嗜热真菌hermomyces lanuginosus A236热稳定葡萄糖淀粉酶的纯化…

嗜热真菌Ｔｈｅｒｍｏｍｙｅｓ ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓＡ２３６在液体培养基中５０℃下静止培养１４天,粗提酶液经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ离子交换层析、Ｂｕｔｙｌ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ疏水层析,ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ１００凝胶过滤和ＦＰＬＣＭｏｎｏＱ离子交换层析,得到了凝胶电泳均质的葡萄糖淀粉酶。酶促反应产物经ＴＬＣ分析为葡萄糖,证明纯化的酶葡萄糖淀粉酶（ＥＣ３．２．１．３）。ＳＤＳ－Ｐ     

稀土离子对烟草RuBPcase的激活作用及EXFAS研究

研究了稀土离子（Ｌｎ３ ＋） 对烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ）１ ,５ － 二磷酸核酮糖羧化酶（ＲｕＢＰｃａｓｅ）活力的影响。结果表明,在该酶的反应体系中,用Ｌｎ３ ＋ 替代Ｍｇ２ ＋ ,烟草ＲｕＢＰｃａｓｅ 的活力随Ｌｎ３ ＋ 浓度的变化曲线呈双相效应, 即在高浓度时, Ｌｎ３ ＋ 抑制该酶活性; 低浓度的Ｌｎ３ ＋ 提高ＲｕＢＰｃａｓｅ 活性。其活化效应为轻稀土离子大于重稀土离子,但Ｌｎ３ ＋ 的活化效应低于Ｍｇ２ ＋ 。在有Ｍｇ２ ＋ 的反应体系中,Ｌｎ３ ＋ 在低浓度时也有提高ＲｕＢＰｃａｓｅ 活性的能力,提高幅度较低;而高浓度的Ｌｎ３ ＋ 显著地抑制酶活性。进一步对ＲｕＢＰｃａｓｅ － Ｌａ 二元复合物的ＥＸＦＡＳ 研究,证实Ｌａ３ ＋ 与ＲｕＢＰｃａｓｅ 氨基酸残基的Ｏ 原子键合,键长为２ ．５１?;Ｌａ３ ＋ 还与Ｓ 原子结合。最后对Ｌｎ３ ＋ 和ＲｕＢＰｃａｓｅ 相互作用的分子机制进行讨论     

鲫鱼视网膜谷氨酸受体和GABA受体在爪蟾卵母细胞中的表达

我们以两栖类卵母细胞为功能表达系统,通过注射鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓｃａｒａｓｓｉｕｓ）视网膜ｍＲＮＡ,利用电压箝及药物灌流手段,系统地研究了鲫鱼视网膜内氨基酸受体的类型和特征,结果如下：（１）Ｇｌｕ受体：ＫＡ可以诱发明显的去极化电流,而且Ｄｉａｚｏｘｉｄｅ能增强ＫＡ诱导的反应,这提示鲫鱼视网膜内某些Ｃｌｕ受体是ＡＭＰＡ选择性亚型（ＡＭＰＡ－ｐｒｅｆｅｒｒｉｎｇｓｕｂｔｙｐｅ）。（２）ＣＡＢＡ受体：ＧＡＢＡ能诱发一个快速、光滑的内向电流,绝大部分对ＧＡＢＡ的反应可被ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ所压抑,而ＧＡＢＡ＿Ｂ受体的激动剂ｂａｃｌｏｆｅｎ则无任何作用,这提示,鲫鱼视网膜内大部分是ＧＡＢＡ＿Ａ受体。     

利用靶标分子使药物释放优化

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮｅｗｓ ,2 0 0 1年 2 1卷 15期报道 :专化性在开发有效药物中是一个关键。刚成立 6个月的ＴａｒｇｅｔｅｄＭｏｌｅｃｕｌｅｓＣｒｏｐ .(ＴＭＣ) (Ｓａｎｄｉｅｇｏ ,ＣＡ)在药物专化性释放研究领域中是一个新加入者。该公司针对血管专化性靶标来改善药物在体内的有效释放 ,因而该公司成为研究肿瘤学、血管系统疾病和炎症的公司的新伙伴。ＴＭＣ是去年 11月从ＢｕｒｎｈａｍＩｎｓｔｉｔｕｔｅ(ＬａＪｏｌｌａ ,ＣＡ)独立出来的研究开发型公司 ,拥有Ｂｕｒｎｈａｍ公司的 12个专利和一个有专利保护的技术所生…     

利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究

利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究杨仲毅王兰岚刘志岩张铁汉刘桂珍陈正华（中国科学院遗传研究所,北京,１００１０１）ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＢｅａｎＣｈｉｔｉｎａｓＧｅｎｅｉｎｔｏＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓｂｙＬａｓｅｒＭｉｃｒｏｂ...     

反相胶束体系中辣根过氧化物酶的活力和动力学性质

本文系统研究辣根过氧化物酶在ＣＴＡＢ／Ｈ２Ｏ／ＣＨＣ．３－ｉｓｏｏｃｔａｎｅ（１∶１,Ｖ／Ｖ）反相胶束体系中的催化行为。在一定条件下酶反符合Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ动力学。研究水含量、底物浓度、ＰＨ、温度、表面活性剂的浓度等对酶反应的影响,结果表明表面活性剂对酶表现非竞争性抑制作用,高浓度的过氧化氢抑制酶活,最适ＰＨ为７．０。在低水含量（Ｗ０＜５）的胶束体系中保温后,酶的活力发生不可逆的改     

韭蛆病原菌cyt基因的克隆及工程菌株的构建

以Ｇｅｎｅｂａｎｋ中收录的来自Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｅｎｓｉｓｓｕｂｓｐ .ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ(Ｂｔｉ)的ｃｙｔＡ基因序列为依据 ,设计了特异性的引物 :ｃｙｔＡ1和ｃｙｔＡ2 ,对从四川成都分离的韭蛆病原菌Ｂ .ｔＴＮ 189用ＰＣＲ方法扩增到 982ｂｐ的ｃｙｔ基因片段。利用设计的酶切位点将此片段用ＨｉｎｄⅢ /ＸｂａⅠ进行双酶切后 ,与克隆载体 ｐｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ( /- )连接 ,转化Ｅ .ｃｏｌｉＪＭ 10 9,通过蓝白菌落的筛选 ,挑出转化子 ,并通过ＰＣＲ和酶切验证了转化子的正确性。将重组子命名为ｐｂｌ ｃ…     

双向蛋白质组分析程序

《双向蛋白质组分析程序》(2 ＤＰｒｏｔｅｏｍｅＡｎａｌｙｓｉｓＰｒｏｔｏｃｏｌｓ)由ＡｎｄｒｅｗＪ.Ｌｉｎｋ编著 ,1999年ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓＩｎｃ .出版 ,6 0 1页。本书系“分子生物学方法”(ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ)丛书的第 112卷 ,是用蛋白质组解答生物学问题的一册指南。不管是球面蛋白质分析问题 ,还是评估细胞对内部或外部的刺激反应 ,本书描述的先进方法将对研究者更好地理解细胞如何活动以及对药物探索都提供了新的可能性。特点 :(1)证实了蛋白质总体表达的特殊性和同一性程序。(2 )药物探…     

cAMP反应序列结合蛋白及其家族与转录调节

ｃＡＭＰ反应序列结合蛋白（ｃＡＭＰ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｅｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＲＥＢ）经磷酸化激活后,可参与ｃＡＭＰ诱导的多种靶基因的转录调控。新近研究表明,ＣＲＥＢ的转录调节作用可能是通过ＣＲＥＢ结合蛋白（ＣＲＥＢ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＢＰ）实现的。在神经系统中,ＣＲＥＢ可能介导神经递质诱导的基因表达,并能通过放大神经营养因子的信号,参与神经细胞增殖、分化、存活等生物效应。     

从线粒体细胞色素b探讨长臀？属三个种分类与进化的关系

本研究测定了长臂Ｂａ属（Ｍｙｓｔａｃｏｌｅｕｃｕｓ Ｇｕｅｎｔｈｅｒ）中的３个种：月斑长臂Ｂａ（Ｍ．ｃｈｉｌｏｐｔｅｒｕｓ Ｆｏｗｌｅｒ）、长臂Ｂａ〔Ｍ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｓ（Ｃｕｖｒｉｅｒ ｅｔ Ｖａｌｅｎｃｉｅｎｎｓｅ）〕和细尾长臂Ｂａ（Ｍ．ｌｅｐｔｕｒｕｓ Ｈｕａｎｇ）共２２个个体的线粒体细胞色素ｂ部分基因片段,其序列为４０８ｂｐ,并选用Ｐａｎｇ Ｐｉ（Ｒｈｏｄｅｕｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｕ     

α-半乳糖苷酶

最近各种媒体不断报道红血球类型可以通过酶处理进行转换 ,这对于输血和开拓血源有十分重要的意义 ,所用的酶是α 半乳糖苷酶。α 半乳糖苷酶 (α ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ ,α Ｄ ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅｇａｌａｃｔｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ ,ＥＣ 3.2 .1 .2 2 )能专一地催化α 半乳糖苷键的水解。它广泛存在于各种植物和动物体内 ,许多微生物如双歧杆菌 (Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ)、黑曲霉菌 (Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ) [1] 、大肠杆菌 (Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ)Ｋ 1 2 1 [2 ]的抽提液中也发现有α 半乳糖苷酶的…     

树鼠mtDNA限制性内切酶图谱及其与小家鼠褐家鼠的亲缘关系

本实验用ＡｐｅⅠ,ＡｖａⅠ,ＢａｍＨⅠ,ＢｃｌⅠ,ＢｇｌⅠ,ＣｌａⅠ,ＥｃｏＲⅠ,ＥｃｏＲＶ,ＨｐａⅠ,ＰｓｔⅠ,ＰｖｕⅡ,ＳｃａⅠ,ＸｂａⅠ等１３种限制性内切酶分析树鼠（Ｃｈｉｒｏｍｙｓｃｕｓｃｈｉｒｏｐｅｓ）的ｍｔＤＮＡ限制性片段长度多态性,并用双酶解法构建了其中８种酶的限制性内切酶图谱。根据限制性片段差异法和分子钟,计算并讨论树鼠和小家鼠（Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ）、褐家鼠（Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）的ｍｔＤＮＡ遗传距离和亲缘关系。结果表明树鼠与褐家鼠的关系较接近,两者的分歧时间在距今１５００─２０００万年前,即处于中新世早中期。     

导入耐过氧化氢兰草基因促进植物生长

《日经生物技术》１９９９年４月１２日第１１页报道：近畿大学农学部教授重岗成等小组将耐过氧化氢兰草所具有的碳同化系基因导入烟草,促进植物生长获得成功。成果的详细情况于３月２８日在仙台市召开的日本植物生理学会１９９９年年会上发表。这次导入的基因是兰草ｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓＭＰＣＣ７９４２株的ｆｂｐ－１基因。其产物在Ｃａｌｖｉｎ途径中决定反应速度,该酶具有弱胁迫的ＦＢＰａｓｅ和ＳＢＰａｓｅ两方面酶活性。使用番茄ＲｕＢｉｓＣｏ小亚单位（ｒｂｃＳ）启动子和叶绿体抑制肽,导入烟草。不用担心基因沉默等问题,…     

中国竹类二新种及某些种类花的补充描述

本文记载了中国西南牡竹属二新种,席竹ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｅｘｉｌｉｓＸｉａｅｔＣｈｉａ,钓鱼竹ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｇｕｉｙａｎｇｅｎｓｉｓＸｉａｅｔＣｉａ,并对妈竹ＢａｍｂｕｓａｂｏｎｉｏｐｓｉｓＭｃＣｌ．、大眼竹Ｂ．ｅｕｔｕｌｄｏｉｄｅｓＭｃＣｌ．、撑篙竹Ｂ．ｐｅｒｖａｒｉａｂｉｌｉｓＭｃＣｌ．、紫秆竹Ｂ．ｔｅｘｔｉｌｉｓＭｃＣｌ．ｃｖ．Ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ和佛肚竹Ｂ．ｖｅｎｔｒｉｃｏｓａＭｃＣｌ．的花作了补充描述．     

胡子鲇mtDNA多态性及限制性酶切图谱

用８种限制性内切酶对胡子鲇（ＣｌａｒｉａｓｆｕｓｃｕｓＬａｃｅｐｅｄｅ）肝脏线粒体ＤＮＡ（ＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ,ｍｔＤＮＡ）进行了分析。ＸｈｏⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＰｓｔⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＸｂａⅠ、ＨｉｎｄⅢ在ｍｔＤＮＡ分子上分别有２、３、１、１、３和５个切点。胡子鲇种内存在ｍｔＤＮＡ酶切片段长度多态性（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ,ＲＦＬＰ）。经ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ酶解,ｍｔＤＮＡ都出现两种酶切类型,Ⅰ型各具２个片段,Ⅱ型各具１个片段。ｍｔＤＮＡ分子量为１０．２４２×１０６ｕ,长度约为１６．６８ｋｂ。用双酶解法建立了胡子鲇ｍｔＤＮＡ的限制性酶切图谱,并对ＲＦＬＰ现象进行了分析。     

猕猴属6个种的rDNA变异及其系统进化关系

以人２８Ｓ,１８Ｓ,ｒＤＮＡ为探针,用１５种限制性内切酶构建了猕猴属６个种（Ｍ．ｍｕｌａｔｔａ,Ｍ．ｆａｃｓｉｃｕｌａｒｉｓｆＭ．ａｒｃｔｏｉｄｅｓ,Ｍ．ａｓｓａｍｅｎｓｉｓ．Ｍ．ｔｈｉｂｅｔａｎａ．Ｍ。ｎｅｍｅｓｔｒｉｎａ）和滇金丝猴Ｒｈｉｎｏｐｉｔｈｅｃｕｓｂｉｅｔｉ）,白颊长臂猿（Ｈｙｌｏｂａｔｅｓｌｅｕｃｏｇｅｎｙｓ）核糖体ＤＮＡ重复单位的限制性内切酶图谱,红面猴（Ｍ．ａｒｃｔｏｉｅｓ）与     

生孢噬纤维粘菌基因文库的构建和纤维素酶基因的克隆

将生孢噬纤维粘菌（ＳｐｏｒｏｃｙｔｏｐｈａｇａＢ２９）染色体用ＰｓｔＩ部分酶切后,连接到大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）质粒载体ｐＵＣ８上,然后转化Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ８３,从而建立了Ｂ２９的基因文库,并筛选一个含有内切葡聚糖纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）的阳性克隆．从此阳性克隆中提取质粒再转化ＪＭ８３,发现所有的氨苄青霉素抗性（Ａｐｒ）转化子都具有ＣＭＣａｓｅ酶活性,证明在大肠杆菌中克隆到一个Ｂ２９的内切葡聚糖酶基因．     

国外动态

将蛋白质锁定在活性构型ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮｅｗｓ 2 0 0 1年 2 1卷 14期报道 :哈佛医学院 (Ｂｏｓｔｏｎ ,ＭＡ)的研究者将一种蛋白锁定在活性构型而增加了对靶标的结合特性。这个发现可能在诊断和开发药物中发挥重要作用。众所周知 ,单个的蛋白分子可以形成不同的形状或构型 ,一般分为活性构型和无结合活性构型。在溶液中的蛋白有一部分蛋白分子以一种构型存在 ,而另一些分子则以另一种构型存在。目前研究者利用二硫键这种不容易断裂的共价键可使蛋白质分子保持结合活性的构型。ＴｉｍｏｔｈｌｙＳｐｒｉｎｇｅｒ和其同事研究整…     

Partial Abstracts of the 5th Conference of the Asia- Pacific Infernational Molecular Biology Network (A-IMBN)

Ｎｏｖｅｍｂｅｒ 3- 5 ,2 0 0 2 ,ＳｈａｎｇｈａｉＳｃｒｅｅｎｉｎｇｆｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｇｅｎｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆａ 5 0ｋＤｐｒｏｔｅｉｎｐｕｒｉｆｉｅｄｆｒｏｍＴｉｎｏｓｐｏ ｒａｒｕｍｐｈｉｉＢｏｅｒｌｏｎｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓＪｕｌｉｅＣｈａｒｍａｉｎＯＢｏｎｉｆａｃｉｏ1,ＲｏｎａｌｄＲＭａｔｉａｓ1,2 ,ＦｉｌｉｐｉｎａｓＦＮａｔｉｖｉｄａｄ2 ( 1 ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙ ,Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ…     

腈水合酶产生菌的分离筛选及其特性研究

本研究进行了产腈水合酶菌种的分离筛选,对菌株ＳＤ—１６进行了诱变,并对ＳＤ—１６的生长、产酶条件以及腈水合酶的反应条件进行了研究。ＳＤ—１６经鉴定确定为微球菌Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．