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高等植物对土壤中营养元素的吸收是其一切生命活动过程的基础,尤其在营养元素缺乏的状态下,更与其抗营养饥饰物等特性息息相关。兼于土壤中N、P、K元素缺元的严重性与普遍性,以及N、P、K对高等植物生长和发育的重要性,有关高等植物吸收营养元素的膜转运蛋白编码基因的分子生物学研究已引起有关学者的高度重视。 相似文献
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高等植物对磷饥饿自我拯救的分子生物学机制 总被引:10,自引:0,他引:10
磷饥饿状态下,植物通过一系列生理、生化变化主动适应胁迫逆境,包括植物对土壤难溶性磷的活化、根系对低浓度有机磷的有效吸收,以及对吸收磷的再利用等。而这些生理生化反应都有其特定的分子生物学基础。本文着重综述与这三方面特性有关的分子生物学研究进展,包括与根系有机酸合成以活化难溶性磷有关的PEP羧化酶(PEPC);与有效吸收低浓度有机磷有关的高亲和力磷转运子;以及与利用生长介质中的有机磷有关的RNase、磷酸酶(APase);Ca2+-ATPase;低磷营养胁迫导致的植物与菌根菌互作的分子生物学;以及磷饥饿诱导差异表达的基因等。 相似文献
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蚯蚓新钙结合蛋白(NCBP)的二级结构及Ca~(2+)、Tb~(3+)离子的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
应用红外光谱技术定量测定了水化膜中蚯蚓新钙结合蛋白(NCBP)的二级结构及在不同比例Ca2+、Tb3+离子的作用下其二级结构的变化。结果表明,NCBP中α-helix含量较低而β-sheet的含量较高,且随不同比例金属离子的加入,1629cm-1处β-sheet峰的变化较明显。同时发现,NCBP具有钙结合蛋白家族特征的SDS-PAGE现象,但不具有激活PDE靶酶的活性,初步认为,NCBP含有与Ca2+浓度相关的特殊的结构和功能。另外,高浓度下Tb3+的结合引发NCBP的分子间聚合,提示对稀土元素的使用要慎重 相似文献
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利用聚合酶链式反应(PCR)获得了萝卜(Raqhanus sativus L.)抗真菌蛋白1(Rs-AFP1)基因编码区核苷酸序列。将整个阅读框架片段和云除了N-端信号肽序列的片段分别装入原核表达载体pET-32g(+)中,在大肠杆菌中表达,发现带有信号 的Rs-AFP1不能在大肠杆菌中表达,而当这一序列去除后,表达出约27kD的Rs-AFP1的融合蛋白。用凝血酶处理融合蛋白以云除N-端His.t 相似文献
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作为猪胃H+/K+-ATPase的非竞争性抑制剂,消炎痛明显抑制H+/K+-ATPase泡囊的质子转运功能,造成质子泄漏。在0.15mg/ml蛋白深度下,4%的消炎痛结合于H+/K+-ATPase泡囊上。它能渗入膜脂相并显著降低膜的流动性。并使H+/K+-ATPase内源荧光受到淬灭。从实验结果看来,消炎痛对猪胃H+/K+-ATPase质子转运功能的抑制来自对酶蛋白和膜结构影响两个方面,而非仅抑制 相似文献
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水稻磷酸盐转运蛋白基因的克隆、表达及功能分析 总被引:5,自引:0,他引:5
以水稻叶片为材料, 设计一对特异引物, 获得了编码磷酸盐转运蛋白基因OsPT6:1. 聚类和氨基酸保守位点分析指出该基因可能为水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白编码基因. 原位杂交与RT-PCR表达结果确定此基因在根与叶片中均表达, 尤以低磷诱导下叶片的叶肉细胞表达量最高. 同源重组表明该基因的表达可以提高毕氏酵母对磷素的吸收效率, 同时其基因的导入可以使高亲和力磷酸盐转运蛋白缺失的酵母突变体的磷素吸收功能得以恢复. 以上结果表明, OsPT6:1为水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白的编码基因. 相似文献
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电压依赖性离子通道门控的分子机制 总被引:5,自引:0,他引:5
50年代Hodgkin和Huxley双通道模型及其激活与失活学说,正逐步被80年代以来的分子生物学和电生理学研究所证实。Na^+、K^+离子通道的激活主要决定于高度保守的带正电荷氨基酸残基密集的S4段,由膜内向膜外方向的拧改锥样旋转。Na^+通道的失活主要与其Ⅲ-Ⅳ功能区之间的胞内连结襻的“铰链盖”样运动有关;K^+通的失活分N-、C-、P-三型,分别发生在N-、C-末端和P区,其N型失活与N-末 相似文献
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杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统与K^+吸收 总被引:3,自引:0,他引:3
杜氏盐藻(Dunaliella salina)细胞表面存在氧化NADH 与还原Fe(CN)3-6 的氧化还原系统(redoxsystem )。该系统在氧化NADH 时,抑制K+ 的吸收,在还原Fe(CN)3-6 时, 促进K+ 的吸收,当NADH 同时存在时, 促进效应最显著, 高达735% 。外源NADH 促进藻细胞的氧吸收达165% ,而使胞质pH 下降; 当NADH 存在时, Fe(CN)3-6 被快速地还原, 同时藻细胞膜外酸化程度增加。质膜H+ -ATPase和氧化还原系统的典型抑制剂都不同程度地抑制K+ 吸收; 并且钒酸盐对K+ 吸收的抑制可以被加入NADH 和Fe(CN)3-6 而部分恢复, 表明质膜H+ -ATPase和氧化还原系统共同参与了细胞K+ 的吸收过程 相似文献
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经磷脂酶A2 去脂的肌质网Ca2 + - ATPase 重组于不同比例的二油酰磷脂酰胆碱(Dioleoylphophatidylcholine,DOPC) 和二油酰磷脂酰乙醇胺(Dioleoylphophatidylethanolamine,DOPE) 形成脂酶体,研究了不同磷脂环境中Ca2 + - ATPase 的ATP 水解和Ca2 + 转运活力。结果表明,DOPC 和DOPE 分别有利于ATP 水解和Ca2 + 的转运,DOPE 可以增强Ca2 + - ATPase 的ATP水解和Ca2 + 转运之间的偶联效率。利用内源荧光、荧光淬灭及Forster 能量转移原理测定Ca2 + -ATPase 相应的构象变化, 发现随着DOPE/ DOPC 比例的改变使Ca2 + - ATPase 构象发生相应的变化。 相似文献
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人胰岛素原类似物(BKRA)基因的合成与表达 总被引:4,自引:0,他引:4
为了利用基因工程生产胰岛素,按照已知的人胰岛素A、B链氨基酸序列和大肠杆菌偏爱的氨基酸密码子设计并合成了人胰岛素原类似物(BKRA)基因,其中以赖(K)-精(R)二肽编码区取代人胰岛素原C肽编码区.为了避免其编码蛋白在大肠杆菌中表达时被降解,通过人工接头将2个BKRA基因串联起来,接头部分氨基酸序列为Arg-Arg-Asn-Ser.将串联的BKRA基因克隆到表达载体pET-28a(+),实现了在大肠杆菌中的融合表达,表达产物以包含体形式存在,约占细菌总蛋白24%.表达产物氨基末端具有六组氨酸肽段,以HiTrap凝胶进行亲和层析,一步纯化可达纯度95%以上.放射免疫测定表明,纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性.表明已构建成人胰岛素原类似物的高效表达菌株 相似文献
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将含有鸡传染性支气管炎病毒 S1 基因c D N A 的重组转移质粒p S X I V V I+ X3 S1 . Holte 和p S X I V V I+ X3/4 S1 . Holte 分别与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Tn N P V S V I- G D N A( O C C- ,gal+ ) 共转染草地夜蛾( Sf9) 细胞,经空斑纯化得到重组病毒 Tn N P V( X3) S1 . Holte O C C+ 和 Tn N P V( X3/4) S1 . Holte O C C+ 。将重组毒株分别感染 Tn5 B1 细胞,并进行 S D S P A G E 与 Westernblot 检测。结果表明, Tn N P V( X3/4) S1 . Holte O C C+ 在感染的细胞中高效表达了 S1 蛋白, S D S P A G E 凝胶薄层色谱分析结果显示,感染病毒后72 h S1 蛋白的表达量占细胞内总蛋白量的35 .8 % ,而 Tn N P V( X3) S1 . Holte O C C+ 感染的细胞内检测不出 S1 蛋白。经分析认为这一差异主要来自 S1 基因翻译起始位点及其附近的周围环境。 相似文献
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水稻牺叶枯病毒基因产物在水稻和昆虫体内的Western印迹分析 总被引:7,自引:0,他引:7
将RStV基因组组分3编码的NS3和NC蛋白基因以及组分4编码的NCP和NSvc4蛋白基因分别克隆于大肠杆菌表达载体pGEX3X,在IPTG诱导下,表达出4种融合蛋白。这些表达产物用于免疫动物产生多克隆抗血清,以制备的多克隆抗血清为探针,Western印迹分析了宿主植物和介体昆虫体内NS3,NC,NCP和NSvc4种基因表达的产物。 相似文献
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低磷胁迫水稻根部基因表达谱研究 总被引:3,自引:0,他引:3
磷是植物体内重要的营养元素.土壤中含磷总量丰富,但能被植物直接吸收利用的可溶性磷含量却很低,这成为制约农作物产量的重要因素.本研究利用水稻寡核苷酸芯片分析了水稻根部在正常营养条件和低磷胁迫6,24,72h3个时间点的全基因组表达谱.和正常营养条件下相比,低磷胁迫水稻根部共发现795个差异表达基因.差异表达基因功能分析发现:(1)磷酸盐转运蛋白、酸性磷酸酶、RNA酶等基因上升表达;(2)糖酵解等与能量代谢相关基因先上升后下降表达;(3)氮吸收和脂代谢相关基因改变其表达;(4)蛋白质降解、细胞衰老相关基因上升表达;(5)部分跨膜转运蛋白基因表达上调.研究结果为进一步揭示植物低磷胁迫反应机制,改善作物对磷吸收利用效率提供了有用的信息. 相似文献
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新辅基吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成基因研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
吡咯喹啉醌(Pyroloquinoline-Quinone,PQQ)是氧化还原酶的新辅基。它在细菌体内是由一组排列成簇的相关基因即pqq基因控制合成的。根据不同细菌来源pqq基因的同源性和对应关系,可将pqq基因归为7类:簇基因1~7。在Acinetobactercalcoaceticus中存在其中四个,KlebsielaPneumoniae和MethylobacteriumOrganophilumDSM760中6个,而Methylobacteriumex-torquensAM1中存在全部7个簇基因。簇基因1编码一个由22~29年氨基酸组成的小肽,此小肽可能是PQQ的前体,簇基因2可能涉及PQQ跨膜转运,簇基因3可能负责PQQ合成的最后一步酶催化,簇基因5可能涉及PQQ合成中某种酶的辅因子合成,簇基因6和7可能负责小肽的加工。簇基因4功能还不清楚,但在M.extorquensAM1中簇基因3和4是以融合基因存在的。 相似文献
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植物对锰的吸收运输及对过量锰的抗氧化响应 总被引:3,自引:0,他引:3
锰(Mn)毒是酸性土壤上限制作物生长的重要因素。植物体内Mn^2+吸收运输的转运蛋白或将Mn^2+分隔储存于内膜细胞器(如液泡)中,或在细胞内Mn^2+运输及调节中起重要作用。近年,编码这些转运蛋白的基因已被分离鉴定。另外,高Mn胁迫极易诱导植物产生氧化胁迫,抗氧化系统在清除高蝴迫诱导产生的活性氧过程中起到重要作用。文章重点就承担Mn^2+跨膜运输的膜转运蛋白以及植物抗氧化系统对高蝴迫的响应两方面进行了综述,并结合作者的研究提出看法和展望。 相似文献
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本文报告了进行性系统性硬化病(PSS)患者外周血单个核细胞中C-myc、Ki-ras和Ha-ras三种癌蛋白的表达和NK细胞亚群的检测结果。与对照相比,PSS患者淋巴细胞的C-myc癌蛋白阳性率显著升高(P<0.01),单核细胞的阳性率也倾向于明显升高(P=0.052);PSS组单核细胞的Ki-ras癌蛋白表达显著高于对照组(P<0.001)。另外,PSS患者NK细胞中Leu-11c~+亚群细胞数显著低于对照值,而Leu-7+亚群细胞数则显著高于对照值(P<0.05)。作者结合文献讨论了PSS患者体内癌基因表达的可能机制以及癌基因表达和NK亚群改变的临床意义。 相似文献