大花蕙兰与墨兰种间杂交子房培养研究初报

大花蕙兰与墨兰种间远缘杂交是培育具香味、易开花、早开花、抗性强的大花蕙兰品种的有效途径之一。本研究以大花蕙兰为母本,墨兰为父本进行种间杂交,共设计三个杂交组合。结果显示,同一组合子房不同离体时间培养萌发率差异明显,且不同组合间最适宜子房培养的离体时间有所差异。三个杂交组合最适宜的子房离体时间分别为授粉后90 d、120 d及100 d,萌发率分别为80.0%、80.0%及60.0%。     

大花蕙兰与兰属植物种间杂交研究

进行了大花蕙兰、墨兰、建兰、纹瓣兰、兔耳兰等兰属植物的种间远缘杂交实验.在52个杂交组合中,86.5%的杂交组合具明显的子房膨大和果荚发育,但授粉4个月后未变黄落果的杂交果仅占组合数32.7%,经胚胎培养获得植株的杂交组合只占组合数的19.2%.大花蕙兰×墨兰与墨兰×大花蕙兰的杂交成功率有较大的差异.     

大花蕙兰与兰属植物种间杂交研究

进行了大花蕙兰、墨兰、建兰、纹瓣兰、兔耳兰等兰属植物的种间远缘杂交实验。在52个杂交组合中, 86.5%的杂交组合具明显的子房膨大和果荚发育, 但授粉4个月后未变黄落果的杂交果仅占组合数32.7%, 经胚胎培养获得植株的杂交组合只占组合数的19.2%。大花蕙兰×墨兰与墨兰×大花蕙兰的杂交成功率有较大的差异。     

组培大花蕙兰

目前,在花卉市场上深受人们喜爱的大花蕙兰,就是由虎头兰、碧云兰和西藏虎头兰等大花种类通过人工杂交培育出来的新品种。由于大花蕙兰在自然条件下增殖率较低,采用分根法进行无性繁殖,其繁殖速度缓慢。为此,我们将通过组织培养技术,以提高大花蕙兰的增殖率,具体方法如下：１．植体的处理取大花蕙兰茎尖或侧芽,用洗衣粉刷洗表面,经自来水冲洗干净后,去掉外层苞片,露出芽体,再用７５％的乙醇浸泡３—４秒钟,放入０．１％的升汞溶液中杀菌６—７分钟,然后用无菌水冲洗数次。在无菌的条件下截取长约５毫米的茎尖,放入０．０５％…     

大花蕙兰的栽培管理技术

本文从大花蕙兰生长所需的生态环境、营养基质及组培苗特性等方面,对大花蕙兰的栽培技术进行讨论,并提出组培苗各发育阶段的栽培措施。     

大花蕙兰原生质体分离纯化

以大花蕙兰的叶片、根为试材,分析不同酶液组合、摇床转速、酶解温度、材料酶液比、酶解时间等因素对其原生质体分离的影响。大花蕙兰叶片、根经过90 min质壁分离预处理后,在温度28 ℃,于摇床上50 r·min^-1振荡酶解6 h,叶、根分别在酶解液为纤维素酶2.0%＋果胶酶0.1%＋离析酶0.2%＋崩溃酶0.2%和纤维素酶2.0%＋果胶酶0.3%＋离析酶0.1%＋崩溃酶0.1%中得到最高产量的原生质体。     

大花蕙兰的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　大花蕙兰 (Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ ｇｒａｎｄｉｆｌｏ ｒｕｍ)。2　材料类别　茎段。3　培养条件　 (1 )原球茎诱导增殖培养基 :ＭＳ +6 ＢＡ 0 .5ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) +ＮＡＡ 1 .0。 (2 )原球茎分化培养基 :ＭＳ +6 ＢＡ 2 .0 +ＮＡＡ 1 .0 +香蕉泥 1 5 0 ｇ·Ｌ- 1 。 (3 )生根培养基 ,1 /2ＭＳ +ＮＡＡ1 .0。ｐＨ 5 .6～ 5 .8,蔗糖 3 0 ｇ·Ｌ- 1 、琼脂 5 ｇ·Ｌ- 1固化培养 ,培养温度 (2 5± 2 )℃ ,环境湿度 6 0 %～80 % ,光照度 2 5 0 0ｌｘ ,每天光照 1 2ｈ。4　生长与分化情况4.1　启动培养　取大花蕙兰茎段 ,流…     

大花蕙兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称　大花蕙兰 (Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｆａｂｅｒｉ )。2　材料类别　幼芽、幼根。3　培养条件　以ＶＷ和 1 2ＭＳ为基本培养基。诱导圆球茎培养基 :(1 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 1 .2 ＣＭ 1 5 0ｍｌ·Ｌ-1 0 .2 %活性炭 ;(2 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3 ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 2 .0 0 .3 %ＣＨ ＣＭ 1 5 0ｍｌ·Ｌ-1 0 .2 %活性炭。圆球茎增殖培养基 :(3 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3 ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 0 .2 0 .2 %活性炭。壮苗生根培养基 :(4) 1 2ＭＳ ＧＡ1 .0 ＮＡＡ 0 .1 1 5 %香蕉泥 ;(5 ) 1 2ＭＳ…     

大花蕙兰的快速繁殖技术研究

应用组织培养和快速繁殖技术对大花蕙兰开展了茎尖培养、试管苗微繁和成苗培育的研究,结果表明,有利于原球茎增殖的培养基为ＭＳ＋６ＢＡ１．０ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／ｌ＋２％～３％蔗糖;有利于原球茎分化的培养基为ＭＳ＋６ＢＡ０．４ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋２％～３％蔗糖。四年生以上试管苗可以开花,为其大规模工厂化育苗提供了科学的依据。     

大花蕙兰高频再生体系的研究

以大花蕙兰无菌苗假球茎为材料诱导丛生芽。适宜诱导的培养基为MS 6.4g·L~(-1)琼脂 0.5%活性炭 2.0mg·L~(-1)6- BA 0.1mg·L~(-1)NAA 30g·L~(-1)蔗糖。其芽长至2～3cm时,转入生根培养基,适宜的生根培养基为MS 6.4g·L~(-1)琼脂 0.2mg·L~(-1)6-BA 0.5mg·L~(-1)NAA 0.5mg·L~(-1)生根粉(ABT),生根率为100%。根长2～4cm时炼苗移栽,成活率可达95%。     

墨兰花朵发育和衰老生理的初步研究

目的：了解墨兰花朵的发育和衰老生理,为控制黑兰花期提供科学依据。方法：测定不同发育期的墨兰花瓣的干重／鲜重、呼吸速率、过氧化物酶活性及可溶性糖含量。结果：黑兰花朵在由花蕾发育到衰老的过程中,上述指标呈现出一定的变化规律。     

大花蕙兰类原球茎形态发生的组织学研究

以大花蕙兰类原球茎发生发育不同阶段的培养物为试材,采用石蜡切片法对其进行组织学研究。结果表明,类原球茎形成过程中,表层薄壁细胞首先经脱分化恢复分生能力,形成愈伤组织,随后在其表面形成瘤状突起--类原球茎;类原球茎继续发育,在其周围形成多个不规则突起,并进一步发育形成新的类原球茎;而原来的类原球茎开始进入器官分化阶段,逐渐形成完整的小植株。根据观察,类原球茎起源可能存在两条途径:体细胞胚胎发生和器官发生。     

大花蕙兰多倍体的高效诱导

以大花蕙兰‘红瀑布’无菌苗丛芽为材料、秋水仙素为诱变剂,采用不同的处理浓度、时间诱导大花蕙兰体细胞加倍。通过形态学和细胞学观察、统计等方法对其进行倍性鉴定。结果表明：秋水仙素浓度0.05%,处理时间24 h的条件下,诱导率高达28.2%;多倍体苗外部形态、叶绿体数目、气孔数目和大小与二倍体差异大,加倍后的细胞核明显变大,染色体倍数增加。     

广东四个墨兰品种的核型研究

研究了广东四个墨兰品种金嘴墨兰、银边墨兰、企剑黑墨和企剑白墨的染色体数目和核型。结果表明,企剑黑墨和企剑白墨的染色体数目为2n=40,为二倍体,核型公式分别为：2n=2x=40=30m＋10sm和2n=2x=40=2M＋36m＋2st;金嘴墨兰和银边睾兰的染色体数目为2n=41,为非整倍体。4个墨兰品种的染色体结构主要由中部着丝粒染色体组成,除银边墨兰为1B型外,其它均为2B型。     

大花蕙兰基因组DNA提取及RAPD反应条件探索

用SDS、CTAB和改良CTAB法分别提取大花蕙兰叶片基因组DNA,发现以改良CTAB法提取的DNA纯度高,产率也较高。以5’-GGTGCTCCGT-3(’BA440)为随机引物,并以大花蕙兰品‘种金杯(’Cymbidiumhybridiumcv.HiroshimaGoldenCu“pSunnyMoon”)的DNA为模板,对RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA)反应体系进行了优化研究,结果表明,25μl反应体系中,Mg2 、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:2.0mmol/L、1.0U、0.20μmol/L、25ng和0.20mmol/L。扩增程序优化为:94℃预变性4min;94℃变性0.5min,37℃退火1min,72℃延伸1min,40个循环;最后72℃延伸7min。     

菌根真菌感染墨兰与建兰根状茎对呼吸速率和几种氧化酶活性的影响

用从野生建兰部分离的菌根真菌P15菌株感染墨兰Cymbidium sinense和建兰Cymbidium ensifolium的根状茎后,使寄主的呼吸速率、细胞色素C氧化酶、过氧化物酶活性明显增高,而感染前后IAA氧化酶活性变化不明显。两个品种相比较,建兰根状茎的呼吸速率、细胞色素C氧化酶和过氧化物酶活性均比墨兰的高,但墨兰的根状茎IAA氧化酶活性则高于建兰。     

大花蕙兰四倍体的离体诱导和鉴定

采用组织培养方法研究了秋水仙素处理对大花蕙兰类原球茎增殖、分化和四倍体诱导的效应.结果表明,秋水仙素处理明显抑制类原球茎的增殖和分化,提高类原球茎褐变率和死亡率;在试验浓度和时间范围内,秋水仙素浓度越高,处理时间越长,抑制作用越强,解除抑制作用所需的继代次数越多.所有秋水仙素处理均能诱导出四倍体,但不同处理的四倍体诱导率不同,当处理浓度为0.05%、时间为5 d时,四倍体诱导率最高,为23.7%.二倍体及其四倍体的气孔保卫细胞长度和气孔密度均存在极显著的差异.四倍体植株比二倍体矮,茎部较粗壮,株型紧凑,叶片颜色浓绿、质地变硬.秋水仙素处理和组织培养相结合是创建大花蕙兰多倍体的有效方法.     

墨兰的解剖学研究

运用石蜡切片法和扫描电镜技术,对墨兰营养器官和生殖器官进行了研究。结果表明墨兰叶片表面具较厚的角质层。气孔多为四轮列型,分布在下表皮,叶肉没有海绵组织和栅栏组织的分化,但叶尖部和叶中部中脉附近的叶肉细胞常伸长,类似栅栏组织细胞,平行脉,外韧型维管束,在假鳞茎中,维管束散生在基本组织中,根具根被,皮层和维管柱三部分,花被各部分基本结构均相似,唇瓣和合蕊柱的表皮为腺表皮,具花柱道,三心皮雌蕊,一室,侧膜胎座,四合花粉,表面无纹饰,蒴果。