肿瘤多药耐药:机制及逆转剂

肿瘤细胞多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的产生是临床上导致肿瘤化疗失败的主要原因之一,因此寻找高效低毒的MDR逆转剂已成为肿瘤药物开发领域的热点。MDR的作用机制主要包括P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白、肺耐药相关蛋白等等。多药耐药逆转剂包括钙离子通道阻滞剂、维拉帕米及其衍生物等等。本文主要介绍了MDR的作用机制以及肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展。     

逆转肿瘤多药耐药策略进展

多药耐药MDR是肿瘤治疗的一大障碍 ,本文简述了MDR的可能机制与逆转克服策略及开发临床可应用的低毒有效逆转剂的新方向     

新辅助化疗对骨肉瘤多药耐药相关蛋白表达的影响

目的:探讨不同新辅助化疗方案对多药耐药相关蛋白在骨肉瘤组织中表达的影响。方法:采用RP-PCR技术以及免疫组化技术检测48例骨肉瘤患者在不同新辅助化疗方案实施前后多药耐药相关蛋白在mRNA以及蛋白水平的表达变化。结果:在同一新辅助化疗方案实施前后以及不同新辅助化疗方案之间,肿瘤组织的多药耐药蛋白的mRNA及蛋白表达均无显著性差异。结论:不同新辅助化疗方案的实施对骨肉瘤多药耐药蛋白表达的影响有限,其多药耐药性可能主要决定于肿瘤本身,检测多药耐药蛋白的表达有利于制定个体化化疗方案。     

肿瘤多药耐药分子机制研究进展

化疗是治疗恶性肿瘤主要方法之一。然而不幸的是,先天或获得性耐药尤其是多药耐药的发生,最终导致化疗失败。因此,深入探讨多药耐药发生的分子机制,寻找可以有效预测肿瘤化疗敏感性的分子标志物以及逆转多药耐药的分子靶点,是提高化疗效果的有效途径。肿瘤多药耐药分子机制错综复杂,本文主要从DNA损伤修复、ABC转运蛋白家族表达和功能异常、肿瘤干细胞、拓扑异构酶活性改变、上皮间质转分化、谷胱甘肽-S-转移酶表达改变、表观遗传学修饰以及缺氧等方面对肿瘤多药耐药分子机制进行阐述。     

洛贝林逆转肿瘤细胞多药耐药机制新进展

洛贝林,是从半边莲的品种中提取的一种哌啶生物碱。近期发现洛贝林可以逆转肿瘤细胞的多药耐药,可能作为新型、低毒、有效的耐药逆转剂。研究其作用机理、体内实验等将有助于探讨其临床实用性。     

洛贝林逆转肿瘤细胞多药耐药机制新进展

洛贝林,是从半边莲的品种中提取的一种哌啶生物碱。近期发现洛贝林可以逆转肿瘤细胞的多药耐药,可能作为新型、低毒、有效的耐药逆转剂。研究其作用机理、体内实验等将有助于探讨其临床实用性。     

脉冲磁场对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及分子机制研究

目的:探讨脉冲磁场(pulsedmagnetic fields,PMF)对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及其可能的分子机制.方法:生长曲线法检测PMF的细胞毒性;MTT法测定HL60、HL60/ADR的IC50及经不同参数PMF作用后HL60/ADR的IC50,计算耐药倍数和逆转倍数;流式细胞术检测PMF作用前后HL60/ADR细胞内药物蓄积变化及多药耐药相关蛋白(Multidrug Rcsistance Related Protcinl MRPI)阳性表达率的变化;RT-PCR法检测MRPI基因表达的变化.结果:单独PMF对HL60/ADR细胞的生长没有明显抑制作用,不同参数(频率为150Hz和250Hz,场强均为40mT,照射时间30min和1 h)的PMF均能有效逆转HL60/ADR的多药耐药,150 Hz/1 h作用最为明显,逆转倍数为5.891倍.PMF作用后Rh123在HL60/ADR细胞内的蓄积增加了近8.0%,而MRPl基因表达下调了68.3%,蛋白阳性表达率下调23.6%.结论:PMF能够通过下调MRPl基因和蛋白的表达.进而增加Rh123在细胞内的蓄积,功能性部分逆转白血病细胞的多药耐药.     

基因逆转肿瘤多药耐药的研究进展

化疗在恶性肿瘤的综合治疗中占有非常重要的地位,而耐药性是严重影响肿瘤病人化疗效果及生存的主要原因之一,其中多药耐药(multi-drug resistance,MDR)最具临床意义。多药耐药是指肿瘤细胞对某一化疗药物产生耐药性后,对其他化学结构及机理不同的化疗药物也产生交叉耐药性。研究表明MDR是一个多阶段发展、多因素参与的复杂事件。逆转肿瘤多药耐药是目前肿瘤化疗的研究热点之一。近年随着基础科学研究的不断深入,基因逆转肿瘤多药耐药的研究已从分子水平上,定点、多位点阻断多药耐药基因的表达,已取得一些显著的进展。本文对肿瘤多药耐药机制以及逆转肿瘤多药耐药性的相关基因做一简要综述。     

乳腺癌耐药蛋白介导多重耐药机制及其逆转

近年发现的乳腺癌耐药蛋白属于ATP结合框转运体家族中的G亚家族,是主要的介导肿瘤细胞多药耐药机制的跨膜转运蛋白之一,在临床抗肿瘤治疗中具有重要的意义。本文综述了乳腺癌耐药蛋白的结构特点、表达特征,及其介导的肿瘤细胞多重耐药机制与逆转等方面的研究进展,并展望了今后的研究方向。     

多药耐药基因与子宫颈癌化疗

肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药性是化疗失败的主要原因之一,肿瘤多药耐药的机制十分广泛,其中P-gp/mdrl介导的多药耐药是最经典的耐药机制.故本文就MDR1与宫颈癌化疗的关系进行回顾和总结.     

miRNA-194 在骨肉瘤中靶基因的预测和验证

目的:对miRNA-194在骨肉瘤中的作用机制进行探索和研究,为研究miRNA-194在骨肉瘤中的作用及可能的生物治疗提供理论依据和研究基础。方法:使用生物信息学软件对miRNA-194在骨肉瘤中可能的靶基因进行预测,并在基因水平和蛋白水平进行相应的验证。此外,利用荧光素酶基因报告实验对其靶基因(CDH2)进行DNA水平的直接验证。结果:使用生物信息学软件预测出了多个可能的潜在靶基因(367个,6014个和212个);荧光素酶基因报告实验显示野生PTEN-3'-UTR在miRNA-194上调组明显的低表达,同时下调组明显的高表达(P0.05);同时,western实验显示在蛋白水平miRNA-194直接靶向作用于CDH2(P0.05),而在m RNA水平则无明显作用(P0.05)。结论:经预测和验证,CDH2是miRNA-194在骨肉瘤中的直接靶基因,为接下来关于miRNA-194在骨肉瘤中的各项研究奠定了良好的实验基础。     

三种中药制剂Ams-11、Fw-13、Tul-17逆转肿瘤细胞多药耐药性的研究

为寻找能有效逆转肿瘤细胞多药耐药性的药物,通过体外细胞实验对Ams-11、Fw-13、Tul-17三种中药制剂逆转肿瘤细胞多药耐药性的作用进行了分析。并用流式细胞仪测定了Tul-17处理细胞后药物累积程度的变化及细胞P糖蛋白表达情况。为进一步研究体外细胞实验筛选出的多药耐药逆转剂在体内的药效学,将其中Fw13用于人白血病K562/ADR裸鼠移植瘤逆转试验。结果:在无细胞毒性的剂量范围内,该三种中药制剂均能明显增强多药耐药细胞对抗癌药物的敏感性,而且其逆转作用呈剂量依赖关系。Tu-17处理后,K562耐药细胞表达的P糖蛋白较对照降低1.5倍,对罗丹明123的累积量是对照的2.5倍。用Fw13治疗人白血病K562/ADR裸鼠移植瘤,可将硫酸长春新碱(VCR)对K562/ADR的抑瘤率从19.79%提高到86.59%,与单独VCR治疗疗效有显著性差异(P<0.05)。结果表明,这三种中药制剂可望成为肿瘤多药耐药逆转剂,在肿瘤化疗中发挥作用。     

ROR2在骨肉瘤细胞和组织中的表达及其意义

目的：研究ROR2在骨肉瘤细胞及组织中的表达情况,探讨其表达的临床意义。方法：使用Western-blotting实验方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤新鲜原发灶标本中ROR2表达情况;使用免疫组化方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤原发灶标本中ROR2表达情况并结合临床资料了解其临床意义;使用RT-PCR实验方法检验SaoS-2骨肉瘤细胞中ROR2mRNA表达情况。结果：①通过免疫组织化学的方法检测骨肉瘤标本ROR2阳性表达率为70.91%,骨软骨瘤标本ROR2阳性表达率为20.00%,两者阳性表达率有显著性差异（x2=12.73 P〈0.05）。②Western-blotting实验检测新鲜骨软骨瘤和新鲜骨肉瘤组织中ROR2蛋白表达有显著性差异（P〈0.05）。③RT-PCR实验检测SaoS-2骨肉瘤细胞株中ROR2基因表达阳性。④检测在有转移的骨肉瘤患者标本中ROR2的阳性表达率为100.00%,在无肿瘤转移患者标本中阳性表达率为61.91%,两者表达阳性率有显著性差异（x2=5.26 P〈0.05）。⑤ROR2在骨肉瘤Enneking分期Ⅰ期表达阳性率为22.22%（2/9）,Ⅱ期表达阳性率为72.73%（24/33）,Ⅲ期表达阳性率为100.00%（13/13）。Ⅰ期与Ⅱ期间有显著性差异（x2=5.66 P〈0.05）,Ⅰ期与Ⅲ期间有显著性差异（x2=11.46 P〈0.05）,而Ⅱ期与Ⅲ期间无显著性差异（x2=2.85 P〉0.05）。结论：ROR2蛋白和基因在骨肉瘤组织及细胞中有较强表达。鉴于ROR2对于骨骼发育的影响及其通过WNT信号通路调节成骨细胞增殖及分化的生物学特点使得我们怀疑ROR2可能在骨肉瘤的发生发展过程中具有一定的作用,其可能促进了骨肉瘤的发生发展及恶性生物学行为。     

DC-CIK对K562/A多药耐药基因mdr1表达的影响

目的：体外观察树突状细胞（dendritic cell,DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine inducedkiller,CIK）对K562/A细胞株多药耐药基因mdr1表达的影响。方法：采集健康人的外周血,分离出单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,在体外加入多种细胞因子经诱导生成DC及CIK细胞,以流式细胞仪检测其表面标志,将DC细胞内加入K562/A细胞裂解物致敏后,再与CIK细胞混合培养48小时。将致敏后的DC-CIK细胞与K562/A及K562分组培养后以荧光定量PCR检测其mdr1基因表达的情况,PBMC作为对照组。结果：RT-PCR中可见K562/A＋DC-CIK组中mdr1 mRNA表达较K562/A明显降低,经荧光定量PCR观察到K562/A内mdr1 mRNA表达为K562的10.27倍、K562/A/PBMC略低于未处理的K562/A（P〉0.05）,K562/A/DC-CIK细胞中mdr1 mRNA含量较K562/A、K562/A/PBMC少（P〈0.05）。DC-CIK细胞与细胞株混合培养后,mdr1基因表达较混合培养前明显降低。结论：实验数据显示DC-CIK可使耐药细胞株内mdr1基因表达下调。但K562与DC-CIK混合培养后该基因降低不明显,提示该基因在细胞中存在着基础表达,意义在于维持细胞内稳态。目前针对逆转白血病耐药的研究较少,需要多进行相关研究以拓宽细胞免疫治疗在逆转耐药领域的应用。DC-CIK是具有发展潜力的抗肿瘤方法。本实验将为下一阶段研究逆转耐药的机制提供依据,DC-CIK细胞免疫疗法有望成为逆转肿瘤耐药的新方法。     

骨肉瘤相关基因的研究

骨肉瘤为最常见的恶性骨肿瘤,多发于10-25岁青少年,恶性程度高,复发率,转移率,死亡率高。虽然骨肉瘤化学治疗的开展明显提高了骨肉瘤患者的生存率,但效果并不很令人满意。近些年来,随着分子生物学、分子遗传学的发展,人们已经越来越多的认识到,骨肉瘤的发生、发展及预后往往涉及多个基因的改变,包括致癌基因的表达及活化,抑癌基因的丢失及失活。本文通过查询近年大量国内外关于骨肉瘤癌基因方面的文献,分析与骨肉瘤发生、发展及预后密切相关的致癌基因及抑癌基因。希望通过对这些基因深入的探讨,为骨肉瘤的治疗寻找新的方向及新的潜在的治疗新靶点奠定理论基础。     

细菌对喹诺酮类抗菌药的分子耐药机制

喹诺酮类是目前临床上应用较多的抗菌药。然而,喹诺酮类耐药菌时有出现。就细菌对喹诺酮类抗菌药主要耐药机制从分子水平作一综述。(1)一般认为,喹诺酮类抗菌药通过结合细菌Ⅱ类拓扑异构酶,干扰细菌复制,而发挥抑菌作用。Ⅱ类拓扑异构酶变异时,细菌可逃脱喹诺酮类的抑菌作用。高水平的耐药由DNA回旋酶和拓扑异构酶Ⅳ同时发生变异造成。(2)细菌细胞壁是抗菌药进入的屏障。细胞壁组分脂多糖和孔蛋白的改变,可减少喹诺酮类的通透。(3)有些细菌可利用“外排泵”主动将喹诺酮类排出,降低喹诺酮类在菌体内的积累浓度。(4)细菌的其他一些代谢因素也可影响喹诺酮类的抑菌作用。     

杆状病毒p35蛋白抗凋亡作用及机理

杆状病毒入侵可以诱导昆虫细胞凋亡,作为对抗宿主防御体系的一种策略,病毒自身编码具有抗细胞凋亡活性的蛋白,如p35蛋白和IAP。杆状病毒p35蛋白是一种广泛有效的凋亡抑制因子,能在哺乳纲、昆虫纲和线虫纲中抑制细胞凋亡作用,推测其与细胞凋亡途径上保守的成分Caspase起作用。研究表明,p35蛋白正是通过蛋白酶间的相互作用和p35蛋白的剪切而起作用的。就最近几年在p35蛋白抗凋亡作用机理方面的研究作一综述 。