线粒体氧应激损伤的防御体系

线粒体在细胞代谢和能量过程扮演着重要的角色 ,由于线粒体内膜的高选择透过性 ,线粒体较独立于外界环境 ,线粒体只有在能量吸收和转换过程中 ,受到外界环境的影响 ,产生线粒体氧应激损伤。电子由ＮＡＤＨ或ＦＡＤＨ2 通过电子传递体传递给分子氧的呼吸作用 ,也是作为呼吸副产品的活性氧(ＲＯＳ)和自由基的产生过程 ,分子氧一方面是电子传递链上电子和质子氢的末端受体 ,另一方面分子氧能启动氧化过程 ,质子氧接受一个泄漏的电子 ,变成超氧阴离子 (Ｏ·-2 ) ,Ｏ·-2是体内活性氧的主要来源 ,活性氧的不断积累能导致线粒体结构和功能的广泛损…     

茶多酚对沙土鼠脑缺血后再灌注氧化损伤的保护作用

采用蒙古沙土鼠（Ｇｅｒｂｉｌ）制作脑缺血后再灌注模型,用化学发光法（Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｓｃｅｎｅ,ＣＬ）测定缺血后再灌注、喂饲茶多酚后脑组织内源性超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性、脂质过氧化程度（ＬＰＯ）及脑组织ＡＴＰ能量代谢的变化;运用顺磁共振法（ＥＳＲ）检测了缺血后再灌注过程中产生的活性氧（ＲｅａｃｔｉｖｅＯｘｙｇｅｎＳｐｅｃｉｅｓ,ＲＯＳ）,探讨了脑缺血后再灌注的损伤机制及抗氧化剂的保护作用。在整体模型的研究中表明,茶多酚对沙土鼠脑缺血后再灌注氧化损伤具有显著的保护作用;内源性超氧化物歧化酶活性提高,脂质过氧化程度下降,ＡＴＰ水平升高     

植物-病原物互作过程中的活性氧

活性氧与水分胁迫、环境污染、衰老及低温等方面的关系已有大量的报道。在植物－病原物互作过程中,病原物作为一种特殊的胁迫因子而起作用。近年来对植物一病原物互作过程中活性氧的研究已成为植物病理生理学研究的一个热点,本文对此作一综述。１植物─-病原物巨作过程的活性氧的产生在正常情况下,植物体内活性氧（ａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ,ＡＯＳ,包括超氧阴离子Ｏ－２;过氧化氢Ｈ２Ｏ２;氢氧自由基ＯＨ;单线态氧１Ｏ２）处于低水平状态,在植物过敏性反应（ＨＲ）早期阶段常出现ＡＯＳ迅速释放,这种ＡＯＳ迅速释…     

何首乌提取物减轻大鼠脑缺血再灌注损伤和上调脑内UCP4蛋白水平

目的研究何首乌提取物对脑缺血再灌注损伤UCP4的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠采用线栓法复制局灶性脑缺血(MCAO)再灌注损伤模型,缺血2h后再灌注6h或24h,部分缺血再灌注模型大鼠分别灌胃不同浓度何首乌口服液。免疫组织化学染色和Western blot检测脑内UCP4表达,TTC染色检测脑梗死面积。结果在脑缺血再灌注6h后损伤,UCP4蛋白在海马内表达增高,再灌注24h后表达降低;何首乌提取物能浓度依赖性减少脑缺血再灌注损伤的脑梗死面积和上调UCP4表达。结论何首乌提取物能明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤,其机制可能与脑内线粒体蛋白UCP4表达升高,保护神经元有关。     

转基因鼠在脑缺血氧化应激研究中的应用

活性氧自由基作为脑内一类重要的病理因素直接或间接地参与脑缺血/再灌注的损伤过程。氧自由基不仅受到脑内促氧化酶与抗氧化酶间平衡的调节,同时也参与了细胞内信号转导通路,在神经元死亡中发挥着决定性作用。近年来,转基因及基因敲除鼠已广泛应用于这些影响活性氧自由基的形成和清除过程的酶类物质及各种介导细胞死亡与凋亡过程的蛋白质的研究中,为脑缺血/再灌注损伤治疗的基础及应用提供了必要条件。     

活性氧簇在脑缺血-再灌注损伤中的损伤与保护作用

活性氧簇是细胞有氧代谢过程中产生的一类化学基团。线粒体是活性氧簇的主要生成位点。一般观点认为,在脑缺血-再灌注损伤过程中,活性氧簇发挥神经细胞损伤作用。活性氧簇不仅直接参与神经细胞氧化损伤过程,也可通过外源性途径和内源性途径,引起神经细胞凋亡。然而,除神经细胞损伤作用外,活性氧簇也可发挥神经细胞保护作用。活性氧簇可激活低氧诱导因子、核转录因子κB、PI3K/Akt通路和MAPK通路等,参与神经细胞存活机制,减轻神经细胞损伤。本文对活性氧簇在脑缺血-再灌注损伤中的双重作用进行综述。     

活性氧的信号分子作用

活性氧 (ＲＯＳ)包括过氧化氢 (Ｈ2 Ｏ2 )、超氧阴离子 (Ｏ·-2 )、羟自由基 (·ＯＨ)等。过量的活性氧可引起细胞大分子的氧化损伤。另外 ,微量活性氧在某些生理现象的调控中也发挥重要的作用 ,特别是在细胞内信号转导方面。在配体与受体的相互作用及激动剂处理细胞的过程中 ,发现酶及转录因子的激活 ,基因的表达 ,细胞凋亡等过程的发生均与活性氧有一定关系。因此 ,活性氧被认为是一种新的第二信使。1 .酶的激活酶的活化是信号转导过程中的重要环节。最近几年的研究表明 ,某些酶的活化与ＲＯＳ参与有密切关系。当血小板源生长因子(ＰＤＧ…     

内源性一氧化氮对肝缺血／再灌注损伤保护作用的实验研究

近年来 ,肝移植的开展及肝门阻断术的临床应用越来越广泛 ,但在肝移植或肝门阻断再开放过程中始终存在着缺血 /再灌注损伤 ,而且是导致术后肝功能不全的一个重要因素。以往实验证实 ,氧自由基 (ｏｘｙｇｅｎｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓ,ＯＦＲ)在肝缺血 /再灌注损伤 (ｈｅｐａｔｉｃｉｓｃｈｅｍｉａ /ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ ,ＨＩＲＩ)中起重要的介导作用。而一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ ,ＮＯ)在ＨＩＲＩ中起何作用 ,目前国外尚无一致的意见 :国内未见详细报道。本研究采用家兔ＨＩＲＩ模型 ,检测血浆、肝组织中一氧化氮…     

高氧预适应对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响

抗氧化酶具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用,在抗氧化酶中,比较重要的是超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,谷胱甘肽过氧化物酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＰｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＳＨｐｘ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）。为了解高氧预适应（ＨｙｐｅｒｏｘｉｃＰｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＨＯＰ）对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸８０－８５％氧气（１ａｔｍ,１５－２０％为氮气）６ｈ,连续７ｄ。利用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置做成心肌缺血再灌注模型。实验动物随机分为二个部分。第一部分可逆性心肌缺血（ＨＯＰＡ组与对照Ａ组）：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。观察冠脉回流液中ＳＯＤ活力,检测心肌内抗氧化酶活力（ＳＯＤ,ＧＳＨｐｘ,ＣＡＴ）。第二部分不可逆性心肌缺血（ＨＯＰＢ组与对照Ｂ组）：缺血６０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。测定冠脉回流液中肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）含量,ＳＯＤ及心肌内抗氧化酶活力。结果表明：对于可逆性心肌缺血：ＳＯＤ,ＧＳＨｐｘ活力升高;对于不可逆性心肌缺血损伤：ＨＯＰ能减少ＣＰＫ释放,ＳＯＤ活力升高。     

叶绿体内活性氧产生及清除的酶系统

活性氧是需氧生物正常代谢的产物[1] 。在光照条件下 ,由于光合作用 ,水裂解而产生大量的分子氧 ,造成叶绿体局部氧浓度剧增而引起氧的光还原 ,形成大量的超氧化物阴离子 (Ｏ·-2 )。Ｏ·-2 的歧化及金属离子的作用则可引起Ｈ2 Ｏ2 和·ＯＨ的产生 ,危及叶绿体的膜结构。因此 ,叶绿体活性氧的清除对于维持其正常的生物功能具有重要意义。1 .叶绿体内活性氧的产生氧的光还原是叶绿体活性氧产生的主要方式[2 ] 。在叶绿体内 ,氧的光还原主要有 3条途径 :类囊体途径、叶绿体基质途径和黄素脱氢酶途径。1 .1　类囊体途径　　已经证明 ,在洗去铁…     

丙酮酸脱氢酶多酶复合体研究进展

2 氧 (代 )酸脱氢酶复合体 (ＯＡＤＨｃ)是众多多酶复合体中的一个典型代表 ,该复合体家族包括 3种多酶复合体———丙酮酸脱氢酶多酶复合体 (ＰＤＨｃ)、支链 2 氧 (代 )酸脱氢酶多酶复合体和 2 酮戊二酸脱氢酶多酶复合体。其中ＰＤＨｃ催化糖代谢中丙酮酸的不可逆地氧化脱羧产生乙酰ＣｏＡ。1 .丙酮酸脱氢酶多酶复合体的组成ＰＤＨｃ广泛地分布于微生物、植物和哺乳动物中。在真核生物中 ,组成ＰＤＨｃ的所有蛋白质都是由核基因编码 ,且它们主要都位于线粒体上 (在一些生物的质体中也发现了它们的同工酶 )。ＰＤＨｃ的核心结构是由 3个…     

高氧预适应对大鼠心肌缺血─再灌注时自由基的影响

为了解决高氧预适应（ＨｙｐｅｒｏｘｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇＨＯＰ）对大鼠心肌缺血再灌注时自由基的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸８０－８５％氧气（１ａｔｍ）６ｈ,连续７ｄ。利用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置做成心肌缺血再灌注模型,采用电子自旋共振技术测定自由基含量。实验动物随机分为二组,第一组为对照组：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。第二组为ＨＯＰ组：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。实验观察冠脉回流液中自由基ＰＢＮ加合物含量。结果表明：在再灌注过程中,１、５、１０ｍｉｎ３个时间点,ＨＯＰ组ＰＢＮ加合物含量较对照组明显减少。提示：ＨＯＰ能减少缺血再灌注时自由基的产生。     

La（NO3）3对橡胶树离体黄色体产生O^—2能力的影响

巴西橡胶树乳管细胞内存在着一种特殊的细胞器———黄色体 ,它相当于一般植物的液泡 ,具有单层膜 ,内含大量的胶乳凝固因子。在黄色体膜上存在着ＮＡＤ(Ｐ)Ｈ氧化还原酶 ,在此酶的作用下 ,黄色体能利用ＮＡＤ(Ｐ)Ｈ消耗Ｏ2 生成Ｏ- ·2 。胶乳是乳管细胞的细胞质 ,胶乳中不含叶绿体 ,且含有的线粒体甚少 ,但黄色体占胶乳鲜重的 1 0 %～ 2 0 % ,它所产生的活性氧可能会伤害乳管细胞内的代谢过程 ,破坏黄色体膜 ,体中内含物释放到胶乳中 ,引起胶乳原位凝固 ,乳管发生死皮病(ｄ′Ａｕｚａｃｅｔａｌ.Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆｒｕｂｂｅｒｔｒ…     

Raman spectroscopic study of space structure of membrane proteins and membrane lipids in photodamaged human erythrocyte sensitized by hypocrellin B

Ｈｙｐｏｃｒｅｌｌｉｎａｎｄｉｔｓｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｒｅｗｅｌｌｋｎｏｗｎｐｈｏｔｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ[1,2].ＡｍｏｎｇｔｈｅｍｂｏｔｈｈｙｐｏｃｒｅｌｌｉｎＡ(ＨＡ)ａｎｄｈｙｐｏｃｒｅｌｌｉｎＢ(ＨＢ)ｓｈｏｗｐｒｏｍｉｓｉｎｇａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｎｄａｎｔｉｖｉｒａｌａｂｉｌｉｔｙ[1—3].Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ,ｍａｎｙｍｅｔｈｏｄｓｈａｖｅｂｅｅｎｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｕｃｈａｓ1Ｏ2,Ｏ2.-,.ＯＨａｎｄｓｅｍ…     

依达拉奉通过Nrf2信号分子调节氧化应激减轻脑缺血再灌注诱导的神经损伤

本研究旨在探讨依达拉奉(edaravone,ED)在脑缺血再灌注损伤中发挥神经元保护作用与Nrf2信号分子间的关系。体内实验利用脑内脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion model,MCAO)建立SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型,体外实验采用过氧化氢(H2O2)损伤PC12细胞建立氧化应激模型。通过TTC染色、HE染色、Nissl染色来检测大脑的病理状态。测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,来反映氧化应激水平。此外,通过Hoechst 33342染色和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MTP)测定,探究细胞水平的损伤。采用免疫组织化学和蛋白质印记测定Nrf2的表达。构建Nrf2敲除的PC12细胞系,证实Nrf2信号分子抑制氧化应激损伤的作用。结果提示,经依达拉奉给药后,在动物体内水平,TTC染色证实,脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的脑组织梗死体积减小(P<0.001),ROS和MDA水平下降(P<0.01),SOD活性上升(P<0.01);在细胞水平,凋亡细胞减少(P<0.05),MTP上升(P<0.01),ROS和MDA水平下降,SOD活性上升(P<0.01);在分子水平,免疫组化和Western印迹结果均提示,Nrf2蛋白质含量较正常组增加。H2O2诱导Nrf2基因敲除的PC12细胞损伤加重,且依达拉奉的治疗效果明显削弱。综上所述,Nrf2在依达拉奉减轻脑缺血再灌注诱导的氧化应激损伤中发挥关键作用。     

茵陈水提液的体外抗氧化活性

在．ＯＨ、Ｏ２和Ｈ２Ｏ２的产生和检测系统以及兔脑和肝组织匀浆中,加入一定量的茵陈（Ａｒｔｉｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ Ｔｈｕｎｂ）,水提液,观察其与活性氧引发反应的竞争效应。结果表明,茵陈水提液降低．ＯＨ作用下的水杨酸羟基化作用及Ｏ２介导的氮兰四唑（ＮＢＴ）光化学还原,而对Ｈ２Ｏ２驱动的过氧化物－１太复合物的形成没有影响;显著抑制兔脑和肝组织匀浆的脂质过氧化作用。提示茵陈水提液具有显著的抗尖     

解偶联蛋白2对活性氧的抑制作用

线粒体在能量代谢和自由基代谢中占据十分重要的地位。电子传递过程中形成的活性氧(reactive oxygen species,ROS)履行着众多生理功能,但过多或持续存在的ROS可能与癌症、衰老、糖尿病、动脉硬化、局部缺血或再灌注损伤等的发生有关。解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)作为线粒体内膜质子转运家族中的一个新成员,通过解偶联作用能降低线粒体内膜电势,使活性氢产生减少。UCP2抑制ROS产生的作用日益受到关注。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后脑内NGF和bFGF表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对局灶性脑缺血再灌注后脑组织神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响.方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型.实验动物随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、模型 PNS治疗组和模型 尼莫地平治疗组.用免疫组织化学方法检测脑内皮质、海马等区域NGF和bFGF蛋白表达.结果:缺血2h再灌注46h后,脑内海马和皮质区的NGF表达降低,PNS能显著上调海马、皮质区及丘脑区域NGF的表达.缺血2h再灌注46h后,bFGF的表达各脑区无明显差异;但PNS能显著上调缺血再灌注损伤后胼胝体区域内bFGF的表达.结论:局灶性脑缺血再灌注后,PNS能上调缺血脑组织内NGF和bFGF表达,尤其是促进了NGF的表达,这可能是PNS对脑缺血后损伤神经元的保护机制之一.     

水稻乙醛脱氢酶基因的克隆及其在不育系中的表达

从水稻中分离了乙醛脱氢酶基因（Ｏｓａｌｄｈ）的全长ｃＤＮＡ,序列分析显示Ｏｓａｌｄｈ ｃＤＮＡ含有一个完整的编码５４９个氨基酸的开放阅读框,其编码蛋白ＯＳＡＬＤＨ的Ｎ端为预期的线粒体前导肽,中部具有醛类脱氢酶基因家族的酶催化活性中心,ＯＳＡＬＤＨ与玉米、烟草、人类的线粒体乙醛脱氢酶同源性分别高达８７％、７７％、５９％。Ｎｏｒｈｅｒｎ分析显示,幼根中Ｏｓａｌｄｈ的表达水平高于幼苗,幼穗,不育品种幼重     

人参二酵组皂甙对缺血-再灌注脑组织超微结构及NOS的影响

目的：研究人参二醇组皂甙（ＰＤＳ）对大鼠脑缺血－再灌注海马超微结构、皮层和海马一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的影响。方法：双侧颈总动脉阻断和再灌注建立脑缺血－再灌流模型,电镜技术和ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学技术。结果：电镜观察可见,缺血３０ｍｉｎ再灌注２ｈ大鼠海马超微结构发生缺血性病理改变,ＰＤＳ对缺血脑组织病理变化有显著保护作用。ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学实验表明,脑缺血１５ｍｉｎ和再灌注２４ｈ后,皮层及海马ＮＯＳ阳性细胞数目显著增多,ＰＤＳ可显著抑制此增多。结论：ＰＤＳ可通过降低脑内ＮＯＳ的活性,减少脑缺血－再灌注过程中ＮＯ的产生,对缺血脑组织产生保护作用