基于亚细胞定位的大豆和鹰嘴豆原生质体分离体系的建立与优化

以湘豆3号大豆和Kabuli型鹰嘴豆幼嫩叶片为材料,研究了酶解种类及配比、酶解液中甘露醇浓度、酶解液p H和酶解时间对两种豆科植物幼嫩叶片原生质体产量和存活率的影响。结果表明,湘豆3号大豆叶片在含有0.5%纤维素酶Onozuka R-10、0.8%半纤维素酶Hemicellulase、0.8%离析酶Macerozyme R-10、0.4%果胶酶Pectolyase Y-23、0.1%2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)和10%甘露醇的酶解液中(pH 6.0),27℃黑暗条件下恒温水浴振荡(45 r/min)酶解6 h,分离得到的原生质体产量和存活率最高;Kabuli型鹰嘴豆叶片在含有0.5%纤维素酶Onozuka R-10、0.8%半纤维素酶Hemicellulase、0.8%离析酶Macerozyme R-10、0.1%MES和10%甘露醇酶解液中(pH 4.8),27℃黑暗条件下恒温振荡水浴(45 r/min)7–8 h,分离得到的原生质体产量和存活率最高。通过上述件分离到的湘豆3号大豆和Kabuli型鹰嘴豆幼嫩叶片原生质体用于亚细胞定位的效果最好。     

萌芽鹰嘴豆主要异黄酮变化规律及分布研究

目的：考察鹰嘴豆萌芽过程中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素含量的变化规律及豆芽不同部位2种成分含量的差异。方法：将鹰嘴豆在22 ℃萌芽,分别于萌芽的0、1、2、3、5、7、9d取样品测定鹰嘴豆芽素A和芒柄花素含量,取萌芽7d鹰嘴豆,分别取其子叶、胚根和胚芽测定上述2种成分含量,分析2种成分含量变化规律和豆芽不同部位含量差异。 结果：鹰嘴豆芽素A 和芒柄花素含量自发芽后呈现不断增长的趋势,第3～7d增长迅速、第7～9d后增速放缓,不同部位含量大小依次为胚根＞胚芽＞子叶。结论：鹰嘴豆萌芽过程中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素含量呈不断上升趋势,成分主要集中在胚根和胚芽中。     

鹰嘴豆芽素A糖苷类衍生物的合成及其结构表征

为了改善鹰嘴豆芽素A代谢稳定性,提高其生物利用度,本文以乙酰溴代糖和鹰嘴豆芽素A为原料,采用相转移催化法在鹰嘴豆芽素A 7位羟基处引入糖苷,合成12个鹰嘴豆芽素A糖苷类衍生物,方法简单,条件温和,产率较高。产物结构通过1H NMR、13C NMR、IR和ESI-MS分析确认,为进一步对其进行生物活性研究奠定了基础。     

红车轴草提取物中总鹰嘴豆芽素类成分HPLC测定方法的研究

对红车轴草提取物中总鹰嘴豆芽素类成分测定方法进行了研究，建立了以鹰嘴豆芽素类Ononin,Sissotrin,Formononetin及Biochanin A为个标的HPLC测定总鹰嘴豆芽素类的方法和仅以Biochanin A为外标HPLC测定总鹰嘴豆芽素类的方法，两种方法所得结果基本一致。     

鹰嘴豆铁蛋白提取工艺优化研究

本研究以鹰嘴豆为原料,研究了缓冲液种类、缓冲液pH值、料液比、盐析盐种类、盐浓度等因素对鹰嘴豆铁蛋白提取率、总蛋白提取率及干重的影响。在单因素实验的基础上,以L9(34)正交实验方法优化鹰嘴豆铁蛋白提取工艺。结果表明:各因素对鹰嘴豆铁蛋白提取率的影响顺序依次为:料液比盐浓度温度pH。最优提取工艺为:料液比1∶4,浓度为70 mmol/L MgCl2盐析,温度50℃,KH2PO4-NaOH缓冲液pH 7.5,最优提取率为0.002643%。     

鹰嘴豆素A对病理脱发模型小鼠毛发生长影响的初步研究

本文初步研究了鹰嘴豆素A对毛发生长的影响和机制。实验分为空白对照组、脱发模型组、鹰嘴豆素A组和米诺地尔组。以睾酮诱导的C57BL/6小鼠为脱发模型,通过对比空白对照组与其毛长、毛重以及皮肤中毛囊的差异性来判断脱发模型是否构建成功,对比两组之间激素含量的差异以研究此脱发模型对激素的影响;对比鹰嘴豆素A组与脱发模型组毛长、毛重、皮肤中毛囊和血液中激素含量的差异性来研究鹰嘴豆素A对脱发小鼠毛发生长情况和激素水平的影响;利用体外微量酶反应体系研究鹰嘴豆素A对5α-还原酶活性的抑制作用。结果显示,与空白对照组相比,脱发模型组小鼠毛长、毛重、毛囊数目显著减少,血液中雄激素含量显著升高;与脱发模型组相比,鹰嘴豆素A组小鼠毛长、毛重、毛囊数目显著增加,血液中雄激素含量显著降低。鹰嘴豆素A具有一定抑制5α-还原酶活性,相对抑制率达到50%的浓度(IC50)为94.45±6.92μmol/L。结果表明脱发模型构建成功,鹰嘴豆素A对毛发生长具有一定的促进作用,其机制可能与睾酮的转化过程或抑制5α-还原酶活性有关。     

应用SSR标记分析鹰嘴豆种质资源遗传多样性

种质资源的遗传多样性是育种工作的基础,本研究利用SSR标记对鹰嘴豆资源进行遗传多样性分析,旨在发掘鹰嘴豆资源中丰富的遗传变异。从48对鹰嘴豆SSR引物中筛选出18对核心多态性引物,对96份不同来源的鹰嘴豆种质资源进行SSR标记的遗传多样性分析。结果表明,18对SSR引物共检测到115个等位变异,占总检测位点的52.99%,每对SSR引物可检测出3~10个等位变异,平均6.39个;平均每个位点多态信息量(PIC)为0.8107,变化范围为0.6661~0.8984。Shannon's信息指数平均为1.4769,变化范围为0.0607~1.9584。PGMA聚类结果表明,在遗传相似系数0.59处,可将96份鹰嘴豆资源分为6个类群,类群Ⅰ包含9份资源,类群Ⅱ包含2份资源,类群Ⅲ包含28份资源,类群Ⅳ包含4份资源,类群Ⅴ包含40份资源,类群Ⅵ包含13份资源。本研究对我国鹰嘴豆种质资源的评价与利用、优异基因的挖掘、育种亲本材料的选择等提供科学依据。     

不同预处理对鹰嘴豆根尖细胞染色体制片的影响

采用常规压片法,以鹰嘴豆根尖为材料,研究了秋水仙素、对二氯苯和8-羟基喹啉等预处理剂对积累鹰嘴豆根尖细胞中期分裂相的效果,并比较了不同预处理剂对中期染色体形态的影响。结果表明,3种预处理剂均能使根尖细胞的有丝分裂停留在中期,但0.1%的秋水仙素溶液进行预处理后的中期分裂相,染色体粗短,分散度不理想;0.006 mol/L的8-羟基喹啉溶液进行预处理后的鹰嘴豆中期染色体形态不清晰,边缘缺失;对二氯苯饱和水溶液4 h处理后的根尖细胞染色体背景清晰,缢痕明显,分散度较适宜,适合核型分析。     

鹰嘴豆种质资源对Ascochyta rabiei的抗性评价及遗传多态性分析

以25 个鹰嘴豆品系为试验材料,通过叶面喷雾的方式进行Ascochyta rabiei菌悬液室内外人工接种,评价不同鹰嘴豆种质资源的抗病性;同时利用RAPD方法进行基因型鉴定,采用NTSYSpc 2.10t软件对分子标记结果进行遗传相似性的统计分析并建立各品系间的亲缘关系聚类图,探讨不同鹰嘴豆品系对A.rabiei抗性与遗传多态性间的关系。通过室内和田间鹰嘴豆抗A.rabiei鉴定结果综合分析表明：在25个鹰嘴豆供试品系中,“系选 03”和“216”品系均表现出稳定抗性特性;北园春品系表现出稳定中抗特性。通过RAPD多态性引物对这25 个供试品系进行PCR扩增,共获得129 个扩增条带,其中多态性条带共有67 条,多态性比例达51.94%,遗传相似系数为0.3731-0.9254。结合抗病性和遗传多态性,经方差分析表明,本研究所采用的鹰嘴豆品系对A.rabiei的抗性强弱与其遗传相似性之间无显著相关性。     

鹰嘴豆芽素A对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌外排系统的抑制作用

【目的】MRSA外排系统是其对多种药物耐药性的主要原因,为此研究鹰嘴豆芽素A对MRSA外排系统的抑制作用。【方法】以MRSA41577为供试菌株,通过二倍稀释法、双平板法和荧光分光光度法测定鹰嘴豆芽素A对MRSA41577的抑制作用及其对外排系统的影响;通过RT-PCR检测加药前后MRSA41577外排蛋白norA的表达量;SDS-PAGE检测加药前后与MRSA41577外排相关蛋白的变化,并用液相色谱质谱仪进行鉴定确认。【结果】鹰嘴豆芽素A本身无抑菌活性,但鹰嘴豆芽素A和环丙沙星联合作用后,MRSA41577对环丙沙星的敏感性显著提高,其中40μg/mL的鹰嘴豆芽素A能使环丙沙星对MRSA41577的MIC从64μg/mL降低到8μg/mL,且作用强度与药物浓度呈正相关。经鹰嘴豆芽素A处理MRSA41577后,菌体内环丙沙星的蓄积量随着药物处理时间的增加而增加,在处理15min时与对照组相比,菌体内环丙沙星蓄积量增加了83%(P﹤0.01),与阳性对照利血平的作用效果相当。鹰嘴豆芽素A能降低MRSA41577的norA表达量,与对照组相比,鹰嘴豆芽素A和环丙沙星作用MRSA41577 16h后,norA的相对表达量降低了65%,其抑制效果优于阳性对照利血平的48%。SDS-PAGE电泳结果显示,鹰嘴豆芽素A作用MRSA4157716h后,与对照组相比菌体的蛋白谱带发生了明显的变化,其中与外排系统相关的蛋白除norA蛋白明显减少外,ABC转运体ATP结合蛋白也明显减少。【结论】鹰嘴豆芽素A是MRSA41577的外排泵抑制剂,其作用机制是通过降低MRSA41577菌体内norA基因的表达量,进而减少norA蛋白的表达量,来抑制MRSA41577对环丙沙星等药物的排出而恢复其对药物的敏感性。     

鹰嘴豆种子的化学成分研究

摘要 目的：探究维药鹰嘴豆种子的化学成分，从药效物质基础的角度为阐明鹰嘴豆的营养功能与药用价值奠定基础。方法：将鹰嘴豆75%乙醇提取物分散于水中，分别通过石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取获得不同的萃取段。对正丁醇萃取段通过正相硅胶、凝胶柱层析，以及半制备高效液相色谱进行分离纯化，通过核磁共振氢谱和碳谱对分离纯化的单体化合物进行结构鉴定。结果：从鹰嘴豆种子中分离鉴定了8个化合物，分别为：(+)松醇(1)、乙基α-D-半乳糖苷(2)、L-色氨酸(3)、β-谷甾醇(4)、β-胡萝卜苷(5)、亚油酸甲酯(6)、亚油酸(7)和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。结论：亚油酸甲酯(6)和槲皮素-3-O-βD-吡喃葡萄糖苷(8)为首次从鹰嘴豆中分离鉴定。对鹰嘴豆中之前报道的乙基α-L-半乳糖苷的化学结构确证为乙基α-D-半乳糖苷(2)。     

玉米和羽扇豆、鹰嘴豆间作对作物吸收积累Pb、Cd的影响

采用土壤盆栽试验研究玉米、羽扇豆和鹰嘴豆在不同分隔/间作方式下对Pb、Cd吸收积累的影响.试验结果表明,不同分隔/间作方式对玉米、羽扇豆和鹰嘴豆生物量变化有不同的影响.不同分隔/间作方式均显著影响玉米地下部对Pb的吸收,但是不同间作方式对玉米地上部Pb含量影响不大.塑料分隔以及玉米-鹰嘴豆间作可显著减少玉米地下部对Pb的吸收.在玉米单作中,塑料分隔和尼龙网分隔处理的玉米地下部Pb含量分别比不分隔处理时降低41.1%和33.3%.在不分隔处理时,玉米-鹰嘴豆间作的玉米地下部Pb含量仅分别为玉米单作和玉米-羽扇豆间作时的53.9%和63.8%.不同分隔方式对玉米地下部Cd含量影响较大,但是不管是间作还是分隔方式均对玉米地上部Cd含量影响不大.同时,还讨论了不同分隔/间作方式对羽扇豆和鹰嘴豆Pb、Cd含量的影响.作物根际土壤溶液Pb含量随着作物的生长而不断降低,但Cd含量却不断提高.不同分隔/间作方式对作物根际土壤溶液Pb、Cd含量也有一定影响.     

树锦鸡儿、柠条锦鸡儿、小叶锦鸡儿和鹰嘴豆干旱适应能力比较

对1年生豆科作物鹰嘴豆Rupali品种和Almaz品种以及多年生植物树锦鸡儿、柠条锦鸡儿和小叶锦鸡儿叶相对含水量和叶水势对逐渐干旱胁迫的响应进行了分析,比较了两类植物的干旱适应能力。结果表明鹰嘴豆叶相对含水量随叶水势的下降线性下降,树锦鸡儿、柠条锦鸡儿和小叶锦鸡儿叶相对含水量在叶水势分别下降到-2.4MPa、-2.5MPa和-1.5 MPa之前没有下降,之后随水势的下降线性下降。树锦鸡儿、柠条锦鸡儿和小叶锦鸡儿这种叶相对含水量下降的滞后性表明该类植物叶具有较硬而弹性较差的细胞壁,使得植物在干旱胁迫下叶具有良好的保水能力。鹰嘴豆叶具有的最低水势为-4.5MPa,对应的土壤相对含水量为14％,锦鸡儿植物叶具有的最低水势可达-6.7MPa,对应的土壤相对含水量为6％,说明锦鸡儿植物比鹰嘴豆具有更好的干旱适应能力,这种能力可能取决于锦鸡儿植物体内大量渗透调节物质的累积。     

山黧豆160年研究历程及进展

在全球范围内曾多次发生因过量食用山黧豆导致神经中毒事件,使得国内外对于山黧豆的种植和利用存在一定的误解和偏见,山黧豆的优良农艺价值和潜在功能食品利用价值也受到一定限制。但山黧豆适应性强、分布范围广,是全球气候变化条件下农业可持续发展和地力维持的优选作物,在食品安全、生态文明建设和乡村振兴新形势下,进一步研究和挖掘利用这一古老的优良作物具有重要的战略意义。山黧豆相关研究报道可追溯到1861年,距今已有160年的历史。在同行学者的不懈努力下,山黧豆基础研究及种质资源利用等方面均取得了显著的阶段性成果。该文系统回顾了山黧豆研究160年以来的发展历程,依托历史文献进行了梳理和分析。首先,基于山黧豆神经活性物质β ODAP的分离和鉴定、神经山黧豆中毒机制的探索、β ODAP生物合成途径解析等重要研究节点将整个山黧豆研究进程划分为山黧豆中毒因素的探索、神经山黧豆中毒机理解析和神经山黧豆中毒及β ODAP生物学功能的再认识等三个阶段。其次,总结了山黧豆在毒理学研究、种质资源利用、品质改良基础研究等方面取得的重要进展。特别是以兰州大学为代表的中国学者在β ODAP的分析检测、生物合成途径、山黧豆生理生态学研究及种质资源利用等方面进行了深入探讨,确立了中国在国际山黧豆研究中的主流地位。最后,针对目前山黧豆分子生物学基础研究相对滞后、种质资源缺乏系统利用等问题进行了展望,提出了未来的重点发展方向,为山黧豆种质资源的进一步深入挖掘和应用提供参考。     

新疆棘豆属棘豆组的修订

通过对大量标本和文献的研究,并结合野外居群的观察分析,澄清了《中国植物志》棘豆组中存在的分类学问题,对新疆棘豆属棘豆组植物的分类进行修订,确认产于新疆的棘豆属棘豆组植物8种、1变型,并重新编制了新疆棘豆属棘豆组的分种检索表,以及各种的分类学处理及地理分布.研究结果表明:少花棘豆归并在宽瓣棘豆中,其中少花棘豆为新异名;冰河棘豆应改为球花棘豆;冰川棘豆的学名更正为Oxytropis proboscidea;将黑萼棘豆并入长茎棘豆组中.此外,棘豆组增加了3个类群:等瓣棘豆、伊朗棘豆和奇台棘豆,其中等瓣棘豆和伊朗棘豆为新疆新记录种,白花球花棘豆为新变型.     

世界食用豆主要出口国国际竞争力的比较分析

通过国际市场占有率、贸易竞争指数等指标对世界主要食用豆出口国阿根廷、澳大利亚、加拿大、中国、美国的食用豆国际竞争力进行了测算和比较分析,探讨了影响我国食用豆国际竞争力的主要因素,最后提出了提升中国食用豆国际竞争力的若干对策。研究发现：中国食用豆在20世纪90年代具有极强的国际竞争力,之后国际竞争优势逐步弱化;加拿大和澳大利亚的食用豆出口具有很强的国际竞争力且竞争优势继续上升,阿根廷食用豆的国际竞争力也很强;美国食用豆的国际竞争力则相对较弱而且略有下降。影响我国食用豆国际竞争力的主要因素包括生产成本上升导致缺乏价格优势、产品品质不够一致、国外食用豆发展生产对中国国内市场带来冲击等。要提升我国食用豆的国际竞争力,需要加大对食用豆生产的科技投入力度、建立商品生产出口基地、提高商品品质,适度规模化等。     

鹰嘴豆种子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与鉴定

为了寻找具有药物作用的天然胰蛋白酶抑制物,采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析(DEAE-纤维素52)及Sephadex G-100凝胶层析等方法, 从鹰嘴豆种子中分离出一种鹰嘴豆胰蛋白酶抑制剂（CPTI）. 研究表明：CPTI对胰蛋白酶有较强的抑制作用,抑制率达80%,而对胰凝乳蛋白酶抑制作用较弱,抑制率为32%, 对胃蛋白酶、木瓜蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶均无抑制作用; 用SDS-PAGE测得CPTI近似分子质量为25.7 kD; CPTI具有较高的热稳定性,在100 ℃下加热60 min,对胰蛋白酶活性仍保持78%抑制率; Lineveaer-Burk作图得知该抑制剂属竞争性抑制类型. 动力学测定显示,来自鹰嘴豆中的CPTI对胰蛋白酶的抑制作用常数(Ki)为3.99×10^-7 mol/L.     

离子液体微波辅助提取降香檀叶中鹰嘴豆芽素A和染料木素

以降香黄檀可再生资源——叶子为原料,利用离子液体微波辅助提取技术对鹰嘴豆芽素A和染料木素进行提取。通过单因素实验,3因素3水平的BBD(Box Behnken design)实验,对提取条件进行优化,确定了离子液体微波辅助提取降香檀叶中鹰嘴豆芽素A(biochanin A)和染料木素(genistein)的最佳提取工艺条件：1.00 mol·L^-1［C₄MIM］Br,提取温度为56℃,液固比18∶1,提取时间为11 min,提取功率300 W。在最佳提取条件下,鹰嘴豆芽素A和染料木素平均提取率分别可达1.598和0.939 mg·g^-1。     

中国食用豆贸易演变特征及现状分析

中国是食用豆生产和消费大国，也是全球重要的食用豆贸易大国。本文总结了2000年以来我国食用豆贸易的演变特征，分析了2019年我国食用豆贸易的总体情况。研究表明，我国已从食用豆净出口国转变成净进口国，进出口产品结构差异较大，国际贸易竞争优势呈逐年下降态势，进口市场集中率较高，出口市场集中率逐年增加。2019年食用豆出口价量齐减，进口价量齐增；食用豆出口以芸豆、绿豆为主，进口以豌豆为主；食用豆出口集中在周边国家和地区，加拿大是最大进口来源国。未来需要从加快食用豆优势区域建设、以提升单产和提高品质为主攻方向、加强深加工技术研发和推广等方面入手，提高我国食用豆国际竞争力。     

国产丽豆属2个种的比较形态及其生态学特性和地理分布

对国产丽豆属间断分布的 2个种丽豆 Calophaca sinica 和新疆丽豆 C.soongorica 进行了形态、地理分布及其生态学特性的研究 ,其中包括叶表皮微观结构、花粉和果皮形态、种皮特征以及分布现状、生态学适应性等 ,结合古地理、气候、植被等的变迁 ,探讨了丽豆属的起源、形态分化及其环境解释以及现代分布式样的成因 ,并对其资源利用与保护方面的有关问题提出了相关措施和建议