人类造血细胞的端粒—端粒酶的研究进展

端粒和端粒酶是近年来生命科学的研究热点之一,端粒酶与肿瘤密切相关,作为特殊的肿瘤标记,已成为抗肿瘤治疗的新靶点。由于造血干细胞的特性,对正常及恶性造血细胞进行端粒－端粒酶的研究可为进一步探讨正常造血细胞的增殖、分化、成熟和凋亡的调控机制,以及恶性血液肿瘤的发病机理提供理论依据,为临床诊断和抗癌治疗提供新的思路和策略。     

靶向端粒酶的肿瘤治疗方案相关进展

近年来,端粒作为真核细胞染色体末端的保护染色体免受核酸酶降解的特殊的DNA重复结构,成为现代生物学的研究热点。端粒与基因表达调控、细胞生长、肿瘤发生、衰老有着密切的关系。端粒维持过程中有2类重要的蛋白,即端粒相关蛋白和端粒酶。端粒酶,特别是其催化亚基hTERT,在端粒延长过程中起着不可替代的作用,与细胞永生化和癌变密切相关。近年来,靶向端粒酶的肿瘤治疗在逆转录酶抑制剂尤其是反义核酸和免疫治疗方面都取得了突破性的进展。肿瘤干细胞在肿瘤的发生发展过程中起重要作用,将很有希望成为未来靶向端粒酶的肿瘤治疗的一个重要靶标。     

端粒酶shRNA慢病毒载体的构建及转染人类胚胎干细胞

目的：构建端粒酶shRNA慢病毒载体及建立端粒酶稳定干扰的人类胚胎干细胞系。方法：将端粒酶基因特异性shRNA靶序列与慢病毒载体PLKO.1-puro连接、转化、挑取阳性克隆进行PCR及测序鉴定;利用包装细胞293T获得重组的慢病毒,感染人类胚胎干细胞,分为干扰组ShTert、载体组vector和野生型组wt;Realtime-PCR检测端粒酶mRNA的表达。结果：经PCR和DNA测序鉴定,成功构建端粒酶特异性shRNA慢病毒载体,并感染人类胚胎干细胞;经检测shTert组端粒酶mRNA表达较vector和wt组明显降低,vector组和wt组之间无明显差异。结论：通过成功构建的端粒酶特异性shRNA慢病毒载体对人类胚胎干细胞的转染实现了对其端粒酶mRNA的调控。     

端粒酶shRNA 慢病毒载体的构建及转染人类胚胎干细胞

目的:构建端粒酶shRNA慢病毒载体及建立端粒酶稳定干扰的人类胚胎干细胞系。方法:将端粒酶基因特异性shRNA靶序列与慢病毒载体PLKO.1-puro连接、转化、挑取阳性克隆进行PCR及测序鉴定;利用包装细胞293T获得重组的慢病毒,感染人类胚胎干细胞,分为干扰组ShTert、载体组vector和野生型组wt;Realtime-PCR检测端粒酶mRNA的表达。结果:经PCR和DNA测序鉴定,成功构建端粒酶特异性shRNA慢病毒载体,并感染人类胚胎干细胞;经检测shTert组端粒酶mRNA表达较vector和wt组明显降低,vector组和wt组之间无明显差异。结论:通过成功构建的端粒酶特异性shRNA慢病毒载体对人类胚胎干细胞的转染实现了对其端粒酶mRNA的调控。     

Exo-1基因对端粒酶缺陷小鼠造血干细胞植入效率的影响

目的利用不同的造血干细胞移植方式,探讨Exo-1基因缺失对端粒酶基因敲除小鼠的造血干细胞植入效率的影响。方法以CD45.1小鼠的骨髓细胞或骨髓造血干细胞为供体,以端粒酶基因敲除小鼠或Exo-1基因和端粒酶基因双敲除小鼠为受体,在给予不同剂量X线照射或不照射的情况下,重复进行静脉注射全骨髓细胞或分选的骨髓造血干细胞(c-kit+、Sca-1+、lineage-,KSL),于移植后1个月取外周血,流式分析嵌合率。结果未经X线照射及1 Gy、2 Gy照射情况下,端粒酶基因缺陷受体小鼠的外周血中供体来源的细胞嵌合率较低;6 Gy照射后,供体来源的外周血细胞嵌合率仍低于50%,而且端粒酶基因缺陷受体小鼠在移植后1个月内死亡较多;3 Gy照射可形成较高嵌合率,Exo-1基因缺失对端粒酶缺陷小鼠的造血干细胞植入效率的影响不显著。结论以端粒酶缺陷小鼠作为衰老模型研究造血干细胞植入效率时,3 Gy X线照射能够有效地形成较高的外周血供体细胞的嵌合率,但是Exo-1基因没有进一步提高造血干细胞在端粒酶敲除小鼠的植入效率。     

端粒酶在干细胞研究中的主要进展

端粒酶的表达对于维持干细胞自我更新能力和复制潜能具有重要意义。影响干细胞中端粒酶表达的因素包括生长因子、基因调控及其它物理化学因素。利用人端粒酶催化亚单位 (hTERT)基因修饰干细胞 ,可有效地体外长期扩增并维持某些干 /祖细胞的多向分化潜能特性 ;通过异位表达hTERT使干细胞永生化 ,可为干细胞基础研究及临床应用提供药物筛选模型或细胞模型     

端粒酶抑制剂

端粒酶被激活被认为是发生恶性肿瘤的主要因素,其激活及表达程度与肿瘤的发生和转移密切相关,因此端粒酶是肿瘤靶向治疗的理想靶点。研究和开发端粒酶抑制剂将为肿瘤治疗揭开新的篇章。端粒酶全酶复合物有很多可以做抑制剂的靶点,包括hTR(端粒酶RNA成分)、hTERT(端粒酶逆转录催化亚单位)、引物锚定位点、全酶的组装和那些招募端粒酶到端粒的因子。     

衰老或肿瘤: 端粒酶和p53的相互作用

端粒酶和p53两者在肿瘤和衰老的发生发展过程中都起着关键的作用。在人类大多数的肿瘤中都发现了这一现象: p53基因发生突变和端粒酶的重新激活。端粒酶和p53基因的治疗逐渐成为肿瘤治疗的重要手段之一。文章论述了端粒酶或p53基因敲除的不同组合的小鼠模型(mTR-/-p53+/+; mTR-/-P53-/-)的衰老与肿瘤表型, 对端粒功能异常可抑制或促进肿瘤发生的辩证作用作一综述, 以期理解p53与端粒酶在衰老与肿瘤发生中的辩证相互作用, 寻求一种治疗肿瘤的新思路。     

应用mTR-/-鼠模型系统研究肿瘤发生机制的进展

端粒酶是真核细胞体内的一种核糖核酸蛋白质复合体,是一种特殊的DNA聚合酶,具有延伸DNA末端的功能,能够维持端粒长度和功能,TERT具有反转录酶活性。在大多数体细胞和原代细胞中,端粒酶活性很低,通常检测不到,但在肿瘤细胞中,端粒酶则被广泛激活,因此认为端粒酶与肿瘤的发生具有密切的关系,本介绍了应用端粒酶阴性鼠研究端粒酶与G链悬垂和P53在肿瘤的发生过程中的相互关系。     

人端粒酶与肿瘤的关系及测定方法

端粒酶是维持染色体端染粒长度和功能稳定的重要物质，依照人们掌握的端粒酶表达活性的测定方法，近年来大量资料表明，肿瘤细胞中有端粒酶的表达，并在不同时期有不同程度的表达。人们试图将端粒酶的表达水平作主肿瘤的诊断和愈合指标，并有可能将对端粒酶表达的抑制作为下世纪肿瘤基因治疗的一个新手段。     

端粒、端粒酶与肿瘤的相关研究进展

端粒是真核细胞染色体末端的DNA序列,在维持染色体的稳定中起着重要的作用。快速生长的细胞通过端粒酶来合成端 粒重复序列以弥补其损耗。在人类恶性肿瘤细胞中,85%以上能检测到端粒酶的活性,使其成为一个几乎普遍的癌标志物,而在大 多数正常体细胞中,端粒酶是阴性的。端粒酶与肿瘤之间的最新研究已经在肿瘤生物学领域开辟了新的途径,可能会彻底改变抗 癌疗法。在这篇文章中,我们将会总结端粒和端粒酶在癌细胞中的作用。随着科技的发展,端粒和端粒酶拥有巨大的潜力,必将能 够为肿瘤的治疗带来更多的方法。     

端粒酶的非端粒保护作用

端粒酶与细胞永生化和肿瘤的发生发展密切相关,过去认为是由于端粒酶保护端粒从而阻止因端粒缩短所导致的细胞凋亡;然而近年来,越来越多证据表明:端粒酶在维持端粒长度之外,还存在着非端粒保护作用。通过对其非端粒保护作用的研究,有助于深入而全面地阐明端粒酶的生物学行为及其作用机理,对于肿瘤等疾病的治疗具有重要意义。本文对端粒酶的非端粒保护作用进行小结。     

端粒酶抑制剂在肿瘤治疗中的进展

端粒是真核细胞染色体末端含有ＴＴＡＧＧＧ重复结构的复合体 ,有防止染色体降解丢失 ,端端融合和重组建作用 ,端粒酶是一种逆转录酶 ,以自身ＲＮＡ为模板 ,逆转录维持染色体的稳定。目前肿瘤组织端粒酶检出率约 85 - 90 %,而正常组织或良性肿瘤端粒酶检出率〈5 %,说明端粒酶与恶性肿瘤密切相关。端粒酶抑制剂作为新的抗肿瘤策略正成为肿瘤研究的热点 ,现就端粒酶抑制剂在肿瘤治疗中的研究状况做一简单概述。1、阻断端粒酶ＲＮＡ的模板作用对端粒酶活性的抑制1. 1反义核苷酸、反义肽苷及硫代反义核苷酸对端粒酶活性的抑制端粒酶ＲＮＡ序列中…     

综述: 肿瘤干细胞微环境与靶向干预策略

肿瘤干细胞具有自我更新和可塑性的潜能,能够维持肿瘤生长和异质性的能力．肿瘤干细胞是肿瘤产生、转移、耐药和复发的根源,肿瘤干细胞学说逐渐被肿瘤研究者所接受,因此,对肿瘤干细胞的深入理解有重大的科学和临床意义．肿瘤干细胞的微环境是肿瘤微环境的组成部分,包括细胞-细胞接触、分泌型因子等．肿瘤非干细胞和肿瘤干细胞本身都可以作为肿瘤干细胞的微环境．肿瘤干细胞的微环境可以维持肿瘤干细胞的可塑性,保护肿瘤干细胞免受免疫系统攻击,也可以促进其转移．肿瘤干细胞对其微环境的塑造、肿瘤干细胞的微环境对肿瘤干细胞自我更新的影响,以及针对肿瘤干细胞微环境的靶向干预等问题,已成为肿瘤干细胞研究的前沿问题．本文就肿瘤干细胞的发现、自我更新维持机制、肿瘤干细胞的微环境,及其肿瘤干细胞及微环境的干预策略等研究进展进行了综述．     

肿瘤干细胞微环境与靶向干预策略

肿瘤干细胞具有自我更新和可塑性的潜能,能够维持肿瘤生长和异质性的能力.肿瘤干细胞是肿瘤产生、转移、耐药和复发的根源,肿瘤干细胞学说逐渐被肿瘤研究者所接受,因此,对肿瘤干细胞的深入理解有重大的科学和临床意义.肿瘤干细胞的微环境是肿瘤微环境的组成部分,包括细胞-细胞接触、分泌型因子等.肿瘤非干细胞和肿瘤干细胞本身都可以作为肿瘤干细胞的微环境.肿瘤干细胞的微环境可以维持肿瘤干细胞的可塑性,保护肿瘤干细胞免受免疫系统攻击,也可以促进其转移.肿瘤干细胞对其微环境的塑造、肿瘤干细胞的微环境对肿瘤干细胞自我更新的影响,以及针对肿瘤干细胞微环境的靶向干预等问题,已成为肿瘤干细胞研究的前沿问题.本文就肿瘤干细胞的发现、自我更新维持机制、肿瘤干细胞的微环境,及其肿瘤干细胞及微环境的干预策略等研究进展进行了综述.     

端粒酶是干扰素抗肿瘤的新靶点

端粒酶(telomerase)是一种具有逆转录活性的核糖核蛋白酶.端粒酶的异常活化是细胞永生化和肿瘤形成的关键步骤. 端粒酶活性与细胞周期及细胞凋亡调控密切相关;端粒酶由端粒酶逆转录酶、端粒酶RNA、端粒酶相关蛋白质组成,端粒酶逆转录酶是端粒酶活性的决定性组分.干扰素(interferon)是一种具有抗病毒、抗增殖、抗肿瘤和免疫调节等功能的细胞因子;近年研究表明,干扰素通过相关信号转导途径而调节端粒酶活性,诱导细胞凋亡,为肿瘤的生物治疗提供了新思路;但干扰素与端粒酶活性相关的抗肿瘤机制研究尚不充分. 本文综述干扰素通过调节端粒酶逆转录酶转录因子的表达和相互作用而抑制端粒酶活性、调节细胞周期并诱导细胞凋亡等抗肿瘤作用机制.     

端粒、端粒酶与细胞衰老

端粒和端粒酶是现代生物学研究的热点,端粒的缺失与细胞的衰老,端粒酶的活性与细胞的老化及癌化均有密切的关系。章综述了端粒和端粒酶的结构和功能,及其与细胞衰老的关系,并在此基础之上展望了端粒酶在抗衰老、抑制肿瘤等方面的应用。