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1.
与光系统Ⅱ颗粒结合的对DTT敏感的蛋白酶的纯化和性质 总被引:1,自引:0,他引:1
菠菜光系统Ⅱ颗粒的1mol/LNaCl抽提液经butyl-Toyopearl650M疏水层析和DEAE-SephadexA-50柱层析分离得一种对DTT敏感的蛋白酶。用SDS-PAGE和Superose12凝胶过滤测得该酶的分子量为37kD,其为单体酶。该酶可降解18kD和24kD水溶性蛋白质,分别产生13.2kD、12kD、10.5kD和23kD、22kD、20kD片段,最适pH为8.0,对NaCl不敏感,对DTT和β-Me敏感。抑制实验表明该酶不属丝氨酸类蛋白酶。 相似文献
2.
纯化酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示一条蛋自带,其亚基分子量为39.8kD。用SephacrylS-200凝胶过滤测得全酶的分子量为79.4kD,该酶由两个相同亚基组成。其表观Km为12mmol/L,Vmax为99.5mg还原糖mg-1proteinh-1。 相似文献
3.
甘薯叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质 总被引:11,自引:0,他引:11
纯化酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示一条蛋白带,其亚基分子量为39.8kD。用Sephacryl S-200凝胶过滤测得全酶的分子量为79.4kD,该酶由两个相同亚基组成。其表观Km为12mmol/L,Vmax为99.5mg还原糖mg^-1protein h^-1。 相似文献
4.
人胃腺苷脱氨酶的分离纯化及性质研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、免疫亲和层析、SephadexG-100凝胶柱层析从人胃组织中提取出腺苷脱氨酶。酶纯化19324倍,比活力为5797U/mg蛋白。提取酶液经PAGE、SDS-PAGE和等电聚焦只呈现一条区带。测得该酶的分子量为41.2kD,等电点为pH4.8,氨基酸组成分析表明该酶由388个氨基酸残基组成,N端氨基酸为精氨酸。酶的最适pH为6.5,pH小于5.0或大 相似文献
5.
非洲爪蟾孵化酶的纯化及其部分化特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以GST-VUS.2抗体和卵黄膜为检测手段,采用凝胶过滤和离子交换等方面将非洲爪蟾(Xenopus laevis)孵化酶纯化了90倍以上,并研究了其酶活性和生化特性。实现发现,孵化酶分子量为60kD,有很强的蛋白酶活性和卵黄膜溶解活性;它很不稳定,在纯化时极易降解为40kD分子,40kD分子没有卵黄膜溶解活性,但仍有很强的蛋白酶活性。40kD分子中能只代表60kD分子中的蛋白酶功能区,而丢失了 相似文献
6.
柑叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
唐云明 《Acta Botanica Sinica》1995,(8)
柑(Citrusreticulata Blanco)幼叶中存在高活性的酸性蔗糖酶。经硫酸铵盐析、DEAE-琼脂糖离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶层析纯化,活性回收率6.4% ,纯化倍数179.2 倍。纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示1 条蛋白带,其亚基分子量40 kD。用SephacrylS-200 凝胶层析法测得分子量为80 kD。推测该酶由两个相同亚基构成。以蔗糖为底物测定该酶的表观Km 为1.6×10- 2 m ol·L- 1,Vm ax为100 m g 还原糖·m g- 1蛋白质·h- 1。最适pH 5.0,酸碱稳定区在pH 4.5—5.5 之间。最适温度55℃ 相似文献
7.
利用PEG分级,DEAE离子交换层析,Bhue Sepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化直二氏藻甘油三磷酸(G-3-P)脱氢酶(EC1.1.1.8)得到比活为12.6u/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4-20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDS-PAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶 相似文献
8.
番茄系统感染TMV(tobacco m osaicvirus)诱导叶β-N-乙酰氨基己糖苷酶活性升高。番茄叶胞外提取液经冰冻干燥浓缩、- 20℃丙酮沉淀、CM-Sephadex C-25 离子交换层析,PBE 94(Polybuffer Exchanger 94, Sigm a)聚焦层析和Sephadex G-150 凝胶层析纯化,获得纯化的β-N-乙酰氨基己糖苷酶。凝胶层析测得该酶的分子量为145 kD,SDS-PAGE测得该酶的分子量为75 kD,证明该酶由两个亚基构成。该酶能水解p-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)和P-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷(pNP-β-D-GalNAc)两种底物,能被过碘酸氧化,Schiff试剂染色。在感染TMV 的番茄叶片中,β-N-乙酰氨基己糖苷酶活性大部分位于胞外 相似文献
9.
以Wistar大鼠肝为材料,确立了一个简便的纯化鼠肝DNA甲基化酶的程序,包括:细胞的超声破碎、去内源核酸、硫酸铵盐析、磷酸纤维素亲和层析、DEAE-SephadexA-50柱层析及SephadexG-150凝胶过滤。用不同浓度聚丙烯酰胺凝胶电泳和孔梯度凝胶电泳检测,纯化后的酶已达电泳均一,且酶的比活力提高112倍。以聚丙烯酰胺孔梯度凝胶电泳测得其天然酶的分子量为365kD,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶有两种亚基,大亚基为95kD,小亚基为85kD,推测该酶由两个大亚基和两个小亚基组成。 相似文献
10.
枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的纯化及性质研究 总被引:8,自引:0,他引:8
经硫酸铵分级沉淀、超滤浓缩、阴离子交换层析和凝胶过滤层析,由枯草芽孢杆菌(Bacilussubtilis)BM9602培养滤液得到了常规凝胶电泳一条带的中性β-甘露聚糖酶.该酶具有与其它已知同类酶相类似的性质,但用SDS-PAGE测得该酶分子量为37kD;用聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测得等电点pI为4.9. 相似文献
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沙门菌CWDMs脂代谢检测 总被引:9,自引:2,他引:7
采用毛地黄皂苷敏感试验和菌细胞胆固醇、甘油三脂及胆碱酯酶定性与定量分析法,检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌经L 型变异后形成的细胞壁缺陷突变株(CW DM )的脂类代谢活性,了解这些CW DM 变异的性质和探讨细菌细胞壁缺陷突变与细菌演变的关系。结果表明,沙门菌CW DM s 具有显著的胆固醇和甘油三脂代谢活性、对毛地黄皂苷高度敏感并且还具有与白色念珠菌相似的胆固醇和甘油三脂的含量,但未能检出胆碱酯酶活性。CW DM s返祖菌丧失了脂类代谢酶类和胞浆膜不含胆固醇,恢复了与其亲代细菌型相似的代谢特征。提示在沙门菌天然即存在有与脂类及胆固醇代谢相关的基因,细胞壁的缺陷导致这些脂类及胆固醇代谢基因活化,以致 CW DM s 能够表达固醇和甘油三脂代谢活性和胞浆膜含有胆固醇 相似文献
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沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
采用氨基氨利用生长试验和谷丙转氨酶(GPT)、谷草转酶(GOT)、乳酸脱氨酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、α-闳丁酸脱氢酶(α-HBD)、γ-谷志肽酶(γ-GT),酸性磷酸酶(ACP)定性与定量分析法,检测伤CWDMs变异的特点及其机制,探讨CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌CWDMs在仅含蛋氨酸或脯氨 相似文献
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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的CWDMs及其宁代细菌型和伤寒杆菌粗糙型的乳酸脱氢酶(LDH)同功酶,以了解沙门菌CWDMs生物氧化的特点和机制,探讨CWDMs变异的性质。结果表明,伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的细菌型及伤寒杆粗糙型在聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出相同的4种具有不同泳动速率的LDH同功酶,但CWDMs仅显示2种LDH。CWDMs的2种LDH同功酶与其亲代细菌型及伤寒杆 相似文献
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光照对蕨类植物配子体假根向重力性的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
对8种蕨类植物配子体假根向重力性反应的研究结果表明,除卷柏Selaginella tamariscina Spring配子体假根无向重力性反应并且其生长方向与光照方向无关外,其它7种的配子体假根均有向重力性反应,并且假根的向重力性反应在配子体发育初期,因光照的方向不同而异,表现为负向光性。随着配子体发育至片状体阶段,光对其向重力性反应的影响逐渐减弱,而重力的影响增强。在蕨类植物配子体发育初期,光对 相似文献
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省沽油科叶解剖结构的分类学意义 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对国产省沽油科 Staphyleaceae 4属植物叶的解剖结构进行了详细的比较研究。结果表明, 叶解剖结构特征在属间的区别较明显, 特别是瘿椒树属 Tapiscia 有着几乎与其他三属截然不同的独特性状。根据已有的孢粉学, 花、节及木材的解剖等方面的资料, 我们支持Тахтаджян(1987)将瘿椒树亚科分出而建立瘿椒树科 Tapisciaceae 的观点。瘿椒树属为我国特有属, 根据我们对采自不同产地的材料观察, 居群间的差异很小, 其可能仍为一单种属。 相似文献