真养产碱杆菌突变株65－7产聚－β－羟基丁酸的研究

本文对真养产碱杆菌突变株６５－７在台式２Ｌ发酵罐中利用葡萄糖积累ＰＨＢ进行了碳源和氮源补料分批培养的研究。结果表明７２ｈ发酵液中细胞干重达５０ｇ／Ｌ,ＰＨＢ占细胞干重的７７％,糖对ＰＨＢ的转化率为２５％。制得的ＰＨＢ产品纯度与Ｓｉｇｍａ公司的相当,熔点１７４℃。     

聚β—羟基丁酸产生菌Z5—GⅡ发酵条件的研究

对聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）产生菌Ｚ５－ＧⅡ的发酵培养基及发酵条件进行优化研究;结果表明：该菌株在蔗糖１％,酵母粉０．３％,酵母浸汁０．３％,Ｋ２ＨＰＯ４０．２％;ｐＨ７．２￣７．４的优化发酵培养基中,接种量８％,种２８ｈ,发酵培养３６ｈ,细胞干重为６．８７ｇ／Ｌ,ＰＨＢ产率可达的细胞干重的６１．８６％。该菌株还可利用葡萄糖生产废液为碳源生产ＰＨＢ,具有实现工业化生产的潜力。     

真养产碱杆菌二级连续培养系统中稀释率对聚β—羟基丁酸合成的影响

在研究真养产碱杆菌ＷＳＨ３一级连续培养动力学的基础上,采用二级连续培养系统对不同稀释率下聚β羟基丁酸的生产进行了研究。结果表明：在一级连续培养系统中,当稀释率为０２１ｈ－１时,细胞干重最大值达２７１ｇ／Ｌ;二级培养系统中,稀释率为０１４ｈ－１时细胞干重最大值为４７６ｇ／Ｌ;在稀释率为０１２ｈ－１时,ＰＨＢ的生产强度达到最大值为２５０ｇ／（Ｌ·ｈ）,但胞内ＰＨＢ含量仅为４７６％;在稀释率为００７５ｈ－１时,产物对基质的转化率达到最大值为０３８ｇ／ｇ,此时ＰＨＢ的生产强度达２１４ｇ／（Ｌ·ｈ）和胞内ＰＨＢ含量±７２１％;随着细胞比生长速率的增长,细胞中ＰＨＢ含量和单位菌体合成ＰＨＢ的量不断下降。     

利用糖蜜发酵生产生物降解塑料PHB的研究

由Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｌａｔｕｓ经单菌落分离,从中筛选到一株高效利用糖蜜产聚羟基丁酸（ＰＨＢ）的优良菌株１０１８。在６Ｌ台式发酵罐（Ｎ.Ｂ.Ｓ）中,进行了该菌利用甜菜糖蜜和甘蔗糖蜜积累ＰＨＢ的分批补料培养的研究。结果表明,培养５４ｈ左右发酵液中细胞干重达７０～８５ｇ／Ｌ,ＰＨＢ含量占细胞干重的６０％～７０％,生产强度１．０ｇＰＨＢ／Ｌ／ｈ以上;发酵液经非有机溶剂提取制得ＰＨＢ产品,纯度９５％,提取收率８０％以上。     

利用葡萄糖发酵生产聚-β-羟基丁酸菌株的选育及其摇瓶发酵条件的研究

通过紫外线诱变筛选出能利用葡萄糖高积累ＰＨＢ的突变侏－真养产碱杆菌９２０。研究了碳源和氮源对该菌株发酵积累ＰＨＢ的影响。结果表明,在分批摇瓶发酵中碳源和氮源的最佳浓度分别为５％和０．３３％。经过３６ｈ的发酵菌体干重、ＰＨＢ含量、ＰＨＢ浓度和ＰＨＢ的产率分别为１９．３ｇ／Ｌ、５６．３％、１０．８６ｇ／Ｌ和０．２２。     

真养产碱杆菌突变株65—7产羟基丁酸与羟基戊酸共聚物的研究

研究了真养产碱杆菌突变株６５－７,以葡萄糖为主原料,添加丙酸或戊酸,采用二步发酵积累共聚物聚β－羟基丁酸－β－羟基戊酸（ＰＨＢＶ）。摇瓶总发酵时间为５０ｈ,细胞干重达７－１１ｇ／Ｌ,共聚物含量占细胞干重的７０％以上,其中β－羟基戊酸（３ＨＶ０含量占ＰＨＢＶ的１０－７２％,主要取决于不同碳源的组成,丙酸和戊酸对ＨＶ的转化率分别为０．４１－０．６３ｇＨＶ／ｇ丙酸和０．４０－０．７４ｇＨＶ／ｇ戊酸,制得     

真养产碱菌利用甜菜糖蜜发酵产聚β—羟基丁酸的研究

探讨了以廉价原料甜菜糖蜜培养真养产碱菌Ｈ１６生产聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）的可行性。对培养基优化试验表明,菌体产量可达２０ｇ／Ｌ,ＰＨＢ产量达９．８ｇ／Ｌ,糖转化率为２７．５％。用２升自控发酵罐进行验证,在良好的供氧条件和特定的ｐＨ值自控条件下发酵周期从４８小时缩短到４０－４２小时,菌体和ＰＨＢ量都有提高。菌体最高产量２６ｇ／Ｌ,ＰＨＢ最高产量１３ｇ／Ｌ,糖转化率为２０．４％。ＰＨＢ占细胞的含量,摇     

真养产碱杆菌合成3-羟基丁酸与3-羟基戊酸共聚物发酵条件研究

在摇瓶条件下,对真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）的３羟基丁酸与３羟基戊酸共聚物（ＰＨＢＶ）发酵过程中ＨＶ组分的前体物质———丙酸的加入时间和加入量进行了研究,结果表明,ＰＨＢＶ中ＨＶ组分含量与丙酸的加入时间和加入量有密切的关系,丙酸的最佳加入时间为菌体生长阶段结束后的多聚物合成初期;尽管高浓度丙酸下可获得较高的ＨＶ组分含量,但会明显抑制菌体的生长和产物的合成。通过对２Ｌ小罐中ＰＨＢＶ合成阶段流加不同糖／酸比混合液所得的发酵结果的比较,并在综合考虑ＰＨＢＶ浓度、ＨＶ组分含量、生产强度和生产成本等基础上,提出了在ＰＨＢＶ合成期流加液的糖／酸比应随菌体对丙酸利用能力的下降而不断增加的流加策略,在此条件下,细胞干重、ＰＨＢＶ浓度和ＰＨＢＶ含量和ＨＶ摩尔分率分别达到５２１ｇ／Ｌ、４０８ｇ／Ｌ、７８３％和１６２ｍｏｌ％,ＨＶ组分对丙酸的产率系数为０５ｇ／ｇ,ＰＨＢＶ的生产强度达到０７４ｇ／（Ｌ／ｈ）。     

真养产碱菌利用甜菜糖蜜发酵产聚β－羟基丁酸的研究

探讨了以廉价原料甜菜糖蜜培养真养产碱菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）Ｈ１６生产聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）的可行性。对培养基优化试验表明,菌体产量可达２０ｇ／Ｌ,ＰＨＢ产量达９．８ｇ／Ｌ,糖转化率为２７．５％。用２升自控发酵罐进行验证,在良好的供氧条件和特定的ｐＨ值自控条件下发酵周期从４８小时缩短到４０－４２小时,菌体和ＰＨＢ量都有提高。菌体最高产量２６ｇ／Ｌ,ＰＨＢ最高产量１３ｇ／Ｌ,糖转化率为２０．４％。ＰＨＢ占细胞的含量,摇瓶和罐上结果都在５０％左右。     

真养产碱杆菌合成3-羟基丁酸与3-羟基戊酸共聚物发酵条件研究

在摇瓶条件下,对真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）的３羟基丁酸与３羟基戊酸共聚物（ＰＨＢＶ）发酵过程中ＨＶ组分的前体物质———丙酸的加入时间和加入量进行了研究,结果表明,ＰＨＢＶ中ＨＶ组分含量与丙酸的加入时间和加入量有密切的关系,丙酸的最佳加入时间为菌体生长阶段结束后的多聚物合成初期;尽管高浓度丙酸下可获得较高的ＨＶ组分含量,但会明显抑制菌体的生长和产物的合成。通过对２Ｌ小罐中ＰＨＢＶ合成阶段流加不同糖／酸比混合液所得的发酵结果的比较,并在综合考虑ＰＨＢＶ浓度、ＨＶ组分含量、生产强度和生产成本等基础上,提出了在ＰＨＢＶ合成期流加液的糖／酸比应随菌体对丙酸利用能力的下降而不断增加的流加策略,在此条件下,细胞干重、ＰＨＢＶ浓度和ＰＨＢＶ含量和ＨＶ摩尔分率分别达到５２１ｇ／Ｌ、４０８ｇ／Ｌ、７８３％和１６２ｍｏｌ％,ＨＶ组分对丙酸的产率系数为０５ｇ／ｇ,ＰＨＢＶ的生产强度达到０７４ｇ／（Ｌ／ｈ）。     

真养产碱杆菌突变株65－7产羟基丁酸与羟基戊酸共聚物的研究

研究了真养产碱杆菌突变株６５－７,以葡萄糖为主原料,添加丙酸或戊酸,采用二步发酵积累共聚物聚β－羟基丁酸－β－羟基戊酸（ＰＨＢＶ）。摇瓶总发酵时间为５０ｈ,细胞干重达７－１１ｇ／Ｌ,共聚物含量占细胞干重的７０％以上,其中β－羟基戊酸（３ＨＶ）含量占ＰＨＢＶ的１０－７２％,主要取决于不同碳源的组成,丙酸和戊酸对ＨＶ的转化率分别为０．４１－０．６３ｇＨＶ／ｇ丙酸和０．４０－０．７４ｇＨＶ／ｇ戊酸,制得的ＰＨＢＶ产品纯度９９％以上,分子量６．９×１０^{５相似文献}   

真养产碱杆菌积累聚-β-羟基丁酸发酵条件的研究

对Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｅｕｔｒｏｐｈｕｓ培养过程的研究表明,氮源的限制或缺乏刺激细胞大量积累聚－β－羟基丁酸（ＰＨＢ）,但ＰＨＢ合成期氮源的完全缺乏,会导致细胞的ＰＨＢ合成速率迅速下降,氧的限制也可刺激Ａ．ｅｕｔｒｏｐｈｕｓ合成ＰＨＢ,但胞内ＰＨＢ的积累远小于氮源控制下的情况。在细胞的不同生长期限制氮源的供应会明显影响ＰＨＢ的发酵过程,当残留菌体浓度达到２０ｇ／Ｌ至３０ｇ／Ｌ时停止流加氮水,可     

乙型肝炎免疫指标全阴的原发性肝细胞癌患者体内HBV—DNA的检测…

本文以聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对３５例乙型肝炎免疫指标（ＨＢＶｍ）全阴性的原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）患者血清,外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）肝活检标本进行乙型肝炎病毒ＨＢＶ－ＤＮＡ检测,其检出率分别为３４．２９％,６０．００％,６８．５７％,说明一部分血清ＨＢＶｍ全阴性的ＰＨＣ患者血清并非无传染性,ＥＬＳＩＡ法具有一定局限性。ＰＢＭＣ内有相当的ＨＢＶ－ＤＮＡ存在,这对于研究ＰＨＣ患者体内ＨＢＶ的存在情况     

高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建

重组大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉＨＭＳ１７４（ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ） 含有携带聚羟基烷酸（ＰＨＡ） 合成基因（ ｐｈａＣＡＢ）＊＊ 的质粒ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ,是很有潜力的ＰＨＡ 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成３羟基丁酸（３ＨＢ） 与３羟基戊酸（３ＨＶ） 共聚物［Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ）］ 的缺陷。将ＲＫ２ 质粒上的ｐａｒ ＤＥ 基因引入ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ 构成质粒ｐＪＭＣ２ ,该质粒可以在宿主Ｅ．ＣｏｌｉＨＭＳ１７４ 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至１８ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,发现Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） 能够以丙酸为前体合成Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为５ ％ ～８ ％ 。在５Ｌ自动发酵罐中分批补料培养Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） ,培养基初始磷酸盐浓度为１５ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,３０ ｈ 后每升培养液中干菌体可达４２－５ ｇ,Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） 占干重的７０ ％ ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为４－９ ％ 。     

新组合菌系SCB329—SCB933利用L—山梨糖发酵生产维生素C前体—2—酮基…

新组合菌系氧化葡萄糖酸杆菌ＳＣＢ３２９－苏芸金芽杆菌ＳＣＢ９３３能在较长时间内保持高的转化活力且具有极强的抗杂菌污染的特性。在一次投糖分批发酵的基础上,探索在控制溶氧、ＰＨ,温度等条件下,分批加入Ｌ－山梨糖发酵生产２－酮基－Ｌ－古龙酸新工艺。采用新工艺,既充分利用了菌系的优良特性,又避免了高糖浓度可能对菌系造成的不良影响。Ｌ－山梨糖最终浓度达到１４％（Ｗ／Ｖ）,产酸１２０－１３５ｇ／ｌ,转化率９０     

利用葡萄糖发酵产聚β—羟基丁酸菌株的选育

采用常规紫外线诱变处理真养产碱杆菌Ｈ１６,获得高效利用葡萄糖产聚β－羟基丁酸的突变株,摇瓶发酵试验证明,突变株耐糖程度及其程度及其积累ＰＨＢ的能力均优于亲株Ｈ１６。ＰＨＢ积累量达１０ｇ／Ｌ以上。     

产菊糖酶克鲁维酶母Y-85的明胶固定化

克鲁维酵母Ｙ－８５的胞外菊糖酶占其总酶活的２８％,以１０％明胶包埋该酵母,酶活保留率为７３．９％。与游离细胞相比,固定化细胞菊糖酶的最适ＰＨ未改变,但当ＰＨ〈４和ＰＨ〉７时酶活稳定性更高;最适水解温度则升高了５℃,酶的热稳定性也有所提高。游离细胞的Ｋｍ值为９．３ｍｍｏｌ／Ｌ,固定化细胞则为１２．８ｍｍｏｌ／Ｌ。４℃贮存３０ｄ,固定化细胞酶活无损失,分批反应１０批次,固定化细胞酶活及机械强度保持良好     

大鼠甘氨肽α—羟化单氧酶在昆虫细胞中的活性表达

将编码大鼠甘氨肽α－羟化单氧酶（ＰＨＭ）ｃＤＮＡ基因,插入昆虫杆状病毒转移表达载体ｐＢａｃＰＡＫ８,构建成表达质粒ｐＢａｃＰＨＭ２,与修饰的银纹夜蛾核多角体病毒ＢａｃＰＡＫ６线性化ＤＮＡ共转染秋粘虫细胞Ｓｆ２１,通过同源重组,得到在核多角体蛋白基因启动子控制下的ＰＨＭ基因的重组病毒ＢａｃＰＨＭ。用ＢａｃＰＨＭ感染Ｓｆ２１细胞,无血清培养上清在７２小时后检测到酰胺化酶最高活力;用细胞免疫组化法和免疫     

5—HT对大鼠新鲜分离DRG神经元GABA激活电流的调制作用

本实验在新鲜分离的大鼠背根神经节（ＤＲＧ）细胞上应用全细胞膜片钳技术,观察５－ＨＴ对ＧＡＢＡ激活电流的调制作用。结果发现,绝大多数细胞（４９／５４）对ＧＡＢＡ（１０－８～１０－３ｍｏｌ／Ｌ）产生浓度依赖性的内向电流,并有明显的去敏感现象。在多数细胞预加５－ＨＴ（１０－７～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）,ＧＡＢＡ激活电流受到明显抑制,抑制率分别为３．０％,１３．５％,１９．７％,２４．７％,５９．１％。５－ＨＴ（１０－７～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）本身在部分细胞（２４／４０）可引起浓度依赖性的内向电流,部分细胞（１２／４０）未检测到膜电流,少数细胞（４／４０）可引起微弱的外向电流。此结果提示５－ＨＴ可能作用于初级传入终末,抑制ＧＡＢＡ引起的初级传入去极化从而调节ＧＡＢＡ的突触前抑制效应     

氮源流加对Alcaligenes eutrophus 积累聚β-羟基丁酸的影响

以真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）为聚β－羟基丁酸９ＰＨＢ）的生产菌株,在分析了ＰＨＢ发酵过程参数变化的基础上,进一步探讨了ＰＨＢ合成期不同的硫酸铵流加速度对ＰＨＢ合成的影响。研究结果表明,在ＰＨＢ合成阶段,培养基中氮源的完全缺乏。导致细胞合成ＰＨＢ能力的下隆;在ＰＨＢ合成期,不同的氮源流加速率对ＰＨＢ合成过程存在着显著的影响,当流加速率较小时,尽管最终胞内ＰＨＢ含量很高