免疫酶技术及其在细胞生物学中的应用

长期来,许多细胞生物学工作者希望能够在显微镜下直接看到组织和细胞中大分子物质的分布。用物理学(如光谱吸收)或组织化学方法虽能测定其在组织细胞中的存在,但反应专一性往往不如免疫学上的抗原一抗体反应。Coons 等首先利用荧光素来标记抗体,在肺炎球菌感染的小鼠组织切片内观察到肺炎球菌可     

酶免疫组织化学技术

酶免疫组织化学技术,是以辣根过氧化物酶(Horsenadish peroxidase 简称HRP)结合在抗体、抗原或中间体上,对组织或细胞进行的免疫化学反应。由于酶对底物的对数放大作用和成色反应,增强了分辨力,使抗原抗体反应具有较高的的敏感性和特异性。本法具有操作简便,试剂稳定和不需用特殊设备等优点;在细胞涂片、冰冻切片和石腊切片中,均可在光镜或电镜下定位或定量组织细胞中的各种成份和研究细微结构等。因此,自1966年 Nakane 等建立酶免疫技术以来,发展很快。最初主要是通过化学交联剂将酶与抗体交联,用以检测组织中的相应抗原,相     

澳大利亚在应用免疫不育技术防治有害脊椎动物研究上的最新进展

小家鼠、欧洲兔和红狐是在澳洲危害最为严重的３种有害脊椎动物。１９９２－１９９９年间,澳大利来共投资了５０００多万澳元用于研究防治小家鼠,欧洲兔和红狐的不育疫功圾关免疫不育技术的研究已有很大进展,主要体现在重组病毒性不育疫苗已接近实用化。有关不育控制的生态学理论研究也有了很大的进展,初步确定了合适的不育水平,这为不育疫苗生态风险评估和大田释放实验工作奠定了基础,相比之下,非病毒或细菌性的,口服性的毒     

酶联免疫试验研究与应用

本文介绍了ELISA法的基本原理及ELISA法在临床医学、生物制药、食品科学、农牧渔业等方面的应用,并对该检测技术的发展趋势及应用前景进行了展望。     

酶标记抗人IgA单克隆抗体及其在Epstein-Barr病毒免疫酶技术中的应用

继成功地建立了4株分泌高效价抗人IgA McAb杂交瘤细胞株后,我们将制备出的McAb用于改进鼻咽癌早期诊断中的IgA/VCA和IgA/EA免疫酶技术,并探索了高效价抗人IgA McAb的纯化、辣根过氧化物酶(HRP)标记及有效保存的方法,结果令人满意。 采用饱和硫酸铵沉淀法及Sephadex A-50吸附法对来自细胞培养上清液和腹水的     

氢酶在生物工程上的应用

本文概述了氢酶的稳定和固相化方面的进展,对氢酶在水的脱氚和重水的生产、制备性有机合成、环境保护、太阳能转换和生物固氮上的应用进行了综述,且对有关问题进行了讨论,指出了氢酶应用研究的意义和有关的研究途径。     

在生态学研究中怎样应用免疫技术

随着科学技术的飞速发展,各个分支学科的相互渗透不断加强。近年来,国内外许多研究者在生态学领域纷纷引入各种新技术、新方法。尤其是现代免疫技术用于有害生物综合治理体系的研究,显得十分活跃。免疫学技术,在植病诊断、病原物鉴定及分类等方面的应用,早有文献报道。近年来,在昆虫分类、种间关系研究、害虫抗药性鉴定及其抗性产生机理研究等方面的应用也取得进展。用该方法研究捕食者与被捕食者的关系比传统的笼罩饲养观察试验要准确和接近实际。而且所需仪器简单,操作方便,不失为研究种间关系的一种理想手段。下面介绍几种最常用的血清学试验。     

遗传工程在工业酶生产上的应用

一 D-木糖异构酶和D-葡萄糖异构酶 利用D-木糖异构酶和D-葡萄糖异构酶从半纤维素(木糖)制备乙醇和从淀粉(葡萄糖)制备高果葡糖浆具有巨大的经济价值。最近,美国Upjohn公司用遗传工程方法获得了具有高酶活力的大肠杆菌(E.coli)。方法和结果如下。     

微生物酶在有机化学工艺上的应用

<正> 自古以来,人类就利用微生物来进行发酵,但这只停留在利用微生物的代谢系统。随着应用微生物学的发展,将微生物酶当做一个触媒,即利用酶的催化反应,有效的结合到有机化学合成工艺的某个步骤,使微生物酶反应与有机化学合成反应相结合,已成为一个独特的新工艺。这一新工艺在1930年首先由Reichstein等人用于维生素丙的制造,即以山梨醇为原料,经微生物氧化制备维生素丙的中间体山梨糖。这一利用微生物     

细菌的酶抗酶及免疫酶染色法的研究

细菌的酶抗酶(PAP)及免疫酶(IES)染色法是测定抗体或抗原的一种新方法。它操作简单,不须荧光显微镜及分光光度等特殊设备,可直接用肉眼判定。目前国内尚未见到在细菌方面应用的报导。作者自已制作了酶抗酶血清及市     

免疫酶技术检测流行性出血热病人抗体的研究

流行性出血热(EHF)是一种死亡率较高的传染病,国内常用免疫荧光(IF)法进行此病的检测及诊断。由于荧光设备不普及,很多基层单位不能监测及诊断此病,因而妨碍防治工作的进展。本文介绍免疫过氧化物酶技术(IPT)或称免疫酶染色(IES)进行EHF抗体的检测,同时     

原子力显微技术在酶学研究中的应用

酶在生物体的生命活动中占有及其重要的地位,机体功能的和谐统一有赖于酶的作用。原子力显微技术(AFM)作为一门新发展起来的技术,为人们认识酶的结构与功能提供了又一新的窗口。AFM能够在生理条件下对生物样品进行三维成像,在分子水平上实时监测生理生化反应。AFM还能够在皮牛顿精度上测定分子间作用力。目前,AFM已用于单分子酶的化学性质及其作用原理的研究。本简述AFM在酶学中的应用情况。     

应用斑点酶免疫法检测狂犬病毒抗体的研究

本文通过特异性试验、重复性试验、稳定性试验,建立了斑点酶免疫试验(DEIA)检测狂犬病毒抗体的方法,其结果与间接免疫荧光(IFA)法进行了比较,符合率100％,实验结果表明本法不但简便、稳定而且敏感特异,不需要特殊仪器设备及昂贵的荧光显微镜,是一种值得推广的检测狂犬病毒抗体的方法。     

免疫组织化学标记新技术的临床病理应用

随着免疫组织化学在肿瘤病理诊断中的应用 ,肿瘤标记物不断推陈出新 ,不仅丰富了肿瘤标记物的内容 ,而且有力地推动了诊断免疫组织化学的深入发展 ;与此同时 ,免疫组织化学标记方法学也取得了可喜的成果 ,由于各种新方法的问世 ,不仅简化了操作步骤 ,缩短了标记时间 ,使工作效率得到显著提高 ,方法的敏感性特异性也得以明显增强 ;自动免疫组织化学染色机的应用 ,它集诸多优点为一体 ,标志着免疫组织化学标记技术已基本实现了规范化操作。现将结合我们体会作如下介绍 :一、微波在免疫组织化学中的应用微波以高频电磁波热效应和化学效果 ,加速…     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为1:2084(4H8)、1:256(6H9、4H3、2H5、2C8)、1:16(3F10);腹水抗体效价为10~9(4H3、4H8)、10~8(2H5)、10~7(6H9)、10~5(3H10)。竞争间接酶联免疫吸附试验测定六株单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的敏感度为0.3—0.8ng/ml。六株抗体与玉米亦霉烯醇的交叉反应率为1.3—9.0％。六株单克隆抗体均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定,-30℃保存90天抗体滴度不变。用该抗体建立竞争间接酶联免疫吸附试验检测掺合玉米赤霉烯酮的玉米、小麦、饲料,平均回收率分别为105％、90％、103％,平均批间变异系数为5.8％、2.8％、6.8％,批内变异系数为3.8％、12.7％、15.7％。样品中玉米赤霉烯酮掺合量与竞争间接酶联免疫吸附试验检出量有良好相关性(r≥0.9996)。     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为１：２０８４（４Ｈ８）、１：２５６（６Ｈ９、４Ｈ３、２Ｈ５、２Ｃ８）１：１６（３Ｆ１０）;腹水抗体效价为１０＾９（４Ｈ３、４Ｈ８）、１０＾８（２Ｈ５）、１０＾７（６Ｈ９）、１０＾５（３Ｈ１０）。竞争间接酶联免疫吸附试验测定六     

计算机与信息化技术在病理技术中的应用

计算机与信息化技术融入传统病理学技术,改革了原有的工作模式,专业设计的技术工作站软件、计算机的数据库为病理技术工作提供了现代化的工作流程,提升和稳定制片质量,提高了工作效率,并为临床与科研提供良好的数据平台。     

低密度脂蛋白的酶标和免疫酶标的定位研究

以辣根过氧化物酶标记人LDL、兔抗人LDLIgG或羊抗兔IgG抗体作为示踪剂,作用于培养的人胚肺细胞,经DAB-H_2O_2显色,超薄切片,电镜观察,结果表明: (1)细胞能与很低浓度LDL-HRP产生特异性结合,显示LDL受体的高亲和力。 (2)兔抗人LDLIgG-HRP与已结合在受体上的LDL的结合可被未标记的兔抗人LDLIgG封闭,而封闭后以羊抗兔IgG-HRP作用又显示特异性反应,这种反应只能在已有LDL结合的细胞膜上显示,IgG不能阻断这种反应。 (3)肝素或高浓度LDL对LDL-HRP与受体的结合产生竞争性抑制;事先经高脂培养,这种结合也受到抑制(反馈性抑制)。 (4)细胞对游离HRP不显示特异性高亲和力的结合。 (5)生长在不含LDL-HRP是培养液中的细胞也无这种特殊性反应。上述纳果说明,LDL-HRP是结合于质膜表面有外被区特异性的、高亲和力的LDL受体上。