜍(Bufo raddei Strauch)眼形态发生过程中角膜上皮表面结构的扫描电镜观察

扫描电镜观察表明,花背蟾蜍眼形态发生过程中角膜上皮细胞表面形态结构的变化,大致可分三个阶段。1.从神经管期至肌肉感应期预定角膜上皮表面无明显变化;2.在心跳期和鳃血循环期预定角膜上皮表面出现较多的细胞缢束和其下细胞表面的下陷;3.在以后各期,角膜上皮中纤毛细胞的纤毛逐渐退化消失,在右鳃盖封闭期纤毛细胞全部消失。上述变化与视网膜及其中光感受器的发育分化密切相关,纤毛的退化和消失更精确地反映了这种依赖关系,似可作为角??膜上皮分化的一个形态指标。     

花背蟾蜍蝌蚪变态期角膜发育的研究

作者用光镜和电镜研究了花背蟾蜍蝌蚪变态期角膜的发育。在后肢发育晚期,内、外角膜在中央部位首先愈台,在完全变态期角膜完全愈合,此时角膜上皮细胞增殖,上皮基质变为Bowman’s膜,内、外角膜之间的成纤维细胞和由它分泌的胶原纤维形成角膜基质,内角膜细胞形成单层的角膜内皮,它与角膜基质间的Descemet’s膜最晚形成。     

CHANGES IN CELL FINE STRUCTURE DURING LENS REGENERATION IN XENOPUS LAEVIS

Changes at the level of cell fine structure have been studied during lens regeneration in the toad, Xenopus laevis, where cornea gives rise to the new lens. The transformation of these cells may be divided into three phases. (1) In the cornea, flattened cells become cuboidal and rough endoplasmic reticulum increases in amount. (2) In the new lens vesicle, cisternae of the rough ER break down into vesicles, smooth-walled vesicles and free ribosomes increase in number, and mitochondria can become enlarged and irregular, then centrally attenuated. Rudimentary cilia form. (3) As new lens fibers form, ribosomes become very numerous and low density fibrous elements and dense clumps appear in the cytoplasm. These phases are accompanied by marked nucleolar changes. The changes during the 3rd phase are similar to changes in the lens during normal development. The first two phases show an unexpected morphological complexity.     

小鼠角膜发育期间凝集素受体的分布及变化

用辣根过氧化物酶标记的ConA、WGA和RCA Ⅰ为探针,研究了小鼠发育期间角膜内糖残基的分布和变化。Man残基主要分布在角膜基质和内皮;SA残基主要存在于角膜上皮;Gal残基在角膜上皮和基质中都有分布。Man残基在出生前后的小鼠角膜基质中朝内皮方向呈现递增的梯度。SA和Gal残基随角膜发育最后在成体角膜上皮的外表而密集。胎龄13天是小鼠角膜成纤维细胞合成复合糖的起始时间。     

CORNEAL SURFACE PROPERTIES OF TWO MARINE MAMMAL SPECIES1

Compared to the anterior surface of the normal human cornea, all Tursiops showed pronounced random, local curvature changes typical of old keratitis and scarring. Comparable but less severe findings apply to Zalophus. These irregularities were superimposed on the mild regular astigmatism of the spoon-shaped Tursiops cornea (mean central power is 26.8 D, SD = 3.8, N = 82). All Zalophus corneas showed no reliable regular astigmatism (overall mean power is 21.7 D, SD = 4.4, N = 53) but exhibited a flat, circular region about 6.5 mm in diameter along the nasal aspect of the horizontal meridian. Refraction through this cornea1 region showed aerial emmetropia, which accounts for equivalent marine and aerial visual resolution in this species.