大鼠长期毒性试验质量控制探讨

大鼠长期毒性试验是费时长、参加人员多、消耗财力和物质大、操作繁琐复杂而又经不起重复的一个高难度研究工作,对其进行质量控制显得尤为重要。主要包括试验开始前的试验设计质量控制、试验过程中的全程质量控制和试验结束后的资料整理和实验报告质量控制。     

安神补脑液对大鼠长期毒性的观察

目的观察安神补脑液长期灌胃给药对大鼠所产生的毒性反应及严重程度,提供毒副反应的靶器官及其损害的可逆程度,确定无毒反应剂量,以评价安神补脑液长期用药的安全性,为拟定临床试验剂量及观察指标提供参考。方法 Wistar大鼠随机分为安神补脑液低、中、高剂量组(2.5、5、10 m L/kg)和溶剂对照组(灌服同容积蒸馏水2 m L/100 g),每组60只,雌雄各半,每天给药1次,每周给药6 d,连续26周。观察大鼠的外观行为、体重、摄食量,并分别于给药第13、26周末及四周恢复期结束进行血液学及血液生化学等各项指标检测及脏器系数、病理组织学检查。结果长期连续灌胃给予安神补脑液,对动物一般状态、行为活动和外观体征无明显不良影响;各剂量组的摄食量、体重、血液学及血液生化学指标与对照组比较无明显差别;给药3个月、6个月对动物各脏器组织位置、重量和脏器系数无不良影响,但部分脏器重量有所增加,各组动物脏器系数在正常范围内;病理结果显示对照组和安神补脑液高剂量组动物未见明显与给药相关的异常病理改变和毒性改变,恢复期停药后未见延迟性毒性,因此,中、低剂量组动物各脏器组织无需进行组织病理形态学检查。结论安神补脑液长期用药对大鼠未见明确的毒性反应,停药后亦无延迟性毒性反应,预期拟定的临床用药量为安全剂量。     

骆驼刺提取物大鼠灌胃长期毒性实验研究

观察骆驼刺提取物对SD大鼠的长期毒性反应。采用SD大鼠120只,雌雄各半,按体重随机分为对照组及低、中、高剂量药物组,连续灌胃3个月,对照组给予羧甲基纤维素钠,检查血液学、血生化、电解质及组织病理学。结果显示各组大鼠给药期间未出现异常反应,高剂量雄性大鼠体重下降,与对照组比较,中、高剂量组的LYMPH、NEUT、RBC、HGB、PLT、BUN、K+、Na+升高,低、中、高剂量组的ALB、CHO、GLU降低,均在正常范围,组织病理学检查无明显变化,未见明显毒性反应剂量为1.0 g/(kg·d)[相当于生药22.7 g/(kg·d)]。本研究证明骆驼刺提取物对大鼠无明显毒副作用。     

水飞蓟的毒理学安全性评价

目的：对水飞蓟进行毒理学安全性评价,为其食用安全性提供科学依据。方法：采用大鼠急性毒性实验、Ames实验,小鼠骨髓细胞微核实验、精子畸形实验和大鼠30d喂养实验等安全性评价实验,评估水飞蓟的食用安全性。结果：水飞蓟对雌、雄大鼠的急性经口最大耐受量（MTD）均大于18.0g/kg·BW。Ames实验、小鼠骨髓微核验和精子畸形实验结果均未见该样品有致突变作用,大鼠30d喂养实验各项指标也均未见明显毒性反应。结论：水飞蓟急性毒性分级属无毒级、无遗传毒性,在该实验研究剂量和条件下,水飞蓟未见明显毒副作用。     

虾青素的毒理学安全性评价研究

目的：对虾青素进行毒理学安全性评价,为其食用安全性提供科学依据。方法：通过急性经口毒性试验、Ames试验、骨髓细胞微核试验、精子畸形试验和大鼠30d喂养试验等毒理学评价试验,评估虾青素的食用安全性。结果：虾青素对雌、雄大鼠的急性经口最大耐受量（MTD）均大于19.0g/kg·BW。Ames试验、小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验结果均未见该样品有致突变作用,大鼠30d喂养试验各项指标也均未见明显毒性反应。结论：虾青素急性毒性分级属无毒级,无遗传毒性,在该实验研究剂量和条件下,虾青素未见明显毒副作用。     

安儿宁颗粒在幼年大鼠临床前安全性评价研究

目的 研究安儿宁颗粒单次给药和3个月重复给药对幼年大鼠的毒性影响,评估安儿宁颗粒对临床儿童患者的长期使用安全性。方法 20只幼年大鼠(3～4周龄),按最大给药量法,单次给予安儿宁颗粒240 g生药/kg体重的剂量,观察大鼠的毒性反应和死亡情况;200只幼年大鼠(3～4周龄)按体重均衡随机分为溶媒对照组、唐古特乌头组、安儿宁颗粒低、中、高剂量组,每组40只,雌雄各半,分别灌胃给予纯水、唐古特乌头5.5 g生药/kg体重、安儿宁颗粒3、11、40 g生药/kg体重,每天1次,连续91 d,于给药中期(给药1.5个月)、停药(给药3个月)和恢复期结束(停药后4周)分别抽样剖检大鼠40只(每组10只,雌雄各半)、80只(每组20只,雌雄各半)和40只(每组10只,雌雄各半),检测体重、摄食、血液学、血清生化学、凝血、尿液、眼科及组织病理学等相关指标。结果 幼年大鼠单次经口给予最大给药量的安儿宁颗粒,未见明显急性毒性;重复经口给予安儿宁颗粒91 d,仅见高剂量雄鼠摄食量减少和体重增长减缓、唐古特乌头组和给药组雄鼠中性粒细胞和单核细胞数、血清白蛋白均可逆性升高,AST、Na⁺...     

70%丙森锌可湿性粉剂对环境生物的安全性评价

丙森锌是一种广谱、速效、残效期长的保护性有机硫杀菌剂,广泛用于作物病害的防治,但是药剂的广泛使用也可能会对农田环境生物产生一定的影响。根据《化学农药环境安全评价试验准则》,采用多种室内模拟试验,测定了丙森锌对环境中6种非靶标生物鹌鹑、蜜蜂、家蚕、斑马鱼、大型溞和蚯蚓的毒性,并进行了环境安全性评价。70％丙森锌可湿性粉剂对鹌鹑、蜜蜂的毒性为低毒;对家蚕的96 h LC50为0．3990 mg· L-1,属剧毒;对斑马鱼96 h LC50为1．4764 mg· L-1,属中毒;对大型溞的48 h EC50为2．7406 mg· L-1,属中毒;对蚯蚓的14 d LC50为29．0737 mg· kg-1,为低毒。该研究结果可为丙森锌的风险评估和环境安全管理提供依据,并为其合理使用提供基础资料和科学指导。     

污水处理工艺的生态安全性研究进展

污水经处理后,排放和回用时常规指标通常都能达到设计标准,但出水水质并未达到无害化.从可持续发展的角度来讲,为保障生态环境及人群的安全,需要将污水的综合毒性纳入排放标准.为此,在工艺的选择及优化时应将毒性削减效果纳入其中,提高污水处理工艺的生态安全性.本文着重综述了以特定污水处理为目的、以污水回用为目的及以受纳水体安全为目的各类污水处理工艺的生态安全性研究,指出传统生物处理与高级氧化技术相结合,在去除污染物质的基础上可以强化对毒性的削减;对于以污水回用为目的处理工艺,对各种工艺进行集成可实现常规污染物去除和毒性削减的优势互补;以受纳水体生态安全为目的的污水处理工艺,应重点基于工艺运行参数和工艺单元选择进行毒性削减优化.最后对研究中存在的问题以及未来的学科发展方向提出了建议.     

长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠的毒性作用

目的研究长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠的毒性作用,确定其最大无作用剂量,为安全生产及慢性毒性实验提供剂量参考。方法将80只SD大鼠（雌雄各半）按体重随机分为4组,分别为烯草酮原药14.9mg/kg.d体重组、89.6 mg/kg.d体重组、537.5 mg/kg.d体重和正常对照组。在实验结束后处死实验大鼠,同时检测血液学、血清生化、体重和脏器系数等指标,并对结果进行统计学处理。结果与结论烯草酮原药对雄、雌性大鼠经口染毒剂量为89.6 mg/kg.d体重及以上时,对大鼠有毒性效应;长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠最大无作用剂量为14.9 mg/kg.d体重。     

转基因植物的食品安全性问题及评价策略

转基因植物经历了20年的快速发展,已经成为21世纪农业的重要支柱之一。转基因植物从诞生以来,其食用安全性一直是科学界、政府和广大消费者关心的焦点问题。各类转基因安全事件层出不穷,严重影响着转基因产业的发展。本文从营养、毒性、过敏性、抗生素抗性、非期望效应等五个方面系统总结了转基因植物食用安全的问题,详细介绍了转基因植物食用安全评价的六大原则以及国际与国内对转基因植物食用安全性评价的内容,最后介绍了我国的转基因植物安全管理体系。以期使读者对转基因植物食用安全问题有一个系统全面的了解。     

抗动脉粥样硬化核酸疫苗安全性的初步研究

目的：研究抗动脉粥样硬化核酸疫苗的安全性。方法：观察该质粒在小鼠组织中的分布和急性毒性,井在正常给药的情况下对新西兰大白兔进行6个月毒性试验。采用肌肉注射20μg/只和100μg/只,用P（温法检测外源基因在小鼠组织的分布和存留时间;同样采用肌肉注射,对最高剂量达到到50kg/kg体重的小鼠进行急性毒性试验。结果：实验证明该核酸疫苗在注射部位可存留时间为8周,其他组织如心、肝、脾、肺、肾、脑和生殖器官也有低水平分布,急毒试验显示,在剂量达到有效荆量的60倍的情况下,无可观察到的毒性反应发生,小鼠血液学和生化指标亦无异常;新西兰大白兔毒性观察,体内生化指标以及解剖学研究结果表明,该药无可观察到的毒性反应发生。结论：该核酸疫苗无可观察到的明显毒性反应,安全性良好。     

胰十二指肠切除术治疗胰头癌伴壶腹周围癌的近远期疗效及安全性

目的:研究胰十二指肠切除术治疗胰头癌伴壶腹周围癌的近远期疗效及安全性。方法:研究对象选取我院2009年8月到2013年6月间收治的胰头癌伴壶腹周围癌患者82例,采用随机数字法将其分为对照组和观察组,每组各41例。对照组患者接受姑息性手术治疗,观察组患者接受胰十二指肠切除术治疗,比较两组患者的手术时间、住院时间、术中出血量及并发症发生率,术后随访3年,比较两组患者术后1年、2年及3年生存率、术后1年复发率以及肿瘤根除率。结果:观察组的手术时间和术中出血量均明显高于对照组(P0.01),两组的住院时间比较无明显差异(P0.05);观察组的总并发症发生率(41.46%)明显高于对照组(22.96%)(P=0.03),术后2年和3年的生存率明显高于对照组(P0.05),术后1年的复发率明显低于对照组(P=0.04),肿瘤根除率明显高于对照组(P=0.04)。结论:胰十二指肠切除术治疗胰头癌伴壶腹周围癌虽可延长手术时间,提高术中出血量及并发症风险,但肿瘤根治效果更好,可减少术后复发,明显提高远期生存率。     

痛血康胶囊对早孕大鼠不完全流产模型的治疗作用

目的：探讨痛血康胶囊治疗早孕SD大鼠不完全流产模型产后出血的疗效及作用机制。方法：1）受孕7 d予米非司酮和米索前列醇,造成早孕不完全流产模型,痛血康治疗7 d观察并记录SD大鼠离体子宫平滑肌活动情况及病理组织学改变。2）用小鼠尾尖取血法,观察痛血康对小鼠出凝血时间的影响。3）用小鼠耳廓肿胀和SD大鼠棉球肉芽肿两个模型,观察痛血康的抗炎作用。4）用皮下注射肾上腺素加冰水刺激所致SD大鼠血瘀模型,观察痛血康的活血化瘀作用。结果：痛血康能增强早孕不完全流产SD大鼠子宫平滑肌收缩强度,促进残存的胚囊组织排出;能降低血瘀模型SD大鼠全血和血浆黏度,缩短小鼠出凝血时间;对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和SD大鼠棉球肉芽肿有明显抑制作用。结论：痛血康在早孕SD大鼠中具有治疗产后出血的作用,可能与增强流产SD大鼠的子宫收缩强度、促进残留在宫腔的绒毛或蜕膜组织排出、缩短出凝血时间、抑制炎症等有关。     

Long Term Influence of Carbon Nanoparticles on Health and Liver Status in Rats

Due to their excellent biocompatibility, carbon nanoparticles have been widely investigated for prospective biomedical applications. However, their impact on an organism with prolonged exposure is still not well understood. Here, we performed an experiment investigating diamond, graphene oxide and graphite nanoparticles, which were repeatedly administrated intraperitoneally into Wistar rats for four weeks. Some of the animals was sacrificed after the last injection, whereas the rest were sacrificed twelve weeks after the last exposure. We evaluated blood morphology and biochemistry, as well as the redox and inflammatory state of the liver. The results show the retention of nanoparticles within the peritoneal cavity in the form of prominent aggregates in proximity to the injection site, as well as the presence of some nanoparticles in the mesentery. Small aggregates were also visible in the liver serosa, suggesting possible transportation to the liver. However, none of the tested nanoparticles affected the health of animals. This lack of toxic effect may suggest the potential applicability of nanoparticles as drug carriers for local therapies, ensuring accumulation and slow release of drugs into a targeted tissue without harmful systemic side effects.     

iQPR法处理水对SD鼠生物安全性的研究

iQPR技术处理污水是一项新型尖端的技术,此技术可以成功降低污水乃至受到污染的地下水中的各种污染指标。但是,iQPR技术处理污水尤其是地下水是否存在潜在的生物安全性问题有待于进一步研究。因此,为评估iQPR技术对生物安全性的影响,本研究首先分析了三种不同iQPR法处理水的水质成分;其次系统研究了iQPR水对SD鼠在个体水平、组织水平和病理形态学损伤的研究。研究表明:iQPR处理的水质成分较对照组普通饮用水好,在个体组织水平检测未见异常,尽管其中一组iQPR处理水造成了SD鼠的脾小体增大,但是可能的原因是水处理环节存在微生物污染现象,因此,初步认定此技术未造成SD大鼠的个体损伤。本研究为揭示iQPR处理的水对生物体的安全性评价提供一个理论依据。     

阿托伐他汀联合参松养心胶囊治疗老年心力衰竭患者临床疗效及安全性研究

目的:探讨阿托伐他汀联合参松养心胶囊对老年心力衰竭患者的临床疗效及安全性。方法:选取我院心血管内科治疗的老年慢性心力衰竭患者121例,按治疗药物不同分为两组,对照组46例采用西医常规治疗,研究组75例常规治疗基础上给予阿托伐他汀联合参松养心胶囊治疗,记录两组12个月后的临床疗效,治疗后3、6及12个月后的总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平的变化及不良反应的发生情况。结果:与治疗3个月时相比,两组治疗12个月时临床有效率均显著提高,研究组治疗6、12个月后临床有效率均显著高于对照组(85.33%vs. 76.09%, 88%vs. 80.43%,P0.05)。两组治疗后血清TC、TG、LDL-C水平逐步下降,血清HDL-C水平逐步上升,研究组治疗第12月后血清TC、TG及LDL-C水平较对照组显著降低(P0.05),血清HDL-C水平较对照组明显升高(P0.05)。两组在1年观察期内均未见明显肝肾功能损伤及肌溶解,不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:长期使用阿托伐他汀联合参松养心胶囊治疗老年性心力衰竭的临床效果明显优于西医常规治疗,其可有效降低血脂水平,安全性高。     

脑心通胶囊辅助治疗不稳定型心绞痛的临床疗效和安全性的Meta 分析

摘要目的：系统评价脑心通胶囊辅助治疗不稳定型心绞痛的临床疗效及其安全性。方法：计算机检索PubMed(1966～2012.3)、 EMbase(1974～2012.3)、Cochrane Library(2012 年第3 期)、CBM(1978～2012.3)、CNKI(1994～2012.3)、VIP(1989～2012.3)。纳入脑 心通胶囊联合常规药物治疗不稳定型心绞痛的随机对照试验(RCT),并补充检索纳入研究的参考文献;按Cochrane 系统评价方法 对纳入研究进行资料提取及质量评估后,采用RevMan 5.1 软件进行统计学分析。结果：共纳入11 个RCT,包括共1384 例患者, Meta 分析结果显示：与常规药物治疗相比,脑心通胶囊联合常规药物明显缓解不稳定型心绞痛患者的临床症状,差异有统计学意 义[RR=1.24,95%CI(1.18-1.31),P<0.01],提高了心电图的改善率[RR=1.35,95%CI(1.24-1.47),P<0.01]。结论：目前研究表明脑心通 胶囊辅助治疗不稳定型心绞痛的短期疗效明显优于常规治疗,但其不良反应和远期疗效尚不确定,需要更多高质量随机对照试 验进一步证实。     

Evaluation of the Safety and Immune Efficacy of Recombinant Human Respiratory Syncytial Virus Strain Long Live Attenuated Vaccine Candidates

Human respiratory syncytial virus(RSV) infection is the leading cause of lower respiratory tract illness(LRTI), and no vaccine against LRTI has proven to be safe and effective in infants. Our study assessed attenuated recombinant RSVs as vaccine candidates to prevent RSV infection in mice. The constructed recombinant plasmids harbored(5' to 3') a T7 promoter, hammerhead ribozyme, RSV Long strain antigenomic cDNA with cold-passaged(cp) mutations or cp combined with temperature-sensitive attenuated mutations from the A2 strain(A2cpts) or further combined with SH gene deletion(A2cpts△SH), HDV ribozyme(δ), and a T7 terminator. These vectors were subsequently co-transfected with four helper plasmids encoding N, P, L, and M2-1 viral proteins into BHK/T7-9 cells, and the recovered viruses were then passaged in Vero cells. The rescued recombinant RSVs(rRSVs) were named rRSV-Long/A2 cp, rRSV-Long/A2 cpts, and rRSV-Long/A2 cpts △SH, respectively, and stably passaged in vitro, without reversion to wild type(wt) at sites containing introduced mutations or deletion. Although rRSV-Long/A2 cpts and rRSV-Long/A2 cpts △SH displayed temperature-sensitive(ts)phenotype in vitro and in vivo, all rRSVs were significantly attenuated in vivo. Furthermore, BALB/c mice immunized with rRSVs produced Th1-biased immune response, resisted wt RSV infection, and were free from enhanced respiratory disease.We showed that the combination of △SH with attenuation(att) mutations of cpts contributed to improving att phenotype,efficacy, and gene stability of rRSV. By successfully introducing att mutations and SH gene deletion into the RSV Long parent and producing three rRSV strains, we have laid an important foundation for the development of RSV live attenuated vaccines.     

Effect of Chronic Administration of Low Dose Rapamycin on Development and Immunity in Young Rats

Mammalian target of rapamycin (mTOR) regulates cell growth, cell differentiation and protein synthesis. Rapamycin, an inhibitor of mTOR, has been widely used as an immunosuppressant and anti-cancer drug. Recently, mTOR inhibitors have also been reported to be a potential anti-epileptic drug, which may be effective when used in young patients with genetic epilepsy. Thus, a suitable dose of rapamycin which can maintain the normal function of mTOR and has fewer side effects ideally should be identified. In the present study, we first detected changes in marker proteins of mTOR signaling pathway during development. Then we determined the dose of rapamycin by treating rats of 2 weeks of age with different doses of rapamycin for 3 days and detected its effect on mTOR pathway. Young rats were then treated with a suitable dose of rapamycin for 4 weeks and the effect of rapamycin on mTOR, development and immunity were investigated. We found that the expression of the marker proteins of mTOR pathway was changed during development in brain hippocampus and neocortex. After 3 days of treanent, 0.03 mg/kg rapamycin had no effect on phospho-S6, whereas 0.1, 0.3, 1.0 and 3.0 mg/kg rapamycin inhibited phospho-S6 in a dose-dependent manner. However, only 1.0 mg/kg and 3.0 mg/kg rapamycin inhibited phospho-S6 after 4 weeks treatment of rapamycin. Parallel to this result, rats treated with 0.1 and 0.3 mg/kg rapamycin had no obvious adverse effects, whereas rats treated with 1.0 and 3.0 mg/kg rapamycin showed significant decreases in body, spleen and thymus weight. Additionally, rats treated with 1.0 and 3.0 mg/kg rapamycin exhibited cognitive impairment and anxiety as evident by maze and open field experiments. Furthermore, the content of IL-1β, IL-2, IFN-γ, TNF-α in serum and cerebral cortex were significantly decreased in 1.0 and 3.0 mg/kg rapamycin-treated rats. The expression of DCX was also significantly decreased in 1.0 and 3.0 mg/kg rapamycin-treated rats. However, rats treated with 1.0 mg/ kg rapamycin exhibited fewer and milder side effects than those treated with 3.0 mg/kg. In summary, all these data suggest that there is not a rapamycin dose that can inhibit mTOR for epilepsy without causing any side effects, but 1 mg /kg may be the optimal dose for young rats for suppressing mTOR with relatively few side effects.