实验Beagle犬感染寄生虫的常规检查报告

Beagle犬已经在科研领域得到广泛应用。我场的Beagle犬种群也逐渐增加 ,产量扩大 ,已用于多项实验研究。了解我单位Beagle犬体内外寄生虫的感染情况及感染程度 ,有利于提高实验犬的质量 ,加强饲养管理。同时 ,常规、定期、随机检查 ,对掌握Beagle犬的生长发育等状况也很有必要。1　材料和方法本所饲养场Beagle犬 1 2 0只。分为 3组 ,第 1组为 2～ 4月龄幼犬 ,体重 2～ 4kg ,共 30只 ,♂♀各半 ;第 2组为 5～ 7月龄待发犬 ,体重 6～ 8kg ,共 66只 ,2 9♂ 37♀ ;第 3组为 1 2～ 36月龄以上种犬 ,体重 9～1 1kg ,共 2 4只 ,8♂ 1 6♀。体外寄…     

不同粗蛋白含量日粮对Beagle犬生产力的影响

用4种不同粗蛋白含量的日粮饲喂60条2～3岁Beagle犬种犬(♀48,♂12)和200条(♀,♂各半)1～8月龄生长犬,对种母犬2～3胎的主要繁殖性能和生长犬的生长性能(体重月平均增加)进行测定.结果 表明饲喂粗蛋白含量水平为28.6%的日粮,受试母犬表现出优良的繁殖性能:配怀率98.5%、平均产仔数6.3条/胎、仔犬成活率90.3%;1～8月龄生长Beagle犬饲喂粗蛋白含量水平为32.8%为最佳,平均月增重为1.41 kg.说明不同粗蛋白含量日粮对Beagle犬生产力有明显的影响.     

Beagle犬的基础数据

目的检测不同性别年龄段Beagle犬的血液学和血生化指标,解剖称量分析8～12月龄Beagle犬脏器重量、系数等基础数据,为实验用Beagle犬的应用与研究提供参考数据。方法采用HITACHI-7020自动生化分析仪和SWELAB—AC920EO血球自动分析仪,检测了3000多只次不同性别和年龄的健康Beagle犬的血液学和血生化数据;解剖128头Beagle犬,称量及计算正常Beagle犬各内脏器官重量及系数。结果和结论获得正常Beagle犬的血液学RBC、HCT、MCV、RDW、HGB、MCH、MCHC、PLT、WBC、LYM、MID、GRA等指标正常值及标准差,血生化ALT、AST、ALP、TP、ALB、BUN、CREA、GLU、TCHO、TBILI、TG等指标正常值及标准差;获得Beagle犬心脏、肝脏、脾脏、肺脏、左右肾、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、睾丸、前列腺、子宫、卵巢等内脏器官的重量和系数正常值及标准差。     

成年Beagle犬生物学指标及心电图检测值统计分析

目的 测定正常Beagle犬生理指标,比较不同性别间各参数的差异,以建立健康成年Beagle犬相关生理学参数的基础正常值.方法 根据国家(成都)中药安全性评价中心制定的标准操作规程(SOP)并参照国内外相关资料,对200只4～8月龄Beagle犬的心电图、血压、呼吸、血液学及血液生化等指标进行检测.结果 200只犬均为窦性心律,雌性犬心率较雄性快(P<0.01);血液学指标中RBC、Hb及HCT值雌性均低于雄性,差异有统计学意义(P<0.01);血生化指标中雌性犬高于雄性的是BUN(P<0.05);雌性犬低于雄性的是TP、ALB、GLU、TC及K+的含量(P<0.05或P<0.01).结论 在本实验室条件下,雌雄Beagle犬之间部分指标有统计学差异,本结果可为Beagle犬的实验提供正常值参考.     

Beagle犬正常血液学指标及血清生化指标测定

选用普通级健康Beagle犬270只(雄性135只,雌性135只),6～8月龄,体重7～9 kg,前肢内侧隐静脉采血,使用日本西森美康(Sysmex)全自动五分类血球仪及配套试剂和日本奥林巴斯(OLYMPUS-2700)全自动生化分析仪及配套试剂,分别测定血液学指标和血清生化指标.数据经统计分析,得出了雄性、雌性Beagle犬血液学指标和血清生化指标正常参考值的均值及标准差;19项血液学指标雌雄间差异不显著(P＞0.05);4项血液学指标:平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)、网织红细胞(Ret)与国内相关报道差异显著(P＜0.05);1项血清生化指标:碱性磷酸酶(ALP)雌雄间差异显著(P＜0.05),其余9项血清生化指标雌雄间差异不显著(P＞0.05).建立了本研究所繁育饲养基地Beagle犬血液学指标和血清生化指标的正常参考值范围,为医学研究提供参考基础数据.     

经颈静脉途径制备Beagle犬心脏记忆模型

目的经颈静脉途径应用心室起搏的方法制备心脏记忆犬模型。方法 8只普通级成年健康Beagle犬经腹腔麻醉后,Seldinger’s法穿刺颈外静脉成功后送入心内膜起搏电极,将电极头端固定于右室心尖部,近端连接于脉冲发生器。起搏频率设置较犬窦性心律时的基础心率快15%,保证起搏器连续起搏。结果连续起搏1周后所有动物均成功制备为心脏记忆模型。建模后犬的心率、呼吸、体重与建模前比较,无明显改变;所有模型组犬起搏前心电图均为窦性心律,起搏1周后出现心脏T波记忆,在下壁导联以及胸前导联均出现T波倒置,停止起搏后,心脏T波记忆逐渐消失;模型组犬与正常组犬心肌病理相比,无明显改变。结论经颈静脉途径应用心室起搏法建立心脏记忆犬模型的方法,具有手术简单,创伤小,诱发方式与临床相似等优点,为深入展开心脏记忆的机制研究奠定基础。     

体位改变对Beagle犬心脏自主神经控制的影响

目的观察体位改变对Beagle犬心脏自主神经控制的影响。方法利用大动物无创生理遥测技术,监测清醒活动状态下雌性Beagle犬在静态姿势（lying、standing、sitting、hanging）和运动（walking）姿势下的心电图（ECG）,并用HRV功率谱分析其自主神经功能。结果在静态姿势下,Beagle犬RR间期（RRI）、RR间期的标准差SDNN（SDNN）、相邻RR间期差值平方和的均方根RMSSD（RMSSD）、相邻R-R间期差值〉50 ms的窦性个数占心搏总数的百分比pNNabs（50）（pNNabs（50））、TP总功率（TP）、VLF极低频功率（VLF）、标准化高频功率（HFnorm）均明显高于运动状态（P〈0.05,P〈0.01）,而心率（HR）、标准化低频功率（LFnorm）和低频功率/高频功率（LF/HF）平衡指数则明显低于运动状态（P〈0.05,P〈0.01）。结论不同体位姿势在静息状态下以迷走神经活动兴奋为主,相反,在运动状态下以交感神经活动兴奋为主;体位姿势改变能引起心率的变化,必然影响心脏自主神经控制能力,其主要取决于迷走神经活动强弱有关,且导致LF/HF均衡性的破坏。     

不同繁育饲养设施对Beagle犬生产性能的影响

目的探索不同繁育饲养设施对Beagle犬主要生产性能的影响。方法使用两种不同Beagle犬繁育饲养设施（设施Ⅰ、设施Ⅱ）对母犬产仔状况、仔犬初生重、60 d离乳犬只存活率、60 d离乳犬只体重、1～6月龄犬只体重月增长等生产性能进行了比较研究。结果两种设施比较母犬产仔状况,仔犬初生重无差异（P〉0.05）;设施Ⅱ比设施Ⅰ的60 d离乳犬只存活率高18.4%,差异极显著（P〈0.01）,60日龄离乳犬只体重平均多（0.62±0.13）kg,差异极显著（P〈0.01）;1～6月龄犬只体重月增长平均多0.29±0.14 kg,差异近显著（P=0.08〉0.05）。结论设施Ⅱ优于设施Ⅰ。     

羟基喜树碱脂质体多次静脉滴注对Beagle犬的毒性

为了研究羟基喜树碱脂质体连续4周静脉滴注给予Beagle犬后产生的重复给药毒性作用,采用薄膜分散法制备羟基喜树碱脂质体,将30只Beagle犬按照体质量和性别随机分为生理盐水对照组、羟基喜树碱脂质体(0.3、0.6和1.2 mg/kg剂量)组、市售羟基喜树碱注射液1.2 mg/kg对照组,每组6只,雌雄对半,静脉滴注,每日1次,连续给药2 d停药2 d,共连续滴注4周,恢复期为2周。临床观察,检测体质量、摄食量、心电图、临床病理及组织病理学各项指标,全面评价Beagle犬重复给药后产生的毒性反应。结果发现：制备的羟基喜树碱脂质体重现性较好,其剂量相关性地引起Beagle犬食欲不振、呕吐、流涎、体质量减轻、稀便腹泻等消化道毒性反应;在0.6和1.2 mg/kg剂量下引起Beagle犬血液学、血生化部分指标的异常改变,对红细胞和粒细胞有明显的抑制作用;病理结果显示,1.2 mg/kg羟基喜树碱脂质体对给药部位(皮肤)、腺垂体、大肠、胸骨、睾丸有一定损伤作用。同等剂量的注射用羟基喜树碱脂质体和市售羟基喜树碱注射液毒性表现及程度相当。注射用羟基喜树碱脂质体毒性靶器官主要为消化道和睾丸,但毒性可...     

特异性抗体效价检测技术概述

特异性抗体效价是生物制品活性(浓度)的重要标志,通常采用生物学方法来测定,并以抗体与其相应抗原反应产生的、可观察到的标准免疫反应来表示。抗原抗体间除发生特异性反应外,还会产生交叉反应,从而使特异性抗体效价的检测出现偏差,这在实际应用中亟需避免。特异性抗体效价检测技术是疾病诊断、特异性免疫球蛋白制备和疫苗评价等领域的关键技术,在生物制品质量控制及医学临床实践中意义重大。本文对抗体效价检测的常规技术及其研究进展进行简要综述,并对这些技术的特异性、灵敏性、检测周期及应用情况等方面进行比较分析,以期对特异性抗体效价检测技术有一个系统全面的认知,有利于研究人员在实际应用中选择合适的技术,共同推动抗体检测技术的发展。     

犬瘟热病毒（CDV）ELISA检测方法的建立与应用

目的建立犬CDV抗体ELISA检测方法。方法培养vero细胞,接种CDV病毒,制备vero正常抗原和CDV特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验。结果正常、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为1∶32 000、10μg/mL和1∶8 000;正常、特异抗原批内变异系数分别为9.1%和5.8%,批间平均变异系数分别为8.8%和6.6%;检测灵敏度为1∶2 560;与犬细小病毒（CPV）、犬肝炎病毒（ICHV）均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。可用于犬CDV抗体的检测。     

Occurrence of Pneumocystis carinii in Canine Distemper

Pneumocystis carinii is a eukaryotic opportunistic pathogen causing pneumonia (PCP) in immunosuppressed patients. It is best known in human medicine as a pathogen of AIDS pa-tients and in immunosuppressed transplant and cancer patients (Waltzer 1993).     

Real-time TaqMan RT-PCR快速检测犬瘟热病毒方法的研究

按照犬瘟热(CDV)N基因序列,设计合成了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了Real-time荧光定量RT-PCR技术,对细胞培养物、肝脏、肺脏、脑、脾脏、淋巴结以及鼻腔拭子等组织病料中的CDV进行了特异性检测和敏感性试验。同时,利用建立的Real-time荧光定量RT-PCR方法与常规RT-PCR以及韩国BIOINDIST生产的BIT RAPID CDV检测试剂盒对57份临床样品进行了检测。结果:用20pmol/mL的引物浓度各1uL和20pmol/mL的探针浓度0．3uL,获得的荧光信号最强,曲线平滑。敏感性高,可检测到1．24×10—3ng/uL的病毒RNA;特异性强,与NDV、AIV、NiPV等RNA病毒不发生交叉反应。试验重复性的变异系数(CV)分别为2．3%、2．5%和4．2%;与常规RT-PCR和BIOINDIST生产的BIT RAPID CDV检测试剂盒相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点。     

Real—time TaqMan RT—PCR快速检测犬瘟热病毒方法的研究

按照犬瘟热（CDV）N基因序列,设计合成了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了Real—time荧光定量RT—PCR技术,对细胞培养物、肝脏、肺脏、脑、脾脏、淋巴结以及鼻腔拭子等组织病料中的CDV进行了特异性检测和敏感性试验。同时,利用建立的Real—time荧光定量RT—PCR方法与常规RT—PCR以及韩国BIOINDIST生产的BITRAPIDCDV检测试剂盒对57份临床样品进行了检测。结果：用20pmol／mL的引物浓度各luL和20pmol／mL的探针浓度0.3uL,获得的荧光信号最强,曲线平滑。敏感性高,可检测到1.24×3ng／uL的病毒RNA;特异性强,与NDV、AIV、NiPV等RNA病毒不发生交叉反应。试验重复性的变异系数（CV）分别为2．3％、2．5％和4.2％;与常规RT—PCR和BIOINDIST生产的BITRAPIDCDV检测试剂盒相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点。     

灵长类动物感染犬瘟热

通过介绍犬瘟热流行病学特点,结合犬瘟热病毒在灵长类动物的感染情况,对犬瘟热的危害及公共卫生意义进行了分析。指出犬瘟热病毒存在大范围流行风险从而对进出口猴场形成新的威胁,并根据工作实际提出了疫病疫情预防控制和检验检疫监督管理的着重点。     

Continuous-Flow Ultracentrifugation of Canine Distemper Virus and Infectious Canine Hepatitis Virus

The use of a Spinco L-4 zonal centrifuge with the B-XVI continuous-flow rotor for the purification of canine distemper and infectious canine hepatitis viruses is described. Up to 68 liters of virus was processed at one time. Infectious canine hepatitis virus was found to band at 39% sucrose and canine distemper virus banded between 32 and 48% sucrose. The virus was concentrated 10-fold, and the purity of the virus, as measured by protein concentration, was increased by 99%.     

Cell Fusion by Canine Distemper Virus-Infected Cells

AV3 cells (continuous human amnion) infected with the Onderstepoort strain of canine distemper virus produced cell fusion within 2 to 5 hr when added to AV3 cell monolayers. An apparent requirement for intact, infected cells was demonstrated by showing that (i) frozen-and-thawed infected cells failed to induce fusion, (ii) infected cells frozen in the presence of glycerol retained their ability to induce fusion, (iii) infected cells subjected to swelling in hypotonic buffer and homogenization lost their ability to fuse cells, and (iv) semipurified and concentrated virus preparations with infectivity titers as high as 10(7.5) mean tissue culture doses per ml failed to induce fusion within 5 hr. Preparations of intact, infected cells had a mean log(10) ratio of infectivity to fusion activity of 3.6. Treatment with beta-propiolactone rendered the active preparations free from detectable infectivity while they retained their ability to cause cell fusion. Cycloheximide did not block the formation of syncytia in assay cells. This type of cell fusion was neutralized by canine distemper virus immune antisera, and measles virus immune sera showed a slight degree of cross-neutralization. Other cell lines, HEp-2, MA 139 (embryonic ferret lung), MA 104 (embryonic rhesus monkey kidney), and Vero (African green monkey kidney) were also susceptible.