疫苗

920931生物技术在研制动物皮苗中的应用〔英〕/Redm。-nd,M J.…了Genet。Eng.Bioteehnol。-1991,11(1)一14一21〔译自DBA,1991,10 (15),91一08572〕 本文综述了应用生物技术生产动物疫苗。讨论的题目有:工程疫苗(即经修饰的减毒重组活疫苗或重组的载体活疫苗如痘苗病毒载体或鼠伤寒沙门菌载体),亚单位重组疫苗(原核系统如大肠杆菌表达的蛋白)、和真核系统(如酿酒酵母菌表达的乙型肝炎病毒、CHO细胞表达的单纯疙疹病毒、携带首落银纹夜蛾核型多角体病毒载体的草地夜蛾昆虫细胞表达的流感病毒或人轮状病毒)表达的蛋白;合成肤疫苗;疫苗配…     

基因工程

890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN…     

农业上的应用

生物防治组织与原生质体培养932031启动子对杆状病弃介导的甚因在受纳和非受纳昆虫组饱系中农达的形响一英〕/Morris,T.D.一,J .Virol一1992,65(12)一7397~7405〔译自DBA,1995,12(i),93一00265〕 在宜组杆状病毒(首藉银纹夜蛾核多角体病毒)侵染7种昆虫细胸系期间,试验了代表早、晚和极晚期启动子的3种病毒启动子和昆虫启动子(果蝇hsp7。启动子(HP”表达的瞬时形式和相对强度。结果表明,极晚期启动子活性主要受受纳细胞限制。在非受纳细胞中,晚期启动子的表达不象受纳细胞那样高,但比病毒早期启动子的表达要高。来自病毒衍生HP的非受纳…     

医药其它

922949在特定杆状病毒表达系统中生产具生物学活性的跳胺化eeeropin〔英〕/Andersons,H.…2 Bioe-liem.J一1091,250,Pt.1一219~224〔译自DB-A,1992,11(3),92一01388〕 构建了表达质粒pVL941一22一ceoA,其中含有:组织血纤维蛋白溶酶原激活子(t一PA)的信号肤、从金黄色葡萄球菌蛋白一A(22)衍生的合成性抗体结合部分、编码cecropin一A天然部分的合成片段(附加C末端甘氨酸密码子)。将此融合基因转入首着银纹夜蛾核多角体病毒载体基因组,再用重组病毒感染草地贪夜蛾Sfg细胞。对从细胞培养基获取的蛋白进行SDS一PAGE和blotting检测。采…     

疫苗

881180感染性重组病毒,含有所述猫白血病病毒疫苗及其生产方法〔专,英〕/Nunbe-rg,J .H.…1 European Patent Appl.EP 0216564.Pub.01 .04 .87.Appl.US.774040,filed 09.09.86〔译自CBA,1957, (6),2576〕 含有一个嵌合猫白血病病毒(FeLV)外壳基因的感染性重组病毒可用作猫白血病疫苗。用病毒DNA和一个插人性载体转染易感的哺乳动物细胞来制备病毒。该载体带有由在细胞内具活性的启动子、翻译起始密码子和为FeLV病毒外壳蛋白编码的一个DNA片段组成的嵌合基因。编码蛋白的DNA受控干启动子。用这种感染性重组病毒和一个衍生载体或…     

基因诱变、重组、克隆

923208通过逆转录病毒载体介导的签因转移在人异染性脑白质营并不良成纤维细胞中恢复芳荟硫酸菌脚A (ASA)活性〔英〕/Rommerskireh,W.…了Bioehem。J扩1991,250.Pt.2厂459~461〔译自DBA,1992,11(5),92一02414」 将人的ASA cDNA克隆到逆病毒载体质粒pXTI(含单纯疤疹病毒胸昔激酶启动子及小鼠Moloney白血病病毒5‘长末端重复片段)中,形成pXTASA。转染双嗜型PA317包装细胞培养,产生复制缺陷型逆病毒。用重组逆病毒感染MLD患者的成纤维细胞(2301培养)。受染细胞比正常人的对照细胞表达多10倍的ASA。由整合型原病毒编码的ASA被正…     

质粒研究与载体构建

920410可在蓝燕株系PCC7120中分析启动子的载体〔英〕/Tang,J.D.…了J.Baeteriol一1901,i了3 (s)一2729~2731〔译自DBA,1991,10(12),91一06654〕 构建了启动子探测载体pJL3,它含有一个多克隆位点、cat基因(不带启动子)以及转录终止子。经接合将其从大肠杆菌转移至Aoaba‘。a“P.PCC7iZo中。新质粒的成分来源于:质粒pRL25C (含大肠杆菌和兰藻复制子)、新霉素杭性标记、bom接合转移区、质粒pDUI(从丝态兰细菌分离到)以及pBR322的序列。描述了该载体质粒的详细构建过程。Aoaba。:a psbB基因编码光合系统n中的一种分子量47000的叶绿…     

植物遗传工程

921489单子叶植物LHCp启动子在转基因水稻中的表达〔英〕/Tada,Y.…2 EMBOJ一1991,10(7)一1803~1808〔译自DBA,1991,10(18),91-10498〕 通过电激将与编码水稻(Or夕za夕at苏公a)捕光叶绿素a/b光系统一n(LHCPll)结合蛋白启动子相连的户葡糖昔酸酶(GUS)基因(位于质粒PLHC4.4中)导入水稻。转化原生质体和愈伤培养物中由LHCP启动子控制的GUS基因表达远低于由花椰菜花叶病毒(CaMV)355启动子控制的,而在绿色器官中,LHCP启动子启动的LHCP-GUS活性比CaMV35S启动子启动尸的高10倍。在叶、茎和花组织中检测到LHCP一GUS基因的表…     

基因标记、转化、表达与检测

,石石泞‘汤.刁,,口.r..“924339杆状病毒至组体在受纳和非受纳昆虫细饱中的签娜表达〔会,英〕/Melntosh,A.H.…2 In vitro一1992,25(3),Pt .2一soA〔译自DBA,1992,11(11),92一06032〕 用携带在p10和多角体启动子控制下的声一半乳糖昔酶和荧光素酶基因的首蓓银纹夜蛾多核壳体核多角体病毒(Ac一Gal一Lu。)测定了报道基因在受纳和非受纳昆虫细胞中的表达。所用鳞翅目昆虫细胞系为粉纹夜蛾(Tn一CLI)、草地贪夜蛾(少-LB一Sf21)等6种,还用了鞘翅目棉铃象的细胞系(AGE)。将细胞与Ae一Gal一Lul以ioMOI的量一同在28℃下保温72小时,然后…     

基因标记、转化、表达与检测

821276大肠杆菌户葡枪普酸酶甚因作为鉴定酵母菌株的标记〔英〕/petering,J……了Am.J。Enol.Vitie一1991,42(i)一6一11〔译自DBA,1991,10(18),91一10239二 大肠杆菌介葡糖普酸酶(GUS)uidA基因(分离自质粒pKLG4的HindIH片段)经改造,即在其编码序列上连接酿酒酵母乙醇脱氢酶启动子和终止子序列,构成pAW220新质粒,用于在酵母中的表达。pAW220在转化酿酒酵母3A时,可整合至第13染色体的ILVZ基因中。筛选抗性除草剂甲基化Sulfometuron(10产g/ml)的转化株。用Southern杂交法筛选转化株中在ILVZ基因内含有GUS者(3 AM)。3 AM培养于1…     

生物防治

922224通过表达昆虫选择性蛋白改进杆状病毒杀虫剂功效仁会,英〕/Hammoek,B.D.…了Abstr.Pap。Am.Chem.Soe一1991,202 Meet,Pt.1一AGROg〔译自DBA,1091,10(23),。i-13538〕 对昆虫进行生物防治的重组DNA技术能带来一67一许多便利,包括提高昆虫的选择性和有益性,减少其对环境的影响和害虫抗性,并能降低注册费用。重组技术也能用于杆状病毒,以减少病毒侵染幼虫的饲喂伤害。杆状病毒中的某些强启动子可用于表达某些高效基因。用这些启动子表达昆虫的神经激素能减少饲喂损伤,表达毒素,减少的效果非常明显。另外有表达调节酶,如幼虫激素…     

生物防治

941136全长和平截的苏云金芽抱杆菌晶体蛋白基因在杆状病毒中的表达及重组病毒的致病性〔英〕/Ri-beiro,B。M。…了J。Invertebr。Pathol。-1993,62(2)一121〔译自DBA,1993,12(22),93一12837〕 构建了分别含全长苏云金芽抱杆菌kurstakiDH一1亚种晶体蛋白cryIA(b)基因(质粒pAc-Btm)、该菌kurstaki HD一73亚种eryIA(e)基因(pAeBt73)、和eryIA(b)基因5尹平截形 (pAeBts)、3了平截形(pAeBt3)及5尹/3尹平截形(P AoBts/3)‘基因的重组转移载体。用之与重组杆状病毒AoRPS一刀一gal或野生型首蓓银纹夜蛾核多角体病毒DNA一道共转染草…     

生物防治

930205焉抒状■毒载体表达有杀虫活性的蛋白[会,英]/Po~$ee,R.D.…,Ann.N..Y.Acad.Sci.-1991,646.-236---2391"译自DBA,1992,11(13),92-074623 将IHE(青春素酯酶)基因插入于苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(AcNPV)的完整多角体基因上游,处于p10启动子调控之卞,构建成重组病毒生防因子,AcUWz(B)JHE。用该因子或含苏云金杆菌毒素因子的类似因子(以前发表过)感染草地夜蛾(Spodoptera,rugiperda),30小时后收集并沾染食物表面。将3日龄粉纹夜蛾(~ric.hoplusia ni)置于污染的食物上。取食于受Ac—NPV侵染的草地夜蛾污染过的食物后,虫体在5天…     

激素和活性多肽

920 141表达P45O一加单级酶的盆组醉母细胞的径化反应〔会,英〕/Ohkawa,H.…尹Ann.N.Y。Aead.Sei一1090,615一37~45[译自DBA,1991,10(9),91一04951〕 对微粒体细胞色素一P 45。一加单氧酶(P 450)进行酶工程处理,目的在于提高可能用于工业化学制剂中的酶的反应性和稳定性。建立了一个含有由质粒pAAHS转化的酵酒酿母AH 22的酵母转化系统,该质粒的ADH启动子和终止区之间含有P 450cDNA。能用于幽类化合物转化的牛P45。·17一a和P 45卜C 21 oDNA在酿酒酵母中表达为具酵母NADPH一依赖型细胞色素一P 45。‘还原酶的融合蛋白,该蛋白…     

疫苗

924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(…     

生物防治

920202连续昆虫细胞生物反应器生产杆状病毒或盆组衍生物〔会,英〕/van Lier,F.L.J.一2 Ann.N .Y.Acad.Sci一2992,613一253~100〔译自DBA,1991,10(9),91一05063」 叙述了杆状病毒的分子生物学,以及如何生产用于昆虫生防的重组杆状病毒。此为连续操作系统,其中两个相连反应器的第一个用于培养昆虫细胞,在第二个反应器中,非封闭形首蓓银纹夜蛾(A“to夕ra夕无acal‘for。￡ca.)核多角体病毒 (AoNPV)侵染昆虫细胞。细胞裂解前完成侵染周期。在剪切力最小的饱罩塔中反应,此模型用于气提式生物反应器。4周后,在上述二步反应器中,草地夜蛾(…     

植物遗传工程

95’1027 r ‘启动子序列对杂交落叶松和黑云杉中卢一葡糖宙酸酶基因瞬时表达的影响[英]/Duchcsne,L.C.…,Can.J.Bot.一1992,70(1).·175～I电O[译自DBA,1992,儿(17),92-09768] 一‘、 比较了用微轰击系统导入8种具不同启动子序列载体的杂交落叶松(Lafix×￡.ew'ole~i:sLB) (Larix decidua×L.Zeplolepis)和黑云杉胚性细胞系中卢一葡帖仆酸酶}Il导旭因的瞬时表达情况。用小麦脱落酸诱导性Em恭p司启动_早轰击的各种细胞系中∥一葡糖苷酸酶的瞬时表达均最高。除了水稻肌动蛋[J Fj动手外,用各种载俸在落叶松和黑云杉中的表达程度均孝f…     

基因工程

880888酵母启动子和生产异源蛋白的方法〔专,英]/H。,·11,H.…厂E uropoan丁)ate-nt\PPI.E干,0216573.尸t一b.01。04。87.A ppl.J工,205823/85,fil。d 18.09.85乞译自CB人,2 987,(6),2392〕 描述J’一个D伙A序列,它具有173bp的可阻遏的磷酸酶(PHOS)启动子区,位于PHOS蛋自起始密码上方。提供了利川这种D入、)节歹d作为启动子生产异源蛋白的方法。这种经修饰的小烈化的酵母启动子可使生理活性物质在酵母中有效表达。提供了一个前所未有的修饰的小型化PHOS启动子及简易的重组DNA程序。这个启动子还可使PHOS启动子利用补充磷酸培…     

抗生素和干扰素

940623用链霉菌分泌表达系统生产抗细菌肚“aPidaeci-n”〔英〕/Maeno,M.…/Biosei.Bioteehnol。Bio。hem一1993,57(7)一1206~1207〔译自DBA,1993,12(19),93一10550〕 为了获得链霉菌枯草溶菌素抑制素(SSl)’-ap记aecin融合蛋白,构建了一种表达载体质粒pjsZos一d一EAPIM,并在变铅青链霉菌菌株66中表达。融合蛋白的产量为72m幻1培养基。这种融合蛋白含有551和加在apidaeein基因前头的具Met密码子的apida“cin,起CNBr切割位点的功能。用硫酸钱沉淀、离子交换层析和反相HPLC法纯化产物,并用CNBr切割分离apidaecin(一种抗菌肤,具有1…     

其因诱变、重组、克隆

931176应用电侧联仅砚辅助显徽术检测土雄中的单个遗传工程菌〔英]/Sileoek,D.J.…广Appl.Env-iron。Mierobiol。一1992,55(s)。一2444~2魂‘s〔译自DBA,1902,11(20),。2一11141〕 将铜绿假单胞菌噬菌体phi一PL527的HCM启动子(来自质拉pQF26一HcM)连接到启动子探测载体质拉pQF70上。pQF70含有哈维弧菌(V云-br‘0 ha,公。夕落)的荧光酶lux AB基因。转化大肠杆菌JM83,挑选出那些能从n一癸醛产光的阳性转化株。从转化株中纯化出质粒pGF7。/44,用于转化丁香假单胞菌菜豆色栽培种。通过紫外光下荧光法鉴定出转化子,也可以在培养皿翻…