中国貉线粒体DNA多态性及其与亚种分化的关系

本文以８种限制性内切酶对来自７个地区的１４只中国貉进行了ｍｔＤＮＡ的ＲＦＬＰ分析,并构建了貉ｍｔＤＮＡ的限制酶物理图谱。根据各群体间的遗传距离构建ＵＰＧ分子系统树,结合形态、地理分布资料对中国貉的亚种分化进行了探讨。结果表明,中国貉的指名亚种已发生明显的遗传分化;对于分类地位没有确定的华北和陕西群体,建议将它们各自单独定为一个亚种;中国貉最先发生南北分歧,然后发生东西分歧。     

貉血清IgG纯化及抗血清的制备

目的 制备高纯度貉血清IgG和兔抗貉IgG抗血清,作为建立多种动物抗体检测技术的储备。方法 采用Hitrap Protein A亲和层析及盐析再沉淀法纯化貉血清IgG,通过PAGE电泳和Western-Blot免疫印迹法对IgG作纯度及免疫活性检测;常规免疫法制备兔抗貉IgG血清。结果 貉血清IgG与Protein G虽有较强的结合力,但同时也结合血清中其他杂蛋白;用二步纯化法可从5 mL貉血清中纯化IgG约7 mg,电泳和免疫印迹测定显示,IgG纯度大于95%,常规免疫法制备抗血清免疫双扩散效价达1∶32。结论 建立了可行的貉血清IgG的纯化方法和高效价的兔抗貉血清IgG抗血清,为貉血清IgG二级抗体酶联物的制备储备了资源。     

山西榆社上新世的貉(食肉目,犬科)化石兼论中国的貉化石

<正> 中国貉化石的记录始于舒罗塞1903年定为 Vulpes sinensis 的那批材料.1924年师丹斯基把采自河南渑池的一件带有次角叶的下颌也归入了这个种.1930年德日进和皮韦陀根据泥河湾的丰富材料才把这个种改归貉属.到1941年归入这个种的还有周口店第一和第十三地点的材料.德日进和斐文中(1941, p. 13-14)也提到榆社有这个种的化石.本文所记述的貉化石都是从榆社盆地的云簇次盆地内采集的.它们的层位都     

中国貉随机扩增多态DNA及其亚种分化关系

对来自陕西、云南、越南、安徽和广西等地的８只中国貉（Ｎｙｃｔｅｒｅｕｔｅｓｐｒｏｃｙｏｎｉｄｅｓ）进行随机扩增多态ＤＮＡ分析。应用２８个１０ｂｐ的随机引物,平均每只貉获得的ＲＡＰＤ标记数约为１３０条。遗传距离计算结果显示,中国貉个体间的平均遗传距离指数值为１１．２０％,最大值为１４．９３％,最小值为２．９４％。以赤狐（Ｖｕｌｐｅｓｖｕｌｐｅｓ）为外群,应用ＰＨＹＬＩＰ３．０计算软件包中的ＵＰＧＭＡ和ＮＪ聚类方法构建分子系统树。结果表明,不同地理群体间的中国貉存在遗传分化;中国貉可分为４组：（１）广西貉,（２）安徽貉,（３）陕西貉,（４）云南貉和越南貉。其中安徽貉和广西貉间的关系稍近,陕西貉则与云南貉－越南貉稍近。对合中国貉的形态分类、地理分布、ｍｔＤＮＡ多态分析以及进化遗传学的观点,认为陕西貉、广西貉和安徽貉可能与云南貉－越南貉具有等同的分类地位。     

我国首次证实貉感染水貂阿留申病毒

2013年中国农业科学院特产研究所科研人员在吉林省某一水貂、狐狸、貉共同养殖区,通过对流免疫电泳实验和PCR方法在9只乌苏里貉体内检测到水貂阿留申病毒,这是国内该病毒感染貉的首次报道。目前科研人员已获得了病毒的结构基因序列,相关的研究正在进行中。     

貉的染色体分带研究

貉(Nyctereutes procyanoides)的染色体组型已有报道(M(?)kinen,1974;王宗仁等,1984),但还未见貉的染色体分带研究。本文报告了貉染色体的G带、C带及银染核仁组织者区(Ae—NOR)的数目和定位。     

从健康狐狸、貉粪中检出犬冠状病毒的两种基因型

取某养殖场健康狐狸 (6 1份 )、貉 (2 4份 )粪样 ,用套式PCR(RT-nPCR)方法检测犬冠状病毒 (CCV)并进行基因型鉴定。结果显示 :狐狸粪样中有 4 3份 (70 . 5 % )为CCVⅡ型阳性 ,2 9份 (47. 5 % )为CCVⅠ型阳性 ,两型混合感染2 5份 ,占 4 1 0 % ,两型总感染率为 77 .0 %。 2 4份貉粪样中 ,2 2份为CCVⅡ型阳性 (91 .7% ) ,其中 16份为CCVⅠ型、Ⅱ型混合感染 (6 6 . 7% )。分别取狐狸和貉粪样中CCVⅠ、Ⅱ型阳性PCR产物各 2份 (共 8份 )进行测序 ,均与CCV的M基因序列相符 ,证实PCR结果非假阳性。序列及系统进化分析表明 ,CCVⅠ型与源于意大利腹泻犬的CCVⅠ型 (AF5 0 2 5 83)同源性最高 (96 . 7%～ 98. 1% ) ;CCVⅠ、Ⅱ两种基因型同源性为 88. 3%～ 89. 7% ,在进化树中处于两个大的分支上 ;同为CCVⅡ型 ,狐狸源与貉源序列也存在多个位点差异。首次在貉粪中检出CCV ,证实在健康狐狸、貉群体中存在CCV流行 ,且CCVⅠ、Ⅱ型并存。     

雄貉睾丸宽度和血清睾酮水平的季节性变化及其与某些繁殖特性的关系

作者测定并分析了43只雄貉睾丸宽度、血清睾酮水平的季节性变化。结果表明:睾丸宽度和血清睾酮水平呈明显的年周期季节性变化(p<0.01)。秋分(9月)时,睾丸宽度开始增大(p<0.05 );血清睾酮水平在10月开始升高(p<0.05)。各月雄貉的平均睾酮水平与平均睾丸宽度是极显著的正相关(r=0.83,p<0.01 n=11)。雄貉繁殖季节初期,血清睾酮水平与其首、末次的交配日期呈显著负相关(r=-0.525和r=-0.476,p<0.05,n=19)。     

貉结合臂旁核的形态及细胞构筑

貉结合臂旁核的形态及细胞构筑作者对东北貉（Ｎｙｃｔｅｒｅｕｔｅｓｐｒｏｃｙｏｎｏｉｄｅｓｕｓｓｕｒｉｅｎｓｉｓ）的结合臂旁核作位置、形态及细胞构筑的定量测定,以期填补貉中枢神经解剖学的部分空白,为进一步确定貉此核的纤维联系,并为貉的生理学研究提供一定...     

三种食肉目动物的核型分析

本文报道了产于我国华北地区的艾鼬、貉和果子狸的核型。其中艾鼬2n=36。组型由20条双臂染色体、14条单臂染色体和一对性染色体组成。貉2n=65,它与wuster等报道过的貉的2n=42的核型表现出同种动物核型间的多态现象。果子狸2n=44,其c带带型中具有一对带有较大异染色质的中部着丝点染色体。     

狐、貉源大肠杆菌分离鉴定及毒力基因检测

[背景]狐、貉肺炎频发导致养殖户遭受巨大经济损失.[目的]调查黑龙江省、吉林省、河北省、山东省等地狐、貉肺炎原因,对病原菌进行分离、鉴定及部分生物学特性研究.[方法]无菌采集患病狐、貉肺组织进行细菌分离培养;对分离菌进行革兰氏染色、生化试验、特异性基因PCR鉴定、药物纸片扩散法敏感性试验、毒力基因检测及小鼠致病性试验....     

狐、貉和水貂犬瘟热病毒受体SLAM 的基因克隆及其真核表达

信号淋巴激活分子(SLAM)为犬瘟热病毒(CDV) 感染其宿主动物识别的细胞受体。本试验应用RT -PCR 从狐狸、貉和水貂的外周血淋巴细胞中克隆到其相应SLAM 基因。基因测序比较发现,狐狸、貉与同科的犬SLAM 基因编码区长度均为1 029 bp,核苷酸同源性高于98.6% ;而水貂SLAM 基因编码区长度为1 020 bp,与以上三种动物遗传关系较远(核苷酸同源性< 83.7%),但与海豹SLAM 基因遗传关系较近(核苷酸同源性为91.4% )。基于不同动物SLAM 基因序列的系统进化树分析显示,犬、狐狸、貉、水貂和海豹在进化树上构成了以CDV 为感染宿主的遗传分支。氨基酸序列比较显示,该5 种动物SLAM 分子上均存在一个长度为26 个氨基酸的信号肽序列,且在空间结构上影响宿主--病毒特异性的8 个关键氨基酸均完全保守。通过构建表达该狐狸、貉、水貂SLAM 基因的三种真核表达质粒,分别转染CRFK 细胞后,应用CDV 强毒感染试验证实,CDV 均能在三种转染细胞上产生明显的细胞病变效应(CPE),而未转染CRFK 细胞对照无CPE 产生,由此证实作为CDV细胞受体的狐、貉和水貂的SLAM,体外表达后能明显增强犬瘟热强毒株对非敏感细胞的感染能力。     

埋植褪黑激素对貂、貉促进毛皮生长效应的试验研究

本文在自然条件下,利用ＭＬＴ,人工埋植标准色淘汰成年雌貂、貉和幼龄雄貂,设做试验群。埋植期各在６月初和６月末,使用剂量为貂１０ｍｇ、貉３０ｍｇ。同时设对照群,采用同样的饲养管理手段,观察比较。其结果,不论性别和年龄,用褪黑激素处理的貂、貉、夏毛脱落和冬毛生长都比对照群快（Ｐ＜００００１）。试验群幼龄貂的体重增长速度比对照群快（Ｐ＜００００１）,食欲比对照群强。到８月２０－２５日,首先达到了标准成年貂体重,到９月２５日毛皮即成熟,比对照群提前取皮４７－５５ｄ。试验用淘汰成年雌貂和貉,毛皮成熟均比对照群早,可提前８５ｄ取皮,而且试验群皮张长度增长１５％以上,皮张等级鉴定同正常貂、貉相比,差别很小。     

貂、狐、貉群犬瘟热临床及病理学研究

对2006年6～10月山东、河北等地区的部分毛皮动物养殖场发生疑似犬瘟热的疫情进行了流行病学、临床症状以及剖检病变观察和分析,对采集的病料进行了细菌分离鉴定、病毒特异性核酸检测,并选取肝、脾、肺、心、脑、膀胱和胃进行了病理组织学检查.结果表明,这起疫情主要是由携带CDV的貉、貂调运而促进病毒传播感染引起.发病动物剖检病变以全身脏器出血性变化为特征,病情及病变严重程度依次为貉＞狐狸＞水貂.病理学变化特征为肺泡壁增厚,大量炎性细胞浸润,且在脱落肺泡上皮细胞、膀胱上皮细胞胞浆内偶见嗜酸性的球形包涵体,支气管上皮变形、坏死、脱落,淋巴细胞浸润;非化脓性脱髓鞘性脑炎;脾脏、肾脏、心脏、肝脏、胃和肠道有不同程度出血、坏死等病变.通过对发病狐、貉、貂的肺、肝、脑、膀胱等脏器病理学比较,在病变程度上水貂与狐狸、貉有差异.但是同一种动物,依病程、病型及有无并发症等因素,病理学变化也存在差异.     

种貉被毛微量元素的分析

采用低温干灰化法制备样品,ICP-AES同时分析毛皮动物貉被毛组织中多种微量元素.Ba、Be、Cd、Si、Y和Zn的测定下限为1.0～9.0 ng·g-1级,B、Fe、La、Mg、Mo、Ni 、Ti、Co、Cr、Cu、Sr、V和Zr为0.01～0.09 μg·g-1级,In、Th、P和为0.13～0.23 μg·g-1级,大于1的只有Nb是1.08 μg·g-1级.该方法经国家人发标准物质GBW07601验证,测得方法相对误差在0.83%～9.59% 之间,相对标准偏差在0.81%～5.20%之间,各项检测指标均能满足生物样品检测要求,分别测得健康种貉、自咬症轻重病貉被毛中的22种微量元素,健康貉的B、Co、Cr和Ni微量元素含量明显高于病貉,而Al、Ba、Be、Cd、Mo、Pb、Sr、Ti和Zr元素含量较低.该方法可以满足生物样品元素分析的要求.     

对775份毛皮动物样品检测未发现新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸阳性

目前,2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在我国各地暴发和流行,但其主要来源尚不清楚。曾有报道称该病毒来源于野生动物,如蝙蝠。而有关SARS-CoV-2在我国北方地区人工养殖的水貂、狐狸和貉等毛皮动物中的溯源性研究尚未见报道。本研究收集2016～2019年吉林、黑龙江、辽宁、河北和山东5个省份14个地区的不明原因死亡的水貂、狐狸和貉的625份组织样品,以及2019年8～12月在吉林省采集的水貂、狐和貉的150份粪便样品,通过WHO推荐的Real-time RT-PCR检测方法对上述组织及粪便样品中SARS-CoV-2进行检测。结果显示,上述775份样品中SARS-CoV-2核酸检测结果均为阴性。     

四种犬科（Canidae）动物线粒体DNA分子进化

以９种限制性内切酶分析家犬,狼,赤狐,貉共７只动物的一粒体ＤＮＡ限制性片段长度多态性（ｍｔＤＮＡＲＦＬＰ）,通过双酶解法构建各种动物的限制性内切酶图谱,用ＵＰＧ法,ＮＪ法和简略法分析这些动物之间的遗传关系。结果表明,１．犬的个体差异小,而赤弧的个体间遗传分化程度非常高;２．犬和狼的亲缘关系很近,应是同一种动物;３．在属间关系中,犬属与狐属的关系较接近,貉属是一个较早分化的独立分支。     

缩短光照对貉冬毛生长的影响

貉是一种季节性换毛动物。其毛被的生长受光因子的影响。自然光照条件下4—8月间冬季绒毛陆续脱落,新生绒毛于7—11月间生长和逐渐成熟。冬季针毛在6月开始脱落,同时新生针毛开始生长,于10月下旬成熟,因此貉在夏季是以稀疏、粗硬的针毛和稀短的绒毛组成毛被。本文用控光的方法研究了貉冬毛生长的规律,得到了缩短光照时间能诱导毛皮提前32天成熟的结果并表现出较自然光照条件下毛皮生长成熟期缩短的趋勢。     

犬科的线粒体细胞色素b DNA序列及其分子系统学研究

通过对犬科的赤狐、蓝狐、貉和狼４种的线粒体细胞色素ｂ约３７２ｂｐＤＮＡ片段序列分析,结合ＧｅｎＢａｎｋ中狗、西门豺和非洲野犬３种的该区段ＤＮＡ序列的比较,共发现１１３个核苷酸位点存在变异（约３０％）。ＮＪ法构建的分子系统树显示,非洲野犬最先从犬科动物中分化出来;犬属的我狼、狗和西门豺等３种为系统树上独立的一支,且其分歧的时间较赤狐、蓝狐和貉早;赤狐和蓝狐具有较近的亲缘关系。上述结果与形态的观点基本     

埋植裉黑激素对貂,貉促进毛皮生长效应的试验研究

本文在自然条件下,利用ＭＬＴ,人工埋植标准色淘汰成年雌貂、貉和幼龄雄貂,设做试验群。埋植期各在６月初和６月末,使用剂量为貂１０ｍｇ、貉３０ｍｇ。同时设对照群,采用同样的饲养管理手段,观察比较。