鹅膏环肽类毒素检测技术的研究进展

鹅膏环肽类毒素主要存在于鹅膏属Amanita、盔孢伞属Galerina和环柄菇属Lepiota蘑菇中。如果不慎摄入,可能会给人类和动物带来严重的健康风险。快速准确地鉴定蘑菇和生物样品中的这些毒素对于确保食品安全以及诊断和治疗蘑菇中毒至关重要。本文综述了文献报道的各类检测方法,重点介绍高效液相色谱与质谱联用法,这是测定复杂基质中鹅膏肽类毒素的主要分析方法。此外,本文还提出了鹅膏环肽类毒素检测的当前趋势,并对未来现场快速检测及仪器定量检测进行了展望。     

基于ITS序列对引起中毒事故蘑菇的分子鉴定

目的:对一起中毒事故的蘑菇进行分子鉴定.方法:测定菌株核糖体DNA的转录间隔区序列.结果:该序列与Gen-Bank中已有的序列进行比较,得到一系列同源性较高的序列.其中与接受号为EF411081的Amanita phalloides同源性最高,达到99%以上;利用所得序列构建分子系统发育树,发现所测定的序列以较高的置信度与Amanita phalloides聚为一支.结论:确定引起中毒事故的蘑菇为毒性较高的Amanita phalloide,即条纹毒鹅膏菌.     

鹅膏属一新种

本文报道伞菌目鹅膏属一新种,其形态特征与纹缘鹅膏(Amanita xpreta)和食用鹅膏(A．Eseulenta)接近,可供食用,定名为鹧鸪菌(Amanita htinanensis Pcng et Liu sp. Nov.)。对新种进行了汉文和拉丁文描述,并附有彩色图版。     

西藏鹅膏菌属的分类研究

本文报告了西藏地区鹅膏菌属(Amanita)的真菌26种。其中灰鳞鹅膏菌(Amanita griseofarinosa Hongo),红鹅膏菌[A.parcivolvata(Peck)Glib.],浅杏黄鹅膏菌[A.Crocca(Quél.)Kühn.＆ Romagn.],黄赭毒鹅膏菌(A.flavorubescens Atk.),黄毒蝇鹅膏菌(A.flavoconia Atk.),史米斯鹅膏菌(A.smithiana Bas),褐黄鹅膏菌:(A.umbrinoluteaSeer.)等是我国新纪录种。西藏地区的首次新纪录13种。该属真菌均是树木的外生菌根真菌,有毒种多,具有重要的经济价值。     

灰花纹鹅膏中三个鹅膏毒肽的分离和结构研究

从灰花纹鹅膏(Amanita fuliginea)中分离得到3个已知鹅膏毒肽类成分,利用波谱方法(^1H-NMR、^13C-NMR、2D-NMR和FAB-MS等)对这些结构较为复杂的环肽类成分进行了鉴定,结构分别为α-Amanitin、β-Amanitin和Amanin。     

大孔吸附树脂联合葡聚糖凝胶Sephadex LH20分离制备鹅膏肽类毒素的研究

鹅膏菌肽类毒素是蘑菇中毒导致死亡的最主要因素,同时也是生物学研究领域的一种重要工具试剂,但由于其结构相似,分离制备单体化合物比较困难。通过4种大孔吸附树脂对致命鹅膏Amanita exitialis子实体中主要肽类毒素组分的静态吸附与解吸附性能比较,结果表明XAD16的吸附能力最强,同时也有较强的解吸附能力,但XAD16柱层析梯度洗脱时对毒素分离效果差,表明XAD16只具有吸附富集鹅膏肽类毒素的特性但不适于分离。经XAD16柱层析富集的毒素成分,通过葡聚糖凝胶sephadex LH20柱层析分离,结果表明sephadex LH20柱层析对鹅膏肽类毒素具有较好的分离效果,经过2次sephadex LH20柱层析,获得了5个纯度达50%–80%的鹅膏肽类毒素单体化合物,进一步利用半制备高效液相色谱系统(HPLC)纯化,分离得到了7个纯度达95%以上的鹅膏肽类毒素单体,其中5个经质谱分析鉴定为:α‐鹅膏毒肽(α‐amanitin)、β‐鹅膏毒肽(β‐amanitin)、脱氧二羟毒伞素(desoxoviroidin)、羧基三羟鬼笔毒肽(phallisacin)和羧基二羟鬼笔毒肽(phallacidin)。     

鹅膏环肽毒素生源合成的研究进展

在蘑菇目Agaricales中,已知鹅膏属Amanita、环柄菇属Lepiota和盔孢伞属Galerina 3个属的部分物种能产生剧毒的鹅膏环肽毒素。全球90%以上的致死性蘑菇中毒事件是由含鹅膏环肽蘑菇导致。上述3个属的剧毒蘑菇虽然亲缘关系较远,但却可以合成同一种鹅膏环肽毒素,且使用了大致相同的生源合成代谢途径,涉及多个毒素合成基因,采用了特殊的组合式合成机制。本文总结了鹅膏环肽毒素合成途径研究的最新进展,指出了当前工作中遇到的一些难题,对未来研究的趋势进行了展望。     

气升式液体培养假褐云斑鹅膏菌丝及毒素检测分析

采集并组织分离到假褐云斑鹅膏Amanita pseudoporphyria的纯培养菌丝。培养发现其在琼脂培养基上生长形态与一般蕈菌有差别。摇瓶液体培养条件下,假褐云斑鹅膏菌丝体干重为0.626g/L,在气升式反应器内假褐云斑鹅膏菌丝体干重可达到1.629g/L。反应器培养的菌丝体毒素的HPLC分析表明菌丝体内含有鹅膏毒肽,而不含有鬼笔毒肽。结果表明可以通过液体培养鹅膏菌丝体来生产鹅膏毒素。     

鹅膏菌肽类毒素的产品开发

鹅膏菌肽类毒素作为一类重要的生化试剂 ,在分子生物学、遗传学、生物化学、医学、生物防治等领域得到了广泛的应用 ,目前只有美国Sigma公司和法国 Fluka公司有售 ,其产品全部来自于欧美的毒鹅膏 (Amanita phalloides)子实体 ,通过 HPLC分离纯化获得 ,由于原料资源有限 ,需求量又大增 ,因而价格极其昂贵 ,例如 α-amanitin每克达 1 5. 35万美元 ,且每年以 1 0 %速度上涨 (美国 Sigma公司 1 990～ 2 0 0 0年产品目录 ) .湖南近年来大量发生因误食野生毒菌而中毒死亡的事件 ,我们调查发现均为灰花纹鹅膏菌(Amanita fuliginea)所致 ,灰花纹…     

8个毒蘑菇菌株培养特性及生理学习性

通过对8个毒蘑菇菌株的培养特性及生理学习性的研究,描述了其培养特性,确定其生长所需最适温度、最适碳源、最适氮源以及最适pH值。8菌株为:鳞柄白鹅膏(Amanita virosa)、细鳞环柄菇(Lepiota clypelo-laria)、绒白乳菇(Lactarius vellereus)、鹅膏菌(Amanitasp.)、厚环鹅膏(Amanita pachycolea)、珊瑚菌(Ramariaephemeroderma)、白霜杯伞(Clitocybe dealbata)、冠状环柄菇(Lepiota cristata)。