ＩkB激酶及相关信号转导研究进展

ＮＦ－kB（nuclear factor-kB)是一广泛存在的核转录因子,它参与多种基因的转录调控,与许多重要的生理病理过程关系密切。许多细胞外刺可诱导ＮＦ－kB的活性,位点特异的ＮＦ－kB抑制蛋白（ＩkB）的磷酸化对于激活ＮＦ－kB有重要意义。ＩkK(IkB kinase)的发现为进一步了解ＮＦ－kB的功能和调控提供了线索,本文综述了ＩkK的结构、功能及相关信号转导研究进展。     

干扰素基因表达调控研究进展

干扰素基因表达调控研究进展孙劲综述方企圣审（中国预防医学科学院病毒研究所,北京１０００５２）近年来,有关于扰素（ＩＦＮ）分子生物学的研究以及基因工程方法生产干扰素取得很大进展。本文将有关ＩＦＮ蛋白的诱导和基因调控机理方面最新进展作一综述。ＩＦＮ蛋白的...     

人γ干扰素（IFN－γ）－表皮生长因子（EGF）融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用与靶细胞的EGF受体有关

采用表皮生长因子（ＥＧＦ）受体丰富的Ａ４３１细胞进一步研究了人ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白￣〔１〕的抗细胞分裂活性,以及它和靶细胞ＥＧＦ受体的关系。结果表明,ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用明显高于其母体分子。￣１２５Ｉ－ＥＧＦ受体竞争抑制试验表明,ＩＦＮ－γ可与ＥＧＦ竞争Ａ４３１细胞的ＥＧＦ受体,而ＩＮＦ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的ＥＧＦ受体竞争抑制作用更为明显,说明人ＩＦＮ－γ和ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞分裂活性,与靶细胞ＥＧＦ受体被竟争抑制密切相关。     

胰岛素样生长因子系统的营养调控

胰岛素样生长因子系统的营养调控邹仕庚王恬（南京农业大学动物科技学院,南京２１００９５）胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）因其结构和功能类似胰岛素而得名,ＩＧＦ主要包括ＩＧＦⅠ和ＩＧＦⅡ。体内多种组织都能合成ＩＧＦ,表达ＩＧＦ受体;ＩＧＦ大部分由肝脏合成,...     

N42—A神经生长因子诱导PC12细胞分化的抑制作用

研究表明,缺乏神经生长因子（ＮＧＦ）的营养支持是Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓ等神经元退行性疾病发生发展的重要原因,而ＮＧＦ和／或ＮＧＦ受体的过度表达则与一些神经系统肿瘤的发生发展有着十分密切的因果关系。采用＾１２５Ｉ－ＮＧＦ受体特异结合实验作为ＮＧＦ受体活性物质筛选实验模型从中药牛膝中筛选出了能强烈地抑制＾１２５Ｉ－ＮＧＦ受体结合的活性成分Ｎ４２－Ａ（ＩＣ５０＝６．１８±３．４３,ｎ＝４）;细胞培养实验     

不同功能位点介导α干扰素的免疫调节和中枢镇痛作用

细胞因子α干扰素（ＩＦＮα）具有中枢镇痛作用。抗内源性阿片肽血清与ＩＦＮα能发生明显的交叉反应,提示ＩＦＮα与内源性阿片肽之间存在着共同的抗原决定基。采用基因定点突变技术,获得系列ＩＦＮα突变体,并分别测定其免疫学活性和镇痛能力。结果显示,ＩＦＮα突变体Ｙ１２９Ｓ－ＩＦＮα免疫学活性显著下降,但仍然保留了很强的镇痛能力,阿片受体拮抗纳洛酮能够阻断Ｙ１２９Ｓ－ＩＦＮα的镇痛作用。实验结果表明,ＩＦＮ     

TNF—α在PMA和IFN—γ诱导U937细胞生长和分化过程中的作用

本文报道了佛波酯（ＰＭＡ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）对Ｕ９３７细胞生长和分化的调控作用及其机制。ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ能以剂量依赖的方式诱导Ｕ９３７细胞向成熟单核／巨噬细胞样细胞分化,同时抑制其细胞的生长。实验发现ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ可诱导Ｕ９３７细胞表达ＴＮＦ－α特异性ｍＲＮＡ和蛋白质。Ｕ９３７细胞培养中加入特异性抗ＴＮＦ－α抗体可以抑制ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ诱导Ｕ９３７细胞的分化和生长。这说明内源性的Ｔ     

人类嗜T细胞白血病Ⅰ型病毒TAX蛋白对NF—kB转录因子的作用

人类嗜Ｔ细胞白血病Ⅰ型病毒（ＨＴＬＶ－Ⅰ）是成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）的致病因子,其编码的ＴＡＸ蛋白的反式激活在白血病形成中有重要作用。ＮＦ－ｋＢ是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。正常情况下,ＮＦ－ｋＢ因子与抑制性蛋白ＩＫＢ结合,形成复合物存在于胞质中。ＴＡＸ蛋白可与ＩＫＢ激酶γ（ＩＫＫγ）直接结合,而后启动ＴＡＸ对ＩＫＫα和ＩＫＫβ的结合,并使之发生磷酸化。后者使ＩＫＢ蛋白降解,ＮＦ－     

IL—18信号转导途径研究进展

白细胞介素１８（ＩＬ－１８）是新近发现的细胞因子,其独特的少ＴＡＴＡ型启动子、特殊的ｍＲＮＡ结构及其前体蛋白需ＩＬ－１β转化酶（ＩＣＥ）加工成熟的特点,便得ＩＬ－１８基因可广泛表达于多种类型的细胞,ＩＬ－１８ＩＬ－１８受体结合组成受体复合物,受体复合物信号通过ＩＲＡＫ－ＴＲＡＦ６途径激活ＮＦ－кＢ,及通过酪氨酸蛋白激酶（ＰＴＫ）的ＬＣＫ－ＭＡＰＫ信号途径诱导ＴＨ１细胞产生ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２等细胞     

基因工程人干扰素α2b和α2a亚型抗病毒效应的实验研究

本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应,其中（１）α２ｂＩＦＮ抗流感病毒作用略强于α２ａＩＦＮ,（２）两亚型α干扰素抗脊髓灰质炎和麻疹病毒作用相似。     

可溶性55kD人肿瘤坏死因子受体(shTNFR55)在变铅青链霉菌中的分泌表达

从 Ｈｅ Ｌａ 细胞中提取总 Ｒ Ｎ Ａ,采用反转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术,从该总 Ｒ Ｎ Ａ 中扩增了约 ５３０ ｂｐ 的ｓｈ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ,并克隆至质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ中酪蛋白酶 ｍ ｅｌ Ｃｌ 分泌信号肽编码序列的下游,构建成含融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 的重组质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．把融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入链霉菌表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ 的多克隆位点,使之位于 ｅｒｍ 强启动子的下游,得到重组表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．经 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交证明重组质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入了 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因片段．对重组菌株 Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ（ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ）的发酵液进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ、受体配基杂交（ Ｌｉｇａｎｄ ｂｌｏｔ）分析、对 Ｔ Ｎ Ｆ 敏感的 Ｌ９２９ 细胞的细胞毒性中和试验表明,可溶性肿瘤坏死因子受体 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 在链霉菌中得到了分泌表达,表达产物具有生物学活性．表达产物的分子量约在 ２６～２８ ｋ Ｄ 之间．     

N－糖链在纤连蛋白分泌及纤连蛋白受体与配体结合中的作用

应用能阻断糖蛋白Ｎ－糖链合成的衣霉素（ＴＭ）,研究了Ｎ－糖链缺失对ＨＴ１０８０细胞分泌纤连蛋白（Ｆｎ）以及纤连蛋白受体（ＦｎＲ）与配体结合的影响。结果发现,１μｇ／ｍｌ的ＴＭ可抑制Ｎ－糖链的合成（此时,３Ｈ－甘露糖掺入下降６３％）,但细胞分泌Ｆｎ的量仅下降３３％,这主要是由于蛋白合成受ＴＭ抑制（２５％）而引起,因而,Ｎ－糖链缺失可能并不影响Ｆｎ的分泌。而在同样条件下,单个细胞结合１２５Ｉ－Ｆｎ的量显著下降,显示Ｎ－糖链的缺失可能导致了膜上ＦｎＲ总量或其与配体结合的亲和力的改变。ＴＭ处理组的ＦｎＲ的内吞率与对照组相比较无明显差异,提示受体分子中的Ｎ－糖链缺失不影响其内吞过程．     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对常见呼吸道病毒的抑制作用

用人重组肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）和人天然α干扰素（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－α－,ＩＦＮ－α）在人胚胎肺纤维母细胞（ＨＥＦ）和Ｈｅｐ－２细胞系上对常见呼吸道病毒所致细胞病变抑制进行比较观察。病毒包括不同型别的腺病毒５株,单疱病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ｉ）１株,鼻病毒１株,仙台病毒１株,ＶＳＶ１株。结果提示ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α均具有广谱抗病毒活性。ＴＮＦ－α的抑毒作用能被ＴＮＦ－α申抗和ＩＦＮ－β单抗完全去除,被ＩＦＮ－α单抗部分去除ＴＮＦ－α的抗病毒效应。ＴＮＦ－－α中和试验的结果提示：ＴＮＦ抗病毒活性仍为ＩＦＮ－β诱生所介导。     

IGF—I及其受体,IGF结合蛋白—2和LH受体mRNA在卵泡中的表达

利用原位杂交和原位ＤＮＡ－３’末端标记的方法研究了胰岛素样生长因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）,ＩＧＦ－Ｉ受体,ＩＧＦ结合蛋白－２,和促性腺激素受体的信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）在不同生长与闭锁阶段的大鼠卵巢卵泡中表达的变化,结果表明：ＩＧＦ－Ｉ主要在正常生长的初级卵泡,窦前卵泡和小窦状卵泡中表达。在各生长与成熟阶段的卵泡中都检测到ＩＧＦ－Ｉ受体ｍＲＮＡ,闭锁卵泡的ＩＧＦ－Ｉ受体表达降低,窦前与窦状的生长和闭锁     

半纤维素的化学结构和生理功能

半纤维素的化学结构和生理功能李雄彪,张金忠（北京大学生物学系北京１００８７１）（南开大学生物系天津３０００７１）ＣＨＥＭＩＣＡＬＳＴＲＵＣＴＵＲＥＡＮＤＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＦＵＮＣＴＩＯＮＯＦＨＥＭＩＣＥＬＬＵＬＯＳＥ￥ＬｉＸｉｏｎｇ－ｂｉａｏ...     

人IL-2/IFNα2b融合基因在肝癌细胞中靶向表达

 根据细胞因子之间协同作用的特点,采用重组 Ｄ Ｎ Ａ 技术设计并构建了人 Ｉ Ｌ ２ 与 Ｉ Ｆ Ｎα融合基因,并用肝癌组织特异的 Ａ Ｆ Ｐ增强子／ Ａ Ｌ Ｂ启动子调控融合基因在肝癌细胞中的靶向表达．实验结果表明,克隆的 Ｅ Ａ Ｆ Ｐ Ｐ Ａ Ｌ Ｂ联合转录调控序列能调控细胞因子基因在 Ａ Ｆ Ｐ阳性人肝癌细胞中靶向表达, Ｉ Ｌ ２／ Ｉ Ｆ Ｎα２ｂ 融合基因的表达水平与感染肝癌细胞的 Ａ Ｆ Ｐ表达水平呈正相关性．实验证明表达的融合蛋白具有 Ｉ Ｌ ２ 和 Ｉ Ｆ Ｎ 两种生物学活性的细胞因子．这可能为肝癌基因治疗开辟新途径．     

云南红豆杉细胞培养中紫杉醇的代谢调控

云南红豆杉细胞培养中紫杉醇的代谢调控甘烦远彭丽萍郑光植（中国科学院昆明植物研究所,昆明６５０２０４）ＭＥＴＡＢＯＬＩＣＲＥＧＵＬＡＴＩＯＮＯＮＴＡＸＯＬＯＦＣＥＬＬＣＵＬＴＵＲＥＦＲＯＭＴＡＸＵＳＹＵＮＮＡＮＥＮＳＩＳＧＡＮＦａｎ－Ｙｕａｎ,ＰＥＮ...     

N—糖链在纤连蛋白分泌及纤连蛋白受体与配体结合的作用

应用能断糖蛋白Ｎ－糖链合成的衣霉素（ＴＭ）,研究了Ｎ－糖链缺失对ＨＴ１０８０细胞分泌纤连蛋白（Ｆｎ）以及纤连蛋白受体（ＦｎＲ）与配体结合的影响。结果表现,１μｇ／ｍｌ的ＴＭ可抑制Ｎ－糖链的合成（此时,３Ｈ－甘露糖掺入下降６３％）,但细胞分泌Ｆｎ的量仅下降３％,这主要是由于蛋白合成受ＴＭ抑制（２５％）而引起。因而,Ｎ－糖链缺失可能并不影响Ｆｎ的分泌,而在同样条件下,单个细胞结合１２５Ｉ－Ｆｎ的量显著     

核因子-κB的研究进展

机体对损伤及微生物入侵进行防御反应时,活化的核因子－κＢ（ＮＦ－κΒ）可诱导细胞合成各种生物大分子。细胞处于静息状态时,ＮＦ－κＢ与κＢ抑制蛋白（ＩκＢｓ）结合形成三聚体存在于细胞质内。当细胞受到外界因素刺激时,ＮＦ－κＢ与ＩκＢｓ分离,ＮＦ－κＢ进入细胞核内,其亚基形成环状结构与ＤＮＡ接触,启动基因转录。随后,新合成的ＩκＢｓ又与ＮＦ－κＢ结合返回细胞质。不同的ＩκＢｓ亚型发挥不同的生理功能。同时,对ＮＦ－κＢ的生理功能也作了介绍。     

大鼠诱导型一氧化氮合酶基因转录调控区的克隆与鉴定

采用单特异引物ＰＣＲ克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转录调控区ＤＮＡ片段。核酸序列分析证实,大鼠ｉＮＯＳ基因的５＇－侧翼区含有ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α应答元件及ＮＦ－ｋＢ结合位点的保守序列。这些保守序列的位置及排列显区别于人和小鼠的ｉＮＯＳ基因。电泳迁移率改变分析（ＥＭＳＡ）表达,ＶＳＭＣ受ＩＬ－１和ＩＦＮ－γ刺激后,细胞核内产生某种可与ｉＮＯＳ基因５＇－侧翼区特异结合的核蛋白因