棉花籽抗生育的研究

分别以脱壳棉籽粉、粗制生棉油、棉籽粉抽提物和纯棉酚,喂成年雄性大白鼠4周,普遍发现在大白鼠的输精管和附睾尾部的精子死亡、精子数目减少并出现畸形;部分大白鼠的睾丸曲精细管呈局部退化,精子发生受到抑制。有不少例子,特别是粗制生棉油灌胃2个月的大白鼠出现附睾炎症(囊肿样结节),在贮有死亡精子的附睾管中吞噬细胞十分活跃。此外,棉籽粉和棉酚对大白鼠显然具有毒性,因棉籽粉或棉酚引起中毒的一般症状表现为食欲减退,生长减慢或停滞,当给以大剂量时可使大白鼠死亡。棉籽粉抽提物不含棉酚的部分,没有抗生育效应也无明显毒性。当停喂棉籽粉、粗制生棉油或棉酚3周后,在大白鼠的输精管里又出现活动的精子。1个月之后,精子的活力正常,合笼的结果和精液检查的结果一致,停药不到1个月,只有少数雄鼠有交配行为,雌鼠不受胎或受胎率很低。停药1个月,有交配行为的雄鼠增加,生殖能力部分恢复。1个月以上,多数雄鼠的生殖能力复原。根据观察可以得出如下结论,棉酚是棉籽或棉籽油中唯一的抗生育有效成分,同时也是一种对动物有毒性的物质。棉酚的毒性和使用的剂量有关。小剂量棉酚不会引起严重的影响但具有抗生育效果。对棉酚抗生育的作用环节、引起精子死亡的原因和毒理以及因食用粗制生棉油导致男性不育症等方面进行了初步讨论。     

大鼠及羊精子在附睾成熟过程中ATP酶活力及其对棉酚敏感性的变化

大鼠及羊精子在附睾成熟过程中ATP酶活力发生明显下降,酶活力的变化形式存在着种间差异。大鼠附睾体及附睾尾精子的ATP酶相对活力分别为附睾头的55.7％及59.6％,而羊则为92.1％及59.8％。 大鼠及羊附睾各区域精子的ATP酶对棉酚抑制作用的敏感程度不同。在5μmol/L的低棉酚的浓度下,大鼠附睾头、体及尾部精子的ATP酶活力分别降至对照组的40.8％、62.7％及81.4％;当棉酚浓度增至40μmol/L时,羊附睾头、体、尾部精子的ATP酶活力才分别降至对照组的63.8％、83.7％及90.7％。作者提出如能使药物作用于附睾精子的敏感区域以干扰其成熟,可能是一条有发展前景的抗生育新途径。     

棉酚抗生育作用的研究——Ⅳ.大白鼠长期服棉酚睾丸退化的观察

选用出生1月龄大白鼠按20毫克/公斤体重/日灌服棉酚,每周5次,连续1个月和2个月取材;性成熟大白鼠每天服棉酚5毫克/只,每周6次,给药3、4、6个月和停药1、2、3个月分别取材,睾丸称重后固定、制片作比较观察。实验结果表明,棉酚对幼龄大白鼠睾丸的发育没有影响,但使发育到变态后期的精子细胞受损伤,附睾中出现断头坏死的精子。长期服抗生育有效剂量棉酚的大白鼠中,有相当一部分出现不同程度的睾丸退化。退化通常在睾网附近最先出现,并和死精子在曲精细管中积聚相关连。第Ⅶ—Ⅷ期生精上皮退化的过程是自上皮游离缘18—19期精子细胞开始渐进地向基膜方向推进,直至上皮完全剥落或仅留以个别精原细胞和较多的媬育细胞。停服棉酚后恢复1—3个月的结果指出,已开始退化的睾丸在停药后有继续退化的趋势。严重退化的睾丸经停药3个月,虽然曲精细管排列较整齐,部分留有精原细胞的曲精细管中精原细胞显示增加数目并有B 型精原细胞,但尚未见进一步发展。对于睾丸退化可能与死精子在曲精细管内积聚有关,而不是由于棉酚对整个生精上皮的损伤问题进行了讨论。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅱ.棉酚抗生育作用的形态学分析

利用电子显微镜观察到小剂量棉酚能引起大白鼠精子发生后期精子细胞的中段线粒体肿胀,证明在大白鼠睾丸中对棉酚最敏感的成分是成熟期精子细胞。     

脉红螺Rapana venosa(Valenciennes)生殖系统的组织解剖学研究

脉红螺为雌雄异体。雄性生殖系统包括8部分:精巢、输精小管、贮精囊、输精管、前列腺、输精管外套段Ⅰ、输精管外套段Ⅱ和阴茎。雌性生殖系统包括7部分:卵巢、输卵小管、输卵管Ⅰ段、纳精囊、输卵管Ⅱ段、蛋白腺和产卵器。 脉红螺精子形成过程中有精子细胞团形成。精子线形,由头段、中段和尾段构成。头段核基部内凹形成倒“U”形管;中段有丝状线粒体鞘,螺旋缠绕轴丝;尾段由9条粗纤维包围‘9+2’型轴丝构成。 本文亦对前列腺、蛋白腺及蛋白质卵黄粒等的超微结构作了观察。     

乌梢蛇输精管道的组织学与免疫细胞化学观察

为探讨乌梢蛇(Zaocys dhumnades)输精管道结构与其功能之间的关系,该研究用一般光镜技术观察了乌梢蛇输精管道的显微结构及其年周期变化,并结合免疫细胞化学方法研究了雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和芳香化酶(Ar)在输精管和精巢中精子细胞表达的相关性.为验证该文在乌梢蛇输精管中观察到的大量精子和圆球状结构,用一般光镜技术还观察了黑眉锦蛇(Elaphe taeniura)、赤链蛇(Dinodon rufozonatum)与虎斑颈槽蛇(Rhabdophis tigrina lateralis)的输精管道.结果表明,乌梢蛇的输精管道主要由输出小管、附睾管与输精管构成;8-10月输出小管中有精子,8月—翌年1月附睾管中有精子,全年(除7月外)输精管中有大量精子;在输精管内首次观察到由多个精子细胞构成的圆球状结构,该结构与精巢中精子细胞的AR、ER、PR和Ar累计光密度值之间分别无显著差异.由于在乌梢蛇、黑眉锦蛇及赤链蛇的输精管内圆球状结构均可见精子细胞变态形成精子.因此,建议将蛇类输精管内圆球状结构命名为生精小球(seminiferous spherule).该文认为,蛇类精巢是精子形成的主要部位,而输精管内的生精小球是精子形成的另一个部位;附睾与输精管均可以储存精子,但输精管是精子储存的主要器官.     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅲ.大白鼠灌服棉酚后血液和有关脏器中棉酚含量的测定

大白鼠灌服棉酚后,棉酚在血液和有关脏器中的滞留是不等的,肝脏中浓度较高,累积也较快;血清、睾丸与附睾浓度较低,累积也较慢。但是,在较低的剂量条件下,这种累积是有限度的,即使长期灌服棉酚,也不会造成棉酚在体内无限制的累积;已累积的棉酚在体内滞留时间也并不长久,停药一段时间便可消失,大白鼠也逐渐恢复生育能力。剂量增大时,血液或肝脏中的棉酚浓度也在一定范围内成正比地增大。大量棉酚经肝-胆系统随粪排出,而且在一定剂量范围内有多食多排泄、少食少排泄的现象。     

在体和离体的大白鼠肝细胞经棉酚处理后的观察

性成熟的雄性Wistar大白鼠经小剂量棉酚持续处理半年,肝细胞的超微结构,无论是细胞器或是细胞内含物都和对照大白鼠的相似;但大剂量棉酚短期处理,即可引起肝细胞呈“空泡”样变。在离体条件下,棉酚对大鼠肝细胞的损伤作用,与在体肝细胞经大剂量棉酚短期处理的结果相同,受损伤的程度与棉酚浓度和处理时间成正相关。表明离体肝细胞对棉酚比在体肝细胞敏感,但和生精细胞相比,这些体细胞则是相对不敏感的。小剂量长期用药组及其对照组中部分大白鼠的肝细胞线粒体出现类晶体样内含物,可能提示肝细胞在超微结构水平受损伤,但与灌服棉酚没有必然联系。     

小鼠和豚鼠精子在附睾成熟过程中Ca~(2 )分布变化规律的研究

小鼠附睾头精子,其头部Ca~(2 )在顶体前区顶体外膜内侧结合最多,Ca~(2 )沉淀反应颗粒于该处呈连续层状。附睾头豚鼠精子其头部结合Ca~(2 )含量很少,且主要结合于顶体前区腹面顶体外膜内侧。小鼠附睾体和附睾尾精子Ca~(2 )的分布特征基本上和附睾头精子相同。但豚鼠附睾尾精子顶体外膜内侧无Ca~(2 )结合。和附睾头、附睾尾的附睾液相比,附睾体附睾液基质内具有大量Ca~(2 )存在。附睾体柱状上皮细胞的微绒毛切面上也具有Ca~(2 )沉淀反应颗粒,微绒毛可能与附睾液Ca~(2 )含量的调节有关。精子尾部Ca~(2 )主要分布于线粒体内,在质膜内、外两侧和线粒体外膜外侧也结合有少量的Ca~(2 )。和小鼠精子相比,豚鼠精子尾部线粒体内具有大量的Ca~(2 )。     

中缅树鼩精子形态特征及冷冻损伤

树鼩作为一种新型的、接近灵长类的实验动物,在医学生物学上的应用受到越来越多的重视。精子的结构特性研究及冷冻后结构的完整性分析是精子生物学的主要内容,也有助于树鼩的实验室快速繁殖。该研究采用人工饲养的中缅树鼩(Tupaia belangeri chinensis),结果显示其睾丸占总体重的(1.05±0.07)%,总体积为(1.12±0.10)mL。附睾尾及输精管精子总量估计在2.2×107～8.8×107,其运动度和顶体完整率分别为(68.8±3.9)%和(90.0±2.1)%。利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜对树鼩附睾精子的超微结构进行的观察和分析显示精子头部呈圆形或卵圆形;头部长度、宽度平均分别为6.65和5.82μm;精子尾部中段、主段、尾段和精子总长度平均分别为13.39、52.35、65.74和73.05μm;尾部中段的线粒体螺旋数量为48个,其轴丝结构为典型的"9+9+2"结构。冷冻解冻后的精子主要表现在顶体与质膜不完整、精子断裂、尾部扭曲和膨大。上述结果提示树鼩精子与其他哺乳动物精子的结构特征相似,但是精子大小和线粒体螺旋数目有明显的差别,且超微结构改变仍是冷冻精子运动和受精能力下降的主要原因。     

小鼠附睾头精子获得与卵子质膜融合能力的物质基础研究

随着精子在附睾中的转运,它们与卵子质膜的融合能力逐渐增加。怩证明２附睾体和附睾尾的精子均具有相当高的膜融合能力,而附睾头中的精了奶少能与卵子质膜融合,这是还说明附睾头中的精子不具备与云透明带卵子融合的物质条件呢？利用附睾结扎留并延长体外获能时间,可使附睾头远端精子的融合能力明显地提高;在精子培养液中加入ＡＴＰ,并延长精卵共培养时间,也可使一少部分附睾头近端的精子获得与卵子质膜融合的能力。这表明附睾     

中国石龙子雄性生殖腺的年周期变化

20 0 1年 3月至 2 0 0 2年 2月期间 ,通过每月捕捉浙江丽水中国石龙子 (Eumeceschinensis)雄性成体 ,解剖动物、观测性腺的形态和组织学特征 ,研究雄性生殖周期。睾丸重量和体积、附睾重、输精管重和曲细精管直径有显著的季节变化。睾丸 3月份最重 ,5-9月最轻。睾丸体积和重量的年周期变化规律一致。附睾 3月份最重 ,8-9月份最轻。输精管 4月最重 ,8-10月最轻。生精活动始于 9月下旬 ,翌年 4月最为活跃。 3月下旬曲细精管直径达全年最大值 ,管腔中开始出现呈穗状排列的精子。从基膜到管腔 ,各级生精细胞依次排列。 4月份生精上皮的生精活动最为活跃 ,5月下旬生精活动已近停止 ,7-8月份曲细精管管壁仅由精原细胞 (其间夹有支持细胞 )构成。根据曲细精管生精上皮的年周期变化规律 ,中国石龙子 8月份睾丸生精活动处于第Ⅰ期 ,9月至次年 2月份第Ⅱ期 ,3月上、中旬为Ⅲ期 ,3月底至 4月为Ⅳ期 ,5-6月份为Ⅴ期 ,7月份为Ⅵ期。 4月下旬附睾管腔中有大量的成熟精子 ,7月附睾管腔中已无精子。中国石龙子属于关联型繁殖周期     

猕猴精巢发育的研究

本文用54只正常猕猴按齿序分组研究了精巢的发育状况,结果如下: 1.个体发育年龄在第Ⅰ组和第Ⅱ组的所有动物,毫无例外地都没有表现出性细胞的发育——精细管内只有大量的生殖上皮细胞和少量的性原细胞。 2.第Ⅲ组有两种情况:其一,本组初期的6只动物,其精细管内细胞成分仍然和第Ⅰ、Ⅱ组的相似;其二,本组中后期的6只动物其精细管的直径增大,精细管内的生殖上皮细胞已分化,精原细胞数量剧增,有了支持细胞和初级精母细胞(其中仅1只动物还没有精母细胞),支持细胞核基位;甚至其中1只动物的个别精细管内已有了少数精子,这说明精子发生的首要特征在本组后期的1只动物上已开始出现。 3.第Ⅳ组的11只动物中,除了1只动物的精细管内尚未出现精子外,其余10只动物都有了精子发生的各级成分,有了数量不等的精子。 因此,若以齿序为标准来划分雄性猕猴的性成熟阶段,则结果表明,第Ⅳ组初期(即第三臼齿刚出齐后的时期)的绝大多数个体都达到了性成熟的时期,精细管内有了精子。     

妊娠小鼠子宫内膜LIF基因表达的研究

本文对妊娠第4天(Ⅰ组)、第7天(Ⅱ组)、第10天(Ⅲ组)的小鼠(各20只)子宫内膜LIF基因表达进行了研究。Ⅰ组20只小鼠子宫内膜全部存在LIF基因的表达、Ⅱ组有5只小鼠表达、Ⅲ组仅有1只小鼠表达。文中对不同孕期LIF基因的表达程度与胚胎着床的关系进行了讨论。 Abstract:Leukemia inhibitory factor(LIF)is a glycoprotein with multiple activities and is essential for blastocyst implantation in mouse.We have examined LIF gene expression in mice endometrium on day 4(group Ⅰ),day 7(group Ⅱ),day 10(group Ⅲ)of pregnancy.In group Ⅰ all had LIF gene expression,5 mice had LIF gene expression in group Ⅱ,only one mouse had LIF gene expression in group Ⅲ.We discussed the relation between level of LIF gene expression and embryonic implantation.     

生精细胞及精子赖氨酸含量的研究

本实验取１０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的睾丸和附睾,睾丸石蜡切片,附睾精子涂片后用苯胺蓝染色显示赖氨酸含量。结果是睾丸生精小管中精原细胞和精母细胞染色较深即赖氨酸含量较高,精子细胞和精子染色渐淡即赖氨酸含量降低,而附睾精子显示,在附睾头部的精子染色较深,附睾尾部的精子几乎不着色,应用显微分光光度计测定附睾精子,计算出头部的精子赖氨酸含量在１左右,尾部的精子赖氨酸含量接近于零。本实验还检测了１０例正常人及１０例不育者精子的赖氨酸,结果为正常人精子的赖氨酸含量较低,不育者精子赖氨酸含量高且畸形率也高。提示精子赖氨酸含量高是核蛋白转型异常的征象,可能是男性不育的一个重要原因。     

纤溶酶原激活因子与猕猴精子运动力的关系及其在附睾和附性腺中的表达调节

用11酸睾酮诱导猕猴少精子症和弱精子症及单侧隐睾手术诱导单侧少精子症和弱精子症模型,观察对附睾头、附睾体、附睾尾、前列腺和精囊组织型PA（tPA）、尿激酶型PA（uPA）及抑制因子-1（PAI-1）mRNA表达的影响。原位杂交的结果表明11酸睾酮诱导少精子症和弱精子症,tPA mRNA的表达在附睾头、精囊及前列腺减少,而在附睾体升高,附睾尾表达基本无变化;uPA mRNA的表达在附睾头、附睾体、前列腺减少,而在精囊升高,附睾尾表达基本无变化;PAI-1 mRNA的表达在附睾头、附睾体、精囊下降,而在前列腺升高,附睾尾表达无显著变化。单侧隐睾手术不影响tPA、uPA和PAI-1 mRNA的表达。这些结果提示附睾头和附睾体分泌的uPA可能与精子前向运动能力的获得相关。tPA、uPA和PAI-1 mRNA在猕猴附睾头部和体部、前列腺和精囊中的表达可能受睾酮的调节,但不受睾丸分泌因子及温度的影响,且在不同部位睾酮的调节具不同的特征,而附睾尾tPA、uPA和PAI-1的表达则可能是组成性表达。     

肌肽棉酚对绵羊精子运动及超微结构的影响

肌肽促进绵羊精子运动增强,直线运动精子数目增多;棉酚则强烈抑制精子运动并使精子的运动方式发生改变;肌肽与棉酚混合处理精子,肌肽可不同程度抵消棉酚对精子产生的有害作用。但当棉酚完全抑制精子运动后,再加入肌肽则不能使精子恢复运动。电镜观察,肌肽对绵羊精子超微结构无任何不良影响;棉酚同造成精子严重损伤,导致生物膜系统损害、轴丝崩解、线粒体螺旋鞘紊乱等。本文通过肌肽,棉酚加入的时序不同,探讨两者对绵羊精子     

棉酚甲酸对金鱼精子质膜的影响

利用冷冻断裂-蚀刻制样技术,在超微结构水平上研究了棉酚甲酸对金鱼精子质膜内蛋白颗粒排列图式(包括晶格区)的影响.结果表明,棉酚甲酸能够使金鱼精子质膜内蛋白颗粒分布不匀:或者颗粒聚集成团,或者质膜内出现无颗粒区域;并且还能使质膜内特定部位晶格区的颗粒排列发生混乱.这些变化表明棉酚甲酸能使精子质膜的有序性降低,也即增加了质膜的流动性.     

服棉酚大白鼠血清睾丸酮和LH含量的放射免疫测定

用放射免疫测定法分析了服棉酚雄性大白鼠血清睾丸酮和LH的含量。数据表明,无论是幼龄大白鼠服棉酚2个月和服棉酚2个月停服1个月的,或是性成熟大白鼠服棉酚1个月和停服棉酚1个月的以及服棉酚6个月的血清睾丸酮食量都明显低于同月龄对照大白鼠的或服棉酚前的水平。但血清LH含量没有明显改变。血清睾丸酮含量降低和体重增长以及睾丸生精上皮退化与否都没有明显相关。根据现有的资料可以认为,服棉酚大白鼠血清睾丸酮含量减低,是由于棉酚直接作用于睾丸间质细胞的结果。停服棉酚后睾丸酮含量,除个别动物外均未见明显回升,可能由于棉酚在体内有一定的积累所致。     

青春期大鼠实验性精索静脉曲张对附睾超微结构的影响

目的：精索静脉曲张（VC）与男生不育密切相关,但其导致不育的确切机制尚不清楚。大量临床观察和实验研究证明VC可引起睾丸损害,但对附睾的影响研究较少,特别关于青春期动物VC对附睾影响的研究尚未见任何报道,为此,本研究在建立青春期大鼠实验性VC模型的基础上,试图通过实验性VC对附睾超微结构的影响。来阐明其在不育发生机理中的地位。方法：部分结扎青春期大鼠左肾静脉建立VC模型,分别于手术后4周和8周取左右侧附睾始段头,体,和尾部,在光镜研究的基础上,制作透射电镜标本并进行观察,结果：VC大鼠左右侧附睾各段上皮的超微结构都发生明显改变;如上皮基膜增厚;上皮微绒毛稀少且局部受损;主细胞内多形态溶酶体增加,内质网扩张,高尔基复合体空泡化,线粒体嵴模糊,胞质内出现大空泡;晕细胞数增加且胞质内含大量高电子密度的溶酶体;亮细胞内脂肪滴和溶酶体明显增多,细胞膨胀,常可见游离面突入官腔,此外,附睾官腔内精子残余体增多,精子头出现核大泡,精子尾线粒体,纤维柱排列紊乱等。结论：青春期可引起大鼠附睾超微结构受损,这可能也是VC导致不育的重要原因之一。