一种提高厌氧螺旋体分离培养率的方法

一种提高厌氧螺旋体分离培养率的方法湖北医科大学微生物学教研室武汉４３００７１李成章,杨霖厌氧螺旋体与疾病的关系一直是人们关注的问题之一,但由于厌氧螺旋体培养困难,严重影响了对这一问题的深入研究,有时虽然培养出了螺旋体,但由于培养基上菌落众多。不能正确...     

一次性菌群分析培养瓶的应用

用一次性菌群分析培养瓶对５０ 例小鼠及３５ 人粪便标本菌群分析结果比较可知,我们开发的一次性菌群分析培养基与光岗介绍的经典的菌群分析培养基效果相当,两种方法重复性都好,结果也比较稳定准确,只是经典方法必须把平板培养置厌氧环境３５ ℃培养３６ｈ４８ｈ 观察结果,而一次性菌群分析培养瓶只需放通温箱培养,不仅效果较好而且比传统的经典方法更简易型,易于推广使用。     

口服乳酸杆菌对大鼠粪便正常菌群的影响

本文报告Wistar大鼠在口服嗜酸性乳酸杆菌和嗜热性链球菌前,服后1,2,3,4周及停服1周后的粪菌群俭查结果按每克粪便的菌落形成单位(CFU/g)计算。结果表明:大鼠粪便中排出的乳酸杆菌数量在厌氧培养和需氧培养中不同。在厌氧培养中,口服前为19~(9.41),口服后和停服后为10~(8.99～9.42)CFU/g;在需氧培养中,口服前为     

家鸭粪便正常菌群的研究

本文应用常规好氧培养法和厌氧培养法,分析了不同日龄、性别及饲养条件下金定鸭粪便正常菌群的组成与变化情况,并同成年骡鸭、正番鸭、北京鸭和康贝尔鸭的粪便菌群做了比较。     

悉生重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠的研究——Ⅰ.肠道厌氧菌群的分离和鉴定

本文报道了由澳大利亚WEHI研究所(The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research)引进的悉生SCID(Severe Combined Immunodeficient)小鼠肠道厌氧菌群的分离、鉴定结果。该小鼠粪便标本需氧及厌氧培养发现应用非选择性Scheadler血琼脂需氧条件下有一种革兰氏阳性杆菌生长;厌氧条件下生长的培养物经数种选择性培养基也分离出革兰氏阴性及阳性杆菌,据细菌形态学,染色特征,生化反应特性等鉴别为吉氏拟杆菌、嗜酸乳杆菌和梭形杆菌。     

一次性厌氧菌培养平板的制作与应用

用一次性厌氧菌培养平板,对１０属１７种６７株厌氧菌和３０份临床标本进行培养,同时用厌氧手套箱及厌氧罐作对照培养,其培养效果与厌氧手套箱一致,优于厌氧罐,且用一次性厌氧菌培养平板进行培养具有操作简便,宜于推广应用等特点。     

应用肠道微生物示踪地表水粪便污染的研究进展

人和动物的粪便已成为水污染的重要污染源, 严重威胁着饮水安全和经济发展。水质污染微生物的传统检测指示菌是总大肠菌群、粪大肠菌群、埃希大肠菌、肠球菌和梭菌属。经过调查发现, 上述指示菌由于在体外能存活并繁殖, 并且不同宿主之间没有差异性, 不能准确用于追踪污染粪便的来源, 因此该指标难以直接说明粪便污染源和污染程度。最近的研究表明, Faecalibaterium作为水体粪便污染来源追踪的指示微生物具有很多优点。本文综述了粪便污染指示菌以及其相关替代方法在水质检测中的研究进展, 对各种指示菌进行了优、缺点比较, 展望了Faecalibaterium的应用前景。     

细菌性阴道病的优势菌群半定量培养分析

目的探讨临床适用的菌群培养方法,用于检测分析细菌性阴道病患者阴道优势菌群,以更好地指导临床诊治。方法采集32例细菌性阴道病（BV）患者的阴道分泌物标本,在不同气体环境中用非选择性、半定量方法做细菌培养,比较培养结果,分析患者阴道优势菌群。结果在厌氧环境中培养时菌落数量最多,检出的优势菌共15种,每份标本的优势细菌种类多数为2种（20/32）,少数为3种（3/32）;而在微需氧及需氧环境中检出的主要菌分别为8种及5种。结论非选择性半定量、厌氧培养的方法可有效、简便地了解BV阴道优势菌群的构成,可用于临床对BV菌群的检测分析研究。     

需氧厌氧培养方式对甲型副伤寒沙门菌检出率的影响

目的探讨需氧和厌氧血培养方式的选择对甲型副伤寒沙门菌检出率的影响。方法使用mini VI-TAL自动荧光血培养仪或BacT/Alert 3D培养仪对18684例疑似血流感染患者血液(含骨髓)标本进行需氧和(或)厌氧培养(其中仅做需氧培养935例,仅做厌氧培养16例,需氧和厌氧配对培养17733例,每瓶注入约5 ml血液)。结果18684例血液标本,共分离到甲型副伤寒沙门菌3888例(20.81%)。在17733例需氧和厌氧配对培养中检出3613例,其中仅需氧阳性406例占11.24%(406/3613),仅厌氧阳性405例占11.21%(405/3613),需氧和厌氧培养均阳性者2802例占77.55%(2802/3613),需氧和厌氧均生长的阳性报警时间分别为(22.56±13.22)h和(26.69±15.80)h,仅需氧阳性的报警时间为(32.85±23.33)h,仅厌氧阳性的报警时间为(34.46±18.44)h。结论需氧和厌氧血培养方式获得甲型副伤寒沙门菌的阳性率相同,采用需氧和厌氧瓶配对培养可提高阳性检出率,只做厌氧或需氧培养将有11.24%或11.21%阳性病例被漏检。     

细菌自动培养仪厌氧培养的临床应用

目的 :探讨用细菌自动培养仪作厌氧培养的临床应用价值。方法 :选用 mini VITAL 全自动荧光血培养仪检测常见临床标本 5472份 (其中血液 4869瓶、胸腹水 2 40瓶、脓腔及组织穿刺液 175瓶、脑脊液12 2瓶、骨髓液 2 3瓶、胆汁及其引流液 2 1瓶、其他 2 2瓶 )厌氧培养结果 ,对其阳性检出率、检出细菌种类和时间、假阳性以及药敏结果进行综合分析和评估。结果 :设定收瓶时间为 5d,厌氧培养的阳性检出率为2 5.51% (其中胆汁 76.19% ,脓汁 57.14 % ,血液 2 5.2 8% ,胸腹水 14 .17% ,骨髓 13 .0 4% ,脑脊液 5.74% ) ;共检出各种感染菌 3 3属 77种 ,专性厌氧菌、微需氧菌和兼性厌氧菌的比例为 4.8∶ 1.0∶ 94.2 ;专性厌氧菌的平均检出时间为 (2 6.13± 2 0 .59) h;兼性厌氧菌的检出时间厌氧株比需氧株平均延长 -0 .54～ 4.7h;假阳性率 0 .16% ;药敏结果厌氧株的耐药率普遍较需氧株低。结论 :仪器厌氧培养简便、快速、安全、有效 ,是临床常见标本检测厌氧菌值得推荐使用的方法 ;与需氧培养配对应用可提高培养阳性检出率     

厌氧微生物培养分离：过去、现在和未来

厌氧菌是地球上数量最多、物种最丰富的微生物,也是分类上报道最少的微生物。它们对氧气敏感、生长条件苛刻,不容易培养分离。本文简要总结了厌氧微生物的研究历史,分析了限制厌氧微生物培养分离的主要因素,讨论了厌氧微生物培养分离的策略和方法,回顾了国内外厌氧微生物的系统分类学现状,并展望了厌氧微生物培养分离的发展趋势。     

口腔厌氧螺旋体培养条件的研究

口腔厌氧螺旋体的分离培养在国内尚属还未解决的问题,本研究对培养口腔厌氧螺旋体的培养基,培养条件及与梭形杆菌的共生关系进行了探索,制备出适宜于口腔各类厌氧螺旋体生长的“螺旋体大豆消化液选择培养基”(简称SSSM),使用本培养基从40例青少年牙周炎患者牙周袋分泌物标本分离出小齿密螺旋体19株,大齿密螺旋体4株,疏螺旋体4株,另分离出梭形杆菌21株,其结果显示出患者牙周袋及健康人龈沟标本中厌氧螺旋体及梭形杆菌培养阳性率二者之间有高度显著性差异(P<0.001),进一步揭示出牙周炎与口腔厌氧螺旋体之间关系密切。并对分离出的菌株做了常用抗菌素的药敏试验。     

百宝牌Bbo3-A型2．4升厌氧培养罐简介

厌氧菌与人类及动物的生命密切相关 ,随着医学及生物技术的发展 ,人们对厌氧菌的研究愈来愈深入广泛。由于厌氧菌的厌氧特性 ,其培养必须在严格的无氧条件下进行 ,用厌氧罐培养法进行厌氧菌的培养 ,简便、实用 ,是医院、工厂、教育及科研领域培养 ,检验、研究厌氧菌的重要手段。百宝牌Bbo3 A厌氧罐示意图百宝牌Bbo3 A型 2 4升厌氧培养罐是由北京东方百信生物技术有限公司在国内外产品基础之上 ,克服以往产品操作复杂、使用不便等缺点创新研制而成的最新产品 (专利申请号 :0 32 6 14 5 0 0 )。其原理是 :在密封的罐体内 ,用一定量的硼氢…     

畜禽粪便和粪水厌氧消化技术分析与展望

随着我国畜禽养殖集约化程度的不断提高,畜禽粪污导致的环境污染已成为畜禽养殖业发展面临的重要制约因素。粪污通过厌氧消化可回收能源、生产沼肥和消灭病原菌,避免对环境产生危害,是畜禽粪污处理和资源利用技术链条的核心环节。根据原料性质的差异,将粪污区分为畜禽粪便与养殖废水,分别探讨了这两种处理对象厌氧消化处理的不同技术难点和发展方向。针对畜禽粪便,重点探讨了高含氮粪便厌氧消化过程中存在的氨抑制问题及解除氨抑制的方法;针对养殖废水,介绍了废水处理与回用标准,比较分析了升流式厌氧污泥床、厌氧膜生物反应器、厌氧折流板反应器和自搅拌厌氧折流板反应器等几种代表性的和新型的废水厌氧处理工艺,并展望了技术的创新发展,旨在为畜禽粪便和养殖废水的厌氧消化及废水回用技术的发展提供参考。     

几种厌氧菌的培养方法

在发酵工业中常需培养厌氧细菌,如生产丙酮丁醇的梭状芽孢杆菌,白酒生产中与产酯香关系密切的丁酸菌和已酸菌等。由于许多专性厌氧菌最初仅能生长在氧化还原电位较低(约150毫伏或更低)的培养基中,它们与分子氧接触会很快死亡,因此,在培养厌氧菌时,应     

脱色希瓦氏菌(Shewanella decolorationis) S12还原不同电子受体的厌氧发酵罐培养方法

脱色希瓦氏菌Shewanella decolorationisS12在厌氧环境下能够使用多种电子受体进行厌氧呼吸。为了取得足够的细胞量用于膜蛋白质组学等科学研究的需要,本研究选取无机小分子(硝酸钠)、金属离子(柠檬酸铁)和有机大分子(偶氮染料苋菜红)作为电子受体,在使用确定成分的无机盐培养基条件下,使用不同浓度的电子供体和碳源对S12进行厌氧条件下静置和发酵罐的优化培养,采用连续补充电子受体的培养方式,确认了电子供体和碳源的合适浓度,建立了S12厌氧发酵罐培养方法。相比传统的静置厌氧培养,厌氧发酵罐培养方法在保证了严格厌氧条件下高效率还原电子受体的同时,还极大的提高了细胞生长密度。连续补充电子受体的厌氧发酵罐培养的S12最大细胞密度最大分别可达到静置厌氧培养细胞密度的325,304,369倍,而生长时间也比静置厌氧培养分别缩短了26.5%,17.6%,7.5%。这为需要大量细胞和蛋白的细菌厌氧呼吸生长实验建立了可行方法,对于进行兼性厌氧呼吸的微生物的大规模厌氧培养具有借鉴意义。     

1 276例新生儿临床血液培养的分析

目的研究新生儿血液感染的细菌种类和培养方法（需氧、厌氧培养）。方法血标本在mini VITAL全自动血培养仪中培养,采用VITEK32自动微生物分析仪进行细菌鉴定。结果1276例新生儿血中共分离出细菌95株,阳性检出率为7．37％。95株菌分属37个菌种。其中革兰阳性球菌71株,占74．74％,革兰阴性杆菌20株,占21．05％,专性厌氧菌1株,占1．05％,感染率最高的前3位细菌是凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌。1149例新生儿中需氧和厌氧配对培养结果,阳性83例,阳性检出率为7．24％,其中需氧和厌氧均生长者34例,占40．96％;仅需氧生长者21例,占25．30％;仅厌氧生长者28例,占33．73％。结论快速血培养技术是血液感染病原学诊断必要手段,同时做需氧、厌氧培养对培养结果至关重要。     

厌氧菌预还原琼脂平板培养方法

为简化厌氧菌分离培养方法,使其在普通实验条件下于固体培养基上形成单菌落,本研究增加庖肉培养基无氧溶液体积,用作无氧倍比稀释液,在琼脂柱下进行倍比稀释,将皿盖带有胶塞孔的厌氧琼脂平板进行预还原,注射接种倍比稀释菌液,通过厌氧指示剂监测无氧效果,初步试用于肠道厌氧菌分离培养。结果显示,该方法整个操作过程厌氧效果良好,无需专门厌氧设备即可以分离纯化培养肠道乳酸杆菌,甚至无芽胞专性厌氧菌,如双歧杆菌和韦荣球菌。     

丙酸梭菌简易培养及电转化方法

建立了一种简易的丙酸梭菌(Clostridium propionicum)厌氧培养方法——输液瓶蜡封法,从而使厌氧培养快速有效。基于输液瓶蜡封法,采用电击缓冲液PEB,结合0.03 g/mL维生素C的方法,通过对不同对数生长期的菌体细胞进行实验,在无需借助厌氧培养箱的条件下,成功地将外源质粒pGJ103(3 283 bp)转化丙酸梭菌,结果表明处于对数生长中期(18 h)的丙酸梭菌细胞最适宜用于电转化。该研究为严格厌氧微生物的培养提供了一种普适的方法,并且为丙酸梭菌的分子生物学操作奠定了一定的基础。     

细菌L型的厌氧诱导和培养

厌氧条件下以羧卡青霉素诱导金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和蜡样芽胞杆菌形成Ｌ型,观察细菌Ｌ型在厌氧条件下的形成、形态、生长及时渗透压的敏感性等特性。结果表明：蜡样芽胞杆菌在厌氧条件下不能形成Ｌ型或其Ｌ型在厌氧条件下亦不能返祖。金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在厌氧条件下虽能诱生Ｌ型,但形成丝状体的构成Ｌ型菌落难以传代培养,厌氧培养未见Ｌ型圆球体和典型Ｌ型油煎蛋样菌落。金黄色葡萄球菌Ｌ型在含１％～１０％ＮａＣｌ的Ｌ型培养基上可生长形成Ｌ型菌落或非菌落形式存在的Ｌ型巨形体;大肠杆菌和蜡样芽胞杆菌的Ｌ型在含２％～６％ＮａＣｌ的Ｌ型培养基上可生长形成Ｌ型菌落或非菌落形式存在的Ｌ型巨形体。涂片染色或返祖试验证实细菌Ｌ型在含０．５％ＮａＣｌ的Ｌ型培养基或常规细菌学培养基上亦可生存。非菌落性Ｌ型巨形体和丝形体是细菌Ｌ型在琼脂培养基上广泛的存在形式。