核仁小分子RNA

核仁小分子ＲＮＡ屈良鹄（中山大学生命科学学院生物工程研究中心广州５１０２７５）关键词核仁小分子ＲＮＡ（ｓｏｎＲＮＡ）;内含子（ｎｉｔｒｏｎ）;基因（ｇｅｎｅ）;核糖体（ｒｉｂｏｓｏｍｅ）真核生物（ｅｕｋａｒｙｏｔｅ）在真核生物细胞中,除了人们所熟悉的ｒＲＮＡ,ｍＲＮＡ和ｔＲＮＡ之外,还存在着许多小分子ＲＮＡ［１,２］,如核小分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）,核仁小分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮ）以及细胞过程中的调控活动,具有十分重要的生物学意义[3,4].     

大肠杆菌中的小分子RNA

迄今为止,已知由大肠杆菌基因组编码的小分子ＲＮＡ（ｓＲＮＡ）除了５ＳｒＲＮＡ和ｔＲ－ＮＡ外,共有１０种,其中大多数是调控ＲＮＡ,可调控细菌的某些代谢过程。１．ｓＲＮＡ的发现用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析３２Ｐ标记的大肠杆菌总ＲＮＡ,发现除５ＳｒＲＮＡ和ｔＲ...     

发夹核酶的研究与应用

核酶 (ｒｉｂｏｚｙｍｅ)是既能特异识别又能特异切割小分子ＲＮＡ的核酸内切酶 ,其本身也是ＲＮＡ ,主要包括发夹核酶、锤头核酶、丁肝病毒、链孢霉属ＶＳ和铅依赖性ＲＮＡ ,共同特点是可逆地切割底物ＲＮＡ的磷酸二酯键 ,生成 5′ ＯＨ和 2′ ,3′ 环磷酸末端。虽然催化产物相似 ,但它们的结构和催化机制却是很不相同的。发夹核酶 (ｈａｉｒｐｉｎｒｉｂｏｚｙｍｅ)发现于三种不同植物ＲＮＡ病毒 ,即烟草环点病毒 (ｔｏｂａｃ ｃｏｒｉｎｇｓｐｏｔｖｉｒｕｓ) ,菊苣黄色斑点病毒型 (ｃｈｉｃｏ ｒｙｙｅｌｌｏｗｍｏｔｔｌｅｖｉｒｕｓｔ…     

SELEX法筛选特异亲和淀粉的小分子RNA

ＳＥＬＥＸ法筛选特异亲和淀粉的小分子ＲＮＡ＊王琛金由辛＊＊王德宝（中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室,上海２０００３１）关键词ＳＥＬＥＸ;２．５ＳＲＮＡ;兔肌糖元分枝酶指数式富集法配体进化,即ＳＥＬＥＸ［１］（ｓｙｓｔｅｍ－ａｔｉｃ...     

RNA地位上升

人们长期认为核糖核酸 (ＲＮＡ)在细胞中只传递信息和氨基酸 ,但最近因它的多功能而令人瞩目。自 1995年表明小分子ＲＮＡ能够关闭一种线虫中的基因 ,与植物中已知的“基因沉默”(ｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｅ)相似 ,分子生物学家即认识到基因功能研究将因“ＲＮＡ干扰”(ＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ,ＲＮＡｉ)而得益 ,对ＲＮＡ的兴趣飙升。 2 0 0 1年他们发现ＲＮＡｉ也能在鼠和人的细胞中阻遏基因的活性。小分子ＲＮＡ起着重要的生物作用 ,从ＤＮＡ序列分析已知线虫和果蝇中有几十个 ,大肠杆菌有数百个 ,鼠脑组织更多。在线虫和果蝇中 ,这…     

RNA聚合酶Ⅲ启动子的结构与功能

ＲＮＡ聚合酶Ⅲ (ｐｏｌⅢ )是真核生物催化合成ｔＲＮＡ和 5ＳｒＲＮＡ及一些核小ＲＮＡ和胞质ＲＮＡ必需的酶。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ能够识别ｔＲＮＡ基因中一些高度保守的特征性ＤＮＡ序列而启动下游ＤＮＡ的转录 ,这些序列称为ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子不仅广泛存在于真核细胞中ｔＲＮＡ、Ｕ6核小ＲＮＡ(ＳＮＲ6 )等的基因中 ,也是病毒催化合成一些小片段ＲＮＡ如腺病毒ＶＡＲＮＡ所必需的。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子因其能在体内外高效快速地转录某些小片段基因 ,已被人们广泛地应用于核酶和反义ＲＮＡ技术中 ,在众多的ＲＮＡ…     

真核细胞中mRNA的降解机制

细胞中不同的ｍ ＲＮＡ 半寿期差异很大,ｍ ＲＮＡ 的稳定性受到多种因素的影响,现在已经发现了许多对ｍ ＲＮＡ 的稳定性有影响的顺式因子和反式因子。大量的研究证明在真核细胞内存在复杂的机制调节ｍ ＲＮＡ 的稳定与降解及其所引起的基因表达。现在可以肯定在真核细胞中至少存在着三种ｍ ＲＮＡ的降解方式：依赖于脱腺苷酸的降解,无义密码介导的ｍ ＲＮＡ 的降解和核酸内切酶的水解。其中依赖于脱腺苷酸的降解方式是细胞内大多数ｍ ＲＮＡ 降解的主要途径。     

《基因调节：反义RNA和DNA生物学》

《基因调节：反义ＲＮＡ和ＤＮＡ生物学》《基因调节：反义ＲＮＡ和ＤＮＡ生物学,（Ｇｅｎｅｒｅｓｕｌａｔｉｏｎ：ｂｉｏｌｏｇｙｏｆａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡａｎｄＤＮＡ）由ＲｏｂｅｒｔＰ．Ｅｒｉｃｋｓｏｎ和ＪｏｎａｔｈａｎＧ．Ｉｚａｎｔ编著,１９９２年雷文...     

细菌转录器内的蛋白—蛋白相互作用

本文介绍了大肠杆菌生理活动的分子生物学基础，重点阐述细菌在各种环境条件下基因的转录调节。转录调节蛋白被激活后，有的诱导产生不同的ＲＮＡ多聚酶的δ亚基，有的与ＲＮＡ多聚酶的Ｃ末端结合，有的与δ＾７０亚基的Ｃ末端结合，通过蛋白－蛋白间的相互作用，启动转录过程。     

核糖体RNA拓扑学与RNAN－糖苷酶研究进展（上）

核糖体ＲＮＡ拓扑学的研究对阐明核糖体ＲＮＡ（ｒＲＮＡ）在蛋白质生物合成中的作用具有重要的意义。ＲＮＡＮ－糖苷０酶是一类核糖体失活蛋白．它只水解ｒＲＮＡ特定位置上一个腺苷酸的糖苷键,释放一个腺嘌呤碱基,使核糖体失活。ＲｉｃｉｎＡ链是研究得最早和最详细的ＲＮＡＮ－糖苷酶,迄今已发现有二十五种核糖体失活蛋白具有ＲＮＡＮ－糖苷酶活性。ＲＮＡＮ－糖苷酶作用于２８ＳｒＲＮＡ的α－ｓａｒｃｉｎ结构域,改变核糖体的构象而使其失活。     

反义RNA调节肿瘤细胞O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶活性

报道了逆转录病毒载体介导的反义ＲＮＡ对肿瘤细胞Ｏ６－甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ甲基转移酶（ＭＧＭＴ）活性的调节作用．构建了三个表达ＭＧＭＴ反义ＲＮＡ的逆转录病毒载体并用它们转染ＨｅＬａＳ３肿瘤细胞,观察细胞在转染前后ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平、ＭＧＭＴ活性及其对ＡＣＮＵ抗药性的变化．发现针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ５’端的反义ＲＮＡ能够有效地降低ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并使细胞对ＡＣＮＵ的敏感性提高４．６倍;针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ全长的反义ＲＮＡ也能在一定程度上调节细胞的ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并增加细胞对ＡＣＮＵ的敏感性,而针对３’端序列的反义ＲＮＡ对ＭＧＭＴ活性没有调节作用．     

RNA病毒RNA聚合酶的研究进展

自然界仅有ＲＮＡ病毒以ＲＮＡ作为基因载体。依赖于ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶在这种病毒的增殖复制期起到了非常重要的作用。它一方面以病毒ＲＮＡ为模板复制子代病毒的基因,另一方面也将病毒增殖期间需要的蛋白质和酶类的基因转录成为ｍＲＮＡ,也就是说它担负了复制酶和转...     

RNA功能研究进展

ＲＮＡ功能研究进展王建勋,陈松森（中国医学科学院基础医学研究所,中国协和医科大学基础医学院,北京１００００５）关键词ＲＮＡ近年来,陆续发现了许多小分子ＲＮＡ,它们广泛存在于各种生物体中,行使与传统功能不同的功能,参与许多生命活动的调控。同时,还发现转...     

甘蔗和烟草幼叶原生质体的核酸含量与核酸酶活性及其影响因素

与幼叶组织相比,酶法新鲜分离的甘蔗和烟草幼叶原生质体内的ＲＮＡ、ＤＮＡ及总核酸含量均降低。其原因可能是刚游离的原生质体内酸性和碱性ＲＮＡ酶与ＤＮＡ酶等活性提高所致。甘蔗叶原生质体内的核酸降低量和ＲＮＡ酶与ＤＮＡ酶活性的增加程度均高于烟草。随用作渗透压稳定剂的甘露醇浓度增加,甘蔗和烟草叶原生质体的ＲＮＡ酶和ＤＮＡ酶活性均相应提高。其中以甘蔗叶原生质体的核酸酶活性增加水平较明显。在细胞壁降解产物的作用下,除了甘蔗原生质体内的ＲＮＡ酶活性略被促进外,其ＤＮＡ酶和烟草叶原生质体内的核酸酶均不受影响     

河西走廊不同生态型芦苇核酸代谢季节动态研究

分布在甘肃河西走廊的４ 种生态型芦苇（Ｐｈｒａｇｍ ｉｔｅｓｃｏｍ ｍ ｕｎｉｓＴｒｉｎ．）的核酸代谢季节变化有差异。盐化草甸芦苇ＲＮＡ 含量持续增加,ＤＮＡ 含量相对稳定,其它３ 种生态型芦苇的ＲＮＡ 和ＤＮＡ 含量以５月份为最高。过渡带芦苇的ＲＮＡ 含量、沼泽芦苇及沙丘芦苇的ＤＮＡ含量９ 月份略有增高。盐化草甸芦苇与过渡带芦苇的ＤＮａｓｅ和ＲＮａｓｅ的活性７ 月份最高,沼泽芦苇与沙丘芦苇的ＤＮａｓｅ和ＲＮａｓｅ活性５—９ 月份呈增高趋势。盐化草甸芦苇的ＤＮＡ 和ＲＮＡ 合成活性不断升高,过渡带芦苇和沼泽芦苇的ＤＮＡ 和ＲＮＡ 合成活性及沙丘芦苇的ＲＮＡ 合成活性５—９月份均降低,仅沙丘芦苇的ＤＮＡ合成活性增强。ＲＮＡ 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分析结果表明,４ 种生态型芦苇均含有２５Ｓ、２３Ｓ、１８Ｓ、１６Ｓ大分子量ｒＲＮＡ 和小分子量５．８Ｓ、５Ｓ、４．５ＳｒＲＮＡ 及４ＳｔＲＮＡ。大分子量ＲＮＡ 的含量高于小分子量ＲＮＡ 含量。不同生态型及同一生态型芦苇的不同发育时期,相同的ＲＮＡ 组分含量各不相同。且发育过程中２３Ｓ、１８Ｓ、１６ＳｒＲＮＡ 在不同月份发生不同程度的降解。由此,我们认为,核酸代谢的差异性是４ 种生态型由生长转入衰     

剪接体是否属一种以RNA为基本组成的酶？

在ｍＲＮＡ的剪接 (ｓｐｌｉｃｉｎｇ)过程中 ,前体ＲＮＡ分子的内含子被切除 ,继以外显子相连成具有翻译功能的ｍＲＮＡ。剪接反应系由剪接体 (ｓｐｌｉｃｅｏｓｏｍｅ)完成 ,它是一个含有 5种细胞核内小分子ＲＮＡ(ｓｎＲＮＡ)与逾 50种蛋白质的大复合物。最近Ｎｉｌｓｅｎ报道 ,有新的实验证据表明 ,前体ＲＮＡ的剪接由剪接体的一种ＲＮＡ组分所催化 ,该组分可同一关键性金属离子结合。及后 ,Ｙｅａｎ等也指出 ,剪接体含有的Ｕ6ｓｎＲＮＡ能特异地同二价金属离子结合 ,参与剪接第一步的催化 ,提示剪接体属于金属依赖性酶类。剪接包括两个…     

基因治疗中的受体介民反义RNA转移技术

在调节特定基因的表达上,反义ＲＮＡ是一种重要的手段。但由于存在降解、非特异性转移及安全性等问题,反义ＲＮＡ在个体基因治疗中无法得到充分利用。受体介导的内吞作用为定向转移反义ＲＮＡ提供一种运载工具,它可以将反义ＲＮＡ定向、高效、低毒、高安全性地转移到靶细胞中发挥作用,因而将大大加快反义ＲＮＡ基因治疗的临床应用。     

反转录病毒载体系统

反转录病毒载体系统曹虎（江苏省东海县教育局２２２３００）反转录病毒是一种ＲＮＡ病毒,由糖蛋白外壳、两条ＲＮＡ链和含有反转录酶的核心蛋白组成。当包着ＲＮＡ链的核心蛋白进入宿主细胞后。反转录酶启动,以病毒ＲＮＡ链为模板,反转录出单链ＤＮＡ,继而生成双链Ｄ...     

大鼠4.5S RNAs的cDNA克隆与序列分析

利用ＲＴ－ＰＣＲ方法,首次从大鼠肝脏细胞总ＲＮＡ中扩增出４．５Ｓ ＲＮＡｓ的ｃＤＮＡ。该ｃＤＮＡ被克隆到ｐＧＥＭ３Ｚｆ（＋）质粒上,经酶切电泳鉴定,然后测序。与报道的小鼠和仓鼠４．５Ｓ ＲＮＡｓ序列进行了比较研究,并对该分子的结构特点进行了初步分析。     

核糖体失活蛋白及核糖体拓扑结构的研究进展

天花粉毒蛋白使核糖体失活的分子机制是它有ＲＮＡＮ－糖苷酶的作用。从樟树种子中纯化的两种新的核糖体失活蛋白（ＲＩＰ）——辛纳毒蛋白和克木毒蛋白也都具有ＲＮＡＮ－糖苷酶和依赖超螺旋结构的核酸内切酶活性。辛纳毒蛋白还有杀虫活性;克木毒蛋白还有超氧化物歧化酶活性。被ＲＮＡＮ－糖苷酶失活的核糖体用硼氢化钠还原或氨基酸加成反应可部分地复活,这表明失活的核糖体ＲＮＡ上产生的一个活泼醛基对其失活起着重要作用。工作中建立了荧光标记在凝胶上测定小分子ＲＮＡ序列和定性测定糖蛋白的两种新方法。