Wnt通路中蓬松蛋白DNA甲基化对骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化影响

摘要 目的：探讨蓬松蛋白（DVL）DNA甲基化对骨质疏松（OP）患者骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化及Wnt通路的影响。方法：分离、培养OP患者的BMSCs,成骨诱导培养BMSCs 0、7、14、21天,观察BMSCs细胞形态变化,检测碱性磷酸酶（ALP）染色及活性,检测茜素红染色及钙结节形成,荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）及免疫印迹检测远端缺失同源盒5（Dlx5）、核心结合蛋白因子2（Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（OSX）、Ⅰ型胶原蛋白（Colla Ⅰ）表达。检测DVL1、Wnt、糖原合成酶激酶3（GSK3）、β连环蛋白（β-catenin）表达及DVL DNA甲基化水平。在成骨诱导培养基中加入甲基转移酶抑制剂5-Aza,将BMSCs分为对照组（Control组）、甲基转移酶抑制剂组（5-Aza组）、甲基转移酶抑制剂+si-NC组（5-Aza+si-NC组）、甲基转移酶抑制剂+si-Wnt组（5-Aza+si-Wnt组）,依次进行ALP活性测定,茜素红染色及钙结节形成测定。RT-PCR检测Dlx5、Runx2、OSX、Colla 1水平,免疫印迹检测Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ、DVL1、Wnt、GSK3、β-catenin的蛋白表达量,并检测DVL DNA甲基化水平。结果：成骨诱导后BMSCs具有强的ALP活性和矿化结节生成能力,且随着培养时间的增长,BMSCs细胞ALP活性和矿化结节生成能力增强,Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ mRNA水平和Wnt、GSK3、β-catenin、DVL1表达升高,DVL DNA甲基化水平降低（P＜0.05）。5-Aza组较Control组ALP染色加深,活性增强,钙结节形成增多（P＜0.05）,Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ mRNA及蛋白表达、Wnt、GSK3、β-catenin、DVL1表达升高,DVL DNA甲基化水平降低（P＜0.05）。5-Aza+si-Wnt组较5-Aza+si-NC组ALP染色变浅,活性降低,钙结节形成减少（P＜0.05）,Dlx5、Runx2、OSX、Colla Ⅰ mRNA及蛋白表达、Wnt、GSK3、β-catenin、DVL1表达降低,DVL DNA甲基化水平升高（P＜0.05）。结论：DVL DNA甲基化可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制OP患者BMSCs成骨分化。     

TRB3基因敲除减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的研究

摘要 目的：探讨TRB3基因敲除对糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的影响。方法：选择30只TRB3敲除（TRB3-/-）小鼠和30只C57/BL6J小鼠，随机分为4组，包括TRB3基因敲除糖尿病模型组（A组）、TRB3基因敲除正常对照组（B组）、普通对照组（C组）和糖尿病模型组（D组）。正常对照组小鼠喂养标准大鼠饲料，糖尿病模型小鼠使用腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型。进行前肢握力测试、悬栅试验、肌肉功能试验，同时测定骨微结构各指标水平、抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平、萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平。结果：A组、B组、D组小鼠前肢握力显著低于C组，其中D组小鼠前肢握力最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠悬栅试验倒挂时间显著低于C组，其中D组小鼠悬栅试验倒挂时间最短（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠肌肉功能CSA值显著低于C组，其中D组小鼠肌肉功能CSA值最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠骨微结构指标BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th值显著小于C组，其中D组数值最低（P<0.05）；而Tb.Sp和SMI值显著大于C组，其中D组数值最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平显著高于C组，其中D组抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平显著高于C组，其中D组萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平最高（P<0.05）。结论：TRB3基因敲除可显著减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化，增加骨强度。     

丹参多酚酸盐通过SIRT3/β-catenin-PPARγ信号通路对心肌梗死大鼠的作用及机制研究

摘要 目的：通过制备心肌梗死大鼠模型，基于SIRT3/β-catenin-PPARγ信号通路探讨丹参多酚酸盐对心肌梗死大鼠的作用及相关机制，为将丹参多酚酸盐应用于心肌梗死治疗积累理论基础。方法：选取SPF级健康SD大鼠60只，随机分为假手术组（A组）、模型组（B组）、丹参多酚酸注射低剂量组（C组）丹参多酚酸注射高剂量组（D组）。B、C、D组大鼠制备为心肌梗死模型，A组大鼠仅进行假手术操作。B、C、D三组大鼠均接受丹参多酚酸盐注射治疗，A组大鼠注射等量生理盐水。比较各组大鼠心动图指标、血流动力学参数、心肌损伤相关指标、SIRT3/β-catenin-PPARγ信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量。结果：干预后，B、C、D组大鼠的LVEF、LVFS和dP/dt max、dP/dt min均下降，且C、D组高于B组，D组高于C组；同时B、C、D组大鼠LVEDD高于A组，C、D组低于B组且D组低于C组。B、C、D组大鼠CK、CK-MB、LDH水平均高于A组，同时C、D组均低于B组，且D组低于C组；干预后，B、C、D组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于A组，同时C、D组均低于B组，且D组低于C组；干预后，B、C、D组大鼠SIRT3、β-catenin蛋白表达量及mRNA表达量均高于A组，同时C、D组大鼠高于B组且D组高于C组；同时B、C、D组PPARγ蛋白表达量及mRNA表达量均高于A组，且C、D组低于B组，D组低于C组（P＜0.05）。结论：丹参多酚酸盐能够有效改善心肌梗死大鼠的心功能，缓解心肌损伤，其机制可能与调控SIRT3/β-catenin-PPARγ信号通路、下调炎性因子水平相关，且高剂量丹参多酚酸盐的治疗效果更优。     

绒毛膜促性腺激素对复发性流产大鼠子宫内膜厚度、雌激素受体表达及免疫因子表达的影响

摘要 目的：探讨绒毛膜促性腺激素对复发性流产大鼠的治疗效果,为临床中优化复发性流产的治疗方案提供理论基础。方法：选取未交配生育的SPF级雌性大鼠共40只,随机分为对照组（A组）、模型组（B组）、常规治疗组（C组）、绒毛膜促性腺激素治疗组（D组）,每组各10只。雌鼠妊娠后开始干预。A组大鼠全天仅灌服生理盐水。B组大鼠上午灌服生理盐水,C组大鼠上午灌服地屈孕酮水溶液,D组大鼠上午注射绒毛膜促性腺激素注射液,下午B、C、D组大鼠灌服羟基脲溶液。妊娠第十天给予各组大鼠灌服米非司酮。比较各组大鼠胚胎吸收率、炎性因子水平、免疫因子水平、雌激素受体表达水平及子宫内膜损伤程度。结果：干预后,与A组相比,各组大鼠胚胎吸收率增高,与B组大鼠相比,C组、D组大鼠的胚胎吸收率降低,且D组大鼠低于C组;与A组相比,各组大鼠IL-17水平、IL-17/ TGF-β、Th17细胞比例、Th17/Treg升高,且TGF-β水平、Treg细胞比例下降,同时C组、D组大鼠的IL-17水平、IL-17/TGF-β、Th17细胞比例、Th17/Treg均低于B组,且D组低于C组,同时TGF-β水平、Treg细胞比例高于B组,且D组高于C组;干预后,与A组相比,各组大鼠子宫内膜厚度下降,纤维化面积比例增加,与B组相比,C组、D组大鼠的子宫内膜厚度增加且D组高于C组,同时子宫内膜纤维化比例低于B组,且D组低于C组;与A组相比,各组大鼠ER、PR、PRLR mRNA表达水平明显降低,与B组相比,C组、D组大鼠的ER、PR、PRLR mRNA表达水平有所增加,且D组高于C组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：绒毛膜促性腺激素可能通过调节炎性因子水平和免疫微环境,提高性激素、受体表达,进而修复子宫内膜损伤,降低胚胎吸收率,促进复发性流产的恢复。     

姜黄素通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨折愈合

摘要 目的：探讨姜黄素治疗骨折的潜在应用价值及其对Wnt/β-catenin信号通路的可能影响。方法：本研究建立了胫骨骨折SD大鼠模型（模型组）,然后应用不同剂量的姜黄素（50、100和200 mg/kg/d）治疗胫骨骨折大鼠4周。治疗4周后,通过苏木精和伊红（HE）染色评价骨折区域的形态,通过ELISA法测定大鼠血清中TGF-β、BMP-2、OC和CTX-I水平。应用不同浓度的姜黄素（0、5、10、20、和50 μM）或Wnt/β-catenin信号通路抑制剂ICG-001（10 μM）处理成骨细胞3 d,然后检测细胞的ALP活性、PCNA和COL-1的含量及Wnt /β-catenin信号通路相关分子的表达水平。结果：不同剂量的姜黄素处理组大鼠的小梁状骨和胶原明显增多。与模型组相比,不同剂量的姜黄素处理组大鼠血清中的TGF-β、BMP-2和OC水平均升高,而CTX-I水平降低（P<0.05）;与模型组相比,不同剂量的姜黄素处理组大鼠骨折区域中的COL-1阳性率升高（P<0.05）,而COL-2水平未发生显著变化（P>0.05）。在药物干预3 d后,10和20 μM的姜黄素促进了细胞增殖,而100和200 μM的姜黄素抑制了细胞增殖（P<0.05）。与0 μM组比较,10 μM和20 μM的姜黄素组成骨细胞上清液中PCNA和COL-1水平及ALP活性水平均显著升高（P<0.05）。与模型组相比,不同剂量的姜黄素处理组大鼠骨折区域中的Wnt-3a和β-catenin mRNA和蛋白表达水平升高,而GSK-3β降低（P<0.05）。与姜黄素组相比,ICG-001处理后成骨细胞活力、ALP活性和β-catenin的表达水平均显著下降（P<0.05）。结论：姜黄素通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨折愈合并刺激成骨细胞的增殖和分化。     

富血小板纤维蛋白对人牙周膜细胞成骨能力、炎症因子表达和 Wnt/β-catenin信号通路的影响

摘要 目的：探究富血小板纤维蛋白（PRF）对人牙周膜细胞（hPDLCs）成骨能力、炎症因子表达和 Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路的影响。方法：通过刮取法、组织块法获取 2019年 1月至 2020年 1月期间我院口腔科收治的 10例正畸患者拔除健康阻生牙或正畸牙的牙周组织作为研究样本。将 hPDLCs细胞分为干预 1组、干预 2组、对照组、肿瘤细胞坏死因子 -α（TNF-α）组,各组均采用含有 10% FBSDMEM培养基培养,TNF-α 组加用 10 ng/mL TNF-α 诱导液,干预 1组加用 50% PRF培养,干预 2组加用 10 ng/mL TNF-α 诱导液和 50% PRF。对比各组的细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性、炎症因子、Wnt/β-catenin信号通路关键因子的表达差异。结果：（1）相比于其他 3组,干预 1组的吸光度值（OD）明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 OD值均明显升高（P<0.05）;（2）和其他 3组相比,干预 1组的 ALP活性明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 ALP活性均明显升高（P<0.05）;（3）和其他 3组相比,干预 1组的骨形态发生蛋白 2（BMP2）mRNA、runt相关转录因子 2（Runx2）mRNA、BMP2及 Runx2蛋白表达水平均明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 BMP2 mRNA、Runx2 mRNA、BMP2及 Runx2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）;（4）相比于干预 1组、对照组,干预 2组、TNF-α 组的 TNF-α mRNA表达水平明显升高（P<0.05）;（5）和其他 3组相比,干预 1组的细胞周期蛋白 D1（CyclinD1）mRNA、β-catenin mRNA表达水平明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 CyclinD1 mRNA、β-catenin mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）。结论：PRF可以促进 hPDLCs细胞增殖和成骨,并减少炎症因子表达,提升 ALP活性,其可能是通过激活 Wnt/β-catenin信号通路促进 CyclinD1、β-catenin mRNA表达加快hPDLCs细胞成骨。     

基于JAK2/STAT3信号通路探讨头针结合艾灸对缺血缺氧脑瘫幼鼠模型的影响及作用机制

摘要 目的：基于JAK2/STAT3信号通路探讨头针结合艾灸对缺血缺氧脑瘫幼鼠模型的影响及作用机制。方法：选取40只7 d龄的清洁级SD幼鼠,按随机数字表法分为A组、B组、C组、D组、E组,每组8只。E组不予以任何处理,其余各组幼鼠均以改良的缺氧缺血性脑病造模方法构建缺血缺氧脑瘫模型。造模成功后A组、B组、C组分别给予头针结合艾灸治疗、头针治疗、艾灸治疗,D组、E组均给予50 ?滋L生理盐水。对比各组幼鼠脑组织Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）及转录活化因子3（STAT3）蛋白表达量、血清炎症因子[白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子--α（TNF-α）、白介素-1（IL-1）]水平、神经递质[去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）]水平、记忆功能。结果：A组脑组织JAK2、STAT3 蛋白表达量低于B、C、D组,但高于E组（P<0.05）;A组血清IL-6、IL-1和TNF-α水平低于B、C、D组,但高于E组（P<0.05）;A组血清NE、5-HT水平低于B、C、D组,但高于E组（P<0.05）;A组Y迷宫实验正确次数多于B、C、D组（P<0.05）,而少于E组（P<0.05）。结论：头针结合艾灸可通过靶向抑制JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的表达下调机体炎症反应水平,从而降低缺血缺氧脑瘫幼鼠脑组织损伤,促进其记忆功能恢复。     

RGD多肽修饰钙磷陶瓷支架材料对骨质疏松兔成骨能力及骨功能影响的机制研究

摘要 目的：探究RGD多肽修饰钙磷陶瓷支架材料对骨质疏松（osteoporosis, OP）兔成骨能力和骨功能的影响极其可能的作用机制。方法：选取40只雌性SPF级新西兰大白兔，随机分为A组（正常对照组）和B组（OP组），每组各20只，再将A组随机分为A1组：sham组、A2组：sham+HA组、A3组：sham+BCP组、A4组：sham+RGD-BCP组，每组5只；B组随机分为B1组：OP组、B2组：OP+HA组、B3组：OP+BCP组和B4组：OP+RGD-BCP组，每组5只。B组采用去势法制备OP模型，检测相关指标。结果：A组兔术前和术后3个月时BMD无变化（P>0.05），B组兔术后3个月时的BMD值较术前下降（P<0.05）。自第4 d开始，A组和B组RGD-BCP支架材料组细胞的OD值高于HA和BCP支架材料（P<0.05），且B组之间的差异较A组更大（P<0.05）。Western Blot分析显示，A、B两组中RGD-BCP中整合素avβ3的表达高于HA和BCP（P<0.05），且B组之间的差异较A组更大（P<0.05）。B4和A4组p38 MAPK蛋白的相对表达均低于、Wnt5a和β-catenin表达均高于B2、B3和A2、A3组(P<0.05)，此外，A4组p38 MAPK蛋白的相对低于、Wnt5a和?茁-catenin表达高于B4组(P<0.05)。结论：RGD-BCP对兔BMSCs具有良好的相容性和吸附作用，对OP模型兔更显著；且RGD-BCP的机制可能与调控p38 MAPK/Wnt5a/β-catenin信号通路有关，为OP合并骨缺损的修复提供了新的思路和理论依据。     

柚皮苷对骨关节炎软骨破坏的保护作用研究

目的:考察柚皮苷对骨关节炎软骨破坏的保护作用。方法:将60只7周龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和柚皮苷组,每组20只。模型组和柚皮苷组大鼠通过切断右膝关节的前交叉韧带建立骨关节炎模型,建模后,柚皮苷组大鼠每天灌胃200mg/kg的柚皮苷溶液,共灌胃4周。通过番红O/固绿染色和OARSI评分评估大鼠的关节软骨损伤程度。通过免疫组织化学染色检测软骨组织中p-IκBα和NLRP3的表达。通过用IL-1β体外诱导SW1353细胞来模拟骨关节炎软骨细胞的病理微环境,并分别应用NF-κB抑制剂(PDTC)或NLRP3抑制剂(CY-09)处理SW1353细胞。通过RT-PCR和Western blot检测细胞中NF-κB、NLRP3、caspase-1、IL-6、IL-10、IL-18、MMP13和ADAMTS-5的表达。通过Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡。结果:与模型组相比,柚皮苷组的OARSI评分显著降低(2.63 vs 0.94,P0.05)。柚皮苷组的p-IκBα和NLRP3蛋白表达水平显著低于模型组(P0.05)。与IL-1β组相比,IL-1β+柚皮苷组的SW1353细胞中NF-κB、NLRP3、caspase-1、IL-6、IL-18、MMP13和ADAMTS-5的表达水平均显著降低,而IL-10显著升高(P0.05)。PDTC和CY-09对NF-κB和NLRP3信号通路相关分子的调控作用与柚皮苷一致。与IL-1β组相比,IL-1β+柚皮苷组、IL-1β+PDTC组和IL-1β+CY-09组的细胞凋亡率均显著降低(P0.05)。结论:柚皮苷可在体内和体外抑制骨关节炎的进展,柚皮苷对骨关节炎的治疗作用部分依赖于对NF-κB和NLRP3信号通路的抑制。     

崇左金花茶花朵和叶片类黄酮UPLC-Q-TOF-MS分析

以崇左金花茶（Camellia chuangtsoensis）为材料,利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）联用技术定性定量分析其花朵（花瓣、雄蕊）和叶片（老叶、新叶）中类黄酮成分与含量。结果表明,崇左金花茶中共检测到14种类黄酮成分,木犀草素、木犀草素-7-O-芸香糖苷、槲皮素-3,7-O-二葡萄糖苷、芸香柚皮苷、圣草素和染料木苷为山茶属金花茶组植物中首次发现,其中槲皮素-3,7-O-二葡萄糖苷、芸香柚皮苷、圣草素和染料木苷主要存在于花朵中,木犀草素和木犀草素-7-O-芸香糖苷在花朵中含量高于叶片,雄蕊中高于花瓣;槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷为金花茶组植物叶片中首次发现,其叶片中含量远低于花朵,老叶中远低于新叶,雄蕊中远低于花瓣;儿茶素和表儿茶素在花朵中含量高于叶片,雄蕊中高于花瓣;槲皮素和山萘酚在花朵和叶片中含量均较低。崇左金花茶花瓣和雄蕊中含量较高的类黄酮为儿茶素类、木犀草素类和槲皮素类,主要是表儿茶素、木犀草素和槲皮素-3-O-葡萄糖苷;叶片中为儿茶素类和木犀草素类,主要是表儿茶素、木犀草素和木犀草素-7-O-芸香糖苷。崇左金花茶花瓣和雄蕊中儿茶素类、木犀草素类及类黄酮总量均高于叶片,且雄蕊高于花瓣;花瓣和雄蕊中槲皮素类远高于叶片,且花瓣中远高于雄蕊。     

miRNA-145-5p调控FMNL2基因对口腔鳞癌干细胞增殖、迁移的影响

摘要 目的：分析miRNA-145-5p调控形成素2（formin-like 2,FMNL2）基因对口腔鳞癌干细胞增殖、迁移的影响。方法：按照脂质体2000说明书对细胞进行转染miRNA-145-5p inhibitor及miRNA-145-5p mimics,按照实验设计,将其分为空白组、沉默组（miRNA-145-5p inhibitor）及过表达组（miRNA-145-5p mimics）。荧光定量PCR法检测miRNA-145-5p、FMNL2表达量,MTT检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达量。结果：过表达组miRNA-145-5p、Bax蛋白表达量,凋亡率,细胞G0/G1比例高于沉默组,具有统计学差异（P＜0.05）;过表达组口腔鳞癌干细胞增殖率,FMNL2表达量、MMP-13、β-catenin、Bcl-2、APC蛋白表达量低于沉默组,具有统计学差异（P＜0.05）;过表达组口腔鳞癌干细胞迁移能力弱于沉默组,具有统计学差异（P＜0.05）。结论：miRNA-145-5p通过靶向调控FMNL2,作用于Wnt/β-catenin信号通路调控口腔鳞癌干细胞,进而抑制细胞增殖、迁移。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨miR-613对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移与侵袭的影响

摘要 目的：研究基于Wnt/β-catenin信号通路探讨微小RNA（miR）-613对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法：体外培养宫颈癌SiHa细胞和正常宫颈上皮细胞H8,检测细胞中miR-613表达。根据转染miR-613 mimic浓度不同,将SiHa细胞分为0 μmol/L组,100 μmol/L和200 μmol/L组。MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。蛋白免疫印迹法检测miR-613表达对Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Vimentin、E-cadherin和MMP9表达的影响。结果：宫颈癌SiHa细胞中miR-613表达水平均显著低于正常宫颈上皮细胞H8,差异有统计学意义(P<0.05)。转染miR-613 mimic后,100 μmol/L、200 μmol/L 组SiHa细胞中miR-613表达水平显著上调,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。与0 μmol/L组相比,100 μmol/L、200 μmol/L组的SiHa细胞增殖,迁移,侵袭能力均明显下降,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。免疫印迹结果,与0 μmol/L组相比,100 μmol/L、200 μmol/L各浓度组的SiHa细胞Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Vimentin和MMP9表达显著下调,E-cadherin表达显著上调,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论：miR-613能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制人宫颈癌细胞系SiHa细胞的增殖,迁移和侵袭。     

2型糖尿病合并骨质疏松症患者外周血炎性因子表达与骨代谢、骨密度丢失的关系

摘要 目的：探讨2型糖尿病合并骨质疏松症患者外周血中炎性因子NLR、IL-1β、TNF-α与骨代谢指标骨密度、活性维生素D、PTH、ALP及生化指标FPG、2hPG、HbA1c、空腹C肽、BMI、血脂、血尿酸之间的关系,为该类患者的诊断和治疗提供参考。方法：选取2020年9月至2021年9月在本院内分泌科就诊的2型糖尿病合并骨质疏松症患者80例作为观察组,同时选取同期健康体检者80例作为对照组。比较两组患者的一般资料,采用ELISA法检测两组患者外周血中NLR、IL-1β、TNF-α的水平,采用双能X线吸收法（DEXA）检测两组患者的骨密度,采用放射免疫法检测两组患者外周血中活性维生素D、PTH的水平,采用生化分析仪检测两组患者外周血中ALP、FPG、2hPG、HbA1c、空腹C肽、BMI、血脂、血尿酸的水平。结果：观察组患者外周血中NLR、IL-1β、TNF-α的水平均高于对照组（P<0.05）,观察组患者骨密度低于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中活性维生素D水平低于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中PTH水平高于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中ALP水平高于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中FPG、2hPG、HbA1c水平高于对照组（P<0.05）,观察组患者空腹C肽水平低于对照组（P<0.05）,观察组患者BMI高于对照组（P<0.05）,观察组患者血脂异常率高于对照组（P<0.05）,观察组患者血尿酸水平高于对照组（P<0.05）。观察组患者外周血中NLR、IL-1β、TNF-α与骨密度呈负相关（P<0.05）,与活性维生素D呈负相关（P<0.05）,与PTH、ALP呈正相关（P<0.05）,与FPG、2hPG、HbA1c、空腹C肽、BMI、血脂、血尿酸无显著相关性（P>0.05）。结论：2型糖尿病合并骨质疏松症患者外周血中炎性因子NLR、IL-1β、TNF-α水平升高,可能与骨代谢紊乱和骨密度丢失有关,提示该类患者存在慢性低度炎症状态,应加强对其骨代谢和骨密度的监测和干预,以降低骨折风险和改善生活质量。     

HGF调控β-catenin信号通路对家兔股骨颈骨折修复的影响

摘要 目的：探究HGF调控β-catenin信号通路对家兔股骨颈骨折修复的作用和影响机制。方法：15只股骨颈骨折家兔动物模型随机分为半合成细胞外基质样水凝胶组（sECM组）、sECmM+HGF组和脱钙骨基质组（DBM组）,自体右侧作为实验侧,左侧作为对照侧,对比各组家兔一般情况、骨折愈合质量评分骨痂最大载荷、挠度和刚度、BMSC细胞中BMP-2、TGF-β1、PDGF、bFGF mRNA表达水平和COL-I、Wnt5a、β-catenin和Lef-1蛋白表达水平。结果：术后各周sECM+HGF组和DBM组实验侧骨折愈合质量评分高于对照侧（P<0.05）,且高于同期sECM组实验侧（P<0.05）。术后8周,sECM+HGF组和DBM组实验侧骨痂最大荷载、挠度和刚度均优于对照侧（P<0.05）,且优于sECM组实验侧（P<0.05）。术后2周及4周,sECM+HGF组和DBM组实验侧BMP-2、TGF-β1、PDGF和bFGF表达显著高于对照侧（P<0.05）。且高于同期sECM组实验侧（P<0.05）,术后8周sECM+HGF组和DBM组实验侧BMP-2表达高于sECM组实验侧（P<0.05）。术后2周,sECM+HGF组和DBM组实验侧COL-I表达高于对照侧（P<0.05）。术后2周、4周sECM+HGF组和DBM组实验侧COL-I表达均显著高于同期sECM组实验侧（P<0.05）。术后8周,sECM+HGF组和DBM组实验侧wnt5a表达低于对照侧（P<0.05）且低于sECM组实验侧,β-catenin、Left-1表达显著高于对照侧（P<0.05）,且高于sECM组实验侧（P<0.05）。结论：HGF通过激活Wnt/β-catenin信号通路,上调BMP-2、TGF-β1、PDGF、bFGF和COL-1的表达,显著促进股骨颈骨折家兔的骨折修复过程。     

七氟醚对脑缺血再灌注损伤大鼠认知功能及海马S100β及PGRN表达的影响

摘要 目的：探索用七氟醚预处理后脑缺血再灌注损伤大鼠的认知功能变化情况以及海马细胞内钙结合蛋白（S100β）及颗粒蛋白前体（Progranulin,,PGRN）的表达水平。方法：选取SPF级雄性大鼠36只,按照随机数字表法分为假手术组（A组）、脑缺血再灌注损伤组（B组）、七氟醚预处理组（C组）,每组12只。B组和C组大鼠采用线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h,再灌注24 h,假手术组仅切开不插入线栓。术前七氟醚预处理组大鼠吸入体积分数3 %七氟醚和氧流量为2 L/min的混合气体,持续1 h,假手术组和脑缺血再灌注损伤组单纯吸入2 L /min的氧气。建模完成后采用大鼠神经功能缺损评分（modified neurological severity score,mNSS）评估大鼠的神经功能状况;Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习认知功能;Western Blot检测各组大鼠S100β和PGRN的表达情况。结果：（1）B、C组大鼠mNSS评分显著高于A组,C组评分较B组有明显降低（P＜0.05）;（2）与A组相比B、C两组逃逸潜伏期明显延长,C组与B组相比逃逸潜伏期显著缩短（P＜0.05）;（3）B、C组大鼠海马S100β和PGRN的表达较A组有显著上调,其中C组S100β表达较B组显著降低,PGRN表达显著升高（P＜0.05）。结论：本文通过观察七氟醚预处理对CIRI大鼠认知功能及海马S100β和PGRN蛋白表达水平的影响,发现七氟醚预处理对CIRI大鼠认知功能有显著提高,其作用机制与海马S100β和PGRN的表达密切相关,为进一步探索其作用机制提供参考证据。     

IGF-1联合BMP-2对糖尿病合并骨质疏松股骨骨折大鼠中的骨折愈合影响分析

摘要 目的：探讨胰岛素生长因子-1（insulin-like growth factor, IGF-1）联合骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）-2对糖尿病合并骨质疏松股骨骨折大鼠中的骨折愈合影响。方法：8周龄雌性SD大鼠60只,饲养一周后根据随机数字表法进行分组,每组12只,之后进行造模,造模成功50只,成功率为83.33 %。将其分为5组,包括正常组（n=10）,糖尿病+卵巢切除+骨折组（n=9）,糖尿病+卵巢切除+骨折+ IGF-1组（骨折处注射IGF 30 μg/kg,n=11）,糖尿病+卵巢切除+骨折+BMP-2组（骨折处注射100 μL BMP-2基因慢病毒1×10⁸,n=10）、糖尿病+卵巢切除+骨折+IGF-1+BMP-2组（参照上述,n=10）,其余进行等剂量溶剂注射,均连续注射两天。分组处理6周后,观察5组大鼠的一般情况。对比5组大鼠的血清钙、骨钙素、碱性磷酸酶水平,对比5组的最大应力、最大载荷及刚度,检测5组大鼠组织中的IGF-1、BMP-2及TGF-β1 mRNA表达水平。结果：A组大鼠无明显异常反应,大鼠体重逐渐增加,大小便、饮食均正常,毛色光亮;B、C、D、E组大鼠精神萎靡、反应迟缓、毛色光亮性较差、体重无明显减轻或增加、大鼠的饮水量、饮食增加,多尿症状较为明显。5组大鼠的血清钙、骨钙素、碱性磷酸酶水平：B组结论：IGF-1联合BMP-2可促进糖尿病合并骨质疏松股骨骨折大鼠中的骨折愈合。     

不同剂量羟考酮复合右美托咪定麻醉对肺癌根治术患者自控静脉镇痛效应及免疫应答的影响

摘要 目的：观察不同剂量羟考酮复合右美托咪定麻醉在肺癌根治术患者中的临床应用效果。方法：采用随机数字表法,将2017年3月~2020年12月期间在我院行肺癌根治术的肺癌患者（n=140）分为A组（1.0 mg/kg羟考酮）、B组（2.5 μg/kg右美托咪定、1.0 mg/kg羟考酮）、C组（2.5 μg/kg右美托咪定、0.75 mg/kg羟考酮）、D组（2.5 μg/kg右美托咪定、0.5 mg/kg羟考酮）,各为35例。观察四组患者的血流动力学、免疫应答、镇痛效应满意度及不良反应发生率。结果：C组、D组术后2 h（T1）~术后6 h（T2）时间点心率（HR）、平均动脉压（MAP）小于A组、B组（P<0.05）。而A组、B组之间和C组、D组之间的T1、T2时间点HR、MAP组间对比差异不显著（P>0.05）。A组、D组的镇痛效应满意度小于C组和B组（P<0.05）。而A组、D组之间和C组、B组之间的镇痛效应满意度组间对比无差异（P>0.05）。C组、D组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺高于A组、B组;CD8⁺则低于A组、B组（P<0.05）。而C组、D组之间、A组、B组之间的CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺组间对比差异不显著（P>0.05）。C组的不良反应发生率小于A组、B组、D组（P<0.05）。结论：羟考酮复合右美托咪定麻醉用于肺癌根治术患者,以0.75 mg/kg羟考酮+2.5 μg/kg右美托咪定的效果最好,可获得较好的镇痛效应满意度,稳定血流动力学,减轻免疫抑制,安全可靠。     

过表达IDO骨髓间充质干细胞对腹腔异位移植心脏模型大鼠炎症反应、T细胞亚群和NF-κB/NLRP3通路的影响

摘要 目的：探讨过表达吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）骨髓间充质干细胞（BMSCs）对腹腔异位移植心脏模型大鼠炎症反应、T细胞亚群和核因子（NF）-κB/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）通路的影响。方法：慢病毒载体及基因开启技术构建过表达IDO大鼠BMSCs,建立60只大鼠腹腔异位移植心脏模型,造模成功后,随机分为4组,每组各15只。空白组建模后未给予任何处理,吗替麦考组喂养吗替麦考40 mg/kg,空白-BMSCs组在腹腔异位移植心脏术后3 d,经尾静脉注射空白-BMSCs,IDO组在腹腔异位移植心脏术后3 d,经尾静脉注射过表达IDO-BMSCs（每只400 μL,10⁶个细胞）。检测并对比四组心功能、血清心肌酶、炎症因子、T细胞亚群、心脏病理变化以及NF-κB/NLRP3通路相关蛋白表达情况。结果：IDO组射血分数差值、环比收缩（FS）差值大于空白组、吗替麦考组、空白-BMSCs组（P＜0.05）,血清肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK）-MB、白细胞介素（IL）-1α、IL-1β、IL-2、γ干扰素（IFN-γ）、IL-18水平以及脾脏组织CD40、CD86、CD80、MHC II、CD45RA、CD45RA+CD45RB,心脏组织NF-κB、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase）-1表达低于空白组、吗替麦考组、空白-BMSCs组（P＜0.05）,血清IL-10、TGFβ1、TGFβ3水平以及脾脏组织CD274、Treg表达高于空白组、吗替麦考组、空白-BMSCs组（P＜0.05）。HE染色结果显示IDO组炎症细胞浸润较空白组、吗替麦考组、空白-BMSCs组明显减少。结论：过表达IDO-BMSCs可减轻免疫和炎症反应,改善移植心脏功能,可能与其抑制NF-κB/NLRP3信号通路的激活有关。     

纺壳聚糖聚己内酯纳米纤维膜对鼠骨髓间充质干细胞成牙功能影响

摘要 目的：探讨纺壳聚糖聚己内酯纳米纤维膜对鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）成牙功能影响。方法：从SD大鼠分离BMSCs,然后随机分为两组,一组与纺壳聚糖聚己内酯纳米纤维膜进行共培养（共培养组）;另一组不进行共培养,直接在细胞板内培养（对照组）。检测细胞增殖指数、细胞钙含量、碱性磷酸酶活性与成骨相关基因表达水平。结果：BMSCs细胞形态较为单一,呈纤维样、旋涡状梭形、生长,长期培养可见细胞成片生长并相互融合。与共培养24 h相比,共培养48 h后共培养组细胞增殖指数、钙含量、碱性磷酸酶活性以及O成骨相关基因CN、Col1、Runx2等相对表达水平均显著增加（P<0.05）。共培养24 h与48 h后,共培养组的细胞增殖指数、钙含量、碱性磷酸酶活性和骨钙素（OCN）、Ⅰ型胶原α1（Col1）、Runt相关转录因子2（Runx2）等成骨相关基因相对表达水平都显著高于对照组（P<0.05）。结论：纺壳聚糖聚己内酯纳米纤维膜在BMSCs中的应用能促进细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性与钙含量,促进成骨相关基因的表达,从而发挥成牙功能。     

人羊膜上皮干细胞联合富血小板血浆对宫腔粘连大鼠纤维化因子、炎症因子的作用

摘要 目的：探究人羊膜上皮干细胞（hAECs）联合富血小板血浆（PRP）对宫腔粘连大鼠的治疗效果,为临床中优化宫腔粘连治疗方法理论基础。方法：选用SPF级雌性SD大鼠共40只,依照随机数字表法随机分为空白组（A组）、假手术组（B组）、hAECs组（C组）、PRP组（D组）、hAECs+PRP组（E组）,每组各8只。A组不做任何处理,B组仅做麻醉、开关腹腔处理,C组、D组、E组使用搔刮法制备宫腔粘连模型。随后C组进行hAECs治疗,D组注射等量生理盐水。D组进行PRP治疗,C组注射等量生理盐水。E组进行hAECs联合PRP治疗。观察比较两组大鼠子宫内膜组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、盘状结构域受体2（DDR2）蛋白表达水平、PI3K/Akt/mTOR通路相关mRNA表达量、血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）水平以及各组大鼠妊娠孕囊数量比较。结果：与A组相比,B组的子宫内膜组织MMP-9、DDR2蛋白表达水平、p-mTOR mRNA、p-Akt mRNA水平以及血清IL-6、IL-8水平比较无差异（P＞0.05）;C组、D组、E组大鼠的子宫内膜组织MMP-9、DDR2蛋白表达水平明显下降,IL-6、IL-8水平、p-mTOR mRNA、p-Akt mRNA表达升高（P＜0.05）。其中,E组大鼠MMP-9、DDR2蛋白表达水平明显高于C组、D组,IL-6、IL-8水平及p-mTOR mRNA、p-Akt mRNA表达低于C组、D组（P＜0.05）。C组、D组大鼠MMP-9、DDR2蛋白表达水平、血清IL-6、IL-8水平及p-mTOR mRNA、p-Akt mRNA表达比较（P＞0.05）。妊娠孕囊数量方面,与A组比较,B组大鼠妊娠孕囊数量。结论：hAECs联合PRP治疗可能通过上调宫腔粘连大鼠子宫内膜组织MMP-9、DDR2蛋白表达水平并下调p-mTOR mRNA、p-Akt mRNA表达,同时降低炎性因子IL-6、IL-8水平,进而提高妊娠孕囊数量,起到治疗作用。