羊蹄叶过氧化物酶的纯化和酶学性质研究北大核心CSCD

采用磷酸缓冲液浸提法提取羊蹄叶POD,对影响酶提取的主要因素(料液比、浸提液p H、浸提温度和浸提时间)进行单因素实验和正交实验,用p H沉淀和丙酮沉淀对酶进行了纯化,并研究了其酶学性质。结果表明,羊蹄叶POD的最佳提取条件是料液比为1∶40,提取液p H为9,浸提温度是35℃,浸提时间为30 min。调节提取液的p H为5以及用1倍和0.8倍体积的丙酮沉淀提取液时蛋白相对沉淀量多和酶的比活性大。羊蹄叶POD以愈创木酚和H2O2为底物的Km分别是0.12 mmol/L和0.62×10-3mmol/L。Cu SO4对羊蹄叶POD活性有激活作用,而Zn SO4、Mg SO4、Ca Cl2、KCl和Na Cl对POD活性有抑制作用。研究证明羊蹄叶POD的提取和纯化方法简单有效,其酶学性质为理解羊蹄植物的生长特性和酶学应用提供依据。     

枸杞多糖提取工艺的研究

采用热水浸提法从枸杞干果中提取枸杞多糖,经正交实验确定浸提时间、温度、料水比最优值分别为：5h、100℃、1：40;微波预处理超过25min时,多糖得率达15．91％;醇沉时当醇沉时间为4h、乙醇加入量为4倍时有利于枸杞多糖提取。     

蒌蒿过氧化物酶特性及其抑制条件的研究

对蒌蒿中所含的过氧化物酶的特性及其抑制条件进行研究 ,结果表明 ,蒌蒿中过氧化物酶活性的适宜pH为 5 .0和 6 .6 7,适宜温度为 2 0℃ ,四种抑制剂中 ,Vc抑制作用最显著 ,其次为NaHSO3 和柠檬酸 ,EDTA Na2 抑制作用不明显     

枸杞组织培养中过氧化物酶和可溶性蛋白质的变化

枸杞(Lycium barbarum L.)叶组织切块接种在附加6-BA 0.5毫克/升和NAA 0.5毫克/升的MS固体培养基上可大量诱导产生愈伤组??织,培养至30天分化出芽,到50天长成小苗。过氧化物酶活性和可溶性蛋白质的含量分别在大量分生细胞团形成和芽形成时出现两个峰值,酸性蛋白质的种类也在这两个时期迅速增加。过氧化物酶同工酶阳极端出现的四条酶带中,A_2、A_3较稳定,A_1、A_4则在不同发育时期呈现规律性的变化。     

烟曲霉A-16产纤维素酶工艺优化及酶学特性北大核心CSCD

分离筛选高效降解稻草的菌株,研究菌株产纤维素酶工艺条件及酶学性质。采用刚果红染色法从腐败木质下的土壤中分离筛选到一株产纤维素酶菌株,结合菌株的形态特征和18S rDNA序列同源性比较进行鉴定;通过单因素试验和响应面分析法确定菌株最适产酶条件,并对纤维素酶的稳定性进行研究。分离纯化得到的菌株命名为烟曲霉(Aspergillus fumigatus A-16);响应面实验结果表明,最优产纤维素酶工艺参数为:稻草粉添加量7 g/100 mL,pH 6.0,温度65℃,发酵时间5 d;在此最优条件下,该菌产生的羧甲基纤维素酶(CMCase)和滤纸酶(FPA)活力分别为2 954.76 U/mL和1 086.37 U/mL;其总活力较优化前提高了26.4%。该纤维素酶的适宜反应温度为70℃,适宜pH 6.0。在80℃热处理90 min条件下酶活力可保持在80%以上,说明该酶热稳定性较好。同时,在pH 5.0-7.0范围内比较稳定,放置1 d后可保持70%以上的酶活力。该研究可为利用富含纤维素的生物质原料开发洁净能源及食品级葡萄糖资源提供了基础支撑。     

荔枝果皮过氧化物酶的纯化及部分酶学性质研究

经硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose和Sephadex G-75柱层析分离,从荔枝果皮中分离提纯了过氧化物酶(POD),该酶被纯化了12．5倍,产率为1．9％。经SDS-PAGE确定为单一条带。该酶最适反应温度为35℃,对热具有较强的稳定性,经75℃处理30min,酶活性只损失50％。最适pH约为6．5,但在pH4．0—8．0范围内活力仍比较稳定。该酶在25℃和0．05mol／L磷酸缓冲液(pH7．0)条件下对愈创木酚、邻苯二酚和没食子酸的Km分别是2．75、12．4和12．8mmol／L。二硫苏糖醇和抗坏血酸能完全抑制POD活性,L-半胱氨酸、柠檬酸、FeS04、GSH、SDS和ZnS04对POD活性有一定的抑制作用,而FeCl,和CuSOt对POD则有较好的激活作用。     

大鼠肝细胞过氧化物酶体的提取

:采用蔗糖密度梯度离心法 ( 950 0 0× g,2 h)提取大鼠肝细胞过氧化物酶体 ,所得过氧化物酶体形态完整 ,纯度与肝匀浆相比提高了 2 6倍 ,仅有少量 ( 0 .5%～ 0 .9%)的微粒体和线粒体污染 ,回收率为 1 2 %。为研究过氧化物酶体提供了有效的分离方法。此法还可将过氧化物酶体、微粒体、线粒体同时进行分离。     

草酸青霉液体发酵产果胶酶条件的优化及其产物的酶学性质

采用响应面分析法对草酸青霉（Penicillium oxalicum）L5菌株液体发酵产果胶酶条件进行了优化。结果表明：桔皮粉、米糠及硫酸铵的添加量分别为4.85%、5.89%、0.97%,摇瓶初始pH为6.0~8.0,接种量为9%时,优化后的果胶酶活达54 391.70 U,是初始酶活18 148.00 U的3倍。另外,对其果胶酶性质进行了初步探讨,结果表明：该酶较适反应温度和pH分别为50℃和5.0;30~50℃时有较好的热稳定性,pH值为5.0时稳定性最佳。     

竹笋脚料过氧化物酶的提纯及酶学性质的研究

竹笋经加工成食品后,大量脚料被丢弃,严重浪费资源,污染环境。文中采用水抽提、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-52离子交换层析三步法从竹笋脚料中快速提取并纯化该酶;同时对该酶部分的酶学性质（温度、pH对酶促反应的影响、酶的热稳定性、酸碱稳定性）进行了考查。结果表明经过纯化后的过氧化物酶的Rz值达到2．5,纯化倍数为12倍,回收率为28％。最适反应温度为55℃,最适pH为6．8,且其温度和pH的适用范围均较宽,热稳定性和酸碱稳定性均较高的中性同工酶。这些优越的酶学性质能为竹笋脚料过氧化物酶的应用提供依据。     

紫花前胡的提取工艺优化研究

目的:采用多指标综合评分法结合响应面法优选紫花前胡香豆素类成分的最佳提取工艺参数.方法:通过HPLC检测紫花前胡中的化学成分伞形花内酯、紫花前胡苷、补骨脂素、花椒毒素和佛手柑内酯的含量,以综合评分值作为评价指标,并对液料比、甲醇浓度和超声时间进行考察,且在单因素试验基础上,运用Box-Behnken设计响应面法优化提取...     

槲蕨多糖的提取工艺优化及其抑菌性研究

以槲蕨块茎为材料,采用水提醇沉法提取槲蕨多糖.在单因素考察的基础上,以多糖的得率为响应值,料液比、提取温度、提取时间为自变量,建立数学模型,利用响应面法获得槲蕨多糖的最佳提取工艺.采用纸片扩散法比较了不同浓度多糖的抑菌效果.结果表明:槲蕨多糖最佳提取工艺条件为:料液比1:25,提取时间2.0h,提取温度为85℃,在此优化条件下多糖得率为7.57％,与响应面分析预测值7.61％基本相符.槲蕨多糖对杆菌有明显的抑制作用,对供试球菌无明显抑制效果,多糖最低抑菌浓度为10 mg/mL.     

豇豆几丁质酶部分酶学特性的研究

该文测定了纯化的豇豆几丁质酶部分酶学特性。结果表明,该酶在pH5-8,温度低于60℃的范围内稳定性较好,酶活力最适pH为65,最适温度为50℃。10mmol/L浓度的Hg2 、Mn2 、Mg2 、Co2 等金属离子对酶活力有一定抑制作用,其中Hg2 离子抑制率最高(6883%)。Km(胶状几丁质)值为1662mg/ml;以SDS-PAGE电泳和SephadexG-100柱层析两种方法分别测得分子量为34kD、325kD;IEF电泳测得等电点为83。     

枸杞髓组织培养中体细胞胚胎发生与过氧化物酶同工酶分析

枸杞髓组织在 MS+6 - BA0 .1mg/ L+NAA0 .5mg/ L培养基上诱导愈伤组织发生。在 MS+6 - BA0 .1mg/ L+NAA0 .5mg/ L+CH50 0 mg/ L培养基上继代培养 ,再转入 MS+6 - BA2 mg/L +NAA 0 .5mg/ L的分化培养基上进行分化培养。显微观察表明 ,在培养过程中愈伤组织细胞由非胚性细胞转变为胚性细胞 ,直至发育成体细胞胚胎和完整植株 ;电泳结果显示 ,体细胞胚胎发生的各阶段 ,其过氧化物酶同工酶发生相应的变化。     

响应面法优化超声提取绿茶茶多酚工艺

利用响应面法对超声提取绿茶荼多酚的工艺条件进行优化,在单因素试验的基础上,根据中心组合设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,依据回归分析确定最优提取工艺条件。结果表明,其最佳工艺条件为：液料比为40．2mL／g,超声功率为476W,提取时间为15．1min,采用该工艺条件,茶多酚的提取得率达到10．312％,通过响应面法得到一个能较好预测试验结果的模型方程。     

响应面优化超声辅助提取刺梨多糖工艺研究

探讨超声波作用下刺梨多糖提取的最佳工艺条件。在单因素试验基础上,采用响应面法对刺梨多糖提取工艺参数进行优化研究。响应面试验表明提取温度、超声功率、超声时间、液料比对响应值刺梨多糖提取率均有显著影响,优化得到超声辅助提取刺梨多糖最佳工艺条件为:超声时间30 min,超声功率120 W,液料比40m L/g,提取温度80℃,提取3次。在此条件下的刺梨多糖提取率可达2.18%,与模型预测值非常接近。     

兔唇鼠尾草种子粘液理化特性及提取工艺的研究

本研究在对兔唇鼠尾草种子粘液的吸水特性和红外光谱进行分析的基础上,利用响应面分析方法优化种子粘液的提取工艺,并探讨提取时间、液料比、提取温度等3个因素对种子粘液提取率的影响。结果表明:兔唇鼠尾草种子在自然干燥状态下呈卵形,表面光滑无毛,深棕色,种子表皮纹饰为波浪状结构,在水中种子可以吸收相当于其自身干重22倍的水分;干燥的粘液种子吸水120 min后即达到饱和,而吸水饱和后的粘液种子要经过16 h后又干燥失水恢复至原重;种子粘液是一类多糖化合物,该多糖分子含β-糖苷键;优化的种子粘液提取工艺为:提取时间3.7 h,液料比59:1,提取温度64℃,多糖提取率为7.41%。本研究为兔唇鼠尾草资源的开发应用提供了理论依据。     

响应面优化酶解—微波辅助提取桑叶多糖的工艺研究

采用响应面优化酶解——微波辅助法从桑叶中提取桑叶多糖的提取工艺。在单因素试验的基础上通过采用Box-Behnken方法,研究液固比、提取时间、提取温度对桑叶多糖提取率的影响。结果显示,拟合方程显著,最终确定桑叶多糖的最优提取条件为：酶含量2%、酶解pH6、酶解温度50℃、酶解时间20 min、液固比15 mL·g^-1、提取时间13 min、提取温度76℃,该条件下桑叶多糖的实际提取率为15.23%,与理论模拟值15.12%接近,建立的模型真实可靠。该方法用于提取桑叶中的多糖类成分,工艺简单、成本低,具有有较高的应用价值。     

黑果枸杞中色素提取工艺及其性质研究

研究了黑果枸杞中色素及其化学性质。提出该色素在酸性条件下热水浸提或酒精浸提。测得其最大吸收波长为５２０ｎｍ,查明该色素具有较强的耐酸性、耐还原性、耐热性,其在酸性条件下耐光性能极佳。