乳杆菌DM9811代谢产物脂肪酸组分对义齿性口炎的临床应用研究

目的从口腔菌群平衡的角度观察乳杆菌DM9811代谢产物脂肪酸组分对义齿性口炎患者口腔细菌的影响。方法采取自身前后对照,24例义齿性口炎患者给予乳杆菌DM9811代谢产物脂肪酸组分制成的含漱液,每次20 ml,每日3次漱口。分别于用药前,用药后第7天、14天、28天以及停药后第60天采集标本培养,记录活菌数。结果24例患者中18例为有效病例。用药后7 d口腔白假丝酵母菌数量明显降低,口腔链球菌数量升高,较治疗前差异均有显著性（P〈0.01）,乳杆菌治疗前后差异无显著性（P〉0.05）;用药14 d、28 d及停药后60 d时,口腔内白假丝酵母菌、口腔链球菌、乳杆菌数量较7 d时差异均无显著性（P〉0.05）。结论乳杆菌DM9811代谢产物脂肪酸组分治疗义齿性口炎7 d时致病菌和优势菌即可达到相对平衡。乳杆菌DM9811代谢产物脂肪酸组分治疗义齿性口炎不会造成口腔菌群的失衡。     

乳杆菌代谢物脂肪酸组分对白假丝酵母菌的抑制及临床疗效观察

目的观察乳杆菌DM9811代谢物中脂肪酸组分（以下称抑菌液）在体内外对白假丝酵母菌的抑制效果,探索外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）的安全、有效、无副作用的生态制剂疗法。方法不同浓度抑菌液对白假丝酵母菌的作用及作用不同时间的抑菌效果;对2003年9月～2004年1月57例VVC患者分别给予抑菌液（试验组）及达克宁栓（对照组）进行治疗,并做相关细菌培养及疗效判定。结果（1）体外试验中抑菌液对白假丝酵母菌的抑制作用随着浓度的降低而降低;在1：2浓度（乙酸含量0．8mg／ml）抑制作用随着时闻的延长而增强,12h达100％;对乳杆菌无抑制作用。（2）体内试验中抑菌液使阴道白假丝酵母菌数量明显减少（P〈0．05）,使阴道pH明显降低（P〈0．05）,阴道内乳杆菌数量差异无显著性（P〉0．05）;达克宁栓使阴道内白假丝酵母菌数量明显减少,乳酸杆菌数量明显下降（P〈0．05）,而阴道pH无变化。（3）2组1疗程治愈率及1个月复查治愈率均差异无显著性。（4）副反应：两者比较差异有显著性（P〈0．05）。结论抑菌液在体内外对白假丝酵母茵均有明显的抑杀作用;降低阴道pH;对阴道乳杆菌数量无影响;无副作用;可用于VVC的治疗。     

乳杆菌优良菌株的筛选及对小鼠阴道白假丝酵母菌过度增殖干预

目的探讨乳杆菌优良菌株的筛选及其对小鼠阴道白假丝酵母菌过度增殖干预作用。方法对德氏乳杆菌DM8909菌株进行诱变筛选,得到耐抗生素突变株208,以ICR小鼠为实验对象,用甲硝唑进行小鼠阴道菌群脱污染,将白假丝酵母菌接种到小鼠阴道内,构建小鼠阴道白假丝酵母菌过度增殖模型。采用阴道接种德氏乳杆菌DM8909突变株208菌液（2×108CFU/mL）处理,取其阴道冲洗液进行阴道菌群分析,并进行阴道上皮细胞的电镜检查。结果乳杆菌干预后显著清除阴道内的假丝酵母菌,肠杆菌恢复正常水平,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论德氏乳杆菌DM8909抗性菌株208能调整白假丝酵母菌在小鼠阴道内定植,对小鼠阴道上皮细胞有恢复作用。     

纳豆杆菌对白假丝酵母菌的拮抗作用

目的探讨纳豆杆菌对白假丝酵母菌的拮抗作用。方法将纳豆杆菌和白假丝酵母菌混合培养24 h后,应用沙保弱平板培养基分离白假丝酵母菌,计数菌落,计算纳豆杆菌对白假丝酵母菌的拮抗率。结果纳豆杆菌对白假丝酵母菌的拮抗作用明显,拮抗率高达91.91%;纳豆杆菌肉汤培养物的除菌滤液对白假丝酵母菌也有明显的拮抗作用,拮抗率为79.05%。结论纳豆杆菌对白假丝酵母菌具有明显拮抗作用,是白假丝酵母菌的理想拮抗菌株。     

乳杆菌DM9811发酵液的挥发性脂肪酸组分分析

目的：通过分析乳杆菌DM9811发酵液的挥发性脂肪酸,探讨乳杆菌对机体作用的分子机制。方法：采用高压气相色谱方法。结果：乳杆菌DM9811发酵液中存在乙酸、9-十六碳烯酸,十六烷酸,9,12-十八碳二烯酸,9-十八碳烯酸,其中乙酸浓度为1.6mg/ml。结论：乳杆菌DM9811发酵液中除含有乙酸外,还含有十六～十八碳饱和与不饱和脂肪酸。     

乳杆菌DM9811挥发性脂肪酸组分对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌的抑制

目的：探讨乳杆菌DM9811发酵液的挥发性脂肪酸对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌抑制作用。方法：采用普通细菌计数法。结果：乳杆菌DM9811发酵液中挥发性脂肪酸对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌具有抑制作用,以对白色念珠菌抑制作用最强,金黄色葡萄球菌抑制次之,两者都呈现剂量效应关系。结论：乳杆菌DM9811发酵液中挥发性脂肪酸对细菌、真菌都有明显的抑制作用。     

阴道白假丝酵母菌水解酶的研究进展

外阴阴道白假丝酵母菌病是常见的妇产科感染性疾病,对其致病微生物白假丝酵母菌的研究方向已从大范围的筛查病因过渡到小范围的深入研究,本文系统综述了近年来对白假丝酵母菌水解酶的研究发现和前沿进展。     

乳杆菌制剂和(或)达克宁治疗外阴阴道假丝酵母菌病的疗效比较

目的探讨乳杆菌制剂治疗外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的疗效。方法将2006年5月至7月在温州医学院附属二院确诊为VVC的患者分为3组,单纯使用达克宁栓者(A组)40例,联合使用达克宁栓及定君生阴道栓者(B组)40例,单纯使用定君生者40例(C组),进行对照。对3组的临床症状及真菌学检查结果进行分析讨论。结果停药3~5 d时,A、B组患者的疗效差异无显著性(P>0.05),C组患者的疗效明显低于A、B两组(P<0.05);停药30~37 d时,A、C组患者的疗效差异无显著性(P>0.05),B组患者的疗效明显高于A、C两组(P<0.05)。结论在应用阴道用乳杆菌治疗VVC时,应首先应用抗真菌药物,当真菌感染得以控制之后再使用乳杆菌,帮助恢复阴道内菌群环境。     

乳杆菌发酵上清对耐药白假丝酵母生物膜的作用

目的 研究德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii,L.delbrueckii)和发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum,L.fermentum)发酵上清液对3株耐氟康唑白假丝酵母临床分离株CA3、CA6、CA8生物膜形成和分散的作用。 方法 通过MIC试验,确认3株白假丝酵母临床分离株对氟康唑耐药;用96孔板构建体外白假丝酵母生物膜;用棋盘法分别检测L.delbrueckii、L.fermentum发酵上清液与氟康唑联用对3株白假丝酵母的作用;用XTT法对生物膜形成量进行定量分析;检测L.delbrueckii、L.fermentum发酵上清液与氟康唑联用对白假丝酵母时间-生长曲线的影响;显微镜拍照检测L.delbrueckii、L.fermentum发酵上清液单独和氟康唑联用对白假丝酵母生物膜形态的影响;平板培养法检测L.fermentum发酵上清液对白假丝酵母黏附作用的影响。 结果 CA3、CA6、CA8三株临床分离菌株对氟康唑耐药,MIC浓度均为8 μg/mL。L.delbrueckii与L.fermentum发酵上清液与氟康唑联用对3株耐药型白假丝酵母的生物膜形成与分散均未表现出协同作用,且发酵上清液与氟康唑联用效果不如发酵上清液单独处理效果好,L.fermentum发酵上清液对生物膜的分散作用较L.delbrueckii发酵上清液强。L.fermentum发酵上清液抑制白假丝酵母的初始黏附。 结论 L.delbrueckii、L.fermentum发酵上清液单独应用时均对耐氟康唑白假丝酵母生物膜的形成与分散有干预作用,与氟康唑联用时未表现出协同作用,抑制耐药白假丝酵母生物膜的作用可能与抑制菌丝形成和起始黏附有关。     

白假丝酵母菌体外生物膜药敏性不同检测方法的比较

目的比较不同的方法对白假丝酵母菌体外生物膜药敏性检测的差异。方法分别采用菌落计数法(CFU)、AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法对白假丝酵母菌体外48h成熟生物膜的药敏性进行检测,并将AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法与CFU法进行比较,观察其相关性及差异性。结果 AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法与CFU法都有较高的相关性,相关系数分别为r=0.969、r=0.971、r=0.982(P0.01);与CFU法的差异分别为(0.093±0.127)、(0.054±0.113)、(0.013±0.066),其差异无统计学意义(P0.05)。结论 AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法均可替代CFU法对白假丝酵母菌生物膜进行药敏检测。MTT法与CFU法的相关性最大,差异性最小;AlamarBlue试剂作为一种新的试剂,操作简单,对细胞及人类无毒害,更加适合高通量检测。     

乳杆菌DM9811发酵液提取物中RNA组分对水泡性口炎病毒抑制作用研究

目的通过乳杆菌DM9811发酵液提取物中RNA组分对水泡性口炎病毒(VSV)抑制作用研究,探讨其在抵抗肠道病毒性感染性疾病方面的作用。方法应用50%细胞感染计量法(TCID50)、免疫荧光法、ELISA和MTT法探讨不同浓度的RNA组分对VSV的抑制作用。结果 RNA组分200μg/mL浓度时与对照比较,RNA组分具有竞争性抑制VSV感染作用,细胞存活率为(90.9±3.67)%,并具有阻断VSV侵入细胞作用,细胞存活率为(96.6±1.47)%。但RNA组分对病毒生物合成的抑制作用不明显。此外RNA组分具有诱导BALB/c小鼠脾细胞产生IFN-α作用,并呈现一定的剂量依赖关系。结论乳杆菌DM9811发酵液提取物中RNA组分对VSV具有明显抑制作用。     

乳杆菌代谢物对白色念珠菌影响的体外试验研究

目的从阴道微生态平衡角度出发,观察乳杆菌(DM9811)代谢物对白色念珠菌的抑杀效果,并行组份分析,探索CV(candidal vaginitis,CV)的生态疗法.方法取CV患者阴道分泌物30例,分离培养,鉴定,保留白色念珠菌菌株.1.以提取液(以下简称提取液)Ⅰ和Ⅱ分别代替蒸馏水配制培养基SⅠ和SⅡ,将保留的白色念珠菌株传代5次后,配制菌液,接种于S、SⅠ和SⅡ中,培养后活菌计数.2.对提取液Ⅰ和Ⅱ倍比稀释,并代替蒸馏水配制多个培养基SⅠ和SⅡ,测定SⅠ和SⅡ中没有菌落生长的最低有效浓度(MIC).3.气相色谱测定提取液中挥发酸类成分并定量.4.选择提取液最低浓度加1的方法配制培养基,比较提取液和乙酸水溶液对白色念珠菌的抑制效果.结果1.白色念珠菌生长24 h后计活菌数,将SⅠ与S,SⅡ与S中活菌数相比较,非参数配对T检验P＜0.01.2.提取液Ⅰ最低有效浓度为1:4,提取液Ⅱ最低有效浓度为1:2.3.气相色谱测定提取液Ⅱ中挥发酸类主要成分为乙酸,浓度为0.235 9 S/100ml.4.提取液和乙酸对白色念珠菌的生长都有抑制作用,但提取液的抑制作用明显强于乙酸.结论乳酸杆菌DM9811代谢物对白色念珠菌有明显的抑菌和杀菌作用,可作为一种新型的生态制剂进行开发,用于治疗念珠菌阴道炎.     

土槿乙酸对白假丝酵母菌生物膜的抑制作用

目的 探讨土槿乙酸（pseudolaric acid B,PAB）对体外白假丝酵母菌生物膜的影响。方法 甲基四氮盐（XTT）法检测不同浓度PAB和AMB（两性霉素B）对白假丝酵母菌生物膜的抑制作用。血清芽管试验检测不同浓度PAB对芽管生成的影响。结果 PAB对白假丝酵母菌生物膜的SMIC50（抑制生物膜50%的药物浓度）为256~512 μg/mL;1024和512 μg/mL PAB对早期2 h生物膜的抑制率分别为（99.5±0.28）%和（97.1±0.38）%;512 μg/mL PAB对早期（2 h）、中期（8 h）及成熟期（24 h）生物膜的抑制率分别为（97.1±0.38）%、（90.4±0.32）%和（80.1±0.67）%;不同浓度PAB的血清芽管试验显示,64 μg/mL PAB可以完全抑制白假丝酵母菌的出芽生长,16 μg/mL PAB可以抑制83.5%的白假丝酵母菌出芽生长。结论 PAB对体外白假丝酵母菌生物膜有抑制作用,对白假丝酵母菌的出芽生长过程抑制作用显著。     

Denture disinfection by microwave energy: influence of Candida albicans biofilm

doi: 10.1111/j.1741‐2358.2010.00439.x Denture disinfection by microwave energy: influence of Candida albicans biofilm Objective: This study evaluated the influence of the area of Candida albicans biofilm on denture disinfection by microwave energy. Materials and methods: Candida albicans biofilm was allowed to form for 72 h on resin discs, and three small coverage or seven large coverage discs were placed onto the palatal surface of sterile maxillary dentures. Each denture was immersed in 200 ml distilled water and individually irradiated at a power of 450, 630 or 900 W for different time intervals (1, 2 or 3 min) (n = 6). The effectiveness of disinfection was evaluated by counting the residual cells. The data were analysed by anova and Tukey’s HSD test (α = 0.05). Pearson’s correlation test was performed to determine the correlation between effectiveness of sterilisation and temperature. Results: Dentures with a larger area of biofilm demanded a longer irradiation exposure to achieve disinfection (p < 0.001), irrespective of power setting, and in this time no yeast growth was detected. Dentures with small areas of biofilm were disinfected after 1 min at 900 W and 2 min at 450 or 630 W. A positive correlation was found between water temperature and effectiveness of disinfection (r = 0.6170; p < 0.001). Conclusion: The C. albicans biofilm area influenced disinfection by microwave energy; therefore dentures with larger biofilm areas required longer irradiation exposure to be disinfected.     

Dimorphism-associated changes in amino acid transport of Candida albicans

Abstract Amino acid uptake was followed during pH-regulated dimorphism of Candida albicans . It was observed that transport activities of various amino acids differed with the morphological phenotype. The uptake rates of l-alanine , l -phenylalanine and of l -lysine were lower and those of l -methionine were higher in elongated hypha (germ tube), while the rates of glycine, l -glutamic acid and l -proline were similar in bud and hyphal phenotypes. Minimum threshold of amino acids transport activity is required at the time of phenotypic commitment in a diverging population of Candida albicans .     

定菌生调整实验小鼠念珠菌性阴道炎的菌群失调的研究

目的 应用阴道细菌培养与光镜细胞学检查相结合的方法,研究定菌生对阴道念珠菌感染的菌群失调的调整作用。方法 以小鼠为实验对象,用盐酸林可霉素造成阴道菌群失调,并将分离的念珠菌接种到小鼠阴道内,造成小鼠阴道念珠菌感染模型,分别采用定菌生、抗真菌＋定菌生及抗真菌（制霉菌素）治疗1疗程后,取其阴道分泌物进行念珠菌及乳杆菌的菌群分析,并同时进行分泌物镜检,取阴道组织标本做病理组织学检查。结果 模型组小鼠阴道内主要细菌数量乳杆菌显著下降（P〈0．01）．出现阴道红肿、分泌物多呈块状和阴道黏膜充血等念珠菌阴道炎的典型症状,分泌物涂片镜检查到白细胞及念珠菌,而定菌生组和定菌生＋制霉菌素组治疗的小鼠,阴道黏膜与健康对照组的阴道黏膜基本相同,阴道内主要菌群——乳杆菌的数量恢复正常,阴道内念珠菌显著降低,与自然恢复组相比差异有极显著性（P〈0．01）,与制霉菌素处理比差异也有显著性,治疗效果明显好于制霉菌素。结论 定菌生能阻止念珠菌对阴道上皮的粘附作用,能调整阴道的菌群,对阴道黏膜有一定的修复功能,是治疗念珠菌性阴道炎有效的微生态调节剂。