植物胁迫信号转导过程中活性氧和促细胞分裂原活化蛋白激酶的调节作用

以H2O2为代表的活性氧(reactive oxygen species,ROS)和以促细胞分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)为代表的蛋白激酶广泛存在于植物细胞并参与各种生理反应过程.生物胁迫条件下,一些MAP激酶特异性地调节氧化猝发(oxidative burst,OXB)和过敏反应(hypersensitive response,HR),水杨酸(salicylic acid,SA)诱导的MAP激酶(SA-induced protein kinase,SIPK)和ROS共同参与系统获得性抗性(systemic acquired resistance,SAR)的建立;SIPK、P38 MAPK等分别与H2O2共同调节臭氧、受伤和渗透胁迫等多种非生物胁迫生理反应.ROS和MAP激酶共同调节植物胁迫信号转导,但其机制尚需进一步的研究.     

胚胎神经管缺陷大鼠模型差异基因的表达

通过构建妊娠合并糖尿病诱发先天性神经管缺陷的SD大鼠模型, 与胚胎不伴有先天性神经管缺陷组大鼠和正常对照组大鼠胚胎进行研究, 提取卵黄囊细胞的mRNA, cDNA 基因芯片技术对表达差异基因进行检测, 应用特异性抗磷酸化抗体进行免疫共沉淀及Western blotting, 对卵黄囊细胞MAP Kinase信号途径蛋白激酶活性进行分析。在神经管缺陷大鼠胚胎卵黄囊细胞和对照组1 200个基因中, 共筛选出表达差异基因79个, 其中42个基因表达上调、37个基因表达下调。同时发现神经管缺陷胚胎卵黄囊细胞出现细胞凋亡特征性的DNA ladder(梯状电泳), 凋亡相关基因 caspase-3、Bax 高表达, 凋亡抑制基因 AKT活性明显受抑; 与正常对照组相比ERK1/2蛋白激酶活性显著下降、JNK1/2活性明显升高。因此, 认为妊娠合并糖尿病诱发胚胎先天性神经管缺陷的发生存在多种差异基因表达, 以及MAP Kinase、凋亡信号传导机制的共同作用。     

改构苹果多糖对人结肠癌HT29细胞凋亡的影响

目的:探讨改构苹果多糖(modified apple polysaecharides,MAP)对人结肠癌HT29细胞凋亡的影响及其机制.方法:采用MTT法观察不同浓度MAP对HT29细胞增殖的影响;TUNEL法和流式细胞术研究MAP对HT29细胞凋亡的作用;Western Blot法检测给予不同浓度MAP后,HT29细胞中凋亡相关蛋白caspase3,8,9、Bax和Bcl-2表达的变化.结果:与对照组相比,MAP对HT29细胞增殖有明显的抑制作用且能诱导HT29细胞的凋亡;MAP可促进HT29细胞caspase 3,8,9及Bax的表达,降低Bcl-2的表达,且均呈剂量依赖性.结论:MAP可以通过内部和外部途径诱导HT29细胞凋亡.     

苦瓜MAP30蛋白的原核表达及其生物活性研究

以天然苦瓜基因组为模板PCR扩增去前导肽后成熟的MAP30蛋白基因,克隆至可诱导表达载体pET28a中。将含MAP30基因的表达载体pET28a-MAP30转化至E. coli Rostta（DE3）中并通过IPTG诱导表达。经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白杂交（Western blot）以及液相色谱-质谱（LC-MS）对表达的重组MAP30蛋白进行鉴定,并通过镍柱亲和层析纯化。将pUC19质粒与不同浓度的纯化后的重组MAP30蛋白孵育,分析其切割DNA的活性。同时将纯化后的重组MAP30蛋白体外作用于人乳腺癌细胞（MCF-7）,采用MTT、AO/PI双染等方法进行抗肿瘤活性分析。实验结果表明纯化后的蛋白经质谱鉴定和Western blot分析,目的蛋白成功地与His-tag融合表达。首次发现大肠杆菌异源表达的重组MAP30蛋白同天然蛋白一样可以切割超螺旋DNA活性。MTT、AO/PI双染结果证实重组MAP30体外可诱导MCF-7细胞发生凋亡。通过基因工程技术大量制备MAP30蛋白,进一步研究其体外生物学活性,为以后的临床应用奠定基础。     

全国植物细胞生物学学术讨论会在大庸召开

1987年10月26日至11月1日在湖南省大庸市召开全国植物细胞生物学学术讨论会。来自21个省、市、自治区136名代表参加了会议。大会收到论文摘要153篇,分别在大会、分组会上进行了学术交流。按其交流内容可分三个方面:1.植物细胞显徽结构;2.植物细胞、组织与器官的培养;植物染色体核型,组型及其变异。     

植物细胞中的钙离子传导

近年来的研究表明，Ca2＋在植物细胞的信号转导过程中一直起着非常重要的作用。通常，生活细胞内游离钙的浓度保持在30—200nmol/L的范围内, 但来自细胞外或细胞内的各种刺激，则可引起细胞内游离钙浓度的瞬时变化，从而使Ca2＋通过不同的信号转导途径，直接或间接地调节细胞生理和生化过程。在植物细胞的生命活动过程中，Ca2＋的调节功能表现为多种多样，其中包括离子运输、细胞运动、糖类代谢、细胞分裂、细胞分泌以及基因表达等等。有人研究发现，在植物细胞间隙、细胞壁以及液泡中Ca2＋的浓度远高于细胞内游离钙浓度，它们是细胞质…     

向光色素Phototropin1的细胞和亚细胞定位

向光色素 1 (ｐｈｏｔ1 )是在蓝光 (ＢＬ)下进行自我磷酸化的Ｓｅｒ/Ｔｈｒ型光受体激酶 ,它的两个保守的ｄｏｍａｉｎ分别结合着作为发色团的两个ＦＭＮ分子。它是与原生质膜 (ＰＭ)结合的 1 2 0ｋＤ的蛋白。ｐｈｏｔ 1和ｐｈｏｔ 2蛋白都是植物向光性反应的光受体 ,它们也是调节叶绿体运动、开闭气孔和快速抑制黄化芽延长生长的蓝光受体。为了解ｐｈｏｔ 1和ｐｈｏｔ 2调节这 4个反应的机理 ,有必要了解其细胞和亚细胞定位。将编码融合的ｐｈｏｔ 1和ＧＦＰ(绿色荧光蛋白 )的结构 (在内源ＰＨＯＴ1启动子控制下 )转化无ｐｈｏｔ1的拟南芥…     

人工合成树状串联hTERT表位肽对mDC表型和功能的影响

目的 通过对树状串联hTERT表位肽（MAP）与无肽刺激组髓样树突状细胞（mDC）的相关检测,研究MAP肽对mDC的表型和功能的影响.方法 人工固相合成四分支的MAP肽,免疫磁珠分选mDC,流式细胞技术检测相关表面分子.ElISA分别检测两组mDC培养基的IL-12p70含量,并作统计学分析.结果 人工合成MAP肽纯度高（95.26 %）,免疫磁珠分选mDC纯度为72.59 %,相比于无肽刺激组mDC,MAP肽刺激组成熟（培养第9天）时MHCⅡ类分子为83.90 %、MHCⅠ类分子为91.08 %,CD86：77.03 %,CD83：92.16 %;IL-12p70的含量也大于无肽刺激组,且有统计学差异.结论 人工合成hTERT的MAP肽能足够强的激活mDC,刺激其成熟和功能的表达,可作为mDC抗肿瘤疫苗的刺激肽结构.     

一种非破坏性监测培养植物细胞的简易方法

在研究悬浮培养中植物细胞的生长规律时,常常采用多次分批法测定生长曲线,但工作量大,且存在着个体差异,以致测定的结果有误差。为此,我们研制出一体化非破坏性监测的培养装置(图1),对剌五加体细胞胚进行培养,监测其体积增长变化,并得到剌五加体细胞胚的生长模型,现简介如下。 1 培养装置由培养的三角瓶和监测体积的量筒组成,两者的容积比为5∶2。结构简单,操作方便。     

容易混淆的三个概念

在“茎的结构”一节中,有几个容易混淆的概念。1 形成层的细胞不仅仅是1层 理论上讲．形成层只有1层细胞但由于形成层刚形成的衍生细胞与形成层细胞的形状、大小很相似．所以通常看到的是几层到十几层细胞但只有中间1层细胞具有分裂能力．分裂后向外形成新的韧皮部．向内形成新的木质部。