菌核多孔菌培养特性及驯化栽培

为了充分开发利用菌核多孔菌Polyporus tuberaster资源,对采自吉林省露水河东升林场的野生菌核多孔菌进行分离纯化获取纯菌株作为实验材料,采用十字划线法研究固体培养条件下不同碳源、氮源、pH和温度对其菌丝生长的影响,从以上4个单因素实验中选出3个最优水平进行正交实验。结果表明,菌核多孔菌P. tuberaster的最适培养条件为：碳源糊精粉（20mg/mL）、氮源酵母浸粉（2mg/mL）、pH 5.0、温度25℃。在最适培养条件下采用试剂盒测定液体培养条件下菌株的产酶活力,结果表明,菌核多孔菌产漆酶能力较强,酶活力最高可达386.96U/L;木质素过氧化物酶活力仅为5.23U/L;未检测到锰过氧化物酶。出菇实验中,二级种选用麦粒菌种,500mL罐头瓶装干料160g,每瓶接种蚕豆大小菌块3-4块,25℃培养,菌丝满瓶时间为20d;栽培种配方为阔叶树木屑78%、麦麸20%、石灰粉1%、石膏1%、含水量65%左右,17cm×33cm×0.05cm栽培袋装干料520g,每袋接种蚕豆大小二级种3-4块,菌丝发菌时间为26d;在92%-95%空气湿度、一定散射光和20-21℃低温刺激下培养13d后原基分化形成菇蕾,此后加大空气湿度至97%-98%并保持温度24-25℃培养32d后子实体成熟。     

棉籽壳栽培草菇高产技术

围绕提高棉籽壳栽培草菇单产,本文进行了菌种选育、栽培季节、培养料配方等试验。结果表明:V₂₅₈₃是一株优良菌株。接种量以干料重的6%为宜。我国北方地区于七、八月在温室或塑料大棚种植为好;在棉籽壳中加入辅料:麸皮10%、尿素和过磷酸钙各0.4%和磷酸二氢钾0.1%,较单用棉籽壳栽培可提高产量40%以上;辅料中以麸皮增产效果最佳;料水比以1:1.7时产量最高;用发酵料栽培比生料栽培可提高产量10%左右;用波浪式栽培法,分两层播种,覆土0.7cm左右,波谷厚达3cm,产量高。采取上述综合措     

人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备失败可能原因分析

在开设人类外周血淋巴细胞培养实验中 ,我们采用的实验方法是 :将教师事先配制好的经试培无菌后的 ,含 2 0 %小牛血清的 RPMI1 64 0培养液分装到 2 5m L圆形培养瓶中 ,每瓶 5m L ,每个学生一瓶。实验从抽血→接种→培养→加秋水仙素→收集细胞制片→核型分析等步骤均由学生自己完成。实验的具体操作方法是 :每个实验班 ( 2 0人 )由两个学生 (男女各 1名 )自愿献血 ,静脉取血 4 m L,肝素抗凝 ,每个学生在超净工作台内向培养液内加入一定量血液 ,然后将培养瓶放进 3 7℃恒温箱中培养 72 h,在收集细胞制备染色体之前的 2～ 3h,向培养瓶中加…     

瓶栽灵芝管理的几点经验

(一)为了防止瓶栽灵芝的杂菌污染(从接种后到菌丝铺满之前,是污染率最高的时期),可采取以下办法: 1.抢温接种,即灭菌后的培养料温度降至25—30℃时,及时接种。 2.活化菌种,即接种前,把二级菌种放入温箱中1—2天。 (二)瓶栽灵芝的培养基,在高压灭菌后常出现表面干燥现象,致使接种后的菌丝生长缓慢,大大增加了污染的机会。解决的办法是: 1.封瓶口时,在牛皮纸外面再包一层塑料薄膜(为降低成本,可不用纱布或棉塞封口)。 2.先用无菌水湿润培养基表层后再接种。     

介绍一种简易真空杀虫法

1　材料用具　　注射器 ( 5ml以上均可 )、针头、胶盖塞、透明的玻璃小瓶 (如注射用的青霉素钠瓶 ,头孢曲松钠瓶等 )。2　方法步骤1)将要用的注射器 ,玻璃瓶刷洗干净 ,并把它们擦干备用。2 )将捕捉到的昆虫 ,根据虫体的大小 ,选择合适的瓶子装入 ,塞紧胶盖塞。3)用注射器反复抽取瓶内空气 ,抽至真空为止 ,即注射塞能自动快速返回原位。4 )对于鞘翅目的昆虫 ,如瓢虫类 ,想做飞行状态的标本 ,可直接放入瓶内杀死。也可用薄薄一层脱脂棉将鞘翅与腹部缠绕包裹一起 ,防止其死亡时内膜质翅露出。3　注意事项1)在杀死昆虫时 ,虫体较大者死亡较快 ,…     

瓶栽蛹草子座的方法

蛹草(Cordyceps militaris),也称北冬虫夏草,其药性与传统中药材冬虫夏草(C.sinensis)相近。我们在罐头瓶内多次育成蛹草子座,现将方法介绍如下。 (一)培养基的制作与接种方法普通大米:高梁米=9:1,使含水量达到110-120％,其中含KH_2PO_40.1％,MgSO_4 0.05％,酵母粉0.5％,蛋白质少量。每瓶加入50-100克干重的培养基。灭菌时间:高压1.5-2小时,常压8-10小时。取斜面菌种一小片或米饭培养基菌种一小块,在无菌条件下接种在罐头瓶内。菌种特点:在斜面培养基上菌丝纯白色、粗壮浓密,紧贴培养基生长,边缘清楚;在米饭培养基上容易形成浅桔黄色的色素沉着。 (二)栽培管理菌株接种后,在15℃左右条件下培养。6-10℃生长缓慢,20-25℃有利于子座形成。培养基含水量低于100％以下,生长缓慢;湿度过     

桑黄‘浙黄1号’的选育报告

‘浙黄1号’是野生桑黄通过驯化系统选育的新品种。其子实体呈扇形或马蹄形,菌盖长径6.0-15.0cm,短径3.0-5.0cm,基部厚2.0-5.0cm,边缘厚0.2-2.0cm。子实体表面呈金黄色至棕黄色,菌肉黄褐色。菌丝体生长适温25-30℃,子实体发育适温20-25℃。子实体总黄酮含量8.26%,粗多糖含量5.40%,总三萜含量0.96%。浙江省地区有春、秋两季栽培;抗逆能力较强,子实体成品率较高、整齐,商品化程度高,产量13.3g/袋（干料470g）。适宜代料栽培。     

无籽西瓜的快速繁殖技术

无籽西瓜甜度高、口味佳和食用方便 ,在市场上非常抢手。但传统的制种方法复杂 ,生产周期长、成本高 ,严重影响了大田生产的发展。若采用无性繁殖技术 ,便能快速繁育无籽西瓜的植株 ,大大缩短生产周期 ,提高经济效益。1　试管苗培养1.1　胚培养法1.1.1　消毒和接种　取三倍体无籽西瓜 ,用 75 %乙醇消毒 1min,用 0 .2 %Hg Cl2 溶液消毒 30 min,再浸在无菌水中 3～ 4 h。待种子软化后 ,在无菌条件下 ,用镊子剥掉种皮 ,取出种胚 ,接种在不含任何激动素和生长素的MS培养基上 ,每瓶接入 1～ 2个胚。接种完毕后 ,将培养物置 2 5℃的恒温室中培养…     

干花标本的简易制作

将硅胶磨碎,筛取1毫米以下的细小颗粒烘干备用。取鲜花标本放入稍大的容器(如杯、碗等)内,用硅胶掩埋固定(注意保持花的自然姿态),立即用塑料膜封密杯口用绳扎紧。6—7天后,小心地移去硅胶,取出干花并置于盛有干燥剂的标本瓶中,或将干花柄穿上铅丝插在木     

黄腐酸、吲哚丁酸和蔗糖对唐棣试管苗生根的影响

唐棣（Amelanchier alnifolia Nutt．）（步兆军等2005）试管苗的根较细（仅1mm左右）,其生根状况直接影响以后的移栽成活率,因此建立高效的生根培养条件很重要。试管苗来自吉林国联生物技术发展有限公司。以1／2MS为基本培养基,用吲哚丁酸（IBA）为生根诱导剂（江玲和周燮1999）,进行不同浓度吲哚丁酸、黄腐酸（FA）和蔗糖水平下的生根实验。试管苗高3,4cm,每个实验组合接种5瓶,每瓶20株苗,接种后于27℃恒温培养室内培养20d后,统计结果。从表1可见：     

对不同材料包扎的生产用容器灭菌效果的比较试验

为了改进长期以来细胞瓶以牛皮纸加无纺布包装后进行灭菌的方式,实验中依据国内外的有关资料和现行GMP的要求,结合生产的实际情况,以15L细胞瓶为对象,用不同材料(牛皮纸加无纺布、铝箔纸、两层无纺布、带砂芯的硅胶塞)包装后进行灭菌效果的比较试验及残留蒸汽冷凝水测量试验,结果显示用带砂芯的硅胶塞包装的细胞瓶在灭菌过程中瓶内实际温度均能达到设定要求,热穿透及微生物标的验证试验也符合《中华人民共和国药典》(三部)2005年版的标准要求,残留蒸汽冷凝水明显少于其它包装方式,有最好的实际应用价值。     

流感病毒在Vero细胞上的增殖

目的研究流感病毒在非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)上高效增殖的最适条件。方法将Vero细胞在50cm2细胞瓶或3000mL旋转瓶中培养成单层,以不同感染复数接种流感病毒,在不同的培养条件下孵育,取上清测病毒血凝滴度。结果当加入胰酶终浓度为40μg·mL-1时,低感染复数接种流感病毒,可获得高效价病毒液,在3000mL旋转培养瓶中流感病毒的易感性较在50cm2静置培养瓶中略高。结论建立了流感病毒在Vero细胞上高效增殖的初步方法。     

六妹羊肚菌工厂化制备液体菌种繁育条件的优化

为适合大规模工厂化制备羊肚菌液体菌种,以提高菌丝体生物量为目的,控制菌丝球直径,使用六妹羊肚菌Morchella sextelata,采用单因素、Plackett-Burman、响应面Box-Behnken实验摇瓶培养优化液体菌种制备条件,发酵罐扩大培养,具体参数为玉米淀粉2.5%、麸皮6%、酵母粉0.4%、葡萄糖2.5%、蛋白胨0.25%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、接种量10%、pH 5.5、转速200-500r/min、温度25℃、培养1-3d,在该条件下羊肚菌菌丝体干重可达16mg/mL,菌丝球直径降至1.5mm以下,密度达到2 967个/mL,从母种到栽培种仅需13-19d。本研究结果为羊肚菌工厂化液体菌种制备和栽培提供了理论基础。     

喷塑胶封存生物标本

喷塑胶封存生物标本‘喷塑胶是指用喷雾法使生物标本表面挂一层塑料胶,进而胶变成一种透明的塑料膜,对标本起保护作用,效果很好。为了说明喷塑胶封存标本的方法,下面用“封存小白鼠”为例进行介绍。工具用品解剖剪刀、镊子、注射器、喷雾器、标本瓶、线、脱脂棉、玻璃...     

凤尾菇培养料的再利用

将收获二潮或三潮菇后的培养料稍压实,盖上塑料薄膜并遮光。经5—7天,培养料上便布满白色菌丝。只要无杂菌污染,就可准备新料继续栽培。我的培养料是:无霉变的稻草(切成2—3寸长,并用0.5—1％石灰水浸泡一夜后用清水洗净,晾至手捏稻草有少许水从指缝流出止)100千克,加磷肥2千克,石膏粉2千克,细糠15—20千克,拌匀。接种时,先铺新料3寸厚压实,铺一层布满菌丝的培养料(不要弄碎,以免拉断菌丝),再铺一层新料,压实,再铺旧料。一般新、旧相间     

蒙古口蘑驯化栽培成功

在观察研究蒙古口蘑生态的基础上,通过菌种分离、驯化,选出87-B-2优良菌株。在以马粪、麦秸等配制的发酵料进行瓶栽、箱栽试验的基础上,1990年用床式栽培方法驯化栽培成功蒙古口蘑。     

接种方式对细胞在三维材料中接种率和分布的影响

考察了静态和动态接种方式对成纤维细胞在胶原壳聚糖支架材料中接种率和分布的影响。将人成纤维细胞制成细胞悬液,分别采用静态接种、转瓶接种和灌注接种方式将细胞接入三维胶原壳聚糖海绵。通过MTT法和切片HE染色分别考察细胞接种率及细胞在三维材料中的分布。实验结果表明：在低的接种密度下静态接种有较高的接种率(889%),但随着接种密度的增加接种率下降显著,细胞结团且分布不均匀;转瓶接种的接种率约为60%,细胞分布也不均匀;灌注接种的接种率始终维持在77%以上,能得到高的起始细胞密度,且细胞分布均匀,是一种理想的接种方式。细胞接种方式的优化为改善工程化组织的结构和功能、缩短体外构建时间奠定了基础。     

灵芝的园林栽培

灵芝的人工栽培方法很多,我这里介绍的是,菌种接种在活体灌木的茎上,在自然条件下培养的方法。菌种为紫芝,以马铃薯、蔗糖、琼脂为培养基。二级菌种培养基为:木屑70％、麦麸25％、过磷酸钙2％、蔗糖2％、石膏粉9％o具体做法如下: 三月底将灌木玉桂丛中过密的茎上部截去,留下15—20厘米长并除去残存的枝叶。五月中旬,把基部的泥土扒开,在木桩基部用消过毒的解剖刀切开树皮长2厘米左右,宽1厘米左右的口,用无毒接种勺取二级菌种块接在树桩的开口内,然后用树皮覆盖,再用松土封口。接种40天后,有白色乳头出现,而后芝蕾、菌柄、菌盖陆续出现,十一月停止了生长。次年五月再继     

香菇‘申香1644’的选育报告

香菇‘申香1644’是以传统优质栽培品种‘申香215’为亲本,采用多孢自交育种技术选育的新品种。其菌盖纵切面呈凸形,菌盖直径(6.15±0.38) cm,菌盖厚度(2.27±0.42) cm,菇型圆整,菇质紧实,产量高,生物学转化率95%以上。与亲本相比,‘申香1644’在分子标记和栽培性状上均具有明显差异性,其菌盖为浅黄褐色,颜色较亲本浅;菌龄100-105 d,较亲本缩短5-10 d。‘申香1644’菌丝生长适宜温度为22-26 ℃,原基发育适宜温度为16-22 ℃,可在全国范围内进行代料栽培。     

β-内啡肽对妊娠早期人胎盘绒毛hCG与孕酮分泌功能的影响

实验采用庄临之等建立的人胎盘绒毛组织无血清培养方法。将妊娠7—9周人工流产的人胎盘绒毛剪成1mm左右植入培养瓶中,每瓶加入2mlMcCoy's 5a培养液培养三天,更换培养液时分别加入不同剂量(10~(-11)—10~(-7)mol/L)的β-内啡肽,继续培养24小时后收集培液,用放射免疫法测定hCG与孕酮的含量。 结果表明β-内啡肽对妊娠早期人胎盘绒毛分泌hCG