加工产品中转基因玉米Bt11成分实时荧光PCR定量(性)检测

实验在玉米自身基因和外源基因的边界序列之间设计了具有品种和品系特异性的引物和探针 ,并以实时荧光PCR技术 ,建立了加工产品中转基因玉米Bt1 1成分品系鉴定检测和定量检测的方法。实验对加热条件和时间对检测转基因成分的影响作了探讨 ,并检测了部分市售食品和饲料。检测结果发现 ,加热时间温度越高、时间越长 ,对转基因成分定量检测的影响越大 ;在所检测的样品中可以检测出转基因玉米Bt1 1成分 ,有些样品还同时检出其他转基因成分。本研究实验建立的方法 ,可以用于加工产品中转基因成分的定量检测 ,也可以用于定性检测 ,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。     

环介导等温扩增技术在转基因水稻Bt63检测中的应用

采用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)对转基因水稻Bt63进行应用检测。研究表明,环介导等温扩增技术检测转基因水稻Bt63特异性好,并且灵敏度达到0.01%(W/W),具有简便、快速、准确等特点,可以在进出口检验检疫、食品安全监测等领域进行应用。     

转基因在玉米中的遗传分离与整合特性的研究

用ＰＣＲ和ＤＮＡ分子杂交方法研究了转基因Ｂｔ在３种不同方法获得的８个转化体后代中的遗传分离、整合性质及其稳定性,结果表明：（１）转基因在大多数转化体后中呈简单的孟德尔遗传;在Ｒ１至Ｒ２代,部分家系中转化体比例偏低,有的发生转基因丢失,但到Ｒ３代以后均趋于正常的孟德尔遗传方式,在群体中固定下来;（２）转基因在不同转化体中的整合类型有一定差异,但整合的位点和拷贝数都较少,且多呈串联或紧密连锁的整合;（     

试纸条技术在转基因农作物检测中的应用

简述了试纸条技术的基本原理及试纸条技术在转基因农作物检测中的优势与不足 ,并对试纸条技术对转基因农作物检测的应用进行了展望。     

转基因农作物检测技术及其应用与发展

常用的转基因检测方法可分为两个方向,一是以检测外源基因为目标,如多聚酶链式反应分析法(PCR),二是以检测外源蛋白为目标,如酶联免疫分析法(ELISA)。此外,近年来,随着世界各国对转基因生物安全问题的日益关注,还涌现出了一批新的检测方法,如微阵列分析法(microarray),色谱分析法(chroma-tography),表面等离子共振(surfaceplasmonresonance,SPR)生物传感器分析法以及近红外线光谱分析法(nearinfraredspectroscopy,NIR)等。将对各种转基因检测方法的原理、特点及研究现状做一个扼要介绍。     

转基因烟草检测技术研究

本研究建立了转基因烟草常用调控基因35S启动子和nos终止子,标记基因npt-II和目的基因TMV－CP的PCR检测技术,并用轻构建的pUC18质粒提纯的35S启动子和nos终止子基因经地高辛标记后制成了基因探针,建立了检测35S启动子和os终止子的分子杂交技术,杂交试验证明,PCR扩增的35S启动子和nos终止子为特异性扩增产物,此项检测技术具有快速,特异,敏感,经济以及可重复性强等优点。     

Bt 毒蛋白基因在转基因抗虫植物中的应用

1　引言世界上每年因虫害而造成的农产品损失估计为 13 %。在我国 ,水稻每年因虫害减产 10 %以上 ,小麦减产近 2 0 % ,棉花产量损失达 2 0 %～3 0 % ,如果加上这些农产品在贮藏过程中因虫害而造成的损失则更大。目前 ,农作物保护主要依赖于施用农药 ,从长远利益来看 ,将来必须发展绿色环保型农业 ,以减少能源和化学药剂的投入量 ,并且不会产生药剂残留、环境污染以及害虫的抗药性等问题。基因工程技术的发展克服了常规育种的不足 ,开辟了植物抗病虫害育种的新时代。抗植物虫害的基因有很多 ,目前经常使用的主要有 3种 ,即豇豆胰蛋白酶抑制剂…     

转基因玉米Bt176液相芯片检测方法的建立

为建立转基因玉米Bt176的液相芯片检测方法,根据已公布的转基因玉米Bt176外源插入基因CaMV35S启动子序列,外源基因3’端与玉米基因组DNA连接区序列,同时以玉米特异Zein内源基因序列为参照,利用Primer Premier5.0等软件设计特异性引物和探针。将探针与荧光编码微球偶联后,与PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Bio-plex 200)检测荧光信号。检测结果显示,该方法具有高特异性及灵敏度,各条探针之间无交叉反应,最低检测限可达0.01%。初步建立了检测转基因玉米Bt176的液相芯片技术,为其他转基因作物的快速高通量检测提供了借鉴和经验。     

醛基片PCR芯片技术在转基因玉米品系检测中的应用研究

针对9种转基因玉米品系Bt11、TC1507、Bt176、MON810、MON863、GA21、NK603、Mon88017、MIR604进行醛基片PCR芯片高通量检测和条件优化。特异性和灵敏度试验表明,醛基片PCR芯片的特异性较好,能应用于转基因玉米品系鉴定。而该方法应用于转基因检测的灵敏度为5%,有待于后续试验进一步优化。     

转基因技术在玉米遗传育种中的应用

玉米转基因育种是通过基因转移方法创造玉米新种质或新品种。将转基因技术与玉米常规育种技术相结合,能尽快地培育出符合育种目标的新品种,带来了育种水平的提高、创新和突破,加快了玉米育种进程。论述了转基因技术在玉米育种中的主要应用方法、研究进展及应用现状。随着转基因技术的飞速发展及其研究的日趋成熟,转基因技术在拓宽玉米种质资源、提高杂交种的抗逆性、抗病虫性、提高产量和品质等方面将发挥更大的作用,应用前景广阔。     

玉米粉中转基因Bt176玉米的定量检测

使用根据转基因Bt176玉米中的外源基因CryIA(b)和内源基因Zein设计的引物和TaqMan荧光探针和ABIPRISM 770 0定量PCR仪对玉米粉中Bt176玉米的含量进行了定量检测 ,建立了Bt176玉米参照样品CryIA(b)和Zein的Ct值之差与样品中Bt176玉米含量之间的标准曲线和线性回归方程 ,并对进口的未知样品进行了检测     

转基因抗虫玉米发展现状与展望*

转基因抗虫玉米的商业化种植,成为大幅提高农业生产力的主要推进器之一。近年来,转基因抗虫玉米产业化规模不断扩大,有效控制了靶标害虫的发生危害,降低了化学杀虫剂的施用,为粮食安全与农民增收提供了重要保障。介绍了全球转基因抗虫玉米的发展现状,分析了与转基因抗虫玉米种植相关的生态问题,并提出了推进转基因抗虫玉米在我国产业化的相关建议。     

主要转基因作物研究现状及其产业化进展

经过12年的产业化发展,转基因作物研究取得了较大进展。相关外源基因的转入使抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆、品质改良和功能性等作物相继问世。转基因大豆、玉米、棉花和油菜已经大面积种植,产生了极大的经济效益。2007年全球转基因作物的种植面积达到1．143亿hm^2。综述了主要转基因作物研究现状及其产业化进展,并对我国转基因作物产业化应解决的问题进行了论述。     

The Occurrence of Antibiotic Resistance Genes in Taq Polymerases and a Decontamination Method Applied to the Detection of Genetically Modified Crops

Different antibiotic resistance (AR) genes, such as Bla, Tet and NPTII, contaminate commercially available Taq polymerases. The specificity of the AR gene PCR can be increased when using a restriction enzyme-based decontamination of polymerase. The elimination of Taq polymerase contamination allows the use of PCR tests to screen seeds (corn) and processed food for the presence of genetically modified organisms (GMO) based on the detection of AR genes. Without a decontamination procedure for AR genes, PCR screening tests should be interpreted with caution. Revisions requested 1 November 2005; Revisions received 28 November 2005     

转基因作物发展及应用概述

21世纪是生物技术的世纪,加快转基因技术研发已成为世界各国增强核心竞争力的战略决策。介绍了全球转基因作物的研发、种植及应用状况。农业生物技术产业进入全球化布局的新阶段,各国纷纷规划和布局,以期在渐趋垄断的技术与市场中争得先机。经过20年的发展,我国在生物技术研发领域已取得长足进步,抗虫棉大面积推广,产生了良好的经济效益和社会效益。但受消极舆论环境等因素的影响,推动其他转基因作物产业化的进程缓慢。我国是一个人口大国,粮食供需矛盾突出,大力发展生物技术产业是我国未来的必然选择。我国一方面要在确保安全的基础上坚持走自主创新之路;另一方面政府要建立及时的信息披漏机制,营造良好的舆论环境,从国计民生出发,在科学的基础上自主决策,推动我国生物技术产业的健康、有序发展。     

HRCA技术在转基因植物检测中的应用

超分支滚环扩增技术（Hyperbranched rolling cycle amplification, HRCA）在近几年中逐渐引起人们的注意,并越来越多的用于基础研究和实际检测中。在本文中我们对该技术在转基因植物检测中的应用情况作了较全面的探索;根据4种转基因植物中常用的外源基因或DNA片段设计了4条锁式探针（Padlock probe）,利用质粒pKK2328中的一段序列作为锁式探针中的共同连接部分,并根据该共同的连接部分序列设计一对通用的HRCA引物;利用同位素标记的锁式探针对HRCA反应中的连接一步的特异性研究表明,只有当锁式探针和相应的检测靶DNA同时存在于连接体系中时,锁式探针才能被有效地进行连接,从线性分子变为环型分子,在没有相应靶DNA存在时锁式探针仅以线性形式存在;连接时间的研究表明,如果所检测的靶DNA是质粒或较短的DNA片段时,较短的连接时间（5～10min）就可以取得理想的最终检测效果,如果检测的靶DNA是复杂的植物基因组DNA时,连接时间需要较大程度的延长（30～60min）才能取得理想的最终检测结果;HRCA的反应时间研究表明,较长的反应时间可以明显增加最终产物的量;对Bst DNA聚合酶大片段酶用量的研究表明,在其它条件不变的情况下酶的用量可以在较大的范围内变化（0.5u～4u）而不影响最终检测结果;在上述研究的基础上,对转基因烟草进行实际检测,取得了与预期一致的理想结果。为了提高检测效率,仿效复合式PCR（Multiplex PCR,MPCR）的原理采用复合式HRCA（Multiplex HRCA, MHRCA）方法对转基因烟草进行检测,并利用反向点杂交进行结果分析,取得同预期完全一致的结果。我们的研究表明HRCA方法完全可以用于转基因植物的检测,而且其使用比MPCR技术更方便,效率更高。