柑桔原生质体辐射诱变筛选抗寒再生植株

用１１６１Ｃ／ｋｇ软Ｘ射线辐射“Ｐａｇｅ”桔柚（ＣｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏ×Ｃ．ｇｒａｎｄｉｓＯｓｂ．ｃｖ．Ｐａｇｅ）胚性愈伤组织分离的原生质体,经－１１℃低温选择后,将存活的原生质体培养再生植株。研究表明,“Ｐａｇｅ”桔柚胚性愈伤组织原生质体在４１２８Ｃ／ｋｇ辐射剂量处理后几乎不能恢复分裂;２０６４Ｃ／ｋｇ辐射时分裂频率低,即使分裂也难以发育为胚状体;而１１６１Ｃ／ｋｇ辐射后,经－１１℃低温处理仍有１０２％～１６９％的分裂频率,且部分细胞团能发育为胚状体。辐射的原生质体培养成胚状体后,经低温筛选,在改良的生芽培养基和生根培养基中萌发成为植株。再生植株中检测出２株的叶片原生质体的低温半致死温度（ＬＴ５０）分别比对照低１．９６℃和１６８℃。     

柑桔种间体配融合及培养研究

“平户”文旦（柚）（Ｃｉｔｒｕｓｇｒａｎｄｉｓ）Ｏｓｂｅｃｋ的四分体经酶解,分离出原生质体。ＰＥＧ（聚乙二醇）诱导这类原生质体与二倍体“伏令夏”甜橙（Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ）胚性悬浮细胞系的原生质体融合。融合后的原生质体培养于ＢＨ３／ＥＭＥ培养基中。２天后,观察到花粉管生长现象。不同处理的结果显示,这一现象来源于异核体细胞。这种具花粉管生长的细胞可进一步分裂,形成多细胞团及球形和心形胚状体。对再生的胚状体进行染色体数检查,证明１３．１％的胚状体为三倍体,２ｎ＝３ｘ＝２７。而起始悬浮细胞系为二倍体,检查的３９２个细胞,未发现有染色体倍性变异。     

柑橘细胞电融合参数选择及种间体细胞杂种植株再生

以“Ｐａｇｅ”橘柚（ＣｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏ×Ｃ．ｐａｒａｄｉｓｉＭａｃｆ）胚性悬浮系原生质体和粗柠檬（Ｃ．ｊａｍｂｈｉｒｉＬｕｓｈ）叶肉原生质体为融合试材,摸索了适合柑橘的电融合参数。研究表明,在ＡＣ（交变电场）１２５Ｖ／ｃｍ、ＤＣ（直流脉冲）１２５０Ｖ／ｃｍ、ＡＣ作用时间６０ｓ、ＤＣ脉冲时间５０μｓ、ＤＣ脉冲个数为３、ＤＣ脉冲间隔为０．５ｓ时融合率较高,双核异核体率可以达到１５％以上。利用不同类型原生质体比重的不同,融合后通过控制离心时间,可以收集到更高比例的双核异核体。融合产物经培养,３～４个月再生小植株。染色体计数结合形态学观察表明,再生的１５０株小植株中７８％为四倍体,其余为二倍体叶肉亲本再生类型。再生植株经过氧化物酶同工酶及ＲＡＰＤ分析,表明得到了体细胞杂种,还证明获得了１株叶肉亲本同源四倍体再生类型。     

脐橙与柠檬种间细胞电融合再生杂种植株

‘纽荷尔’脐橙（Ｃｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏｓｂｅｃｋ）胚性细胞悬浮原生质体与‘尤力克’柠檬（Ｃｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎ（Ｌ．）Ｂｕｒｍ．ｆ）叶肉原生质体经电场诱导融合,培养８个月,首批再生了１棵植株,形态学观察,染色体计数及ＲＡＰＤ分析证明异源四倍体体细胞杂种,该杂种的获得为三倍体无籽柠檬品种培育提供了杂交亲本。     

基因组对芸苔属作物原生质体培养及植株再生的影响

本文以包心菜、芜菁油菜、浙油６０１的无菌苗叶肉原生质体为材料,经不同液体培养基浅层培养,细胞分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经增殖后,转到分化培养基上诱导分化,均获得了再生植株。本文着重研究了植物基因组对原生质体分裂频率及植株再生的影响。研究结果表明：（１）植物基因组对原生质体分裂频率的影响随原生质体培养基的不同而异;（２）植物基因组对原生质体再生植株影响显著,芜菁油菜的Ａ基因组不利于原生质体再生植株     

烟草花粉原生质体与叶肉原生质体的融合及培养早期变化

用ＰＥＧ—高Ｃａ高ＰＨ法诱导抗卡那霉素的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）品系Ｎ３６４＋Ｋｍ＋花粉原生质体和黄花烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｒｕｓｔｉｃａ）叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。     

小麦分离合子与幼胚中膜钙和钙调素的分布

用非酶手工显微解剖法分离小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）合子与幼胚。应用金霉素（ＣＴＣ）和氟奋乃静（ＦＰＺ）荧光探针,观察了合子与胚胎发育过程中膜钙和活化钙调素的分布。合子原生质体ＣＴＣ荧光呈极性分布。二细胞至十几个细胞原胚时期各细胞间的ＣＴＣ和ＦＰＺ荧光均匀分布。幼小梨形胚胚体ＣＴＣ和ＦＰＺ荧光稍强于胚柄。接近分化的梨形胚ＣＴＣ荧光仅位于胚体与胚柄之间的几层细胞和胚体腹侧中部的几个细胞中。胚芽刚分化时,胚基部ＣＴＣ荧光较强,ＦＰＺ荧光则仅出现在胚基部。讨论了合子分离技术和膜钙与钙调素（ＣａＭ）在胚胎发育中的可能作用。     

链霉菌原生质体的再生

（续１９９８年第３３卷第１期第４１页）３原生质体的再生链霉菌原生质体的再生是指经去壁的原生质体在高渗的再生培养基上,一方面再生出原有的细胞壁,恢复菌丝原来的完整形态,另一方面恢复细胞的生理功能,保证细胞萌发、生长和分裂。原生质体再生过程有以下几个步骤...     

钙与钙调素对柑橘原生质体抗冻性的影响

钙与钙调素对柑橘原生质体低温锻炼过程中抗冻力的获得有影响。加钙残余螯合剂或钙调素（ChM）拮抗剂TFP,能明显抑制柑橘原生质体抗冻性的表达。钙离子载体A23187可提高未经低温锻炼的原生质体抗冻力,但该作用在钙调素拮抗剂TFP参入下则减弱,表明原生质体抗冻力的表达受钙和钙调素的调节。     

家蚕病原球孢白僵菌的原生质体再生回复及核型分析

家蚕病原球孢白僵菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）原生质体的分离制备、性状及再生回复,并用脉冲凝胶电泳（ＰＦＧＥ０技术分析了其核型。以６ｍｇ／ｍＬ Ｄｒｉｓｅｌａｓｅ为酶解液,０．７ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ液（ｐＨ５．８）为渗透压稳定剂,在３０℃下轻轻振荡处理幼嫩菌丝１．５ｈ,是的生质体分离的适宜条件。原生质体的无核率为２６．５％,有核率为７３．５％,其中单核率为５３．５％。再生回复的形式可观     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

Cause of Senescence of Nine Sorts of Flowers

The levels of endogenous phytohormones and respiratory rate in nine sorts of flowers such as Cymbidium faberi Rolfe, Nopalxochia ackermannii Kunth and others were investigated both at full bloom and senescence and meanwhile the effect of exogenous phytohormones on prolonging the blossoms and promoting ethylene production were tested. There is a high content of endogenous ethylene in all the long-lived flowere, about 3–16 folds higer than the short-lived ones. There is a high level of ABA at full blooming flowers of short-lived flowers, in which there is no or only some cytokinins in it, but the ratio of CTK (6BA+zeatin)/ABA is smaller(l.7). The endogenous ABA reached a much higher level at senescence in all nine sorts of flowers, so it is reasonable to consider that it is ABA which plays an important role of regulation in controlling flower's senescence. There is a much higher level of GA3 and zeatin in the long-lived flowers which is not demonstrated in the shortlived ones. The respiratory rate is one of the factors controtling the longevity of flowers, but it does not play a decided role. Application of 6BA and zeatin prolongs distinctly orchid’s longevity, however exogenous IAA through the promotive action on ethylene production, evidently extends the longevity of the flowers of the Nopalxochia ackermannii Kunth.     

真菌类遗传学分析的知识结构教学

本文以认知结构理论为指导,讨论了真菌类遗传分析与高等动植物遗传分析的内在联系,认为利用这种内在联系进行教学可收到好的效果并说明了作者的具体教学过程。 Abstract:In the paper, the relationship between genetic analysis of Fungi and genetic analysis of high animal and plant was discussed.A good results were obtained when we adopted this method in the teaching.     

医疗机构合理用药评价模型的构建研究

目的 针对医疗机构的合理用药水平进行评价研究。方法 根据医疗机构合理用药的具体要求,构建医疗机构合理用药评价指标体系,采用基于模糊群决策的方法和多指标评价分析法构建医疗机构合理用药评价模型。结果 构建了基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型,并通过实例分析证明了评价模型的可行性。结论 建立的基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型能够对医疗机构的合理用药水平进行科学评价,为提高医疗机构合理用药水平奠定基础。     

棉铃虫钙粘蛋白N端多肽多克隆抗体制备及对Bt抗性的初步检测

用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定。通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,得到35ku的重组融和蛋白,融合表达的包涵体经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16000;利用最终获得的多克隆抗体对室内纯合Bt抗/感品系的棉铃虫中肠钙粘蛋白进行Western blot分析,结果显示敏感和抗性品系之间有明显差异,表明其能够应用对Bt抗性进行初步检测。     

龙胆科药用植物化学成分的研究现状

龙胆科植物在我国的分布范围很广,且多数为药用植物,其多数种属的药用植物,至今其化学成分尚未被系统研究。综述了目前龙胆科药用植物的化学成分的研究现状及一般提取方法,对近年来发现的环烯醚萜及裂环烯醚萜类化合物进行了总结,为本科药用植物的更深入研究提供了参考。     

青蒿素生物合成机理研究现状

本文总结了目前有关青蒿素生物合成机理方面的研究,主要包括青蒿素生物合成中生理因子的影响,青蒿素生物合成中间体及前体,青蒿素生物合成细胞定位等。指出了存在的一些问题及今后的研究发展前景。