日本石油公司引进用基因操作生产维生素B_(12)的技术

维生素B_(12)是对贫血、肝病、末端神经炎、胃液缺乏病等有效的药物。现在日本每年进口量约3600Kg。市场价每公斤150—200万日元。现采用链霉菌(Streptomyces)等菌发酵法来生产维生素B_(12)。因其分子结构复杂而难以用有机合成法制造,所以它的生产成本、市售价格均高于其他维生素。看来采用基因操作法是开发维生素的好途径。     

发酵法生产维生素B_(12)

日本石油公司开发了发酵法生产维生素B_(1 2),(Ⅰ)的技术。     

维生素B_(12)促进雏鸡生长的试验

一、绪言 在以猪为纲、畜牧业全面跃进的形势下,如何刺激禽畜迅速生长,在短期内获得更大的增重,是一个重要课题。近二三十年来,在畜牧业上愈来愈广泛应用的维生素、抗生素、微量元素等补充饲料,有助于这个课题的解决。针对这个目的,我们用维生素B_(12)进行了促进雏鸡生长的试验。 维生素B_(12)是1948年才被人从肝精中提炼出来     

利用酒精糟沼气发酵废液提取维生素B_(12)

维生素B_(12)是治疗贫血、肝炎、神经系统等疾病的药品。我国目前生产的这种药品主要是从链霉素废液中提取的,最近也有从庆大霉素废液中提取的,有的单位还研究用丙酸菌发酵法生产也已取得成功。前两种发酵液含维生素B_(12)很少,产量不大,后者虽然含量     

一种费氏丙酸杆菌细胞离位转化生产维生素B_(12)的方法

为建立费氏丙酸杆菌的半连续耦合发酵工艺,克服DMB对维生素B_(12)连续发酵的不利影响,考察了费氏丙酸杆菌菌体细胞离位转化合成维生素B_(12)的可行性,优化了其离位转化工艺,确定了最佳的转化时机、转化体系及DMB添加方式,具体如下:当发酵进行至84 h时,将发酵液离心,收集菌体,然后用离心上清液重悬菌体,配成5倍浓度的菌液,加入终浓度为4.5 mg/L的DMB,于30℃条件下转化48 h,维生素B_(12)的产量达到108.06 mg/L,转化效率为2.26 mg/(Lh)。     

不同发酵材料对甲烷杆菌合成维生素B_(12)的影响

维生素B_(12)也称氰钴胺素,是首先在动物性蛋白质中被发现的一种促生长因素,后来在城市下水道、污水处理厂的活性污泥和沼气残留物中被发现。无论动物或植物都不能合成维生素B_(12),它只能由某些微生物合成,如灰色链霉菌(Streptomycesgriseus)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、菲德力丙酸杆菌(Propionibacterium freudereichii)、舒氏丙酸杆菌(P·shermaii)等。在嫌氧发酵过程中,某些甲烷菌如欧氏甲烷杆菌(Methano bacterium omelianski)的生长,也产生维生素B_(12)。日本小野英男于1950年报道了测定酒     

维生素C与B_(12)并用可阻抑腹水瘤细胞的分裂

鉴于目前临床上常用的抗癌药物大多属抗代谢物,对正常细胞具有毒性作用,近年提出了新的课题——营养疗法。已有一些工作指出,维生素 A 与 E 具有延缓细胞衰老、防止癌变的效能。最近,美国 Ohio 州 Merchurst学院圣 Thomos 研究所的 M.E.Poydock 等报道,用维素生 C 和 B_(12)混合液处理小鼠腹水型移植瘤:S37肉瘤、Krebs-2、艾氏瘤以及 L1210白血病细胞等,能明显地抑制这些瘤细胞的分裂,且对正常细胞无毒性作用。体外温育试验表明,经处理后的瘤细胞的分裂指数下降至另,而非恶性的 L929系细胞乃显示活跃的分裂行为。体内     

筛选脱氮假单胞菌启动子提高维生素B_(12)产量

维生素B_(12)(VB_(12)/钴胺素)具有多种生理学功能,广泛应用于制药、食品等行业。脱氮假单胞菌是维生素B_(12)常用工业菌株之一。通过筛选高表达启动子来过表达VB_(12)合成途径基因,能有效提高菌株的VB_(12)生产能力。通过对脱氮假单胞菌中某些编码热激蛋白和分子伴侣基因前含启动子在内的非编码序列用启动子在线预测软件进行分析,选取P_(ibpA)、P_(cbpA)、P_(dnaJ)、P_(htpG)、P_(dnak)、P_(grpE)的非编码区与编码绿色荧光蛋白的GFP报告基因相连,通过酶标仪检测GFP的荧光信号值,对编码热激蛋白和分子伴侣基因前的非编码区所含有的启动子的表达强度进行评估,以获得高表达的启动子对VB_(12)合成途径的基因进行过表达。结果表明,含有启动子P_(dnak)的非编码区,其表达的GFP荧光值最高。进而构建强启动子P_(dnak)与维生素B_(12)合成途径基因cobA的过表达重组菌,发酵数据表明,与对照菌株相比重组菌株维生素B_(12)产量提高21.5 mg/L。筛选高表达启动子用于维生素B_(12)合成途径关键基因的表达,是一种有效的提高维生素B_(12)产量的方法。     

西安地区妊娠妇女不同孕期血清铁蛋白、叶酸和维生素B_(12)的水平及临床意义

目的:探讨西安地区妊娠妇女不同孕期血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的水平及临床意义。方法:收集2012年8月至2013年1月在本院进行产前检查的750例妊娠期妇女及86例健康非妊娠妇女的血清标本。采用全自动化学发光免疫分析法测定其血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的含量。结果:孕妇血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的含量随孕期的增长而逐渐降低。早、中、晚孕期妇女叶酸的含量较对照组相比,并无显著差异(P0.05)。中、晚孕期妇女血清铁蛋白和维生素B12含量均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:西安地区中、晚孕期的孕妇体内存在铁蛋白和维生素B12缺乏,但并不缺乏叶酸。在重视补充叶酸的同时,也应该重视对铁和维生素B12的补充。     

不同来源的尿卟啉原Ⅲ转甲基酶在脱氮假单胞菌中的表达及其对生产维生素B_(12)的影响

S-腺苷-L-甲硫氨酸依赖型尿卟啉原Ⅲ转甲基酶(S-adenosy-L-methionine uroprophyrinogen Ⅲ methyltransferase,SUMT)催化尿卟啉原Ⅲ(uroprophyrinogen Ⅲ,urogen Ⅲ)中心碳原子C-2和C-7甲基化生成前咕啉-2,是维生素B_(12)生物合成途径中的一步关键酶。本文分别克隆了荚膜红细菌来源的RCcob A1,RCcob A2和脱氮假单胞菌来源的PDcob A,并在VB_(12)生产菌株脱氮假单胞菌中过表达和发酵。通过对三株重组菌维生素B_(12)发酵结果分析可知,SUMT(PDcob A),SUMT1(RCcob A1)和SUMT2(RCcob A2)的表达有利于维生素B_(12)产量的提高,与对照菌株相比分别提高了16.48%,10.2%和31.86%。根据摇瓶发酵的结果在5 L发酵罐上进行了放大实验,p BBR122-PblaRCcob A2的产量为144.5 mg/L,相比对照菌p BBR122-Pbla(111.3 mg/L)产量提高了29.83%左右。结论:SUMT的表达可以在一定程度上解除维生素B_(12)合成途径中的瓶颈,提高维生素B_(12)产量。     

摄入叶酸多而B_(12)少会发生先天性神经损害

营养素叶酸通常对大脑健康有益,但是现在有人提出,摄入过多的叶酸会损害摄入过少B12的人.这样的人可能有危险性,包括素食者,他们含B12不足;以及老年人,他们倾向于吸收维生素不足.美国人摄入叶酸要比其他大多数国家人高,部分原因是自从1998年开始,美国法定食品制造中必需在谷物产品中,诸如烘烤食品以及早餐谷类中,加入叶酸.食品强化叶酸的理由是因为妇女在怀孕期间若缺乏叶酸便会使胎儿发生先天性畸性———神经管发育缺陷.再者,叶酸可以保护老年人的神经学健康.然而,有些研究者关心的是,如果全体居民都补充了叶酸,便产生意料不到的结果,例…     

Aspergllus usamii B_1及B_(1—12)果胶酶性质、组分和应用的比较研究

B_(1—12)是由Asp·usamii B_1经NTG、UV、LiCl复合处理选育到的一株呈黑色的孢子是适于液体培养的高酶活果胶酶菌株。具有发酵周期短、易过滤等痔点,酒樁沉淀的酶制剂与B_1比较,酶作用的最适pH分别为4.0和4.5,最适温度均力50℃,但在30℃时,B_1仍保持较高酶活水平的稳定性。B_(1—12)果胶酶组分ex—PG酶活高于B_1 0.5—1倍左右,endo—PG和PE变化不明显.两者都含有糖化酶、纤维素酶、蛋白酶、花青素酶等非果胶酶组分,其中糖化酶活性比B_1下降一倍.应用于苹果醋、苹果汁、草莓汁、樱桃汁的澄清.B_(1—12)优于B_1,透光率可达90%以上,但对枣汁的澄清效果却次于B_1。     

微生物传感器测定维生素B12的研究

将大肠杆菌(Escherichia coli)215用吸附法固定于醋酸纤维素膜上,与氧电极配合组成微生物电极,建立了对维生紊B₁₂的快速测定系统。测定浓度范围5×10^-6mg—2．5×10^-5mg／ml;测定温度范围在28—39℃;最适Ph为6．7—7．8,测定一个样品所需时间为2h,比常用的生物学测定方法所需时间缩短10倍以上。该系统对维生素B₁₂重复测定的相对误差为±3％。固定化菌体在－25℃保存25天后再进行测定,应答电流不低于初始值的92%。     

微生物技术国家重点实验室(山东大学)

山东大学的微生物学科有着悠久的历史.1950年王祖农教授留法回国,在生物系组建了微生物教研组和微生物学专门化实验室.     

利用微生物混合培养技术生产聚羟基烷酸(PHA)研究

研究了圆褐固氮菌(Azotobacter chroococcum)突变株G3与巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)G6发酵生产聚羟基烷酸(PHA)的人工可配伍性,确定了它们混合培养的适宜条件,先将G3菌株发酵培养24～28 h后,再以15%(v/v)接种量接入G6菌株并同时补加05%(g/g)蛋白胨(FP)和0.5%(g/g)NH4NO3,继续混合培养42～46h,细胞干重达32 g/L,PHA含量为80%,再结合补料技术最终生物量可达53 g/L,PHA产生量达42.4 g/L。糖对PHA的转化率为0.32。人工混合培养成功地解决了固氮菌发酵生产PHA过程中,发酵液粘度过高,传质较差,补糖总量上不去等技术问题。     

微生物在生物能源生产中的应用(英文)

生物可再生能源是最有前景的石油替代品之一.生物能源的生产原料包括:植物、有机废弃物和微生物.微生物在生物能源生产上有着广泛的应用,利用微生物制备的主要生物能源包括:生物柴油、生物乙醇、生物甲烷等.某些微生物如微藻和真菌可以生产大量油脂,这些油脂可以转化为生物柴油;有些微生物如酵母可以将糖类、淀粉以及纤维素转化为燃料乙醇,添加乙醇的汽油或柴油燃烧排放明显降低;还有些厌氧微生物可以将有机废弃物转化为甲烷,可用做家用燃气、车用燃气或发电.除此之外微生物还具有在生产能源的同时治理环境污染的优势.总之研究开发微生物在生物能源生产中的应用有利于世界可持续发展.     

维生素B12的生物合成、发酵生产与应用

维生素B12(VB12)是一种重要的动物和人类营养因子, 广泛应用于饲料、食品和医药卫生领域。中国已成为全球VB12的主要产地, 2007年产量为27 t, 占全球总产量的77%。VB12是目前已发现的最大、最复杂的维生素分子, 化学合成极其困难, 所有VB12产品均采用生物发酵制备其主体结构。VB12主要由古生菌和一些真细菌通过有氧或厌氧两种途径合成, 工业上主要采用费式丙酸菌(Propionibacterium freudenrechii）和脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)进行发酵生产。综述了VB12的基本性质, 生物合成途径, 以及发酵生产工艺, 并对VB12的应用与市场前景作了分析。     

维生素B12的生物合成、发酵生产与应用

维生素B12(VB12)是一种重要的动物和人类营养因子, 广泛应用于饲料、食品和医药卫生领域。中国已成为全球VB12的主要产地, 2007年产量为27 t, 占全球总产量的77%。VB12是目前已发现的最大、最复杂的维生素分子, 化学合成极其困难, 所有VB12产品均采用生物发酵制备其主体结构。VB12主要由古生菌和一些真细菌通过有氧或厌氧两种途径合成, 工业上主要采用费式丙酸菌(Propionibacterium freudenrechii）和脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)进行发酵生产。综述了VB12的基本性质, 生物合成途径, 以及发酵生产工艺, 并对VB12的应用与市场前景作了分析。     

生产人体溶菌酶的“工程微生物”

溶菌酶存在于天然物中,有抗炎特性,也是感冒药的成份之一,有其潜在价值。然而来自人和鸡蛋的溶菌酶各不相同,鸡蛋的溶菌酶产生副作用,有其