神经细胞尼氏体和神经髓鞘的双重组合染色法与应用

探讨了显示实验动物脊髓组织中的神经尼氏体和神经髓鞘等组织成分的双重组合染色法,通过分别选用孔雀石绿(Malachite green)和橙黄G、磷钨酸(Orange G,Phosphotungstic acid)组合染色(简称MG-OP法)。已能够显示狗脊髓神经尼氏体呈绿色,细胞核呈黄色。神经纤维髓鞘轴突呈黄色,神经膜和结缔组织纤维呈绿色,背景呈淡黄色。MG-OP法克服了原法成分单一,色彩效果差,所建立的双重组合染色法,对比清晰,色彩鲜艳,方法简便的较好染色方法。     

实验动物组织血管铁质反应与胶原、弹性纤维和肌纤维的组合染色法

在进行实验动物组织染色反应中,为了证明血管铁质物质与胶原、弹性纤维和肌纤维的分布情况,选用丽春红S苦味酸(Ponceau S picric acid)、间苯二酚碱性复红(Resorein basic fuchsin)与Perls铁法(简称P-PA-R-BF-P法),对大鼠组织进行组合染色,能够较好显示组织血管中铁质物质与胶原、弹性纤维和肌纤维,铁质物质呈蓝色,胶原纤维呈红色,弹性纤维呈棕色,肌纤维呈黄色。这是一种相互对比清晰的组合染色方法。     

一种显示胃幽门螺杆菌及其组织形态特征的双重染色法

幽门螺杆菌 (Helicobacter Pylori HP)是一种革兰氏阴性菌 ,现已证明慢性活动性胃炎、消化性溃疡与 HP的存在有较密切的关系 ,并与远端胃癌和低度恶性胃淋巴瘤的发生有关。所以 ,愈来愈受到国内外学者的广泛关注。诊断 HP有不同的方法 ,如尿素呼吸实验及血清学分析等 ,这些实验敏感性较差 ,且不能对胃的形态特征进行评价。在日常工作中 ,为了明确有无 HP感染常采用组织切片特殊染色法 ,即硝酸银法 (W- S法 )和 Giemsa染色法 ,然而 ,这些方法易造成胃的组织形态结构模糊不清 ,并且染色时间较长 ,故给临床病理诊断带来很大困难。为此 ,…     

运用双重组合设计建立黑龙江省玉米降水产量模型

本文运用旋转设计进一步发展的双重组合试验设计,建立黑龙江省关于降水、有机质、氮、磷、钾肥及有机肥的玉米产量模型,探讨了双重组合试验设计在建模时用可控因素去挂接不可控因素的应用,对模型进行了检验和频数分析,提出玉米产量大子3000公斤的高产在艺措施．     

DNA染色与免疫组织化学双重染色技术

随着计算机技术的普及和图象定量分析方法的发展 ,病理学已经开始应用计算机图象分析技术来定量研究有关病变形态结构特点 ,探讨其在诊断、分型、分类、预后判断中的应用等问题。我们采用Feulgen Rossenbeck改良DNA染色法[1] 和免疫组织化学EnVision法结合的双重染色方法 ,在石蜡切片中同时显示乳腺癌细胞DNA和癌基因CerbB 2的蛋白表达产物 ,该法对应用病理学图象分析技术研究肿瘤细胞DNA及癌基因蛋白的表达及其两者关系提供了一种简便、准确的方法。1　材料和方法1 1　材料 :取自本科室乳腺癌标本 ,标本经10 %中性福尔马林固定 ,常规…     

改良革兰染色法在显示石蜡切片真菌中的应用

目的建立真菌的病理切片改良革兰染色法。方法选取确诊真菌感染的组织蜡块,切若干空白片,通过苏木素-伊红染色（HE）、高碘酸-无色品红染色（PAS）、六胺银染色（GMS）、改良革兰染色后,比较改良革兰染色法的染色效果。结果改良革兰染色法的染色效果好,该法具有易操作、染色效果稳定等优点。结论改良革兰染色法能够清晰地显示出组织切片中的真菌,并且染色效果稳定,在检测组织中的真菌时可发挥重要的辅助诊断价值,具有广泛的应用前景。     

5’核苷酸酶碱性磷酸酶双重染色法在毛细淋巴管研究中的应用

本文应用5’-N-ALP双重染色法观察了裸鼠皮肤及人胃癌组织内淋巴管的形态和细微分布.在光镜下毛细淋巴管、淋巴管呈5’-N强阳性反应,管壁显示明显的棕色或深棕色,而毛细血管、血管的ALP呈强阳性,管壁呈明显的蓝色.据此可用组化方法将毛细淋巴管和毛细血管区别开来.本法能显示呈褐色的毛细淋巴管,特别是呈实性条索状的毛细淋巴管,因而双重染色比HE染色更能客观、准确地显示毛细淋巴管的分布.     

一种鉴定小鼠胚胎质量的双重荧光染色方法

尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法.与传统方法相比,本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1∶5,作用时间为30 min.豚鼠补体最佳稀释度为1∶5,两种分染染料H33342和PI的工作浓度均降低至5.3 μg/ml便可着色,染色时间延长至90 min,加大了染料工作液中柠檬酸钠的浓度,并在计数观察前增加压片这一步骤.染色过程中应注意避免血清物质对抗体补体的不良影响以及避光和快速的操作.双重荧光染色后小鼠胚胎内细胞团(ICM)细胞着色为蓝色,滋养层(TE)细胞着色为粉红色,数目清晰可辨.此方法可以作为一种简洁有效的小鼠胚胎质量鉴别参考方法.     

SARS肺纤维化中胶原纤维组织化学染色方法的比较

为检测和探讨严重急性呼吸综合征（severs acute respiratonry syndronre SARS）病人肺纤维化中胶原纤维组织的变化规律及过程,应用Vangison染色法,Masson染色法,三联染色法,苦味酸天狼猩红偏振光法,四种方法。对4例SARS感染病人肺组织进行染色比较,比较几种组织化学染色的优缺点,发现苦味酸天狼星红偏振光法是较理想的染色方法,染色鲜艳、简便、效果好,并能对胶原纤维进行定性、定位、定量分析。     

免疫酶双重染色法显示再生神经中的神经生长因子与睫状节神经营养因子

本研究以成人正中神经切割伤后２～３个月的神经干为材料,冰冻切片,用免疫双重染色技术显示了神经生长因子与睫状节神经营养（诱向）因子在再生的周围神经组织中的表达与分布。神经生长因子选用ＡＰＡＡＰ法．其阳性产物呈红色;睫状节神经营养（诱向）因子选用ＡＢＣ系统,４氯－１－萘酚显色,阳性产物为褐色。光镜下观察：神经生长因子的阳性反应产物出现在正中神经切割伤后再生的神经纤维中,高倍镜下可见其阳性产物分布在轴索,而在雪旺氏细胞中没能见到呈红色的阳性反应产物;睫状节神经营养（诱向）因子分布在一些细胞体积大、核大呈增生活跃状态的雪旺氏细胞中。红与褐双色反应产物色调清晰,效果较好。研究结果提示：睫状节神经营养（诱向）因子与神经生长因子在人周围神经再生过程中起着十分重要的作用。     

微波在免疫组化双重染色的抗体洗脱中的应用

本文介绍一种新技术──微波加强抗体洗脱法。在酸洗脱液中微波辐射（最低能量档）３分钟．完全除去经ＰＡＰ法染色后的垂体前叶切片上的抗体复合物;双重染色显示两种形态和颜色不同的细胞。切片在Ｔｒｉｓ缓冲盐液中微波辐射３分钟,或分别浸入室温和约５０℃的酸洗脱液中２小时和３分钟,抗体复合物不能被洗脱,或洗脱不完全;双重染色时出现假性双标记细胞。结果表明微波具有加强抗体洗脱的作用,是一种快速、有效的除去免疫酶双重染色中抗体复合物的方法。     

改进的TTC染色法显示大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的比较应用不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色方法对大鼠心肌缺血再灌注损伤后梗死面积的检测效果。方法将20只SD大鼠(雄性,8周龄,体重250~300 g)按随机数字表法分为两组,每组10只。A组:传统TTC染色法组;B组:改进后的TTC染色法组,分别进行大鼠心肌染色,随后计算心肌梗死面积及测定血清cTnI浓度水平。结果 A组和B组均能较好地标记梗死心肌;A组和B组心肌梗死面积百分比无统计学差异(48.69%±5.37%vs.47.41%±3.28%,P0.05);A组和B组血清cTnI浓度水平无统计学差异(4.51±0.88 ng/mL vs.4.70±0.71 ng/mL,P0.05);但B组心肌切片染色色泽对比度及心肌非梗死区与梗死区区分度均高于A组。结论改进后的心肌TTC染色法采用在体染色,不仅操作简便,节省了实验时间和经费,而且提高了染色效果,能更准确地反映心肌缺血再灌注损伤的程度。因此改进后的心肌TTC染色法是一种经济、简便、快捷、高效的染色方法。     

葡萄糖氧化酶—二氨基联苯胺—硫酸镍铵法在免疫酶双重染色技术中应用

作者在豚鼠胰腺组织石蜡切片的PAP免疫酶双重标记染色中,分别使用葡萄糖氧化酶-二氨基联苯胺-硫酸镍铵(Glucose oxidase-DAB-Nickel,GDN)和单纯DAB显示生长抑素(Somatostatin,SOM)及5-羟色胺(5-hpdroxytryptamin,5-HT)免疫反应细胞,获得良好的染色结果。该方法步骤简单,结果明确,背景清楚,是取得理想的免疫酶双重染色结果的新途径。     

生物双重显微结构三维重建图象显示及畸变补偿方法

本文介绍计算机三维重建技术的两个进展:双重显微结构三维重建图象的显示技术及三维重建图象显示畸变的补偿方法。 1.生物双重显微结构的三维显示方法 有些生物的神经核团具有双重结构,例如蛤蚧的中脑峡核,它由大细胞部(Imc)和小细胞部(Ipc)两部分组成,仅Imc与视觉有关,Ipc似乎既无视觉功能也无听觉功能。但Imc与Ipc紧挨着,且有部分结构交迭在     

骨髓标本中免疫组织化学及DNA原位末端标记双重染色技术的应用

为扩展免疫酶标记分子病理学技术在血液病基础与临床研究中的应用,我们探索了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（A-PAAP）免疫组化和DNA原位末端标记（ISEL）技术在骨髓涂片和切片（乙二醇甲基丙烯酸酯GMA冷包埋）中联合应用（双重染色）的方法,结果令人满意,已初步用于白血病分化抗原及细胞凋亡的共同检测。     

一种简单快速的聚丙烯酰胺凝胶电泳染色法——铜染色法

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)作为分离鉴定生物大分子的有效手段已广泛用于分子生物学和医学临床工作,迄今为止,用于该技术的染色法多沿用考马斯亮蓝(CBB)和银染色。但上述两法均有其局限性,如蛋白凝胶染色前须经酸醛固定,不易洗脱且操作繁琐,脱色耗时。最近,Lee等报道一种SDS-PAGE负染色法,利用氯化铜分别与凝胶中     

用胶原纤维分离含不同糖基数的黄酮苷类化合物北大核心CSCD

以戊二醛交联的胶原纤维做固定相,通过柱层析法研究其对含不同糖基数的黄酮苷类化合物（槲皮苷、芦丁、刺槐素）的分离特性。结果表明,在高浓度乙醇溶液中,胶原纤维对黄酮苷类化合物的吸附以氢键作用为主;在低浓度乙醇溶液中,吸附以疏水键作用为主。采用90%~70%~50%的乙醇水溶液进行分步洗脱,槲皮苷、芦丁和刺槐素能够得到分离,它们的纯度分别为99.39%、95.32%和94.23%,回收率分别为89.25%、80.36%和80.49%。戊二醛交联的胶原纤维分离材料具有良好的重复使用性能,在5次重复分离实验中,其分离性能无明显降低。     

王锦蛇心的位置及其组织学参数和 胶原纤维含量的增龄变化

为阐明王锦蛇（Elaphe carinata）心的位置、组织学参数和胶原纤维含量的发育可塑性,采用形态测量、苏木精-伊红染色和 Masson 染色方法,测定了 1 龄、2 龄以及 50 日龄内王锦蛇个体身体大小和心位置,同时测定并分析了 50 日龄内个体心内膜、心肌层和心外膜的厚度,以及胶原纤维含量的增龄变化。王锦蛇的体重、体全长和体重与体全长的比值都在 2 龄组最高,1 龄组其次,2 和 1 龄组均显著高于 50 日龄内各组（P < 0.05）。肥满度 3 日龄组和 7 ~ 10 日龄组都显著高于 1 和 2 龄组（P < 0.05）。心与吻端的距离,1 和 2 龄组都显著高于其他日龄组（P < 0.05）,但心与吻端的距离与体全长的比值未见组间差异（P > 0.05）。心肌层厚度 50 日龄组显著高于 3 日龄组、20 日龄组和 30 日龄组（P < 0.05）,心外膜和心内膜厚度未见日龄差异（P > 0.05）。心肌层和心壁胶原纤维含量 50 日龄组都显著高于 3 日龄组和 20 日龄组（P < 0.05）。王锦蛇心与吻端的距离与体全长的比值随发育进程无明显变化,在首次 蜕皮和主动摄食后,心肌层厚度增厚、胶原纤维含量增多,提示心肌功能逐渐增强。     

质谱兼容的蛋白质银染色法

蛋白质组学是对蛋白质组进行研究的一门新兴学科。它可以揭示细胞内蛋白质组成成分与修饰状态的动态变化．研究蛋白质之间的相互作用．从全局的高度来研究代谢．发育以及调控等复杂的问题。 由于蛋白质组学研究范围十分广泛,所需要的技术手段也多种多样,如双向凝胶电泳（2-DE）．色谱．蛋白质芯片、质谱以及生物信息学等。2-DE分离蛋白质．通过生物质谱以及生物信息学手段对蛋白质进行鉴定是目前最常用的一种研究策略。由于该套技术平台中影响因素较多．很多初学者难以快速掌握．所以本实验方法系列讲座将详细介绍这一常规技术平台中的多项经典实验方案（样品制备．2一DE、染色、质谱鉴定等）．并着重对一些常见问题与难点进行深入的探讨。此外,本实验方法系列讲座还将涉及近年来刚刚兴起的大规模的蛋白质组自动分析系统——液相色谱-质谱联用．旨在为研究者拓宽实验方法的视野。[编者按]     

显示血管壁平滑肌和胶原纤维的染色方法

显示血管壁平滑肌和胶原纤维的染色方法田玉旺,丁华野,邢惠清,邓永江,黄晓南,刘芳龄北京军医总医院病理科、神经内科北京１００７００为了准确而清晰地显示血管壁平滑肌和增生的平滑肌细胞及胶原纤维的形态结构,以利判定病变的性质及发生发展情况,我们设计了一种“...