一种新的猪蛔虫横切片的制作方法

蛔虫是线形动物门的代表动物 ,是学习和观察线虫动物最好的实验材料。我们在借鉴前人经验的基础上 ,经多次实验与反复比较 ,探索出了用正丁醇脱水透明 ,整染制片的新方法。现将具体操作步骤介绍如下 :1　取材　到肉联厂采集新鲜猪蛔虫 ,鉴别雌雄后 ,分别入生理盐水。2　固定　将标本取中段剪成 4～ 5cm入 1 0 %福尔马林液固定 4 0 h。自来水冲洗 2 4 h后 ,用锋利刀片将已剪成 4～5cm的标本进一步切成 4～ 5mm,入蒸馏水 1～ 2 h。3　染色　采用 Mayers苏木精液 (苏木精 2 5mg,钾明矾1 .2 5g,碘酸钠 5mg,蒸馏水 75ml) ,染 3 6～ 4 8h,染液在…     

超声快速石蜡病理切片免疫组织化学染色的分析讨论

超声快速石蜡病理制片方法简便快捷,切片质量好,组织染色清晰,与常规制片无明显差别,是目前国内手术中快速制片常用方法之一。手术中快速病理检查常常因为肿瘤组织较小而全部做成快速石蜡切片,在临床没有后续标本送检的情况下,使得赖以诊断的免疫组织化学就必须在快速石蜡切片上进行。因此,超声快速石蜡切片对免疫组化染色的影响是一个值得探讨的问题。     

小肠腺三色染色法

我们采用三色染色的方法对小肠肠腺细胞进行染色,杯状细胞、潘氏细胞、胞质和肠腺基膜呈现三种不同的颜色。细胞形态清晰,对比鲜艳,收到了理想效果。材料和方法1·材料人小肠为手术切除新鲜标本。10%甲醛固定24-48h,常规脱水,石蜡包埋。2·方法石蜡切片厚4-6μm,切片脱蜡,蒸馏水洗2m in,复合染液染3-5m in,70%乙醇分色,蒸馏水洗1m in,阿利新蓝染5m in,蒸馏水轻洗;0·2%光绿复染胞质、肠腺基膜20s;70%盐酸乙醇分色;梯度乙醇脱水;二甲苯透明;中性树胶封固。3·染液配制(1)复合染液:1%伊红(1g伊红,70%乙醇100m l)40m l,2%偶氮桃红(2g偶氮桃红甲…     

变色素2R水溶液显示神经髓鞘的新方法

本文应用变色素 2R(Chromotrope 2R)显示神经髓鞘的新方法,将神经髓鞘染成红色,形态清晰,颜色鲜艳,操作简便,易于掌握,是显示神经髓鞘较为优良的方法,为神经组织的病理诊断和研究提供了新的技术方法.标本来源:尸检脑组织、脊髓和周围神经组织,经10%甲醛固定,石蜡包埋,切片5μm.试剂的配制:①变色素2R染液:变色素2R(北京化工厂)0.5g,磷钨酸0.6g,冰醋酸1.0g,蒸馏水加至100ml.放置4℃冰箱长期保存,用前回温.②0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2ml,蒸馏水加到100ml.染色步骤:     

四格小孔径包埋盒在常规病理技术中的应用改进

目的探讨四格小孔径包埋盒应用于胃肠镜活检组织病理标本取材和石蜡包埋过程中的改进方法,以提高制片效率和质量。方法将胃肠镜活检组织随机放入四格小孔径包埋盒内作为对照组,包埋盒上不记录(对照组A)或记录(对照组B)每例活检组织的数量;改进组对四格小孔径包埋盒的四个分区重新定义为I-IV四个象限,取材时将1-4个活检组织分别对应放入I-IV四个象限的小格中。对照组和改进组标本均进行常规石蜡包埋、切片以及HE染色,比较3组间病理组织取下后放入包埋盒内的耗时、石蜡包埋过程中收集标本的耗时以及显微镜观察标本数与实际标本数的符合率。结果改进组平均每例标本取材后放置标本和包埋收集标本耗时均显著短于对照组B;与对照组A相比,改进组放置标本耗时无显著差异,而收集标本耗时显著缩短。改进组镜检标本数量符合率为100%,显著高于两个对照组。结论对四格小孔径包埋盒的四个小格重新定义并赋予特定的数量关系,将该规则应用于病理组织取材过程和常规石蜡包埋过程中可提高胃肠镜活检组织的制片效率和质量。     

植物原色浸制标本的保存

不同植物、不同器官其颜色种类各有不同 ,制成标本如采用一般方法想长久保存原先颜色也很困难。笔者通过查资料 ,长期实践、摸索 ,终于找到较满意的制作方法。现介绍如下 :1　保存绿色　将标本浸入 30 % Cu SO4 溶液中 ,5～ 10天取出 ,用清水冲洗 ,再放入 0 .2 %～ 0 .3%的 H2 SO3溶液标本瓶中 ,密闭瓶盖。2　保存红色　用 2 2 0 g硼酸、150 ml福尔马林、10 0 ml75%～ 90 %酒精、2 0 0 ml蒸馏水制成保存溶液 ,将红色标本 ,如红枣、枸杞子或番茄等洗净浸入 ,然后密封容器口。3　保存紫色　将饱和精盐水 50 0 ml,福尔马林 2 50 ml、蒸馏水 …     

龙胆紫希夫氏液显示DNA染色新方法

应用龙胆紫配制成Schiff(希夫氏)试剂,在微波辐射下进行Feulgen染色,结果使正常及良、恶性肿瘤组织细胞核内DNA着紫红色,并能应用真彩色图像仪进行DNA的定量分析.其方法操作简便,便于临床病理诊断应用.现介绍如下.标本的采集:活检手术切取的肿瘤组织100余例,经甲醛固定,石蜡包埋.切片,厚5μm.染液的配制:①8.3%盐酸水溶液(HCl8.3ml、蒸馏水 91.7ml);②龙胆紫(上海试剂站)希夫氏试剂的配制同PAS方法,以龙胆紫代替碱性品红;③亚硫酸氢盐溶液(10%偏重亚硫酸钠溶液5ml、1mol/L-HCl5ml、蒸馏水90ml).染色步骤;①切片脱蜡至水—蒸馏水;②8.3%盐酸水溶液水解切片1min(微波仪5档),蒸馏水洗;③     

丽春红2R—亮绿染色法在显示神经髓鞘中的应用

任何因素所致的神经损伤 ,均可导致髓鞘的变性、髓鞘的脱失程度。常规髓鞘染色多采用传统的苏木素及锇酸染色法。苏木素法染色时间过长 (约 2 4h) ,染色步骤复杂 ,温度需控制在 5 0～ 5 5℃ ,分化时由于分化液作用速度较快 ,不便于掌握 ,易造成染色失败 ;而锇酸价格昂贵 ,浸透性差。这样将使神经组织的病理诊断及研究受到很大影响。为此 ,我们根据神经髓鞘的组织结构特点及染色原理 ,采用丽春红 2 R-亮绿组织化学染色方法 ,收到了满意的效果。材料和方法1.标本来源 :活检、尸检及动物正常或病变的脑组织、脊髓和周围神经组织 ,均经福尔马林…     

一种改良宫颈鳞癌原代培养方法的建立

目的:探讨不同培养条件对宫颈鳞癌原代培养的可行性。方法:取确诊为宫颈鳞癌患者的活检或手术标本,通过对消化时间及重悬液量进行改良原代细胞培养,观察鳞癌细胞生长状况,并比较其与传统消化法的细胞生长率,免疫组化进行细胞鉴定。结果:消化时间为3小时,重悬液量为1ml时细胞生长率最高。改良法24小时细胞生长率为61.54%,传统消化法24小时细胞生长率为7.69%(x2=5.14,P<0.05)。活检标本细胞生长率80%,手术标本3例无一例细胞生长。结论:采用消化时间为3小时,重悬液量为1 ml成功建立了宫颈鳞癌原代培养方法,活检标本较手术标本更易培养成功。     

甲状腺组织冷冻切片的优化

目的优化冷冻切片的关键条件,以期提高甲状腺组织冷冻制片效率、切片质量与染色效果。方法收集术中新鲜送检的甲状腺标本,通过对比实验,比较冷冻切片制作环节中取材厚度、速冻方法与染色方法等因素对制片质量的影响。结果甲状腺组织冷冻切片取材厚度以0.2~0.3cm为佳;预先制作“冰垫”的托头并于上方加盖冷冻冰锤,有利于提高速冻效率、提高组织结构清晰度、减少组织块崩裂、减少冰晶、减少裂隙;机染有利于提高染色优良率并减少染色时间。结论选择适当的取材厚度、优化速冻方法、采用优质的染色方法,可显著提高甲状腺组织冷冻切片的制片质量,为精准的术中病理诊断奠定基础。     

一种改良宫颈鳞癌原代培养方法的建立

目的：探讨不同培养条件对宫颈鳞癌原代培养的可行性。方法：取确诊为宫颈鳞癌患者的活检或手术标本,通过对消化时间及重悬液量进行改良原代细胞培养,观察鳞癌细胞生长状况,并比较其与传统消化法的细胞生长率,免疫组化进行细胞鉴定。结果：消化时间为3小时,重悬液量为1ml时细胞生长率最高。改良法24小时细胞生长率为61．54％,传统消化法24小时细胞生长率为7．69％（x2=5．14,P〈0．05）。活检标本细胞生长率80％,手术标本3例无一例细胞生长。结论：采用消化时间为3小时,重悬液量为1ml成功建立了宫颈鳞癌原代培养方法,活检标本较手术标本更易培养成功。     

早孕孕妇血甲醛值测定

目的:调查妊娠结局正常的单胎孕妇在孕早期时血甲醛浓度正常值.方法:妊娠期无并发症,追踪其新生儿无出生缺陷的单胎孕妇,按标本号随机抽取130例,用气相色谱法测定她们在孕早期留取血样的甲醛浓度.结果:用气相色谱法测定甲醛浓度的最低检出限的浓度为0.007 μg/ml.妊娠结局正常的孕妇孕早期血甲醛浓度为正偏态分布,130例孕妇血甲醛浓度最低为小于0.007 μg/ml,最高值为0.152 μg/ml,极差为0.145 μg/ml,中位数(P50)为0.014 μg/ml,P90为0.066 μg/ml,P95为0.099 μg/ml.结论:可采用气相色谱法测定正常的单胎孕妇的血甲醛浓度.     

肠虫清治疗囊虫病致迟发性脑水肿1例

1　病例资料　　患者 ,男 ,55岁。因皮下散在性结节 3年余 ,伴右上肢抽搐 1次入院。查体 :全身皮下可触及散在性、活动、质硬、无痛、约花生米大小结节共 2 5个。结节病理活检为猪囊虫病 ;头颅 CT诊断为脑囊虫病 ,脑内可见密集点状钙化影及散在小囊状低密度灶 ;眼底检查正常 ;脑脊液压力及常规正常。诊断 :脑及皮下型囊虫病。治疗 :丙硫咪唑 0 .5g/次 ,口服 ,每天 2次 ;共 1 0天为 1疗程 ,强的松1 0 mg/次 ,口服 ,每天 3次。2　结果　　第 1 0天患者出现表情呆滞 ,神志恍惚 ,第 1 1天出现癫痫大发作 ,伴呕吐 ,发作后昏迷 3天 ,平时血压 1 6…     

福尔马林固定及石蜡包埋组织透射电镜样品制备

随着电子显微镜的应用和普及,超微病理诊断为临床病理工作者提高疑难病例的诊断水平,起到了极大的帮助作用。因而电镜技术越来越引起病理工作者的重视。但在实际工作中往往无法预先知道哪些标本需作透射电镜观察,而常规病理标本又多已经福尔马林固定或石蜡包埋。我室自１９９３年以来,探索将福尔马林固定的组织及石蜡包埋的组织再制作成透射电镜样品,进行超微病理诊断,获得一定成效,现报道如下。材料和方法：标本取自本室活检常规福尔马林固定标本及本室常规石蜡包埋组织。经福尔马林固定时间为１ｈ－１ｗ。经观察定位,准确地将有意…     

两种食用菌液体发酵培养基筛选的初步研究

以平菇Pleurotusostreatus(Jacq.exFr.)Quel和香菇Lentinusedodes(Berk .)Sing.为材料 ,在 2 4～ 2 6℃ ,1 60rpm振荡培养条件下 ,确定了平茹培养基最适配方为 :葡萄糖 2 % ,蛋白胨 0 .2 5% ,酵母膏 0 .2 5% ,氯化锰 0 .1 % ,磷酸氢二钾 0 .1 % ,硫酸镁 0 .1 % ,水 1 0 0 0ml,pH自然 ;香菇培养基最适配方为 :玉米粉、麸皮各 1 0 0 g,蔗糖 2 0g ,白糖 2 0g,水 1 0 0 0ml,pH6.8～ 7.0。     

支纤镜肺活检联合刷检与经皮肺穿刺活检对肺周围型病变诊断价值的研究

目的:探讨两种肺检查方法对肺部周围常见疾病的诊断价值.方法:回顾性分析胸片和CT检查发现肺周围型病变的43例患者,在经支气管肺活检联合刷检和/或CT引导经皮肺穿刺活检病理确诊阳性率.结果:43例患者共行33次支气管肺活检联合刷检,26例获取标本成功,阳性诊断率为78.79%.经皮肺穿刺活检17例,全部获取标本成功,1例患者因取材量少,病理结果无诊断意义,阳性诊断率为94.11%,两者结合诊断率97.67%.结论:经支气管肺活检联合刷检与经皮肺穿刺活检对肺周围型病变诊断都是安全、有效、准确、损伤小的诊断方法,两种方法联合使用可明显提高诊断率.     

三种不同原位PCR方法的比较研究

原位 PCR技术是 80年代末开始发展起来的一项新技术 ,它结合了 PCR技术的高效扩增和原位杂交技术细胞定位的优点 ,敏感性高 ,可以进行靶核苷酸的定位。目前 ,主要应用的原位 PCR方法有直接法、间接法 ,但各有其优缺点 ,为此我们应用标记引物的原位 PCR方法检测了肝细胞癌组织中 HBV,尖锐湿疣组织中 HPV及鼻咽癌组织中的EBV的分布 ,并与前两种方法进行了比较。材料和方法1　标本　外科手术切除肝癌标本 2 0例 ,鼻咽癌活检标本 2 0例 ,尖锐湿疣活检标本 2 0例 ,1 0 %中性福尔马林固定 ,石蜡包埋 ,5μm连续切片 ,病理诊断证实。2　试…     

红黄蝎尾蕉的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　红黄蝎尾蕉 (Heliconialatispathacv .Red Yellow)。2　材料类别　茎尖。3　培养条件　 (1)启动培养基 :MS +6 BA 10mg·L- 1(单位下同 ) +15 %椰子水 (新鲜上市椰子中的汁水 ) ;(2 )丛生芽继代增殖培养基 :MS +6 BA 3;(3)生根培养基 :MS(无激素 )。以上培养基均含蔗糖 30g·L- 1、琼脂 0 .7% ,pH 5 .5～ 5 .8。培养温度 (2 8±2 )℃ ,光照度 15 0 0～ 2 0 0 0lx ,光照 12h·d- 1。4　生长与分化情况4 .1　无菌材料的获取　 7～ 8月从田间挖取生长旺盛的蝎尾蕉根茎 ,除去叶和根 ,用自来水洗干净后 ,用 0 .1%的高锰酸…     

拉曼被孢霉F_5发酵生产γ—亚麻酸的研究

对拉曼被孢霉突变株F5发酵生产γ—亚麻酸的最适碳源、氮源、发酵时间及温度、无机盐离子添加、最适碳源浓度及补加碳源时间等发酵条件进行了研究探讨。最适发酵培养基组成为 (g/L) :葡萄糖 1 0 0 ,酵母浸出粉 4 ,蛋白胨 1 ,K2 HPO4 1 ,CaCl2 1× 1 0 - 2 ,MgSO4 5× 1 0 - 2 ,FeSO4 1× 1 0 - 2 ,ZnSO4 7.5× 1 0 - 3,CuSO4 0 .5× 1 0 - 3,MnSO4 2× 1 0 - 3,pH 6.0。培养温度为 2 5℃ ,1 4 0r/min振荡培养 1 0天 ,培养 8天后 (即收获前 2天 )补加 5 %葡萄糖。发酵结果为 :DC 2 4 .5 9g/L ,TL 1 0 .84g/L ,TL/DC 4 4.0 9% ,GLA/TL 1 0 .67% ,GLA产量为 1 1 5 6.63mg/L。GLA产量较初始结果提高 1 5 6.1 5 %。该菌株已达到工业化生产菌株要求     

大鼠骨骼肌组织雄激素受体结合容量测定方法

目的 :以3H testosterone(T)为配基 ,测定大鼠骨骼肌胞浆中的雄激素受体结合容量。方法 :测定温度为 4℃ ,同位素配基的饱和浓度为 5 0 pmol/ml;肌组织以 4倍 (重量 /体积 )缓冲液稀释 ,0～ 4℃温度下 10 80 0 0×g离心 1h ;孵育 18～ 2 4h。结果 :骨骼肌中雄激素受体的Kd =2 ,8× 10 9mol/ml。单点法与多点法之间无显著区别。