制服口蹄疫FMDV基因工程疫苗获得成功

口蹄疫是家畜最有破坏力的疾病,它是由口蹄疫病毒所引起的。1967--1968年期间由于这种病疫的流行造成重大损失,将近50万头家畜受毁。 抗口蹄疫病毒疫苗是制服这种病害的有力工具,通常获得这种疫苗是靠组织培养制取,用乙酰乙烯脒(acetylethylenimine)较易纯化,获得免疫力较强,并持续3--6个月(Marwick C.)。但这种制法常受到很大限制,也不便宜,为此,美国近几年来便用基因工程方法制取疫苗取得进展,他们将口蹄疫病毒VP3外壳蛋白(注:FMDV粒子含有四种衣壳蛋白即VP1、VP2、VP3、VP4,是在感染细胞中合成)基因插入到pBR     

制服口蹄疫FMDV基因工程疫苗获得成功

口蹄疫是家畜最有破坏力的疾病,它是由口蹄疫病毒所引起的。1967——1968年期间由于这种病疫的流行造成重大损失,将近50万头家畜受毁。 抗口蹄疫病毒疫苗是制服这种病害的有力工具,通常获得这种疫苗是靠组织培养制取,用乙酰乙烯脒(acetylethylenimine)较易纯化,获得免疫力较强,并持续3——6个月(Marwick C.)。但这种制法常受到很大限制,也不便宜,为此,美国近几年来便用基因工程方法制取疫苗取得进展,他们将口蹄疫病毒VP3外壳蛋白(注:FMDV粒子含有四种衣壳蛋白即VP1、VP2、VP3、VP4,是在感染细胞中合成)基因插入到pBR     

非毒性AIDS病毒有利于开发疫苗

国立癌症研究所的R.Gllo等人生产出一种能自我复制的AIDS病毒变异体,它不会象毒性病毒那样去破坏T-4辅助细胞。这种失去了遗传物质200个碱基对的非毒性AIDS病毒可作为试验疫苗的基础,目的是用它使人体带有抵抗AIDS病毒的能力。 研究者们队为;AIDS病毒的外壳蛋白质很可能是使T-4细胞致死的原因,因而那些探求生产AIDS病疫苗的人都把兴趣放在这种病毒的蛋白质外壳下。     

用合成的肽模拟口蹄疫病毒的亚型特异性

口蹄疫病毒(FMDV)的主要免疫原位于外壳蛋白质(VP1)的141-160氨基酸之间。相当于主要免疫原区段的合成肽在豚鼠体内可诱致中和抗体反应和保护作用。为了更精确地确定口蹄疫病毒的免疫原位置,我们使用了含有141-160氨基酸区段的合成肽,研究了血清A型的亚型之间的血清学差别。我们发现这些合成肽携带有同口蹄疫病毒亚型特异性一样的决定子。根据氨基酸序列,本文还讨论了这些研究结果和预测的结构模型之间的关系。     

转基因植物作为生物反应器生产口蹄疫疫苗的研究进展

利用转基因植物作为生物反应器表达重组蛋白,生产外源蛋白质作为动物疫苗是一个很有吸引力的廉价生产系统,它有可能代替生产成本较高的传统疫苗的发酵生产系统。通过口蹄疫病毒VPI结构蛋白基因在转基因植物中的表达,口蹄疫疫苗已在植物中产生。在植物中生产的抗原能够保持其自身的免疫原性。本文简要综述了近十年来用转基因植物作为生物反应器生产口蹄疫疫苗的研究进展、特点及其应用前景。     

抗病毒编码性细胞因子的免疫明显限制病毒的攻击

<正>鉴定病毒疫苗保护作用的免疫标志物因因素多而复杂,但中和附着于敏感细胞的病毒的抗体的重要性有着广泛共识。病毒新疫苗的研究多数遵照了这种中和抗体的思路,但是,犹如人巨细胞病毒(HCMV)疫苗最近的一次临床试验表明的那样,这种单一途径可能不会如实代表保护效力。由于HCMV自身编码蛋白质的50%以上都能调节宿主的免疫,可以设想,将疫苗的标靶也包括病毒蛋白组的这一部分必会扰乱病毒天生的生活史。HCMV和恒河     

转基因植物作为生物反应器生产口蹄疫疫苗的研究进展

利用转基因植物作为生物反应器表达重组蛋白,生产外源蛋白质作为动物疫苗是一个很有吸引力的廉价生产系统,它有可能代替生产成本较高的传统疫苗的发酵生产系统。通过口蹄疫病毒VP1结构蛋白基因在转基因植物中的表达,口蹄疫疫苗已在植物中产生。在植物中生产的抗原能够保持其自身的免疫原性。本文简要综述了近十年来用转基因植物作为生物反应器生产口蹄疫疫苗的研究进展、特点及其应用前景 。     

口蹄疫病毒的分子生物学和新型疫苗的研制

口蹄疫目前在世界上特别是在亚、非、拉美地区仍然是构成严重经济问题的一个病害,许多国家在大力研制和开发高效、安全的疫苗,包括用遗传工程手段制备的疫苗。近年来由于运用快速的核酸序列分析、重组DNA和单克隆抗体等新技术,使我们对口蹄疫病毒的基因组结构和抗原结构有了更多的了解,这对研制新型疫苗有直接的指导意义;另一方面,合成多肽的应用在模拟病毒抗原决定子及开发新型疫苗上也正崭露头角。     

Asia 1型口蹄疫病毒抗原表位突变株的构建及其生物学特性分析

为了研制口蹄疫抗原表位突变标记疫苗,本研究以含有Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)c DNA全长的感染性克隆p Asia 1-FMDV作为骨架,将3D蛋白中第27位氨基酸的H和31位的氨基酸N分别突变成Y和R,从而突变3D蛋白的一个抗原表位,将构建的带有突变表位的重组质粒转染BHK-21细胞,成功拯救出一株突变FMDV。经比较后发现,重组病毒的生物学特性与亲本毒株相似。病毒中和试验结果显示,抗重组病毒的血清与亲本病毒有良好的反应性。Western blotting结果表明重组病毒诱导的抗体能与突变的表位合成肽反应而不与野生型病毒的表位合成肽发生反应,从而区分重组病毒与亲本病毒。综上所述,这株抗原表位突变FMDV有望作为口蹄疫标记疫苗候株进一步评估。     

口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及应用研究进展

口蹄疫是严重影响全球政治经济的烈性动物传染病,快速诊断及有效防治对口蹄疫的防控具有重要意义。单克隆抗体具有高特异性、均质、活性单一等优点,在生物医学领域中有广泛用途。目前,国内外学者制备了多种抗口蹄疫病毒的单克隆抗体,并应用于口蹄疫病毒抗原定型、疫苗量化、抗体水平监测、自然感染与疫苗免疫动物的鉴别诊断,以及口蹄疫病毒抗原表位分析等方面。我们简要综述口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及应用进展。     

预防大多数子宫颈癌的疫苗

在 2 0世纪的大半时间内 ,科学家一直怀疑通过性传播的传染病会引起子宫颈癌 .但是直到 2 0年前 ,科学家从子宫颈癌中分离到人乳头瘤病毒 (HPV)的DNA时才找到了证据 .这个发现在有了实际用途了 .在2 0 0 2年 11月 2 1日的NewEnglandJournalofMedicine上 ,美国的一个研究组的科学家报道了用HPV蛋白质所制成的疫苗可以保护妇女免受HPV长期感染 ,这种感染可导致子宫颈癌 .科学家用包围在称为HPV 16病毒的外面形成外壳的 1～ 2种蛋白质的大量生产 ,制成这种疫苗 .在大约一半的子宫颈癌中可以找到HPV 16 .不伴有HPV 16DNA的这种病毒…     

铁蛋白与口蹄疫病毒VP1在大肠杆菌中融合表达及纳米颗粒自组装

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的世界上最重要的畜牧疾病之一,严重影响世界畜牧业的发展,而疫苗免疫仍然是对疫情预防和控制的最有效手段.铁蛋白具有自组装和生物修饰的特性,在纳米疫苗等领域具有广阔的应用前景.选用O型口蹄疫病毒的vp1基因和幽门螺杆菌铁蛋白基因,通过融合PCR将vp1基因构建到铁蛋白亚基基因前端,在大肠杆菌中表达后...     

一种也许可用来制造呼吸道合胞病毒病疫苗的嵌合蛋白

美国Upjohn公司的研究人员发明了一种新蛋白质,动物试验结果证明它有希望用作疫苗以对付呼吸道合胞病毒(RSV)病。这种病毒病每年使美国5.5万婴儿得病住院,并夺走2000名婴儿的生命。 Upjohn公司的研究人员分离了形成病毒外壳的两种糖蛋白的致免疫部分。G糖蛋白与呼吸道中易感细胞结合,而F糖蛋白则使细胞融合成称作合胞体的巨型细胞复合体,     

猪O型口蹄疫病毒细菌样颗粒疫苗的制备与免疫原性鉴定

验证基于革兰氏阳性增强基质(Gram-positive enhancer matrix,GEM)展示口蹄疫病毒细菌样颗粒(Bacteria-like particles,BLP)疫苗的可行性。按照大肠杆菌偏好性密码子优化合成基于猪口蹄疫病毒Mya98株序列的3种抗原基因设计,并将其插入到含有锚钩蛋白基因的原核表达载体p QZ-PA,鉴定阳性后转入Escherichia coli BL21,进行诱导表达。利用SDS-PAGE与Western blotting对目的基因表达及产物的可溶性进行分析。利用GEM颗粒纯化目的蛋白,制备细菌样颗粒疫苗抗原;利用BCA试剂盒测定重组蛋白的浓度,将重组蛋白与白油佐剂乳化,制备疫苗,免疫5周龄小鼠,同时设商品化多肽苗对照与空白对照,免疫后不同时间采集试验小鼠血清,利用口蹄疫病毒多肽ELISA抗体检测试剂盒和O型口蹄疫抗体液相阻断酶联免疫(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测试剂盒检测免疫小鼠血清的抗体水平;利用噻唑蓝比色法(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)测定淋巴细胞增殖情况;利用荧光定量PCR方法检测相关细胞因子表达,评价细胞免疫水平。SDS-PAGE结果表明,设计在大肠杆菌中的3种口蹄疫病毒抗原基因均以可溶形式获得高效表达;Western blotting结果显示,表达的重组蛋白能够与口蹄疫病毒阳性血清发生反应,利用GEM颗粒能够实现重组蛋白的一步离心纯化,制备BLP疫苗抗原;免疫试验结果表明,设计的重组抗原B(T1BT2)4B不但能够刺激免疫小鼠产生更高水平的多肽特异性ELISA抗体与口蹄疫特异性液相阻断抗体,而且产生了更高水平的脾淋巴细胞增殖及Th1型的细胞因子分泌。初步实验结果表明,本研究制备的BLP疫苗GEM-B(T1BT2)4B具有良好的免疫原性,为研究口蹄疫病毒基因工程亚单位疫苗开辟了一条新的思路。     

口蹄疫病毒与宿主细胞的相互作用研究进展

口蹄疫病毒（FMDV）导致了偶蹄动物口蹄疫的发生,它是一类有着自身特点的RNA病毒。首先,FMDV衣壳蛋白VP1识别结合宿主细胞膜上的整联蛋白等受体,以内吞的方式进入细胞,利用宿主细胞成分完成病毒蛋白的合成。这些新合成的L^pro、2C和3C^pro等病毒致病因子进一步抑制宿主基因的转录和翻译,诱导细胞凋亡和白噬,并抑制干扰素介导的一系列先天性和获得性免疫反应。宿主则在病毒侵染细胞的初期,利用病毒识别受体等来识别病毒并诱导合成干扰素等细胞因子,介导多种免疫反应以清除病毒。病毒和宿主两者在持续的利用和较量中完成疾病的发生和痊愈等。其次,不断发现的病毒受体、结合基序、致病因子及宿主细胞的多种免疫调节因子将成为相关领域新的研究内容。综上,开发高效安全疫苗、增强自身免疫力及利用RNAi直接抑制病毒RNA等便成为现代FMDV防治的主要内容。     

SARS病毒研究进展

简要阐述了导致“非典”的病毒的形态学、分类学、病毒基因组、蛋白质组、病毒的检测和SARS病预防疫苗和诊断与治疗约物的研究进展。     

高危型HPV E6蛋白与宿主PDZ蛋白相互作用的研究进展

病毒通过自身蛋白与宿主蛋白间的相互作用,营造一种适合于其转化、增殖的体内环境,从而引起一系列疾病的过程。人乳头瘤病毒(HPV)与某些肿瘤发病关系密切,分子机制研究表明,其表达的早期蛋白E6是HPV参与细胞恶性转化的主要蛋白。含有PDZ结构域的蛋白质是细胞内广泛存在的一类蛋白质。本文综述了人乳头瘤病毒的E6蛋白和宿主细胞的PDZ蛋白间的相互作用,讨论了这种作用引发的细胞内生化生理改变及其应用前景。     

病毒技术公司在伦敦开始艾滋病新疫苗的临床研究

病毒技术公司(首都华盛顿)是一家由CEL-SCI公司和Alpha l生物药品公司组成的合资公司。这种新疫苗(称为HGP-30)的主要成份是艾滋病病毒内部结构蛋白(p17)中某一部分的合成拷贝,而不是外部的“外壳”蛋白。该试验将在伦敦的圣·斯蒂芬医院进行,届时将有24名艾滋病测试阴性的健康志愿者参加。另外将有24名不接受该疫苗的志愿者组成对照组。这项研究意味着艾滋病疫苗     

口蹄疫疫苗的生产竞争

用合成的办法取代灭活病毒来生产口蹄疫苗仍在广泛地开展。正象其他生物工程公司一样,美国的Genentech公司也在用遗传工程方法生产病毒的多肽VP_1方面投入资金。生产灭活病毒疫苗的主要厂家之一,英国魏尔克姆财团(Wellcome Foundation)对这两种方法都支持,现在已经知道合成肽的一部份在免疫方面是有效的。(见Nature 1.July,P.30)     

用口蹄疫病毒非结构蛋白区分注苗动物和自然感染动物研究进展

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄类动物烈性传染病,疫苗接种是防治口蹄疫暴发的主要措施之一,而要控制口蹄疫流行,首先要将病毒感染动物从疫苗接种群体中区分开来。以口蹄疫病毒非结构蛋白（NSP）为抗原,检测动物体内的NSP抗体是一种很好的区分感染动物和疫苗免疫动物的诊断方法,许多实验室开展了相关研究,并取得了一定的成绩。