新鲜生物样品扫描电镜低压观察技术

扫描电子显微镜在生物学上的应用已很普遍。用扫描电镜观察生物表面所揭示的细微结构、远比光学显微镜图象清晰、分辨率高,为生物学的研究提供了很好的工具。由于扫描电镜生物样品的常规制备比较烦琐,须经固定、脱水、干燥,表面喷镀金属膜等过程,不但样品制备周期较长,而且因操作环节繁多往往容易造成样品损伤和变形,使图象不够理想。而新鲜     

植物样品组织导电技术

为了解决植物样品导电和二次电子发射率的问题,采用表面真空喷镀(或离子溅射)的办法,使样品表面均匀地蒸镀上一层导电膜(金、铂、碳等),供扫描电镜观察其表面微细结构形貌。由于样品在喷镀过程中要受到热辐射等影响,往往引起样品变形,而且还要受到设备和材料的限制。为了解决样品热辐射变形等影响,电镜工作者寻找了许多方法,如新鲜样品低压观察     

植物样品组织导电技术

为了解决植物样品在进行电镜观察时,导电和二次电子发射率的问题,通常采用真空喷镀(或离子溅射)的方法,使样品表面均匀地蒸涂上一层导电膜(金、铂、碳等),供电镜观察表面形貌。但是样品在真空中进行喷镀时往往受到不同程度的热辐射影响,引起样品变     

制备生物材料扫描电镜样品的阴极溅射镀膜技术

大多数生物材料在进行扫描电镜观察之前都必须镀一层数十埃至数百埃厚的金属膜,以增加样品表面的二次电子发生率及导电性。常用的金属材料有金、铂、铝、铬等。镀膜的方法有真空蒸发法及离子阴极溅射技术中的阴极     

晶体锇酸安瓿瓶的安全破裂法

锇酸是电镜样品制备中主要的固定剂,它是剧毒试剂,并被密封在壁较厚的安瓿瓶中,从晶体锇酸配制固定液时,须将安瓿瓶破裂,常用安瓿瓶的破裂方法是在洁净的安瓿瓶的中部用小砂轮或钻石刀划一痕,然后将安瓿瓶放入洁净的小棕色试剂瓶中,再用一洁净的粗玻璃棒的一端对准安瓿瓶的的中部一敲,使其破裂。此法要求敲击之力适度而准确,破裂不成功,可能安瓿瓶和棕色试剂瓶皆破或棕色试剂瓶破裂而安瓿     

扫描电镜研究节肢动物形态的简便方法

<正> 近年来,扫描电镜在研究动物形态时广泛应用。但是,供扫描电镜观察的生物样品的制备比较复杂,需要经过预处理,如临界点干燥,金属喷镀等。一些体表柔软的动物体经过这些处理,受抽真空及热辐射等影响,使样品损伤、变形,或由于镀膜有一定厚度(100—200A),小于此厚度的细节则不能分辨。同时,标本经喷镀后再不能继续保存供其他观察用,故扫描电镜技术的运用受到一定限制。 Howden等(1973)曾探索改进扫描电镜,降低加速电压(1.5—2.5KV),用来观察未喷镀的     

一种快速、简易的扫描电镜植物样品干燥新方法

扫描电子显微镜是观察植物样品表面超微结构的有效方法,大部分新鲜植物样品需经过干燥处理才可以进行扫描电镜观察。该研究在传统叔丁醇冷冻干燥法的基础上,建立了叔丁醇一步冷冻干燥法,省略了固定、脱水、置换等步骤,简便易行,干燥后的样品形态饱满,最大程度保持了样品原貌。用叔丁醇一步冷冻干燥法干燥的样品可以与CO_2临界点干燥法和常规叔丁醇冷冻干燥法的效果相媲美。通过对不同的样品进行干燥处理,结果证明,该方法具有广泛适用性。     

用白乳胶作印迹观察气孔

印迹法观察气孔的实验大多数实验指导书上都介绍用牛皮胶,醋酸纤维素溶液,但这两种药品不容易买到。在用白乳胶粘植物标本时发现白乳胶能在叶片表面形成一层透明的薄膜．由此受启发,试用白乳胶代替牛皮胶作印迹法观察气孔的实验,效果很好。具体做法是：     

生物样品离子刻蚀法

早在一个世纪前人们就认识离子的轰击作用,开始在金属学、固体电子学中应用。近年来离子刻蚀技术已成为扫描电镜生物样品制备中的一种新方法。利用高速运动的离子流不断轰击样品表面,使表面的原子和离子发生溅射和剥离.这种溅射一般为物理溅射和化学溅射,其速率取决于刻蚀体和被刻蚀体的性质和刻蚀条件。生物样品的细胞膜表面结构被一层糖蛋白或糖脂掩盖,有些材料如胃、小肠等表面还附有许多粘液,用常规方法很难洗净,就会影响电镜观察效果。应用超声波方法清洗,由于功率和时间较难控制,一旦掌握不好,细胞表面结构就     

离子蚀刻扫描电镜技术在生物样品制备中的应用

近年来离子蚀刻技术已成为扫描电镜样品制备中的一种新方法。由于其操作简便,效果显著,应用日趋普遍。国外在生物样品的离子蚀刻方面做了不少工作,Lewis 等1969年用这一方法观察了红细胞、胰脏外分泌细胞的核表面结构,看到了特异的放射状结构和核孔分布的情况。国内不少电镜工作者在化工等样品     

川东北二叠系-三叠系界线附近微生物岩微观表面特征观察研究

对采自四川通江平溪坝二叠系-三叠系界线(PTB)剖面发育的微生物岩样品,选用2.5%盐酸、10%盐酸、10%氢氧化钠溶液、20%双氧水、10%醋酸以及0.1M乙二胺四乙酸钠(EDTA)进行处理,根据微生物岩表面处理结果的异同,和在扫描电镜(SEM)图像上的表现,确定最适合于微生物岩表面结构观察的化学处理方法是使用2.5%盐酸处理样品表面。用该法处理,并通过SEM观察发现,通常被当作白云岩的PTB微生物岩,实际上只是含有白云岩微晶的泥晶灰岩,微生物岩中含有与硫酸盐还原菌有关的大量的纳米级微球粒与形似草莓状黄铁矿的颗粒。通过实验结果对比分析了不同层位的微生物岩与白云岩的SEM微米级的特征和区别,以及建造微生物岩的微生物群落对其层位上下地层的影响。     

川东北二叠系-三叠系界线附近微生物岩微观表面特征观察研究北大核心

对采自四川通江平溪坝二叠系-三叠系界线(PTB)剖面发育的微生物岩样品,选用2.5%盐酸、10%盐酸、10%氢氧化钠溶液、20%双氧水、10%醋酸以及0.1M乙二胺四乙酸钠(EDTA)进行处理,根据微生物岩表面处理结果的异同,和在扫描电镜(SEM)图像上的表现,确定最适合于微生物岩表面结构观察的化学处理方法是使用2.5%盐酸处理样品表面。用该法处理,并通过SEM观察发现,通常被当作白云岩的PTB微生物岩,实际上只是含有白云岩微晶的泥晶灰岩,微生物岩中含有与硫酸盐还原菌有关的大量的纳米级微球粒与形似草莓状黄铁矿的颗粒。通过实验结果对比分析了不同层位的微生物岩与白云岩的SEM微米级的特征和区别,以及建造微生物岩的微生物群落对其层位上下地层的影响。     

扫描电镜标本制备

扫描电镜主要用以观察物体表面,可观察较大的范围,同时由于它有很大的焦深,因此立体感很强,弥补了透射式电镜对复杂的立体形貌观察上的不足。扫描电镜样品制备方法有多种,下面介绍常用的几种:(一)临界点干燥法本文介绍用液体 CO_2进行临界点干燥的方法。1. 固定:把样品放在缓冲液或生理盐水中洗净后,放在1-3%戊二醛中固定30分钟至     

高精度热电离质谱铀系法测定北京猿人遗址年代初步结果

热电离质谱法可用比经典的α能谱法少一个数量级的样品,实现高一个数量级的测量精度。本文报道了用这一新技术测定北京猿人遗址１－２层钙板样ＢＺＣ－３的铀系年代。     

一种制备植物扫描电镜样品的新干燥法：叔丁醇冻结干燥法

叔丁醇冻结干燥法用于植物材料,获得了良好的效果。经常规固定的样品完成脱水以后浸泡在叔丁醇中,然后将含醇样品放入电冰箱中冷冻,待叔丁醇凝固后再转移到真空镀膜机的钟罩里,用机械泵抽真空,冻结的醇在低真空中升华后样品得到了干燥。SEM 镜检表明,样品的表面和细胞断裂面及其深层(可见到内质网的双层膜、线粒体的嵴、高尔基体潴泡叠层、核糖体颗粒等细胞器)的三维图象均优于用临界点干燥法所得到的样品图象,叔丁醇冻结干燥法用于植物 SEM 样品制备,是一种操作简单,干燥质量可靠、值得推广的方法。     

用电子显微镜直接观测副肌球蛋白分子

将微量电泳及琼脂电泳纯的河蚌(Cristaria plicata,Leach)斧足肌副肌球蛋白溶于pH 8,M乙酸铵盐溶液内,蛋白浓度为0.18毫克/毫升。利用压缩氮气将此溶液从微粒喷雾器内喷至新鲜分开的洁净云母表面上,用铂铱合金真空喷镀,投影角     

蛋白质酸水解液用过甲酸氧化处理对胱氨酸的测定

<正> 蛋白质在酸水解过程中,其中的半胱氨酸和胱氨酸易受到氧化而破坏。特别是在用茚三酮显色反应来检测氨基酸的柱层析法中,半胱氨酸不与茚三酮产生显色反应,因而对它无法测定。所以在测定这两个氨基酸时,通常采用过甲酸氧化法。即用过甲酸将蛋白质中的这两个氨基酸氧化为半胱磺酸进行测定。但这一方法操作烦杂,其中的过甲酸不易除去,而会在酸水解过程中使     

相分配—一种纯化细胞器和膜微囊的方法

根据各种膜颗粒表面电荷密度和疏水性的差异,通过适当的相分配系统,将一种膜颗粒从其它成份中分离出来,这便是相分配法。在相分配法应用之前,都是用离心法纯化膜颗粒的,但离心法纯化的膜颗粒纯度不够高。相分配法作为离心法的辅助技术,则能满足实验对分离纯化的膜颗粒的纯度     

电镜Formvar膜制备要点

在光学显微镜下研究各种对象时,标本都是放在载玻片上,但在电镜下,由于电子不能穿透玻璃,所以不能用玻片作为标本的支持物,于是便采用一种很薄的电子透明薄膜附着在金属网上作为支持膜,用以支持所要观察的各种样品。金属载网一般有直径3毫米与2毫米两种,常用的载网是铜质的,故称铜网,铜网上的这层薄厚度约200A。如果膜太薄时,样品容易漂移或被电子束打破,膜太厚时,分辩率将降低。支持膜除了有一定的厚度和机械强度外,这层膜还应具有透明,在电镜下无可见的结构及与所装载的样品不起化学反应等特性。常用的支持膜有火棉胶膜和Formvar膜。高分辩研究时用碳膜或微筛膜(即带孔的膜)。由于Formvar膜     

难溶性药用纳米微粒的原子力显微检测

建立用原子力显微镜(AFM)检测难溶性药用纳米微粒的方法。将纳米微粒配成一定浓度的悬浮液,以新鲜裂解的云母表面作为样品载体,在室温下用AFM的接触模式成像,用粒度分析软件进行粒度分析。以此方法对两种微粒(活性炭及氧化锌纳米微粒)进行了成像和测量,同时对两种样品进行透射电镜(TEM)观察。AFM检测结果显示,纳米活性炭微粒形态近似球形,表面较平滑,平均直径为(299±187)nm;纳米氧化锌微粒呈球形,平均直径(50±20)nm,与TEM检测结果具有较高一致性。该法简便可靠。