来源于线虫Caenorhabditis briggssae 的ω-3脂肪酸去饱和酶基因的合成及其功能分析

ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFAs)是一类被广泛研究和关注的脂肪酸,对人类及其他哺乳动物的正常发育和保持良好的健康状况极其重要,并且对于人类的多种疾病的预防和治疗亦有着明显的作用。在人和哺乳动物体内,ω-3PUFAs的含量与ω-6PUFAs(其代谢方式和功能与前者不同,通常其作用也相反)相比很低。而对于人体,无论ω-3PUFAs的过低还是ω-6PUFAs的过高都会带来极为不利的影响。所以人们一直在努力寻求提高人体中ω-3PUFAs含量的途径或者大量生产ω-3PUFAs的方法。本研究经过密码子优化后,用化学合成的方法获得了C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1,并构建了哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1-sFat1-EGFP,通过脂质体转染了CHO细胞系并对其进行抗性筛选获得稳定转染细胞株。对稳定转染sFat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的GC-MS分析表明,sFat1基因完全能够在CHO细胞中表达和发挥其ω-3去饱和酶的作用,即促使ω-6系列不饱和脂肪酸转变为相应的ω-3系列不饱和脂肪酸(从十八碳到二十二碳)。ω-6不饱和脂肪酸总量从48.97%下降到35.29%,而ω-3不饱和脂肪酸总量则相应地从7.86%上升到24.02%。ω-6多不饱和脂肪酸和ω-3多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.23下降到转染细胞中的1.47。这说明C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1的合成是成功的,试验所获得的结果为今后的进一步的研究或应用其大量生产ω-3PUFAs奠定了基础。     

来源于线虫Caenorhabditis briggssae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因

ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFAs）是一类被广泛研究和关注的脂肪酸,对人类及其他哺乳动物的正常发育和保持良好的健康状况极其重要,并且对于人类的多种疾病的预防和治疗亦有着明显的作用。在人和哺乳动物体内,ω-3 PUFAs的含量与ω-6 PUFAs（其代谢方式和功能与前者不同,通常其作用也相反）相比很低。而对于人体,无论ω-3 PUFAs的过低还是ω-6 PUFAs的过高都会带来极为不利的影响。所以人们一直在努力寻求提高人体中ω-3 PUFAs含量的途径或者大量生产ω-PUFAs的方法。本研究经过密码子优化后,用化学合成的方法获得了C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1,并构建了哺乳动物细胞表达载体pcDNA31-sFat1-EGFP,通过脂质体转染了CHO细胞系并对其进行抗性筛选获得稳定转染细胞株。对稳定转染sFat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的GC-MS分析表明,sFat1基因完全能够在CHO细胞中表达和发挥其ω-3去饱和酶的作用,即促使ω-6系列不饱和脂肪酸转变为相应的ω-3系列不饱和脂肪酸（从十八碳到二十二碳）。Ω-6不饱和脂肪酸总量从48.97%下降到35.29%,而ω-3不饱和脂肪酸总量则相应地从7.86%上升到24.02%。Ω-6多不饱和脂肪酸和ω-3多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.23下降到转染细胞中的1.47。这说明C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1的合成是成功的,试验所获得的结果为今后的进一步的研究或应用其大量生产ω-3PUFAs奠定了基础。     

ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮孕期营养干预对子代大鼠乳腺癌PCNA、ER、BRCA1表达的影响

目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮孕期营养干预对子代大鼠乳腺癌增殖细胞核抗原(PCNA)、雌激素受体(ER)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)表达的影响.方法:怀孕大鼠随机分为正常对照组、ω-3多不饱和脂肪酸组、三羟异黄酮低剂量组、三羟异黄酮高剂量组、ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮混合组.选用其雌性子代进行甲基亚硝基脲(MNU)诱导乳腺癌.其中母体为正常对照的分别为子代的正常对照组(Con)和模型组(Mod),其余分组按照母体暴露情况进行划分,分别为ω-3多不饱和脂肪酸组(ω-3PUFA)、三羟异黄酮低剂量组(LGEN)、三羟异黄酮高剂量组(HGEN)、ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮混合组(ω-3PUFA+GEN).观察其乳腺癌发生情况,同时采用RT-PCR和免疫组化检测正常乳腺组织和乳腺癌组织中PCNA、ER和BR-CA1的mRNA或蛋白表达水平.结果:ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮孕期营养干预后可以减少雌性子代MNU诱导乳腺癌的发生,与Con组比较,Mod组乳腺癌组织中BRCA1和ER mRNA表达水平上调,PCNA、ER表达量增加.与Mod组比较,ω-3PUFA组、GEN组乳腺癌组织中BRCA1、ERmRNA及PCNA、ER表达量明显降低.结论:孕期暴露于ω-3PUFA和GEN可降低雌性子代MNU诱导乳腺癌的发生,并下调PCNA、ER和BRCA1的表达量.     

不同种源黄连木种子形态特征及脂肪油品质的差异性分析

对10个种源黄连木(Pistacia chinensis Bunge)种子的形态特征、果实含油率、籽油的理化性质和脂肪酸成分及其相对含量进行了测定分析.结果表明,不同种源黄连木种子的形态特征有显著差异(P<0.05),黄连木种子的千粒莺29.22～39.90 g,种子长度4.47～5.17 mm,种子宽度4.15～4.92 mm,长宽比为1.02～1.13.不同种源黄连木果实各部分的含油率均有极显著差异(P<0.01),果实、果肉和种仁的平均含油率分别为29.61%～38.61%、40.38%～64.54%和44.81%～55.97%,以江西彭泽、陕西商洛和云南石林种源的黄连木果实含油率较高.不同种源黄连木籽油的理化性质差异极显著(P<0.01),各种源黄连木籽油的折射率为1.469 6～1.475 1、碘值为748～924 g·kg-1、酸值为9.7～79.7 mg·g-1、水分含量为0.12%～1.40%.从黄连木籽油中共检测出棕榈油酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、棕榈酸、硬脂酸和花生酸等7种脂肪酸成分,其中不饱和脂肪酸的总相对含量高达73.97%～87.41%.综合分析结果显示,江西彭泽的黄连木种子大而饱满且含油率高,可作为生物柴油油料资源的优良种源;云南石林、安徽滁州和陕西商洛的黄连木籽油的不饱和脂肪酸含量较高,可作为食用油原料资源的适合种源.     

高速匀质-微波辅助提取红松籽油工艺及其品质评价

以红松籽仁为原料,以无水乙醇为提取溶剂,优化高速匀质-微波辅助提取红松籽油的工艺,考察了匀质速度、匀质时间、液料比、微波温度、微波功率及微波时间对红松籽油提取率的影响,最终确定了红松籽油最佳提取条件为：匀质速度12 000 r·min^-1,匀质时间120 s,液料比20 mL·g^-1,微波温度60℃,微波功率700 W,微波时间50 min。在上述条件下,红松籽油最优提取率可达60.3%。利用GC-MS对得到的红松籽油的脂肪酸成分进行了分析,其主要成分为棕榈酸、皮诺敛酸、亚油酸、反-13-十八碳烯酸、顺-13-十八碳烯酸、硬脂酸,不饱和脂肪酸含量高达85.55%,其中松籽油所含有的特异性不饱和脂肪酸-皮诺敛酸含量可达13.65%。此外,对该工艺提取得到的红松籽油的抗氧化活性及理化性质进行了评估,发现红松籽油清除DPPH自由基能力强,其IC₅₀值为0.095 4 g·mL^-1。此外,红松籽油过氧化值和酸值较低,碘值较高,表明红松籽油是一种品质优良的天然油脂。     

长江下游产卵期凤鲚、刀鲚和湖鲚肌肉生化成分及能量密度

为研究产卵期凤鲚(Coilia mystus)、刀鲚(C.ectenes)和湖鲚(C.ectenes taihuensis)肌肉生化成分与能量密度,评价其营养价值并探讨生态习性差异对鱼类肌肉生化成分的影响。采集卵巢发育至Ⅴ期的样本各50尾,分别测定相关指标,实验均设置3个重复,结果取平均值。3个种群样本肌肉水分含量为74.62%～81.87%,粗蛋白占肌肉鲜重的比例为15.06%～18.08%,粗脂肪为1.65%～6.78%,粗灰分为0.98%～1.49%,能量密度为4.447～7.209kJ/g。必需氨基酸指数为70.49～76.04,不饱和脂肪酸与ω-3多不饱和脂肪酸含量分别为62.50%～72.48%与6.54%～8.39%。肌肉中矿物元素含量最高的均为钾,最低的均为铜。结果表明,凤鲚、刀鲚和湖鲚均为理想蛋白源,不饱和脂肪酸及矿物元素含量丰富,同时还富含赖氨酸、支链氨基酸、EPA和DHA等生理必需因子。生化成分对比分析结果显示,刀鲚粗脂肪含量和能量密度显著高于凤鲚和湖鲚,这种差异直接反映了洄游习性对鱼类肌肉生化成分的影响。     

瓶鼻海豚肌肉组织营养组成特征分析

分析了2只瓶鼻海豚(Tursiops truncatus)肌肉组织的营养组成。分析部位包括胸腔内肌肉、背肌、腹肌和尾肌四个部分。分析结果表明,2只海豚腹肌和尾肌粗脂肪含量较其他部位高,蛋白质及灰分在肌肉组织中的分布规律不明显。海豚不同部位氨基酸组成具有极高的一致性,含量最高的氨基酸均为谷氨酸,最低的是胱氨酸,胸腔内肌肉和背肌中必需氨基酸含量较高,但不同部位必需氨基酸占总氨基酸的比例基本相当。海豚肌肉组织均存在棕榈酸(16:0)、棕榈油酸(16:1)、硬脂酸(18:0)、油酸(18:1)、EPA(20:5ω-3)及DHA(22:6ω-3)等脂肪酸,这些脂肪酸是动物及鱼油中典型的脂肪酸。饱和脂肪酸(SFA)的总量与单不饱和脂肪酸(MUFA)的总量相近且大于多不饱和脂肪酸(PUFA)的总量。不饱和脂肪酸中ω-3/ω-6的比值与其他海洋生物相比(通常高于4,有的高达50)明显偏低。海豚肌肉组织中富含Ca、Fe及Zn、Cu、Mn、Se等微量元素。     

10个马齿苋类型的脂肪酸和草酸含量分析

该研究采用气相色谱和比色法测定了10种不同来源马齿苋茎、叶中的脂肪酸和草酸含量。结果表明:(1)脂肪酸和草酸在10个不同类型马齿苋茎、叶中的含量均表现出一定的差异显著性。(2)与叶片相比,茎中的脂肪酸含量相对较低;马齿苋茎、叶中以多元不饱和脂肪酸为主;共测出两种多元不饱和脂肪酸,分别是亚麻酸(ω-3脂肪酸)和亚油酸(ω-6脂肪酸);不同类型马齿苋叶片和茎中ω-3和ω-6脂肪酸分别占脂肪酸总量的62.71%~70.91%和9.30%~13.31%,以及26.04%~36.02%和31.61%~43.19%,‘金湖’‘南阳’马齿苋叶片和‘金湖’马齿苋茎中!-3脂肪酸含量显著高于其他类型;国产马齿苋类型,尤其是茎中的!-6/!-3比例明显小于国外马齿苋类型。(3)马齿苋茎中的草酸含量明显高于叶;除‘山东’‘Iran’和‘Pakistan’马齿苋茎中的草酸显著积累外,其他类型马齿苋茎中的草酸含量差异不显著。因此,马齿苋适宜早采收;‘金湖’和‘南阳’,尤其是‘金湖’类型的马齿苋是一种值得研究和推荐的马齿苋类型。     

新油料作物—拉马克月见草

目前英、美、加拿大、南非及阿根廷等国的医学界都在积极研究月见草的化学成分和生理作用。他们发现月见草种子油中含有大量的不饱和脂肪酸(70%),特别是一种γ-亚麻油酸,含量约8—9%,为月见草油特有成分;一致认为γ-亚麻油酸对减少胆固醇和动脉粥状硬化有显著的效果,它给心血管病患者带来了福音,还可以治疗多种硬化症,风湿性关节炎和精神分裂症等,月见草油是医学上重要用油。我国著名植物学家俞德浚教授曾撰文,介绍新油料作物月见草,并呼吁植物引种工作者将它引种。为此,我们     

大鲵油的水酶法提取及精制过程中脂肪酸组成的变化

为研究大鲵油脂肪酸的营养价值,通过水酶法提取大鲵油,采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析粗大鲵油及其精制(脱胶、脱酸、脱臭)过程中脂肪酸组成的变化以及精制草鱼油中脂肪酸组成的差异。研究结果表明:水酶法提取大鲵油的最佳条件为酶解温度60℃,pH6.5,酶添加量0.75%,酶解时间90 min。所得粗大鲵油达到SC/T 3502-2016粗鱼油二级标准。研究发现,在粗大鲵油中共检出脂肪酸20种,精制过程中脂肪酸组成基本不变,精制后大鲵油中不饱和脂肪酸和必需脂肪酸的相对含量分别达74.76%和25.17%,均高于精制草鱼油中不饱和脂肪酸(61.08%)与必需脂肪酸(18.90%)的相对含量,由此可知,当前方法对大鲵油的提取较为有效,且大鲵油营养价值较草鱼油高。     

ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮孕期营养干预对母鼠及新生子代的影响

目的:了解孕期母鼠摄入ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮对胎儿的影响。方法:采用刚怀孕的SD大鼠,进行孕期营养干预,观察营养物质对母鼠、新生子代大鼠的影响。结果:孕期营养干预对母鼠的孕期长短、产仔数量、性别比、雌激素水平影响没有统计学显著性差异,营养干预后的子代SD大鼠无出生缺陷的发生。结论:ω-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮孕期营养干预对母鼠和子代无不良影响。     

新型工业油料作物亚麻荠油脂代谢工程

亚麻荠(Camelina sativa L.Crantz)是一种新型的"低投入、环保型"工业油料作物。种子含油量达43%,其中α-亚麻酸35%。种子油不仅可做食用油和动物饲料,亦可用于加工保健功能食品,以及生物燃油和高值油脂产品。重点分析亚麻荠主要农艺性状和优异油脂性状,论述应用基因工程技术对亚麻荠油脂品质的遗传改良研究,包括长链多聚不饱和脂肪酸,ω-7脂肪酸,中、短链脂肪酸和蜡酯生物合成,以及单一脂肪酸富集途径的代谢组装。分析和讨论了亚麻荠功能基因组学研究动向以及亚麻荠产业发展前景。     

楮实子油精提前后脂肪酸的GC-MS分析比较

首次采用皂化、水解和冷冻等方法纯化楮实子油中的不饱和脂肪酸,确定较好的皂化条件为:碱含量为原油重的35%,温度为80~90℃;冷冻处理的最佳条件为:加5倍楮实子油重的丙酮溶解后,置入-8~-10℃保持48 h,去掉饱和脂肪酸,可使不饱和脂肪酸的含量由65%提高到88%。     

藏药波棱瓜籽油脂中脂肪酸的HPLC与GC—MS分析

分别采用柱前衍生-高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD)和气相色谱质谱法(GC-MS),分析了超临界CO2萃取得到的藏药波棱瓜籽油脂中脂肪酸的成分.用荧光衍生试剂1-[2-(对甲苯磺酸酯)乙基]-2-苯基咪唑[4,5-f]9,10-菲(TSPP)作为柱前衍生化试剂对39种饱和与不饱和脂肪酸标品进行衍生,经梯度洗脱实现了39种游离脂肪酸(FFA)衍生物完全分离,使用外标法定量,建立了同时测定39种脂肪酸绝对含量的方法,对超临界CO2萃取结合正交实验得到的波棱瓜籽油样品及超声波萃取与微波回流萃取油脂中的脂肪酸进行了定量分析,对比了这些样品中油酸、亚油酸、亚麻酸的质量百分含量及不饱和脂肪酸占总脂肪酸的含量.结果表明:波棱瓜籽油中油酸、亚油酸、亚麻酸质量百分含量分别高达34.65%(147.14 mg/g,下同)、22.85%(97.03 mg/g)、20.86%(88.56 mg/g),不饱和脂肪酸占总脂肪酸的79%.同时,采用GC-MS分析,对比了酸催化与碱催化的甲酯化法分析波棱瓜籽油中脂肪酸的优劣,得出了GC-MS分析波棱瓜籽油脂肪酸的条件,并讨论了液相色谱与气质联用分析脂肪酸的特点.     

猫儿屎和三叶木通种子油中脂肪酸成分的GC-MS分析

采用索氏提取法提取木通科植物猫儿屎和三叶木通种子的脂溶性成分,甲酯化处理后用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分离和鉴定其组成和含量。从猫儿屎种子油中鉴定出9种脂肪酸,占检出物总质量分数的94.67%(其中饱和脂肪酸占12.63%,不饱和脂肪酸占82.04%),主要成分为9-十六烯酸(47.22%)、9-油酸(27.13%)、棕榈酸(10.75%)、亚油酸(7.47%)和硬脂酸(1.61%)。从三叶木通种子油中鉴定出10种脂肪酸,占检出物总质量分数的99.75%(其中饱和脂肪酸占23.39%,不饱和脂肪酸占76.36%),主要成分为11-油酸(47.63%)、亚油酸(27.05%)、棕榈酸(20.14%)、16-甲基-十七烷酸(3.03%)和8-油酸(1.07%)。结果表明,猫儿屎和三叶木通种子油中脂肪酸含量丰富,在食用、医疗保健等方面具有较高的应用潜力和综合开发前景。     

樱桃李核仁油脂肪酸组成分析

采用气相色谱法及气相色谱-质谱联机技术,对樱桃李Prunus divaricata Ldb.核仁油中的脂肪酸进行了定量、定性分析.其脂肪酸组成为油酸66.3%、亚油酸25.6%、棕榈酸5.6%、硬脂酸1.4%,不饱和脂肪酸油酸和亚油酸的总量占91.9%,该油有较高的营养价值.     

辣木种子主要成分分离制备及功能应用研究进展

辣木是亚洲和非洲广泛种植的一种药食同源植物。辣木生长快、种子产量高,每公顷辣木可产种子24 t。辣木种子含油19%～47%,蛋白质10%～52%,硫代葡萄糖苷及其水解产物异硫氰酸酯6.2%～8.6%。辣木油具有抗氧化、抗菌和抗炎作用,其不饱和脂肪酸含量高达71.7%～83.1%,是优质的食用油来源。辣木蛋白具有抗菌作用,是良好的食用和饲料用蛋白源。辣木种子所含硫代葡萄糖苷及其水解产物异硫氰酸酯有抗炎、抗肿瘤和降血糖等作用。辣木种子具有较高的开发利用价值。本文综述辣木种子上述四种主要成分分离制备和功能应用的研究进展,为辣木种子综合开发利用提供参考。     

马油中游离脂肪酸分析及其主成分油酸体外淬灭单线态氧能力的研究

本文以马油为检材,进行甲酯化后利用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对其中的游离脂肪酸成分进行了定性定量分析.分析结果表明,马油中含有多种饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸,其中以棕榈酸、油酸和亚油酸的含量为最丰,油酸和亚油酸的相对含量之和超过50%.本文还利用微弱发光检测技术对马油中主成分油酸在体外淬灭单线态氧的能力进行了研究,结果显示油酸在一定浓度范围内具有较明显的抗氧化功能,马油中油酸的含量高达47.5 mg/g,由此可见,马油在一定浓度范围内也会具有抗氧化能力.     

白果油的提取工艺及其化学成分研究

采用正交实验对超临界CO2萃取白果油的工艺条件进行优化,比较超声波提取、索氏提取、超临界CO2萃取3种方式对白果油提取率的大小,用最佳提取方式分析不同品种白果中油脂的含量,并用GC-MS分析其成分.结果表明: (1)3种提取方式对白果油提取率的大小顺序为:超临界CO2萃取(添加夹带剂)＞索氏提取＞超声波提取.(2)超临界CO2萃取白果油的最佳工艺条件为:温度40℃、压力20 MPa、流速15 L/h、时间3 h并添加石油醚夹带剂,不同品种白果干粉中油脂得率为3.6%～7.11%.(3)GC-MS分析表明:从超临界萃取白果油中鉴定出17种化学成分,其中不饱和脂肪酸占85.4%;超声波和索氏提取相似,分别从提取的白果油中鉴定出10种和9种化学成分,其中不饱和脂肪酸含量分别为90.3%和90.1%;不饱和脂肪酸以十六、十八碳的为主.     

ω-3多不饱和脂肪酸治疗急性肺损伤的疗效观察

目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸对急性肺损伤(ALI)疗效。方法选择ALI患者39例,随机分为2组。对照组(19例)予以常规治疗,治疗组20例在常规治疗基础上加用ω-3多不饱和脂肪酸。对比2组治疗有效率及治疗后2、4和8 d的血气分析变化观察氧分压、氧合指数等的变化。结果治疗组有效率为70%,与对照组31.6%相比差异有统计学意义(P0.05);治疗组PaO2、氧合指数高于对照组,同时心率、乳酸水平,下降较对照组明显,差异有统计学意义(P0.05),特别是乳酸(P0.01)。结论ω-3多不饱和脂肪酸应用有助于改善ALI患者的呼吸功能及预后。