肝组织中NF-κB、TGF-β1及其Ⅰ型受体mRNA和HSC在肝纤维化中的改变及护肝片对其的影响

目的探讨中、晚期纤维化大鼠肝组织中肝星状细胞(HSC)的活化与增殖、核转录因子-κB(NF-κB)及转化生长因子-β1(TGF-β1)及其Ⅰ型受体(TβRⅠ)表达的改变及护肝片对其的影响。方法采用12.5%CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,自造模之日起,大鼠分组灌胃给药(护肝片921mg/kg)或溶媒,每日一次,直至8或13周末,分别处死动物,取左叶肝组织石蜡包埋,制作组织芯片。免疫组化S-P法检测大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)和NF-κB p65蛋白的表达,原位杂交检测TGF-β1及TβRⅠmRNA的表达;并用MetaMorph图像分析系统计数-αSMA阳性细胞数,对NF-κB p65蛋白、TGF-β1及TβRⅠmRNA的表达量进行定量分析。结果 1.模型复制8周和13周,模型组的肝损伤及其纤维化分级均明显高于正常组(P<0.01),护肝片组的肝损伤及其纤维化分级均轻于模型组。2.模型复制8周和13周,模型组活化的HSC(即-αSMA阳性细胞)数量较正常组明显增多,NF-κB p65蛋白、TGF-β1及TβRⅠmRNA的表达均较正常组明显增强(P<0.01);3.护肝片显著抑制8、13周纤维化肝组织HSC的活化与增殖和NF-κB p65蛋白、TGF-β1及TβRⅠmRNA的表达(P<0.01)。结论抑制HSC的活化与增殖和NF-κB p65蛋白与TGF-β1及TβRⅠmRNA的表达可能是护肝片抗肝纤维化作用的靶点之一。     

风湿性心脏病房颤患者右心房Ⅰ、Ⅲ型胶原表达差异分析

探讨风心病房颤病人心房间质胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的基因表达改变,以进一步明确房颤的机制,阐述心房结构重构与风心病慢性房颤的关联,用RT-PCR方法检测24例风心病并发房颤病人与20例风心病窦性心律病人中胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的mRNA表达的差异：同时利用免疫组化及图像分析方法检测心房间质中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量并作对比分析,风心病并发房颤病人胶原蛋白Ⅰ、ⅢmRNA表达及胶原蛋白含量均较风心病窭性心律病人组明显增高。二者呈正相关,胶原增生,心房重构等结构改变与风湿性心脏病房颤的发生与维持密切相关并且不同类型胶原增生程度存在差异。     

依帕司他对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预作用及其机制

目的:观察依帕司他(EPS)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠间质纤维化的保护作用及其机制。方法:实验设假手术组(Sham)组、UUO、UUO+EPS(50 mg/kg)及UUO+EPS(100 mg/kg)剂量组,每组n=8。左侧输尿管结扎制备UUO大鼠模型。造模后连续灌胃给药3周,sham和UUO组给予等体积的羟甲基纤维素钠。HE和Masson染色观察肾组织病理变化及胶原沉积情况。免疫组化法观察肾组织醛糖还原酶(AR)表达情况,分别采用real-time PCR和(或) Western blot检测肾脏I型胶原(collagen I)、III型胶原(collagen III)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白-1(FSP-1)、纤连蛋白(FN)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、转化生成因子-β1(TGF-β1)和AR mRNA及蛋白表达。结果:与Sham组相比,UUO组大鼠小管上皮细胞萎缩、空泡样变性,肾间质成纤维细胞及肌成纤维细胞大量增殖并伴大量炎症细胞浸润,胶原沉积明显增加,collagen I、collagen III、TGF-β1和AR mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01),同时EMT标志性蛋白α-SMA、FSP-1、FN mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01),而E-cadherin mRNA及蛋白表达水平明显降低。与UUO组相比,经EPS治疗3周后,肾间质纤维化程度明显减轻,胶原沉积明显减少,collagen I、collagen III、TGF-β1和AR mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01或P<0.05),另外α-SMA、FSP-1、FN mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01或P<0.05),而E-cadherin mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01或P<0.05),而且100 mg/kg剂量组上述指标的改变均好于低剂量组(P<0.05,P<0.01)。结论:依帕司他对肾间质纤维化具有一定的改善作用,其机制可能与其抑制TGF-β1介导的AR表达、进而抑制大鼠肾小管上皮细胞EMT有关。     

MMP-9、ICAM-1、TNF-α在自发性高血压大鼠烟熏肺损伤中的变化分析

探讨MMP-9、ICAM-1和TNF-α在自发性高血压大鼠烟熏肺损伤中的表达变化及其作用机制。选取健康、雄性Wister大鼠12只(对照组),自发性高血压雄性Wister大鼠24只随机分为烟熏组和SH对照组各12只,对照组和烟熏组均每天进行烟熏2次、每周6 d,连续8周对比3组大鼠肺功能变化、肺组织中细胞粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白及mRNA的表达情况。对照组、烟熏组的气道阻力、平滑肌指数、胶原指数均显著的高于SH对照组(p0.05),对照组、烟熏组的最大呼气流量、平均肺泡个数均低于SH对照组(p0.05);烟熏组的气道阻力、平滑肌指数、胶原指数均显著的高于对照组(p0.05),烟熏组的最大呼气流量、平均肺泡个数均低于对照组(p0.05);对照组、烟熏组的ICAM-1、TNF-α、MMP-9蛋白、mRNA表达程度均显著的高于SH对照组(p0.05);烟熏组的ICAM-1、TNF-α、MMP-9蛋白、mRNA表达程度均显著的高于对照组(p0.05)。烟熏对自发性高血压大鼠肺功能的损伤十分明显,破坏肺泡结构,影响大鼠的肺部功能,该过程可能与上调ICAM-1、TNF-α、MMP-9表达有关。     

电针联合艾灸对胶原诱导性关节炎大鼠关节的保护作用

为了探讨电针联合艾灸对胶原诱导性关节炎大鼠关节的影响,本研究将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、DKK1组和观察组,每组10只。对模型组、DKK1组和观察组大鼠建立胶原诱导性关节炎模型,DKK1组给予Wnt阻断剂DKK1,观察组给予电针联合艾灸,观察各组关节炎指数评分(AI)、放射评分及组织病理表现。采用Western blotting和RT-PCR检测Wnt3a、Wnt5和β-catenin蛋白及mRNA表达。研究显示,观察组和DKK1组造模后21 d、28 d的AI均明显低于模型组(p0.05);观察组和DKK1组造模后28 d的放射评分分别为(2.67±0.87)分和(2.67±0.87)分,明显低于模型组(p0.05);DKK1组和观察组的滑膜肿胀、炎性细胞浸润和骨质破坏情况均轻于模型组;DKK1组和观察组的Wnt3和β-catenin蛋白及m RNA相对表达均明显低于模型组(p0.05);各组Wnt5a蛋白及mRNA相对表达比较差异无统计学意义(p0.05)。研究说明,电针联合艾灸对胶原诱导性关节炎大鼠有较好的关节保护作用,可能与其调节Wnt3a、β-catenin表达有关。     

芪苈强心可减弱房颤家兔心房结构重构

本研究旨在考察芪苈强心对房颤家兔心房结构重构的影响。将30只家兔随机分成假手术组、模型组和芪苈强心组,每组10只。建立心房颤动家兔模型前1周及建模后4周,每天按2.5 g/kg的剂量对芪苈强心组家兔灌胃芪苈强心。实验结束时检测三组家兔的超声心动图指标,然后应用组织学、免疫组化和蛋白质印迹分析检测心房组织中的DHPR、TGF-β1、P-smad 2/3、collagenⅢ和MMP9蛋白表达。研究显示,芪苈强心组家兔的LVEDD和IVSd显著低于模型组(p0.05),而LVEF显著高于模型组(p0.05)。芪苈强心组的纤维化面积和心肌细胞凋亡比例显著低于模型组。芪苈强心处理可显著增加DHPR的蛋白水平。芪苈强心处理显著降低了TGF-β1和P-smad 2/3蛋白表达的水平。芪苈强心处理可显著下调collagenⅢ和MMP9蛋白的水平。本研究表明,芪苈强心可通过抑制TGF-β1/P-smad 2/3信号通路及其下游纤维化分子来减轻心房颤动家兔模型的心房组织纤维化并抑制心肌细胞凋亡,从而减弱心房结构重塑和电重构。     

心力衰竭合并房颤患者血浆脑钠肽水平及相关因素分析

目的:探讨心力衰竭合并房颤患者血浆脑钠肽水平变化及相关因素,为心血管疾病的临床诊断提供理论依据。方法:选取我院2011年1月-2013年1月收治的心力衰竭患者94例,分为窦性心律组和心房颤动组。分别抽取两组患者的血液样本并检测血浆中的BNP浓度,比较不同NYHA分级患者血浆内的脑钠肽水平的变化情况,记录左心房和左心室舒张末内径及房颤持续时间等。结果:心力衰竭合并心房颤动组与窦性心律组血浆BNP水平比较,心房颤动组高于窦性心律组;差异有统计学意义(P0.05);两组NYHA不同分级相互比较,Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级间的BNP水平,心房颤动组BNP水平均高于窦性心律组;差异显著具有统计学意义(P0.05);血浆BNP水平与患者年龄、左心房大小、左心室大小、房颤持续时间因素呈正相关(r分别为0.0.801,0.748,0.854和0.703,P0.05),与左心室射血分数呈负相关(r=-0.41,P0.05)。结论:BNP血浆浓度与心功能状态密切相关,BNP浓度的检测有助于临床心血管疾病的诊断。     

GLUT-1、MKK4蛋白与鼻咽癌的相关性分析

为了探讨葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)和丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK4)蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。选取2015年2月至2017年3月我院保存的鼻咽癌组织71例(鼻咽癌组),同时选取鼻咽慢性炎症组织55例作为对照(鼻咽慢性炎症组),采用免疫组化染色检测GLUT-1、MKK4蛋白表达,同时计数微血管密度(MVD)。结果显示,鼻咽癌组织GLUT-1蛋白阳性表达率为57.75%,明显高于鼻咽慢性炎症组织(p0.05),而MKK4蛋白阳性表达率为70.42%,明显低于鼻咽慢性炎症组织(p0.05);Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移患者GLUT-1蛋白阳性表达率为78.57%和77.55%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(p0.05),而MKK4蛋白阳性表达率为57.14%和61.22%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(p0.05);GLUT-1蛋白阳性表达鼻咽癌组织MVD计数(38.42±5.73),明显高于GLUT-1蛋白阴性表达鼻咽癌组织(p0.05);MKK4蛋白阳性和阴性表达鼻咽癌组织MVD计数比较差异无统计学意(p0.05);鼻咽癌组织中GLUT-1和MKK4蛋白表达无明显相关性(p0.05)。本研究表明,GLUT-1和MKK4蛋白与鼻咽癌临床病理特征有一定关系,但两者间无明显关系;GLUT-1与肿瘤血管生成有关。     

TGF-β1和FBRS可指示肝纤维化发展程度

为了探讨转化生长因子(TGF-β1)、外周血纤维化蛋白(FBRS)表达水平变化与肝纤维化发生发展的相关性,本研究选取自2015年5月至2017年6月间在我院诊治的慢性病毒性肝炎患者120例,设为肝炎组。采用免疫组化法检测肝组织TGF-β1的表达水平,酶联免疫分析检测血清中TGF-β1的含量,RT-PCR检测外周血单个核细胞FBRS mRNA的表达水平,分析TGF-β1、FBRS与肝纤维化程度的相关性。研究结果表明:随肝纤维化程度的不同,肝组织TGF-β1、血清TGF-β1表达水平、FBRS mRNA表达水平与肝脏胶原含量同步性升高(p<0.05)。进一步的相关分析表明:肝组织TGF-β1水平、FBRS mRNA与肝纤4项检查,即血清Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原片段(Ⅳ-C)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)水平之间均呈正相关。本研究结果初步得出结论,慢性病毒性肝炎肝组织TGF-β1、血清TGF-β1表达水平、外周血FBRS的表达水平与肝组织纤维化程度呈正相关。     

LncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-124-3p/HMGB1轴对高糖诱导肾小球系膜细胞增殖、凋亡及纤维化的影响

摘要 目的：探讨长链非编码核糖核酸（LncRNA）KCNQ1OT1靶向调控miR-124-3p/高迁移率族蛋白B1（HMGB1）轴对高糖诱导肾小球系膜细胞（HMC）增殖、凋亡及纤维化的影响。方法：将人HMC分为对照组（NC组）、高糖组（30 mmol/L葡萄糖）、阴性序列（si-NC）组、KCNQ1OT1小干扰核糖核酸（RNA）（si-KCNQ1OT1）组、si-KCNQ1OT1+模拟对照序列（miR-NC）组、si-KCNQ1OT1+miR-124-3p抑制剂（miR-124-3p inhibitor）组,各组在转染后进行高糖处理。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测LncRNA KCNQ1OT1信使核糖核酸（mRNA）、miR-124-3p mRNA、HMGB1 mRNA表达;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白印迹法（Western blot）检测HMGB1蛋白、增殖相关蛋白[细胞周期蛋白1（CyclinD1）]、细胞凋亡蛋白[半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶蛋白9（caspase-9）]、细胞纤维化蛋白[纤维连接蛋白（FN）、细胞黏附分子-1（ICAM-1）]表达;双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA KCNQ1OT1与miR-124-3p与HMGB1之间的靶向关系。结果：与NC组比较,高糖组KCNQ1OT1 mRNA、HMGB1 mRNA及HMGB1蛋白、CyclinD1蛋白、FN蛋白、ICAM-1蛋白表达、HMC活性（24 h、48 h和72 h）明显上升,miR-124-3p mRNA、caspase-3蛋白及caspase-9蛋白表达、HMC凋亡率明显下降（P<0.05）;与高糖组、si-NC组比较,si-KCNQ1OT1组KCNQ1OT1 mRNA、HMGB1 mRNA及HMGB1蛋白、CyclinD1蛋白、FN蛋白、ICAM-1蛋白表达、HMC活性（24 h、48 h和72 h）明显下降,miR-124-3p mRNA、caspase-3蛋白及caspase-9蛋白表达、HMC凋亡率明显上升（P<0.05）;与si-KCNQ1OT1组、si-KCNQ1OT1+miR-NC组比较,si-KCNQ1OT1+miR-124-3p inhibitor组HMGB1 mRNA及HMGB1蛋白、CyclinD1蛋白、FN蛋白、ICAM-1蛋白表达、HMC活性（24 h、48 h和72 h）明显上升,miR-124-3p mRNA、caspase-3蛋白及caspase-9蛋白表达、HMC凋亡率明显下降（P<0.05）。较miR-NC组与KCNQ1OT1-WT共转染组而言,miR-124-3p mimic组与KCNQ1OT1-WT共转染组细胞荧光素酶活性明显降低（P<0.05）;较miR-NC组与HMGB1-WT共转染组而言,miR-124-3p mimic组与HMGB1-WT共转染组细胞荧光素酶活性明显降低（P<0.05）。结论：LncRNA KCNQ1OT1可以靶向下调miR-124-3p mRNA表达,上调HMGB1 mRNA及HMGB1蛋白表达,促进高糖诱导HMC增殖,抑制凋亡,促进细胞纤维化发展。     

高山红景天对肝纤维化大鼠PDGF-BB mRNA表达的影响

目的:观察单方生药高山红景天对实验性肝纤维化大鼠的疗效,探讨其可能的作用机制。方法:将实验动物随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、秋水仙碱组(C)、红景天高剂量组(D)、红景天低剂量组(E)。除正常对照组外,其余4组均用四氯化碳诱发肝纤维化。各组于造模第8周末处死动物,分别用放射免疫法检测血清层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)及Ⅳ型胶原(CⅣ);RT-PCR检测肝组织PDGF-BB mRNA的表达。结果:与模型组大鼠比较,经该中药治疗,大鼠血清中LN、PCⅢ、HA、CⅣ水平明显降低(P<0.01);大鼠肝组织内PDGF-BBmRNA表达明显下降(P<0.01);大鼠肝组织病理学检测改善显著。结论:单方生药高山红景天能有效地抑制肝纤维化的发展,其机制可能是通过下调肝组织内PDGF-BB mRNA表达,降低ECM的分泌而达到的。     

护肝片对纤维化肝组织NF-κB表达的抑制作用

目的探讨护肝片对中、晚期纤维化大鼠肝组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法采用12.5% CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,自造模之日起,大鼠分组灌胃给药(护肝片921mg·kg-1)或溶媒,每d一次,直至8或13周末,分别处死动物,取左叶肝组织石蜡包埋,制作组织芯片,免疫组化SP法检测NF-κB p65蛋白表达的改变,并用MetaMorph图像分析系统对NF-κB p65蛋白表达量进行定量分析.结果 1.模型复制8周和13周,模型组的肝损伤及其纤维化分级均明显高于正常组(P<0.01),护肝片组的肝损伤及其纤维化分级均轻于模型组.2.模型复制8周和13周,模型组NF-κB p65蛋白的表达较正常组均明显增强(P<0.01);3.护肝片显著抑制8、13周纤维化肝组织NF-κB p65蛋白的表达(P<0.01).结论护肝片可减轻肝组织的损伤及其纤维化程度,抑制NF-κB的表达可能是其抗肝纤维化作用的靶点之一.     

异甘草酸镁对纤维化大鼠肝脏TGF-β1及Smad蛋白表达的影响

目的:观察异甘草酸镁对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝脏组织TGF-β1及Smad蛋白表达的影响,以期揭示其抗纤维化的机制。方法:利用腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立大鼠肝纤维化模型,然后应用不同剂量的异甘草酸镁和INF-γ处理,于实验第16周末检测大鼠血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、III型前胶原(PC-III)、IV型胶原(C-IV)的水平,采用RT-PCR法检测TGF-β1,Smad3,Smad7mRNA的表达。结果:与模型组比较,异甘草酸镁各剂量组血清HA,LN,PC-III,C-IV水平显著下降(P<0.05),肝脏TGF-β1、smad3的表达明显降低(P<0.05),smad7则有所上升。结论:异甘草酸镁可以改善肝纤维化大鼠肝组织纤维化程度,其作用机理与抑制TGF-β1、Smad3mRNA的表达,上调Smad7mRNA的表达有密切关系。     

丁基苯酞对心力衰竭大鼠心房颤动的影响及作用机制

为探讨丁基苯酞(DL-3-N-butylphthalide,NBP)对心肌梗死诱导的心力衰竭(heart failure,HF)大鼠心房结构重塑和心房颤动形成的影响,本研究将心力衰竭模型大鼠随机分为丁基苯酞组(NBP)、模型组(Model)和假手术组(Sham)。将丁基苯酞用大豆油溶解,制成10 mg/mL的丁基苯酞溶液。丁基苯酞组按照80 mg/kg体重对SD大鼠进行灌胃,模型组和假手术组用等量的大豆油灌胃。假手术组大鼠接受相同手术但未结扎左前降支冠状动脉。分别检测大鼠的超声心动图、心房颤动诱导性试验及心房纤维化,并检测TNF-α、TGF-β1、NF-κB、Nrf2和HO-1的蛋白表达。研究显示,应用丁基苯酞治疗4周后,NBP组大鼠心功能显著改善(p<0.05);NBP组大鼠心房颤动诱导能力和持续时间显著降低(p<0.05);NBP组大鼠心房纤维化程度显著减轻(p<0.05)。丁基苯酞显著抑制TNF-α,NF-κB和TGF-β1的蛋白表达,并上调Nrf2和HO-1的蛋白表达。并且,NBP对TNF-α/NF-κB/TGF-β1和纤维化的抑制作用可能与Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。因此,丁基苯酞有望成为预防房颤的上游治疗中的有效药物。     

肌浆网钙ATP酶过表达对心房颤动兔心房及L型钙通道a1c蛋白表达的影响

目的探讨心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)基因过表达,对兔急性心房颤动(AF)的心房肌L型电压依赖钙通道蛋白alc亚单位(LVDCCalc)表达的影响。方法 48只成年新西兰兔,随机分成为房颤组(AF组,n=12)、9-型腺相关病毒+增强型绿色荧光蛋白组+房颤组(rAAV9+EGFP+AF组,n=12)、9-型腺相关病毒+肌浆网钙ATP酶2a+增强型绿色荧光蛋白组+房颤组(rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组,n=12),并设假手术组作为对照(Control组,n=12)。rAAV9+EGFP+AF组和rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组起搏前30 d开胸心包腔内注射包含报告基因的rAAV9-EGFP和包含靶基因的rAAV9-SERCA2a-EGFP各500μL(1×1012v.g/μL)。转染30 d后,AF组、rAAV9+EGFP+AF组和rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组,以600 BPM刺激频率,持续起搏兔右心房24h制作AF模型。处死各组动物,倒置荧光显微镜下观察右心房肌组织EGFP表达情况,行HE染色对右心房组织形态检查,应用免疫组化技述检测SERCA2a蛋白及LVDCCalc蛋白在心房肌中的表达情况。结果 rAAV9+EGFP+SERCA2a+AF组SERCA2a蛋白及LVDCCalc蛋白表达量显著高于AF组和rAAV9+EGFP+AF组(P<0.05),但与对照组比较差异无显著性。结论心房肌转SERCA2a基因,显著减少了急性房颤心房肌的LVDCCa1c蛋白表达的降低,有逆转急性AF电重构的作用。     

子宫内膜异位症患者血管生成相关基因VEGF和TSP-1 mRNA的表达

本研究的目的在于探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血小板反应蛋白-1(TSP-1)在子宫内膜异位症患者的在位内膜、卵巢子宫内膜异位囊肿及正常子宫内膜中的表达及意义。采用q PCR法检测在北京妇产医院接受腹腔镜手术的62例内异症患者的异位内膜、在位内膜及23例不孕症患者正常子宫内膜中VEGF和TSP-1 mRNA的表达水平。结果表明卵巢子宫内膜异位囊肿间质细胞中的VEGF mRNA的表达水平与在位子宫内膜间质细胞相比明显降低(p=0.001),而TSP-1 mRNA的表达水平明显高于后者(p0.001)。VEGF mRNA在卵巢子宫内膜异位囊肿组织中的表达水平明显低于在位子宫内膜组织(p0.001),而TSP-1mRNA的表达水平明显高于后者(p0.001)。VEGF mRNA在在位子宫内膜组织中的表达水平明显高于正常子宫内膜组织(p0.001)。TSP-1 mRNA的表达与后者相比无统计学差异(p=0.221)。血管形成相关基因VEGF和TSP-1在卵巢子宫内膜异位囊肿和在位子宫内膜组织、细胞中表达不同,其可能参与了子宫内膜异位症的发生和发展。     

CXCL8及其受体CXCR1、CXCR2在慢性乙肝中的表达及意义

为探讨CXC趋化因子8(CXCL8)及其受体CXC趋化因子受体1(CXCR1)、CXC趋化因子受体2(CXCR2)在慢性乙型肝炎中的表达及意义,本研究选取了我院治疗的慢性乙型肝炎患者64例(观察组),同时选取健康志愿者60例作为对照组,两组均采用SABC免疫细胞化学染色法检测CXCL8、CXCR1和CXCR2在各组外周血中性粒细胞(PMNs)内的表达量,采用RT-PCR检测PMNs中CXCL8、CXCR1和CXCR2mRNA表达。实验发现,观察组外周血PMNs中CXCL8、CXCR1表达明显强于对照组(p0.05);观察组和对照组外周血PMNs中CXCR2表达强度差异比较无统计学意义(p0.05);观察组外周血PMNs中CXCL8mRNA、CXCR1 mRNA和CXCR2 mRNA相对表达量分别为(1.16±0.15)、(0.87±0.24)和(1.01±0.22),明显高于对照组(p0.05);观察组中HBV-DNA阳性者外周血PMNs中CXCL8 mRNA和CXCR1 mRNA相对表达量分别为(1.27±0.10)和(1.02±0.13),明显高于HBV-DNA阴性者(p0.05);HBV-DNA阳性者和HBV-DNA阴性者CXCR2 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(p0.05);CXCL8 mRNA和CXCR1 mRNA相对表达量与ALT呈正相关(r=0.673和0.681,p0.05),CXCR2 mRNA相对表达量与ALT无相关性(p0.05)。慢性乙肝患者PMNs内CXCL8、CXCR1、CXCR2的mRNA水平升高,其中CXCL8、CXCR1的mRNA与血清ALT呈正相关,同时与HBV DNA载量有一定的相关性。     

姜黄素在宫颈癌治疗中对MIF、VEGF-C、P53表达及肿瘤生长的影响

为了揭示姜黄素治疗宫颈癌的实验效果及其作用机制。选取成功建立的宫颈癌Caski细胞移植瘤裸鼠48只,随机分为空白组(等量生理盐水灌胃)、顺铂组(顺铂3 mg·g~(-1)·d~(-1))、高剂量组(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))、低剂量组(50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组12只,连续处理15 d后,对比各组小鼠肿瘤体积、瘤体重量、抑瘤率,采用流式细胞仪技术检测各组小鼠肿瘤组织中Caski细胞周期分布情况、采用RT-PCR技术和Western-blotting技术检测各组小鼠瘤组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、血管内皮细胞生长因子-C(VEGF-C)、p53mRNA及蛋白的表达情况。结果显示,顺铂组、高剂量组、低剂量组的小鼠肿瘤体积、肿瘤重量均显著低于空白组(p0.05),顺铂组、高剂量组的小鼠肿瘤体积、肿瘤重量显著低于低剂量组(p0.05),顺铂组、高剂量组的抑瘤率显著高于低剂量组(p0.05);顺铂组、高剂量组、低剂量组的G1期细胞比例低于空白组(p0.05);顺铂组、高剂量组的G1期细胞比例低于低剂量组(p0.05),而S期及G2/M期细胞比例高于低剂量组(p0.05);顺铂组、高剂量的MIF、VEGF-C mRNA表达低于低剂量组(p0.05),顺铂组、高剂量的p53mRNA表达高于低剂量组(p0.05);顺铂组、高剂量组、低剂量组的MIF、VEGF-C蛋白低于空白组(p0.05);顺铂组、高剂量组的MIF、VEGF-C蛋白低于低剂量组(p0.05),而p53蛋白高于低剂量组(p0.05)。姜黄素能有效抑制宫颈癌Caski细胞移植瘤裸鼠肿瘤细胞的生长,可能与下调MIF、VEGF-C及上调p53 mRNA及蛋白有关。     

miR-152-3p调控Notch1/DLL4通路对家兔深II度烧伤创面血管生成的影响

摘要 目的：探究微小核糖核酸（miR）-152-3p调控果蝇Notch同源物1（Notch1）/Delta样配体4（DLL4）通路对家兔深II度烧伤创面血管生成的影响。方法：将50只新西兰家兔随机分为对照组、模型组、miR-152-3p拮抗剂（antagomir）组、miR-152-3p antagomir阴性对照+空载组、miR-152-3p antagomir+Notch1敲低组,每组10只,除对照组外其余各组家兔构建深II度烧伤模型,分组给药处理后,实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测各组家兔创面组织miR-152-3p与Notch1、DLL4 mRNA表达;检测各组家兔创面愈合率及微循环血流灌注值（MPD）;免疫组织化学染色检测各组家兔创面微血管密度（MVD）;酶联免疫吸附反应（ELISA）检测各组家兔血清血管内皮细胞生长因子（VEGF）及促血管生成素1（Ang1）水平;免疫印迹检测各组家兔创面组织VEGF、Ang1与Notch1/DLL4通路蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测兔脐静脉内皮细胞中miR-152-3p对Notch1及DLL4的靶向调节。结果：与对照组相比,模型组家兔创面组织miR-152-3p与Notch1、DLL4 mRNA表达升高（P<0.05）,创面MPD及MVD、血清VEGF及Ang1水平、创面组织VEGF与Ang1蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组相比,miR-152-3p antagomir组家兔创面组织miR-152-3p mRNA表达降低（P<0.05）,创面愈合率、创面MPD及MVD、血清VEGF及Ang1水平、创面组织Notch1、DLL4 mRNA及蛋白表达、创面组织VEGF与Ang1蛋白表达升高（P<0.05）;miR-152-3p antagomir阴性对照+空载组家兔各指标无明显差异（P＞0.05）;与miR-152-3p antagomir组相比,miR-152-3p antagomir+Notch1敲低组家兔创面组织miR-152-3p mRNA表达无明显差异（P＞0.05）,创面愈合率、创面MPD及MVD、血清VEGF及Ang1水平、创面组织Notch1、DLL4 mRNA及蛋白表达、创面组织VEGF与Ang1蛋白表达降低（P<0.05）。miR-152-3p可靶向下调兔脐静脉内皮细胞中Notch1及DLL4的表达。结论：敲低miR-152-3p可通过上调Notch1/DLL4通路而增强家兔深II度烧伤创面血管生成,进而促进其创面愈合。     

抵抗素对NAFLD肝纤维化的影响及可能的体内外机制

应用高脂饮食饲养Wistar大鼠建立非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝纤维化体内模型,选用重组抵抗素作用于肝星状细胞(hepatic stellate cell-t6,HSC-T6)建立体外模型。观察肝组织纤维化的情况;检测体内体外Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)水平;检测肝组织抵抗素mRNA和蛋白的表达水平;检测HSC-T6中转化生长因子β-1(TGF-β1)mRNA及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。结果显示,随着高脂喂养时间的延长,大鼠肝组织抵抗表达逐渐增加且纤维化程度逐渐加重;随着抵抗素浓度的增加,HSC-T6上清中纤维化指标升高,细胞中TGF-β1mRNA及TNF-αmRNA表达增加。与对照组比较,各指标差异均有显著性(P<0.05或0.01)。上述结果显示抵抗素通过TNF-α、TGF-β1诱导NAFLD肝纤维的发生和发展。