研究新一代麻疹疫苗的必要性

麻疹是由麻疹病毒引起的严重危害儿童健康和生命的传染病。预防接种是控制麻疹最有效的措施。麻疹减毒活疫苗在全世界广泛使用３０多年来,麻疹的发病率和死亡率大幅度下降,对控制全球麻疹流行发挥了重大的作用。由于母传抗体的干扰作用,该疫苗不适合早龄接种。疫苗不耐热,需要完整的冷链系统。麻疹病毒疫苗株和野毒株免疫原性的变化也有可能使麻疹减毒活疫苗的有效率降低。发展适合早龄婴儿接种的、耐热的、免疫原性更强的新一代麻疹疫苗、配合最佳的免疫策略,将会加速实现消灭麻疹的目标。     

WHO关于麻疹疫苗的意见书

麻疹病毒是引起人类疾病的重要病原,是专一的人类病原,没有动物宿主和媒介生物,病毒通过气溶胶和直接接触,由呼吸道飞沫传播。从暴露到发病平均14天(7～18天),病人于出疹前2～3天到出疹后1～2天有传染性,一般不发生持续性感染。当麻疹病毒传人无免疫力人群时,90％～100％的人可发生感染,并成为临床病人。热带的麻疹病人多发生于干旱季节,温带的发病高峰在冬末和初春。     

大学生接种麻疹—流行性腮腺炎—风疹和麻疹疫苗后的异常反应

<正>自1963年麻疹(M)疫苗被批准使用以来,每年报告的麻疹病例数比疫苗使用前下降98%以上。1981～1988年,麻疹发病相对稳定,每年大约3000例。但是,1989～1990年,麻疹发病率上升,超过以前的5倍。据认为这与M疫苗一剂接种,免疫应答不足者的积累有关。为减少此种积蓄,新近建议新入学的大学生及直接接触病人的医护人员等高危人群,进行第二剂M疫苗接种。第二剂接种麻疹—流行性腮腺炎—风疹(MMR)疫苗,则同时改善流行性腮腺炎和风疹之免疫。     

冻干人用狂犬病纯化疫苗稳定剂的筛选

取同一批人用狂犬病纯化疫苗纯化液,分别加入筛选出的A、B、C和D稳定剂,按已确定的适宜冻干曲线进行冻干后,分别检测其安全、效力、外观、水分等,效力结果显示,使用A、B、D稳定剂的制品在37℃放置3个月,效价降低了48%～60%;使用C稳定剂的制品在37℃放置3个月效价仅下降了16.1%。表明C稳定剂为冻干人用狂犬病纯化疫苗适宜的稳定剂配方。     

麻疹疫苗生产连续培养多次收获工艺研究

本研究对连续培养多次收获工艺用于麻疹疫苗生产的可行性、疫苗维持液保护剂、冻干保护剂及冻干过程等进行了大量反复试验,结果表明在现行条件下,本生产工艺具有重复性好、成本低、投入产出率高、易于质量控制等优势。对本工艺生产疫苗进行全面检定,表明成品滴度和稳定性试验指标等均高于９０版《生物制品规程》要求,并在试验基础上制定出了生产工艺流程。     

国际脊髓灰质炎和麻疹疫苗与免疫专题讨论会

<正>国际比较病毒学组织(ICVO)和世界卫生组织(WHO)共同组织的国际脊灰和麻疹疫苗与免疫讨论会,于1992年1月7～12日在印度新德里举行。ICVO(蒙特利尔)主席E.kurstak教授和WHO的EPI主任R.Kim-Farley博士主持会议。来自世界各地的260位专家与会。会议交流了有关分子监测,脊灰和麻疹的流行病学、诊断、疫苗免疫原性与免疫策略,重组疫苗、联合疫苗,疫苗质量控制及改进疫苗安全和效力研究等72篇优秀论文。 有关专家就控制和消灭麻疹和脊灰的研究现状及存在问题作了专题报告。会议发表了纪要。现将本次会议的重点内容归纳如下:     

临床用DNA疫苗生产工艺研究进展

DNA疫苗是继传统疫苗和基因工程蛋白亚单位疫苗之后的新一代疫苗,具有很好的市场潜力。DNA疫苗生产工艺的质粒DNA大规模制备技术对DNA疫苗的产业化具有重要意义。本文介绍了DNA疫苗生产工艺的研究进展包括提高质粒DNA产量的策略、发酵后处理工艺、有效去除杂质和分离超螺旋构象质粒DNA的纯化工艺以及DNA疫苗生产相关的质量控制体系等。     

冻干乙型脑炎减毒活疫苗的冻干工艺优化研究

为了研究优化冻干乙型脑炎减毒活疫苗的冻干工艺,运用正交试验法L934考察不同冻干参数对该疫苗成品质量的影响,以外观、残余水分、病毒滴度以及热稳定性为直观分析指标,并对病毒滴度进行方差分析。结果显示,主干燥时间和主干燥真空压力对病毒滴度的影响有显著统计学意义(P<0.05)。优化的冻干参数为预冻温度-35℃、时间2h;主干燥温度从-35℃升温至-10℃,再由-10℃升温至33℃,总耗时16h,真空压力0.220mbar;二次干燥的温度维持于30℃,真空压力为0.001mbar,终点测试压力无变化时结束。对冻干乙型脑炎减毒活疫苗冻干参数筛选优化后,可得到较佳的冻干曲线,经验证该曲线适用于生产。     

梅州市两次麻疹疫苗强化免疫效果分析

目的综合评估分析梅州市两次麻疹疫苗强化免疫效果,为消除麻疹提供科学依据。方法综合分析麻疹疫苗强化免疫现场调查资料、评估法定传染病报告系统中麻疹发病率的变化;随机对辖区内1～12岁健康儿童216名,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行强化免疫前及完成二次强化免疫后麻疹lgG抗体水平监测。结果监测人群完成二次强化免疫后麻疹IgG抗体阳性率达100.00%(216/216),2009年强化组、2010年强化组麻疹IgG抗体保护率和几何平均滴度(GMT)分别为82.08%、87.62%和1958.83、2050.26,均显著高于强化免疫前;2009年强化免疫后麻疹年发病率由强化免疫前五年平均发病率1.71/10万下降至0.22/10万,下降率87.13%,2010年强化后麻疹年发病率再次下降(0.039/10万),下降率82.27%。结论梅州市两次麻疹疫苗强化免疫效果显著,均大幅度降低了麻疹发病率、提高了人群麻疹抗体水平。     

甘肃省麻疹减毒活疫苗强化免疫疑似接种异常反应分析

目的分析甘肃省2010年和2011年麻疹减毒活疫苗(Measles vaccine,live MV)强化免疫活动中疑似预防接种异常反应(Adverse events following immunization,AEFI)发生特征,评价AEFI监测工作。方法收集2010年和2011年甘肃省AEFI监测系统报告数据,采用描述性流行病学方法对相关数据进行分析。结果甘肃省2010年和2011年MV强化免疫活动共报告AEFI病例346例,报告发生率为14.17/100万,男性略多于女性。一般反应报告发生率为12.82/100万,异常反应报告发生率为1.19/100万,异常反应主要以过敏性皮疹为主。接种MV后,发生AEFI的时间多在1 d之内,占总报告病例数的76.41%,并呈现随着年龄增大发生率逐渐降低的趋势。结论两次MV强化免疫活动AEFI报告发生率较低,接种MV后的1 d之内需要重点监测,加强主动监测,提高AEFI的预防和处理水平。     

冷冻干燥对重组酵母乙型肝炎疫苗效力(抗原性)的影响

重组酵母乙型肝炎疫苗(酵母乙肝疫苗)加入保护剂后冷冻干燥,观察是否影响疫苗抗原性和稳定性。按5％和1％的比例,在酵母乙肝疫苗原液中分别加入蔗糖和明胶,低温冷冻干燥,制备3批冻干疫苗,分别进行体外相对效力和小鼠ED50测定。加保护剂冻干后酵母乙肝疫苗体外相对效力和小鼠ED50值较冻干前改变不大,而4℃放置和热加速后的稳定性均优于液体疫苗。因此现有酵母乙肝疫苗加入保护剂冻干后,显著提高了疫苗的稳定性,为进一步制备稳定的疫苗参考品打下了初步基础。     

The roles of a process development group in biopharmaceutical process startup

The transfer of processes for biotherapeutic products into finalmanufacturing facilities was frequently problematic during the 1980's and early 1990's, resulting in costly delays to licensure(Pisano 1997). While plant startups for this class of products can become chaotic affairs, this is not an inherent or intrinsic feature. Major classes of process startup problems have been identified andmechanisms have been developed to reduce their likelihood of occurrence. These classes of process startup problems and resolution mechanisms are the major topic of this article. With proper planning and sufficient staffing, the probably of a smooth process startup for a biopharmaceutical product can be very high – i.e., successful process performance will often beachieved within the first two full-scale process lots in the plant. The primary focus of this article is the role of the Process Development Group in helping to assure this high probability of success.     

正交试验优化鼠疫活疫苗冻干稳定剂

目的优化皮上划痕用鼠疫活疫苗的稳定剂配方。方法采用正交试验,以鼠疫杆菌冻干存活率为检测指标,分别对乳糖、谷氨酸钠、硫脲和尿素4种成分组成的稳定剂配方,以及乳糖、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲和尿素5种成分组成的稳定剂配方进行优化。结果 4种成分组成的稳定剂最佳组合为乳糖7.5%、谷氨酸钠0.5%、硫脲1.0%、尿素0.1%(均为质量分数),此配方可使菌体的冻干存活率达到(68.49±6.19)%;5种成分组成的冻干稳定剂最佳组合为乳糖7.5%、蔗糖7.5%、谷氨酸钠0.5%、硫脲0.5%、尿素0.1%(均为质量分数),此配方可使菌体的冻干存活率达到(74.71±6.34)%,均高于现有稳定剂配方。结论优化的两种稳定剂均对鼠疫杆菌具有较好的保护作用。     

高水分、富含淀粉植物组织的扫描电镜制备技术优化

应用常规高真空扫描电子显微镜观察生物样品必须经过脱水和干燥处理,但无论采用临界点干燥还是冷冻干燥方法,都存在样品表面不同程度失真的问题。植物高水分、富含淀粉组织样品经处理后,容易出现淀粉流失、细胞壁变形等现象,从而造成扫描图像粗糙,无法获得真实的细胞内部结构。本文通过对CO_2临界点干燥、化学固定样品冷冻干燥和新鲜样品冷冻干燥3种扫描电镜样品制备技术中后期制样进行机械断裂和液氮脆断改进,优化出两种植物高水分、富含淀粉组织的扫描电镜样品制备方法:(1)样品首先进行FAA化学固定,经冷冻干燥后用液氮脆断,对断面喷金镀膜和扫描电镜观察。利用该方法所得细胞结构完整,细胞壁整齐,淀粉粒和蛋白轮廓明确,可用于分析淀粉粒和蛋白颗粒在细胞内的分布。(2)新鲜样品直接进行冷冻干燥,经液氮脆断后对断面喷金镀膜和扫描电镜观察。利用该方法所得细胞壁整齐,淀粉粒轮廓更清晰,并且无蛋白颗粒干扰,用于分析淀粉粒在细胞内的分布更加理想。     

用蚀斑法进行麻疹疫苗的病毒滴定

按世界银行中国疫苗项目对麻疹疫苗检定的要求,建立了麻疹疫苗病毒滴定的蚀斑方法。以蚀斑法对Ｈｕ１９１株生产的冻干麻疹活疫苗样品进行了测定。结果发现,Ｈｕ１９１株生产的麻疹疫苗在琼脂和甲基纤维素覆盖下所形成的蚀斑大小及形状不同,但滴度无显著性差异;在室温和３７℃吸附的滴度无显著性差异,但细胞在３７℃生长较好;在本实验条件下,蚀斑滴定和ＣＣＩＤ５０测定的滴度呈正相关,蚀斑滴定相对较敏感;采用国产６孔聚苯乙稀培养板,Ｖｅｒｏ细胞单层,在３７℃吸附,用甲基纤维素覆盖,经结晶紫及甲醛固定染色后计数空斑,操作简便易行,结果特异敏感,重复性好,可用于麻疹疫苗病毒滴定     

Evaluation of manometric temperature measurement (MTM), a process analytical technology tool in freeze drying, part III: Heat and mass transfer measurement

This article evaluates the procedures for determining the vial heat transfer coefficient and the extent of primary drying through manometric temperature measurement (MTM). The vial heat transfer coefficients (K_v) were calculated from the MTM-determined temperature and resistance and compared with K_v values determined by a gravimetric method. The differences between the MTM vial heat transfer coefficients and the gravimetric values are large at low shelf temperature but smaller when higher shelf temperatures were used. The differences also became smaller at higher chamber pressure and smaller when higher resistance materials were being freeze-dried. In all cases, using thermal shields greatly improved the accuracy of the MTM K_v measurement. With use of thermal shields, the thickness of the frozen layer calculated from MTM is in good agreement with values obtained gravimetrically. The heat transfer coefficient “error” is largely a direct result of the error in the dry layer resistance (ie, MTM-determined resistance is too low). This problem can be minimized if thermal shields are used for freeze-drying. With suitable use of thermal shields, accurate K_v values are obtained by MTM; thus allowing accurate calculations of heat and mass flow rates. The extent of primary drying can be monitored by real-time calculation of the amount of remaining ice using MTM data, thus providing a process analytical tool that greatly improves the freeze-drying process design and control.