干扰素的功能表达机制——Ⅵ.2'-5'三腺苷酸对烟草花叶病毒增殖的抑制作用

2'-5'三腺苷酸是否能抑制植物病毒在植物组织中的繁殖,过去无人报告过。本文证实2'-5'三腺苷酸能抑制烟草花叶病毒对离体的枯斑三生烟(Nicotina tabacum cv. samsum NN)叶片的侵染和在离体的普通烟(Nicotina tabacum)叶片内的繁殖,说明在植物中也存在2'-5'寡腺苷酸的作用体系,为植物干扰素的作用机理研究提供了新的依据。     

大白鼠腹腔巨噬细胞2''''-5''''寡腺苷酸合成酶

干扰素(IFN)或干扰素诱导剂能激活巨噬细胞,提高巨噬细胞的吞噬活力。不同来源的巨噬细胞,在体外培养条件下,用pppA2′p5′A2′p5′A(2′-5′P_3A_3)短时间刺激之后,吞噬活力也明显提高。但这两种作用之间有何关系,目前仍不清楚。因为2′-5′P_3A_3是寡腺苷酸合成酶(Esi)利用ATP合成的寡聚腺苷酸中的一种(它     

2′—5′寡聚腺苷酸衍生物的研究——Ⅰ.以2′-5′寡聚腺苷酸作为T_4-RNA连接酶的供体和受体合成其衍生物的方法

在干扰素的功能表达中,2′-5′寡聚腺苷酸是一类重要的媒介物。本文研究了T_4-RNA连接酶的专一性及其用于2′-5′寡聚腺苷酸衍生物合成的可能性。1980年,我们曾发现2′-5′寡聚腺苷酸可以作为RNA连接酶的受体。本文对此作了进一步的研究,证实了T_4-RNA连接酶可以将pNp(N=A,G,C,U)、pCpUpC、pCpm_2~2G等供体连到2′-5′P_3A_3受体上去,生成各种相应产物。2′-5′磷酸二酯键连接的寡核苷酸能否作为T_4-RNA连接酶的供体,有人估计不大可能。本文也证实了T_4-RNA连接酶能将供体pA~(2′)p~(5′)A连接到CpUpC、UpCpCpA、Cpm′IpψpG等受体上面去。从而说明T_4-RNA连接酶也可使用2′-5′磷酸二酯键连接的寡核苷酸作为供体。应用T_4-RNA连接酶,可以合成既含有2′-5′又含有3′-5′磷酸二酯键的寡核苷酸。本工作还证明A~(2′)p~(5′)A也可以作为T_4-多核苷酸激酶的底物。     

一氧化氮在光延缓小麦叶片衰老中的作用

以小麦(Triticum aestivum L.)离体叶片为材料,采用药理学实验和激光扫描共聚焦显微镜技术,对内源一氧化氮(NO)在光延缓离体小麦叶片衰老过程中的作用进行了研究.结果显示:光照处理的同时添加NO清除剂血红蛋白(Hb)或硝酸还原酶抑制剂钨酸钠(Na2WO4)后,光抑制离体小麦叶片叶绿素和可溶性蛋白含量降低及丙二醛累积的效应均显著减弱;光照处理下小麦叶片硝酸还原酶活性和内源NO水平均明显高于黑暗条件下,而Na2WO4处理不仅能抑制光诱导的硝酸还原酶活性提高,还与Hb处理一样能显著降低光下叶片内源NO水平.结果表明,硝酸还原酶途径来源的NO参与了光抑制离体小麦叶片衰老的过程.     

米曲霉在产脱氨酶过程中的超微结构动态

腺苷酸脱氨酶(AMP deaminase,EC 3.5.4.6)催化5′-腺苷酸脱氨生成5′-肌苷酸。核酸经5′-磷酸二酯酶降解后,用AMP催化其中5′-腺苷酸使其生成5′-脱苷酸。产脱氨酶高活力米曲霉菌株(Aspergillus oryzae)AS3.800,在制作麸麯过程中,当米曲霉分生孢子颜色由浅黄变为绿色时,酶活力下降。现对培养1.5、2、2.5及3天的麸麯进行了电镜观察与脱氨酶     

pppA2′p5′A2′p5′A保护病毒感染细胞的普遍性

pppA2′p5′A2′p5′A(简称2′-5′P_3A_3)是干扰素作用于细胞后诱导产生的物质。干扰素的作用机理很复杂,其中之一是2′-5′寡聚腺苷酸合成酶的活力增加,此酶以ATP为底物合成2′-5′P_3A_3及其同系物2′-5′P_3An。但2′-5′P_3A_3或2′-5′P_3A_n本身是否具有抗病毒作用,干扰素的抗病毒作用是否通过2′-5′P_3A_3或2′-5′P_3A_n而进行,这是一个很     

6-苄氨基嘌呤对离体小麦叶片衰老及蛋白质降解过程的影响

6-苄氨基嘌吟(6—BA)对离体小麦叶片游离氨基酸累积的阻抑作用与呼吸抑制剂对叶片游离氨基酸累积的影响不同。从可溶性糖(蔗糖和葡萄糖)放射自显影图谱的比较看到在6—BA处理与对照之间没有阴显差异。6—BA显著地抑制了离体叶片蛋白质分解酶活力的增加。在促进离体叶片蛋白质降解过程的条件下,6—BA的作用才表现得明显。用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析离体叶片的可溶性蛋白质,看到6—BA能够降低叶片中部分-Ⅰ蛋白质在离体后的丢失。 综上所述,认为6-苄氨基嘌呤延缓离体叶片衰老可能主要是通过阻抑离休叶片蛋白质的降解。叶绿体可能是6—BA延缓离休叶片衰老的主要作用部位。     

米曲霉在产脱氨酶过程中的超微结构动态

腺苷酸脱氨酶(AMP deaminase,EC 3.5.4.6)催化5′一腺苷酸脱氨生成5′一肌苷酸。核酸经5′-磷酸二酯酶降解后,用AMP催化其中5′一腺苷酸使其生成5′一脱苷酸。产脱氨酶高活力米曲霉菌株(Aspergillus oryzae)AS3.800,在制作麸麯过程中,当米曲霉分生孢子颜色由浅黄变为绿色时,酶活力下降。现对培养1.5、2、2.5及3天的麸麯进行了电镜观察与脱氨酶活性测定,希望能找到米曲霉菌体发育过程与产酶之间的相关性。     

不同生态区烟草的叶面腺毛基因表达

利用cDNA芯片技术,对同一烟草品种（Nicotina tabacum L cv. K326）、不同生态区(典型的浓香型烟区-河南平顶山和典型的清香型烟区-云南玉溪)、同一叶位(中部叶)、相同叶龄（60天）的叶片腺毛基因表达谱进行了比较研究,共发现有效差异表达基因445个。其中,与光合色素代谢、光合作用以及类萜生物合成相关基因在河南烟叶腺毛中高表达,与碳水化合物、蛋白质分解代谢过程相关的基因在云南烟叶腺毛中高表达;防御过程相关基因在两生态区均有高表达。该结果表明, 烟草叶面腺毛的基因表达水平受到生态因素的调控,生态因素有可能通过影响腺毛的物质代谢和分泌,从而对烟叶风格形成产生一定的影响。     

pppA_2′p_5′A_2′p_5′A对甲胎蛋白抑制巨噬细胞功能的对抗作用

干扰素是一类由干扰素诱生剂诱导生物机体有关细胞产生的糖蛋白,具有广泛的生物学活性,能抗病毒、抗癌肿、及免疫调节等功能。pppA_(2′)p_(5′)A_(2′)p_(5′)A(简称2′-5′P_3A_3)是由干扰素作用于细胞以后诱导产生的一种寡聚腺苷酸,它能表现干扰素的许多生物学功能,我们发现2′-5′P_3A_3能激活巨噬细胞,但激活特点与干扰素本身不同。干扰素激     

普通烟草ATⅢ氨基转移酶家族序列鉴定与表达分析

氨基转移酶是5'-磷酸吡哆醛依赖酶,在植物的生长发育和非生物胁迫的反应中起重要作用。ATⅢ氨基转移酶家族(classⅢ aminotransferase family)是转氨酶家族中一个非常重要的亚家族。本研究利用普通烟草(Nicotiana tabacum)基因组序列信息,鉴定出26个ATⅢ家族成员,对烟草ATⅢ家族进行理化性质分析表明,普通烟草ATⅢ家族成员之间的理化性质差异较大;系统进化和结构域分析显示,烟草ATⅢ家族成员可形成4个分支,同一分支内ATⅢ家族成员的保守结构域的种类和组织形式高度一致;将19个家族成员定位在12条染色体上;分析普通烟草转录组数据,结果显示大多数家族成员在不同组织中都有表达,主要集中在叶脉、打顶后茎和叶、离体叶片等组织。对NtATⅢ1和NtATⅢ2基因的qRT-PCR分析显示,这两个基因主要在植物地上组织中表达。本研究为普通烟草ATⅢ基因的功能研究提供依据。     

豌豆叶绿体脂氧合酶活性与叶片衰老及膜脂过氧化作用的关系

豌豆叶绿体脂氧合酶(LOX)活性在连体叶片衰老过程中变化不大。ABA处理离体叶片2d叶绿体LOX活性升高,处理时间延长活性下降。抗氧化剂α-生育酚、谷胱甘肽、没食子酸丙酯抑制豌豆叶绿体LOX活性。脂质过氧化产物丙二醛对豌豆叶绿体LOX和大豆纯LOX-1的活性均有抑制作用,大豆LOX-1能促进离体豌豆叶绿体膜脂过氧化作用。因此,豌豆叶绿体LOX可能参与叶片衰老过程中叶绿体膜结构和功能的改变,又受膜脂过氧化产物的制约。     

钙离子对细胞分裂素延缓水稻叶片衰老的抑制作用

单独使用细胞分裂素 (BA和 Zeatin,1 0 -9～ 1 0 -5 mol/ L和 Ca2 (1 0 -3 mol/ L)处理水稻离体叶片时 ,二者均对叶片衰老有延缓作用。但当用 Ca2 和细胞分裂素同时处理叶片时 ,细胞分裂素延缓衰老的作用受到 Ca2 的明显抑制。进一步研究表明 ,细胞分裂素和 Ca2 并未协同刺激水稻离体叶片的乙烯生成 ,这样排除了通过乙烯促进叶片衰老的可能性。用可提高细胞质 Ca2 浓度的钙通道载体 A2 31 87处理叶片时 ,可延缓叶片衰老 ;而用可降低胞质 Ca2 浓度的试剂 ,如 EGTA、La Cl3 、Verapamil、氯丙嗪等(1 0 -3 mol/ L)处理叶片时 ,可促进叶片衰老 ,进而排除了细胞分裂素促进 Ca2 的吸收而加快衰老的可能性。     

4PU-30对猕猴桃组织培养影响的初步研究

在植物组织培养研究中常采用腺嘌呤的衍生物(如 KT,6-BA,玉米素,2ip 等)作为细胞分裂素(CTK)与生长素配合进行植物离体组织的分化与脱分化。本研究采用四川大学化学系周明跃先生合成的4PU-30[N-(4-吡啶基)N′-苯基脲]在猕猴桃组织培养中促使分化的作用并与腺嘌呤类化合物作一比较,简要结果如下:     

pppA_(2′)p_(5′)A_(2′)p_(5′)A 对甲胎蛋白抑制巨噬细胞功能的对抗作用

干扰素是一类由干扰素诱生剂诱导生物机体有关细胞产生的糖蛋白,具有广泛的生物学活性,能抗病毒、抗癌肿、及免疫调节等功能。pppA_(2′)p_(5′)A_(2′)p_(5′)A(简称2′-5′P_3A_3)是由干扰素作用于细胞以后诱导产生的一种寡聚腺苷酸,它能表现干扰素的许多生物学功     

NR和NOS在CTK延缓离体小麦叶片衰老中的作用

用一氧化氮(NO)清除剂血红蛋白(Hb)、硝酸还原酶(NR)抑制剂钨酸钠(Na2WO4)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)并结合激动素(KT)和玉米素(ZT)两种细胞分裂素(CTK)处理离体小麦叶片,测定分析各处理的相关生理生化指标,以明确NR和NOS在CTK延缓离体小麦叶片衰老过程中的作用.结果显示:KT和ZT单独处理均能显著延缓离体小麦叶片衰老过程中叶绿素、可溶性蛋白含量的降低,抑制丙二醛(MDA)的积累,促进NR和NOS活性升高;在Hb、Na2WO4或L-NAME存在时,上述KT和ZT延缓衰老的效应均显著减弱,同时NR和NOS活性的升高也分别被Na2WO4和L-NAME显著抑制.该结果暗示CTK延缓离体小麦叶片衰老可能与其诱导了NR和NOS活性的提高,进而促进NO的生成有关.     

6-苄氨基嘌呤延缓小麦叶片衰老机制的研究

6-苄氨基嘌呤在0.05 ppm浓度可以延缓离体小麦叶片的衰老,并且阻止游离氧基酸的迅速累积。核酸或蛋白质合成抑制剂当与6-苄氨基嘌呤同时处理离体叶片不能抵消6-苄氨基嘌呤的上述效应。6-苄氨基嘌呤的这种效应不是由于抑制了离体叶片的呼吸。~(14)C-葡萄糖参入实验及放射自显影图谱的比较表明6-苄氨基嘌呤阻止游离氨基酸累积既不是由于抑制了氨基酸以葡萄糖为碳架的合成,也不是通过刺激叶片蛋白质的合成,而是由于阻止了蛋白质的迅速降解。整体小麦幼苗仅仅在遮光下,6-苄氨基嘌呤才可以表现出对叶片游离氨基酸的累积的阻止作用。在自然光下则看不到6-苄氨基嘌呤的作用,这可能是由于在遮光下蛋白质降解加强的缘故。综上所述,认为6-苄氨基嘌呤延缓叶片衰老的作用可能主要是通过阻止叶片蛋白质的降解。     

CO_2对离体欧芹叶片中蛋白质代谢的影响

以离体欧芹叶片为实验系统 ,研究了CO2 对叶片中蛋白质降解的影响。对离体欧芹叶片中游离氨基酸含量及可溶蛋白含量的分析结果表明 :CO2 具有抑制离体欧芹叶片中蛋白质降解的作用 ,这为进一步了解CO2 延缓叶片衰老的作用机理很有意义。     

CO2对离体欧芹叶片中蛋白质代谢的影响

以离体欧芹叶片为实验系统,研究了CO2对叶片中蛋白质降解的影响。对离体欧芹叶片中游离氨基酸含量及可溶蛋白含量的分析结果表明:CO2具有抑制离体欧芹叶片中蛋白质降解的作用,这为进一步了解CO2延缓叶片衰老的作用机理很有意义。     

低温弱光对黄瓜和菠菜类囊体跨膜质子梯度的影响

以典型冷敏性植物黄瓜和典型抗冷性植物菠菜为材料 ,研究了 5℃ 1 0 0μmol pho-tons· m-2 · s-1 低温弱光处理对 2种植物的活体和离体叶绿体类囊体耦联度的影响。结果显示 ,与 5℃黑暗处理相比 ,5℃下弱光 (1 0 0 μmol photons·m-2· s-1 )分别照射黄瓜和菠菜的叶片和离体叶绿体悬浮液 ,都使叶绿体毫秒延迟发光慢相强度以及类囊体耦联度显著降低。表明无论是冷敏性作物黄瓜 ,还是抗冷性植物菠菜 ,低温弱光处理叶片和离体叶绿体悬浮液 ,均可导致类囊体跨膜质子梯度显著降低