布拉酵母菌联合奥美拉唑阿莫西林克拉霉素治疗顽固性幽门螺杆菌感染的临床研究

目的 探讨布拉酵母菌联合奥美拉唑阿莫西林克拉霉素三联疗法对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)顽固性感染的治疗效果.方法 将120例H.pylori顽固性感染患者分成两组,分别采用奥美拉唑的三联疗法和布拉酵母菌联合奥美拉唑三联疗法治疗14 d.结果 两组患者治疗14d后,奥美拉唑三联组和布拉酵母菌联合奥美拉唑三联组的H.pylori清除率分别是94.6％和96.6％,两组间差异无统计学意义;在不良反应方面,奥美拉唑三联治疗组中发生16例,明显高于布拉酵母菌联合奥美拉唑三联组的5例(P＜0.05).结论 布拉酵母菌联合奥美拉唑三联治疗方案不仅具有良好的H.pylori清除效果,而且不良反应少,是治疗顽固性H.pylori感染患者比较好的方法.     

幽门螺杆菌PCR检测的研究进展

幽门螺杆菌是急性、慢性胃炎、和十二指肠溃疡的致病菌,并可能与胃癌有关,因此对该菌进行检测在临床上具有重要价值,本文仅就ＰＣＲ应用于该菌检测的标本处理,引物设计,扩增步骤、扩增产物的分析和ＰＣＲ诊断的临床意义等做简要介绍。     

口腔中幽门螺杆菌PCR检测方法的建立

全世界大约有50%的人口感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp),Hp感染容易造成慢性胃炎、消化性溃疡、低度恶性胃MALT淋巴瘤及胃癌,对人类造成严重的危害。为寻求一种简便、准确、非创伤性的方法用于口腔中Hp的检测,本研究建立了口腔中幽门螺杆菌的PCR检测方法,并对建立的PCR方法的敏感性、特异性进行分析,并应用于检测唾液样品和牙菌斑共50份。结果显示,50份样品中,阳性率为82%。结果表明,本研究建立的口腔中Hp的PCR检测方法特异性强、敏感性高,可以用于临床上Hp诊断的重要参考。     

229例慢性胃炎患者幽门螺杆菌培养及耐药情况

目的了解慢性胃炎患者H.pylori感染及其耐药情况,为临床治疗提供参考。方法慢性胃炎患者胃镜活检标本培养分离H.pylori,对分离的H.pylori采用纸片扩散法进行耐药性检测。结果229例患者分离出97株H.pylori;H.pylori分离阳性率为42．36％（97／229）,其中男性分离率为43．79％（67／153）,女性分离率为39．47（30／76）;92株H.pylori对抗生素的耐药性分别为：甲硝唑8．7％,克拉霉素7．6％,阿莫西林1．1％、呋喃唑酮1．1％,阿奇霉素4．4％,左氧氟沙星0％。结论慢性胃炎患者H.pylori感染率较高,但与性别、年龄无关;慢性胃炎H.pylori对常用抗生素敏感,建议采用左氧氟沙星、阿莫西林、呋喃唑酮进行治疗。     

原位杂交及原位PCR检测幽门螺杆菌

本研究建立了检测幽门螺杆菌的原位杂交和原位ＰＣＲ技术,采用ＰＣＲ掺入的方法标记原位杂交的生物素探针,６份ＨＰ阳性胃活检组织冰冻切片杂交均为阳性,６份阴性对照组织为阴性。９／１２份ＨＰ阳性对照组织石蜡切片杂交阳性,２份阴性对照切片为阴性。３份阳性对照猫胃粘膜冰冻切片杂交也是阳性。原位ＰＣＲ的引物来自ＨＰ的１６ｓｒＲＮＡ基因,在扩增过程掺入生物素基因。４／４例ＨＰ阳性人胃粘膜冰冻切片原位扩增阳性,２／     

幽门螺杆菌23s rRNA基因突变与克拉霉素耐药性关系的研究

目的:通过对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)23s rRNA基因突变位点分析,观察23s rRNA各突变点与克拉霉素耐药的关系.方法:分离培养HP、提取DNA、扩增其23s rRNA基因片段及测序;运用Clustalw软件进行序列比对找出突变点.选用GenBank中已全基因组测序的35株HP,根据其mutY、ppa、efp和ureI4个管家基因建立Neighbour-joining树,根据进化树结果将35株HP分为欧非和东亚菌群;观察各突变点与菌群分布的关系.结果:与耐药有关的A2143G突变率为32.8％,T2182C突变率为90.6％但与耐药无关,其碱基分布具有菌群差异:东亚菌群以c碱基为主,欧非菌群以T为主(P＜0.05),其他可能与耐药有关的各位点分别为A2223G(6.25％)、T2190C(1.6％)、C2195T(1.6％).结论:青岛地区HP克拉霉素耐药率为32.8％并表现为23s rRNA基因A2143G突变,而2182位点突变是由于菌群分布差异导致的与克拉霉素耐药无关.     

小剂量克拉霉素三联疗法短疗程治疗儿童消化性溃疡幽门螺杆菌感染的临床研究

目的研究小剂量克拉霉素三联短程疗法对儿童消化性溃疡幽门螺杆菌(Hp)感染的临床疗效、根除率及不良反应。方法经胃镜检查确诊为消化性溃疡及幽门螺杆菌脲酶快速诊断试验(HPUT)为Hp感染的患儿75例,男57例、女18例。分3组进行对比性研究。A组为大剂量短疗程组、B组为小剂量短疗程组、C组为小剂量长疗程组。小剂量克拉霉素为15 m g/(kg.d),大剂量为30 m g/(kg.d),分2次口服。短疗程为1周,长疗程为2周。结果临床疗效A组有效率为96.6%,B组有效率为90.9%,C组有效率为91.6%,3组间差异无显著性(χ2=0.75,P>0.05)。Hp根除率A组为93.1%、B组为90.9%、C组为95.8%,3组间差异无显著性(χ2=0.75,P>0.05)。不良反应发生率A组为27.6%、B组为4.6%、C组为29.2%。B组与A组之间(χ2=4.57,P<0.05)、B组与C组之间(χ2=4.84,P<0.05)差异均有显著性。结论小剂量克拉霉素、奥美拉唑和阿莫西林三联1周疗法是根除儿童消化性溃疡Hp感染的理想方案,其根除率高、副作用少、耐受性好、疗程短、顺应性好。     

幽门螺杆菌感染治疗的新靶位

抗生素治疗幽门螺杆菌感染面临着细菌耐药性的威胁,研究该细菌未知基因的功能,寻找新的抗菌靶,将为预防和治疗幽门螺杆菌感染开辟新途径。将机体适应性免疫应答运用于幽门螺杆菌感染的治疗,亦有广阔前景。     

利用杆状病毒表达幽门螺杆菌cagA基因

幽门螺杆菌cagA基因克隆到杆状病毒表达系统的pBlueBacHis2A转移载体中,将重组质粒pBlueBacHis2A-CagA与亲本病毒Bac-N-blue DNA共转染Sf9细胞,以空斑法纯化获得的重组杆状病毒.经PCR法鉴定后进行扩增培养,SDS-PAGE和Western bolt检测结果证实所表达的蛋白为CagA蛋白,间接ELISA分析表明,表达产物可与Hp感染者血清发生特异性的免疫反应.     

利用杆状病毒表达幽门螺杆菌cagA基因

幽门螺杆菌cagA基因克隆到杆状病毒表达系统的 pBlueBacHis2A转移载体中 ,将重组质粒 pBlueBacHis2A CagA与亲本病毒Bac N blueDNA共转染Sf9细胞 ,以空斑法纯化获得的重组杆状病毒。经PCR法鉴定后进行扩增培养 ,SDS PAGE和Westernbolt检测结果证实所表达的蛋白为CagA蛋白 ,间接ELISA分析表明 ,表达产物可与Hp感染者血清发生特异性的免疫反应     

改良幽门螺杆菌抗原检测试剂盒检测粪便幽门螺杆菌抗原的临床评价

目的 评估改良幽门螺杆菌抗原检测试剂盒检测粪便幽门螺杆菌抗原（Helicobacter pylori stool antigen,HpSA）的准确性以及临床应用价值。方法 采用随机、双盲、双验证和与13C呼气试验（13C-UBT）对比的方法,对门诊175例接受13C-UBT检测的患者,采用最新研制出的一种改良幽门螺杆菌抗原检测试剂盒（胶体金法）检测粪便幽门螺杆菌抗原,以13C-UBT检测结果为诊断H. pylori感染的“金标准”,并将两者进行对比研究,所有检测结果均拍照存档,采用随机、双盲和双验证法,以期客观真实地评价改良幽门螺杆菌抗原检测试剂盒检测粪便幽门螺杆菌的效果。结果 改良幽门螺杆菌抗原检测试剂盒检测HpSA敏感度为90.48%,特异度为90.00%,Youden指数为80.48%,Kappa值为0.799;HpSA检测ROC曲线下面积为0.902±0.027,与完全无诊断价值的机会线下面积0.50相比,差异有统计学意义（P=0.000）;Spearman相关系数r=0.800,P=0.000。结论 改良幽门螺杆菌抗原检测试剂盒能准确检测H. pylori感染,其操作简便,可作为非侵入性诊断H. pylori感染筛查以及流行病调查的一种方法,将来有望成为患者家庭自查幽门螺杆菌的一种方法     

幽门螺杆菌耐甲硝唑基因分型与耐药性关系研究

目的：了解幽门螺杆菌（Hp）对甲硝唑的耐药株状况,探讨耐甲硝唑基因分型与耐药性的关系。方法：分离培养Hp,以纸片扩散法检测Hp对甲硝唑的耐药性,再用PCR方法扩增甲硝唑耐药基因,用RFLP方法进行基因分型,最后比较基因型与耐药性的关系。结果：武汉地区人群Hp对甲硝唑耐药率为67％,耐药株基因型与耐药性有相关性。结论：可以以基因型鉴定Hp对甲硝唑的耐药性,此方法,稳定可靠。     

幽门螺杆菌的iceA基因

本文主要论述幽门螺杆菌iceA基因的2个等位基因iceA1和iceA2的结构及与疾病的关系,并简要介绍iceA与cagA和vacA的相关性。     

用PCR快速检测胃活检标本中的幽门螺杆菌

本文用ＰＣＲ对１１６份胃活检标本进行幽门螺杜菌（ＨｅｔｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｒｉＨｐ）检测,总阳性率７１．５５％（８３／１１６）,胃溃疡、十二指肠溃疡和胃炎的阳性率分别为８７．５％（１４／１６）、８６．９６％（２０／２３）和６３．５１％（４７／７４）,同时用尿素酶法作参照,其总阳性率为５８．６２％（６８／１１６）,上述疾病分别为４３．７５％（７／１６）、５６．５２％（１３／２３）和６２．１６（４６／７４）。结果表明ＰＣＲ能快速、敏感特异地检出ＨＰ,这对研究ＨＰ在胃、十二指肠疾病中的致病作用、传播途径及疗效观察具有重要意义。     

耐药幽门螺杆菌的治疗新策略

幽门螺杆菌是一种常见的胃肠道细菌,与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的发生密切相关。既然WHO已经将幽门螺杆菌归类为I类致癌物,那么根除幽门螺杆菌就显得尤为重要。然而,由于抗生素耐药、抗生素在胃低pH环境中活性降低以及在胃内停留时间不足,幽门螺杆菌的根除率正在逐年降低。本文通过回顾幽门螺杆菌的多重耐药情况,总结了有效的非抗生素抑制或者清除幽门螺杆菌的方法和策略,如益生菌、抗菌肽、纳米技术及中药等,并探讨相关的杀菌抑菌机制,为提高幽门螺杆菌的根除率及减少胃癌发生风险提供了新的理论依据和治疗策略。     

幽门螺杆菌抗生素耐药机制研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染可引起消化性溃疡、胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌。随着抗生素耐药性的问题越来越严重,耐药机制的研究也不断深入。分子检测方法,尤其是核酸检测技术,可高效、快速、准确地检测幽门螺杆菌抗生素耐药基因及突变,对幽门螺杆菌感染的临床治疗发挥重要的指导作用,同时也可对幽门螺杆菌抗生素耐药性进行大规模及时有效监控。本文讨论了关于幽门螺杆菌抗生素耐药机制并着重总结了相关耐药基因及突变。     

SYBR Green实时荧光定量PCR快速检测口腔幽门螺杆菌

目的建立一种快速、灵敏、特异的鉴定幽门螺杆菌实时荧光定量PCR方法。方法利用SYBR Green实时荧光定量PCR反应体系对口腔幽门螺杆菌进行检测。鉴定结果与临床常规鉴定方法相比较,评价其敏感度、特异度及重复性。结果通过48例样品的检测,结果显示实时荧光定量PCR法检测标本的鉴定结果与常规PCR鉴定方法的结果对比,特异度为100%,敏感度为100%;最小能检测到102个拷贝数的重组质粒;批内重复试验和批间重复试验结果均与常规鉴定方法结果相符。结论实时荧光定量PCR法鉴定口腔幽门螺杆菌,特异度和敏感度高,重复性好,且快速、简便。该方法有望成为检测口腔幽门螺杆菌感染的一种快速有效的方法。     

幽门螺杆菌的分子指纹法研究进展

分子指纹法包括：细菌全细胞蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱分析法,染色体ＤＮＡ限制酶酶切图谱分析法,ｒＲＮＡ基因限制酶酶切图谱分析法。分子指纹法能敏感表达幽门螺杆菌（ＨＰ）基因变异,从菌株水平准确鉴定ＨＰ,并应用于ＨＰ感染复发,耐药性,致病机理和分子流行病学等重要问题的研究中。     

应用ELISA法检测人群中幽门螺杆菌抗体及血清流行病学分析

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对307例自然人群和228例胃病患者的血清进行了抗幽门螺杆菌(HP)抗体的检测,同时与尿素酶试验和涂片镜检结果比较。结果:自然人群中HP抗体阳性率为14.66％,不同性别、职业、民族间HP抗体的阳性率无差异。各年龄组间HP抗体阳性率有随年龄增加而升高趋势。胃病患者HP抗体阳性率为61.41％,GMT为1:430.53,明显高于自然人群的14.66％,GMT 1:15783,两者差异显著。ELISA法与尿素酶试验和涂片镜检结果存在相关关系。认为ELISA法结果可靠,可用于人群普查及HP感染的诊断。     

幽门螺杆菌检测技术研究进展及展望

幽门螺杆菌是(Helicobacter pylori,H. pylori)是导致人类多种胃肠疾病的主要病因,通过多种毒力因子导致各种疾病的发生和发展。鉴于目前幽门螺杆菌缺少商业化疫苗且多重耐药性问题日益严重,临床上对其根除效果不佳,因此,精准的检测技术是预防幽门螺杆菌感染的关键,也是评估感染后治疗效果的重要手段。幽门螺杆菌的检测方法主要包括尿素呼气试验、快速尿素酶试验、粪便抗原检测、血清学检查、内镜检查、组织学病理检查、聚合酶链式反应及细菌培养,每种方法在临床上皆存在优点与局限性。目前,对于幽门螺杆菌检测的“金标准”尚无统一定论,因此本文重点综述当前应用的幽门螺杆菌检测技术,分析其优点和局限性,并指明精准、快速且便捷的检测技术在流行病学调查等方面具备的优势,旨在为临床和研究提供科学的参考依据。