从agarose胶回收DNA的方法

到目前为止,已经建立了很多从agarose胶回收DNA的方法,但所有这些方法中没有一种令人完全满意。两个主要的问题是:第一,大部分agarose均被硫粘多糖所污染,当抽提DNA时,它们被一起抽提出来。     

从凝胶中回收DNA的一种简便方法

从凝胶中回收DNA的方法已见多种报道,其中的电洗脱法较实用,已有几种装置作为商品出售。Wu等的方法无须任何专门设备,而是在DNA电泳区带前方挖槽,槽内嵌半透膜,使样品自凝胶泳入槽内的缓冲液中。该方法说来简单,实际操作却很费劲,尤其在样品数量大或重复操作时,更觉不便。我们按照Wu等的工作原理,制成一种电洗脱器,可使DNA的回收操作变得简单而高效。     

一种高效、快速从凝胶中回收DNA的方法

目的:介绍了一种从普通琼脂糖电泳中回收DNA的简便、快捷、高效且廉价的方法.方法:利用0.5 mL离心管、1.5mL离心管、尼龙膜做成的一个小装置.把含有DNA的凝胶放在膜上,离心,收集从管底流出来的液体,用乙醇沉淀DNA.结果:最终回收率为60%左右,回收率大约为市售试剂盒的90%,接近市售DNA回收试剂盒.结论:该方法操作简单,回收率高,无其他试剂污染.     

一种从琼脂糖凝胶中同步回收DNA和琼脂糖的方法

介绍一种从琼脂糖凝胶同步回收DNA和琼脂糖的方法。利用0.25 mol/L异硫氰酸胍溶液(p H 8.0)溶解含有目的 DNA片段的的凝胶条,胶条溶解后,静置冰上10 min再加入预冷的异丙醇,琼脂糖呈颗粒状析出,通过离心即可初步分离DNA和琼脂糖。上清液用异丙醇沉淀回收DNA片段,利用50%PEG溶液沉淀琼脂糖。分别对0.2 kb、1 kb和10 kb长度的DNA片段进行回收,回收率分别为19.44%、36.40%、13.49%,回收的DNA纯度高,电泳条带清晰。琼脂糖均回收率为62.52%,回收琼脂糖脱水后的状态为白色颗粒。该方法切实可行,回收成本低廉,回收的DNA和琼脂糖可用于后续实验。     

一种便捷可靠的从凝胶中回收DNA片段的方法

从琼脂糖凝胶中回收 DNA片段是重组 DNA实验中经常需要进行的操作。这里介绍一种用自制的微型电泳槽电泳回收 DNA片段的方法。取 4块各长 1cm,宽 0 .5cm,厚 2 mm的聚乙烯条板 ,用氯仿将它们粘合到一块长 2 cm,宽 1cm的聚乙烯板中央 ,制成一四周密闭的小槽。在相对的两块挡板内侧底边各置一条铂金丝 ,两端用蜡固定。两条铂金丝在相对的两角都向上延伸至顶部并翻出 ,用蜡固定在挡板外侧。这样就制成了一个微型电泳槽。铂金丝外露部分可用带导线的夹子与电泳仪相联 ,通电后可进行潜水电泳。DNA样品按常规的琼脂糖凝胶电泳分离后 ,用 EB染…     

介绍一种DNA的提取方法

实验材料鸡或牛的肝脏、石英砂、脱氧胆酸钠溶液(1克脱氧胆酸钠溶于60毫升蒸馏     

一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法

利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当。在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性。     

用透析膜从琼脂糖胶中回收DNA片段

分离与回收DNA片段是基因操作的重要环节之一。本文介绍了一个用透析膜从琼脂糖胶中回收 DNA 片段的改进方法。利用本法回收DNA片段洗脱容易、节约时间、回收率在80％ 左右。回收的 DNA片段可用于酶切反应、连接反应和用缺口位移反应制备32p标记DNA探针。     

一种分离回收DNA的简捷方法

一种分离回收ＤＮＡ的简捷方法崔晓江,彭学贤（中国科学院微生物研究所,北京１０００８０）从凝胶中分离回收ＤＮＡ有多种方法,如常用的低熔点胶法,普通胶液氮速冻法等。Ｂｉｏ１０１公司生产的Ｇｅｎｅｃｌｅａｎ试剂盒使ＤＮＡ回收避免了苯酚抽提和乙醇沉淀,简单快...     

介绍一种回收DNA片段和浓缩核酸稀溶液的方法

在核酸的结构与功能和遗传工程研究中,常常遇到由凝胶带上回收限制性内切酶酶切片段和大体积溶液中核酸(或片段)浓缩的问题。多年来,不少人,采用不同方法试图解决这一问题,但是,有的回收率不高(20-30％),有的回收后样品不能直接为酶作用,有的样品含量太低,不能满足研究需要。     

一种改良的从银染的聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA的方法

ＣｌｉｎＣｈｅｍ,１９９８,４４（９）报道了Ｓｔｅｖｅｎ等介绍的从聚丙烯酰胺凝胶上将ＤＮＡ转移到ＤＥＡＥ膜上的技术。此技术能同时进行多个样品的处理和纯化,被纯化的差异显示法（ＤＤＡ）产物电泳条带单一,分离的范围为１００～７００ｂｐ的ＤＮＡ,回收的ＤＮ...     

一种简便、高效、经济的从凝胶中回收DNA的方法

目的:尝试一种简便、高效的从凝胶中回收DNA的方法。方法:在Eppendorf管的管底用注射器扎孔,将一小团用Eppendorf管融化后拉成的细丝放入管中,把含有DNA的凝胶放在细丝上,离心,收集从管底流出的液体,经酚氯仿抽提后用乙醇沉淀DNA。结果:经过简单的离心即可近乎100%地回收凝胶中的DNA。结论:使用该方法从琼脂糖凝胶回收DNA,操作简单,回收率高,无其他试剂污染。     

介绍一种提取DNA的简易方法

本文介绍一个中学可做的简易实验,用课堂演示或学生实验来提取动物肝脏中的ＤＮＡ。动物组织细胞中的ＤＮＡ和ＲＮＡ大部分与蛋白质结合成核蛋白。在１～２ｍｏｌ／Ｌ的浓氯化钠溶液中,ＤＮＡ核蛋白的溶解度很大,ＲＮＡ核蛋白的溶解度很小;而在０．１４ｍｏｌ／Ｌ的稀...     

从琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的几种简便方法

介绍两类从普通琼脂糖电泳凝胶中回收ＤＮＡ的简便、快捷、高效且廉价的方法．第一类为电泳洗脱法．方法ａ：利用１．５ｍＬ微量离心管、ｌｍＬ吸头、尼龙网膜和透析膜做成的一个小装置,快速有效回ＤＮＡ,最终回收率为７０％左右．方法ｂ：不用ＤＥＡＥ－纤维素膜,而用透析膜在凝胶中作出横隔挡在ＤＮＡ条带前,最终回收率为５０％左右;第二类为冰冻融解法,最终回收率也在５０％左右．如果联合使用冰冻融解法和电泳洗脱法,回收率可进一步提高至９０％．     

一种回收DNA小片段的有效方法

在分子生物学中回收DNA小片段往往不够理想,本文通过一个51bp多聚接头的消化、电泳,超速离心等步骤,介绍了一种有效的回收DNA小片段的方法。     

从凝胶中回收DNA

引言 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺电泳技术目前得到了广泛的应用。它们按分子大小分离DNA分子,具有很高的分辨率。从混合物中分离单一种类DNA分子,凝胶电泳既可用于分析又可用作制备。用于制备时一个主要问题是如何从一含DNA的胶带中得到较高的DNA回收率而避免凝胶介质污染。本文拟对回收的方法学作一概述。     

一种从毛发中提取DNA 的简易方法

用PCR 缓冲液及蛋白酶K 在PCR仪上对单支毛囊进行消化,　可获得用于PCR反应的足量的DNA。还对几种从毛发中提取DNA的不同方法进行了比较,并对从毛干中提取线粒体DNA进行了讨论。     

一种有效回收小分子DNA片段的方法

介绍了一种有效回收小于200bp DNA片段的方法。用改进的冻融-离心回收法对155bp的DNA片段进行回收,并且与常规冻融-离心回收、TaKaRa回收试剂盒的结果做对比,用琼脂糖凝胶电泳检测回收结果,紫外吸收法定量分析。结果证明:改进的方法是一种经济、方便、可靠的回收小分子DNA片段的方法。     

一种从人血凝块中提取基因组DNA的方法

介绍了一种新的从人血凝块中提取基因组DNA的方法,用该方法提取的DNA成功地应用于PCR和限制性酶切等后续实验中。基本过程为首先机械粉碎,然后高盐高EDTA溶液处理,含蛋白酶K和SDS的消化液变换温度消化,苯酚氯仿抽提。