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《生物技术通报》1992,(8)
922825使用诬式亲和融合法从大肠杆菌中经蛋白水解得到的盆组蛋白的祖定性〔英〕/Murby,M.…,Bi-oteehnol.Appl.Bioehe。一二1991,14(3)一336~346〔译自DBA,1992,11(s),92一0122‘]一31一本技术包括:构建一些融合基因,‘已们编码一些目标蛋白,如人的原胰岛素(Pl)、大鼠蛋白-二硫化物异构酶(PDI)硫氧还蛋白同源区1等 (即蛋白A的IgG一结合蛋白(22)和蛋白G的白蛋白结合区(BB)间的融合),在IgG一Sephar-ose上纯化。对ZZPI(质粒pRIT37)和ZZPIBB (质粒pRIT38)进行SDS一PAGE和Western印迹揭示,产生的Pl在体内是稳定的。从大肠杆… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(1)
920001大肠杆菌JM鸽的盆组A蛋白〔会,英〕/Hamm。-nd,P .M.…尹Ann.N.Y.Acad.Sci一1990,623一563~567〔译自DBA,1991,10(9),91一04829〕 含外源基因的大肠杆菌JM83(pPA34)产生的重组A蛋白占其可溶蛋白的42%。产物没有C一末端疏水尾部,但具有完全的生物学活性。以甘油作碳源,可使JM83的Lac启动子免受代谢抑制。应用疏水反应色谱法,建立A蛋白纯化新法。将33。。克冷冻细胞浆匀化,纯化的抽提物在80“C加热10分钟。除去沉降蛋白,$lJ剂在Sephadex G25一C上脱盐,洗脱液是25mM Tris一HCI(P H8.3),用DEAE一Sepharose FF(用线性梯… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(2)
940623用链霉菌分泌表达系统生产抗细菌肚“aPidaeci-n”〔英〕/Maeno,M.…/Biosei.Bioteehnol。Bio。hem一1993,57(7)一1206~1207〔译自DBA,1993,12(19),93一10550〕 为了获得链霉菌枯草溶菌素抑制素(SSl)’-ap记aecin融合蛋白,构建了一种表达载体质粒pjsZos一d一EAPIM,并在变铅青链霉菌菌株66中表达。融合蛋白的产量为72m幻1培养基。这种融合蛋白含有551和加在apidaeein基因前头的具Met密码子的apida“cin,起CNBr切割位点的功能。用硫酸钱沉淀、离子交换层析和反相HPLC法纯化产物,并用CNBr切割分离apidaecin(一种抗菌肤,具有1… 相似文献
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《生物技术通报》1989,(3)
890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923808抗冻蛋白mRNA在转基因寄主中的不同转译能力〔英〕/Raneourt,D.E.…了Bioehim.Bio-phys.AetaN一1902,1129(2)一158~194〔译自DBA,1992,11(7),92一03916〕 含D,050尹h名la oela:o夕aster卵黄多肤1墓因增强子、启动子和cap位点,擂人冬季比目鱼工型抗冻基因结构部分5/一非转译区的融合基因在成熟雌性D.仍elaoogaste,转化体中转录,以得到预ml1大小的mRNA,但通过Western印迹未检测到抗冻蛋白。当同样的抗冻蛋白与D,o8。尹瓜la热激蛋白70基因调节区融合并置于卵黄多肤基因增强子下游时,由两个基因调节片段调控mRNA的适宜表达。只… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920861克隆的外源基因在大肠杆菌中增加表达的可能性〔英〕/Venetianer,p.了Aeta Bioteehnol一1991,11(2)一129~133〔译自DBA,1991,10 (15),91一08439习 在异源宿主(如大肠杆菌)中合成并累积想要的(外源)蛋白产物是一个复杂的多步骤过程,并受到以下步骤的影响:i。提高基因拷贝数的方法,如采用高拷贝数载体;11.提高和控制转录率的方法,如使用强启动子;111。提高翻译率的方法,如选用适宜的Shine一Dalgaroo序列;iv.增加合成蛋白或肤稳定性的方法,如表达融合蛋白;v.提高重组质粒稳定性的方法;如使用无需抗生素而能选择连续出现的质粒的方法;… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
923283贯组人降钙素在大肠杆菌中的高浓度合成:融合蛋白的胶原酶裂解和肚基甘氨酸的a一酸胺化〔英〕/Tajima,M.…了J.Ferment.Bioeng一1991,72(5)一562~367〔译自DBA,1992,11 (5),92一02581〕 将编码甘氨酸伸长的人降钙素(h CT一G行)的合成基因插入tac启动子与lacZ墓因之间。把具有胶原酶识别位点的合成DNA置于hCT一Gly基因下游。培养物在181培养基(1%葡萄糖、1%酵母膏、i%Baeto PePtone、0.2%硫酸钱、0。2%磷酸二氢钾、1,8%磷酸二钠和。。01%硫酸镁,pH7.0)、32℃下通过IPTG诱导培养5小时,使携带质粒pZT2232(含hCT基因和lacZ序… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(1)
920101检测金黄色葡萄球菌2,6一二甲基苯基青霉素钠抗性基因的非放射性探针〔英万L馆0221,M.一/Antimierob.Agents Che也other。一1991,35 (3)一575一575〔译自DBA,1991,10(9),91一04830〕 新探针用于检测2,6一二甲基苯基青霉素钠结合蛋白(PBP Za),并阐明抗性与金黄色葡萄球菌(Sta夕h歹lococC:。aore:。)内在基因型的关系。将一段长528bp的基因片段(编码s.a。”:8的内在户内酞胺抗生素抗性,即mec基因)插入质粒pBlueseript SK的Smal位点中,制成探针。在20ng/ml浓度下,该探针检测纯化刀.。仰”R 1 DNA有极高灵敏度。该探针还与刀.e夕… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(1)
8803了4在大肠杆菌中表达的重组体人刀-干扰素的纯化〔英〕/Lin,L.S.…了Metho-ds Enzymol一1956,229一183一192〔译自CBA,1987,(4),1676〕 重组体人户干扰素和结构类似物(在该结构类似物中丝氨酸取代了在第17位上的半胧氨酸)是疏水性的,只有在有离子型去垢剂如SDS的情况下是可溶性的。因此,在有SDS的情况下进行纯化,用2一丁醇酸的沉淀作用来萃取,并在SephaerylS一200和SephadexG一75上层析。(马亚敏)880375大规模生产人淋巴母细胞干扰案〔英〕/Phillips,八.W.…了Methods Enz-ymol一1986,119一35一35〔译自CBA-1987,(4),1749〕 … 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922757藻类的分子生物学〔会,法〕/Dubacq,J.P。了B iofutur一1091,106一22~24〔译自DBA,1992,11(3),92一01222〕 1990年s月4~10日,在美国Durkam召开T第四届藻类学国际研讨会。两个重点议题是:叶绿体基因组对光合器官的调控作用和核基因组在这方面的功能;以及基因的演变。在此以前,对海藻的分子生物学还一直未研究。最近,利用单细胞藻成从一些大型藻制备原生质体已能克服在抽提和纯化DNA方面的困难,对藻类基因组的研究已铺开。藻类核的、线粒体的和叶绿体的DNA在大小、基因排列和碱基化学(甲基化频率和特异于某些组的碱基)是不同的。… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922993苏云金杆菌蜡螟亚种新型d一内毒素基因Crylg的核曹酸序列〔英〕/Smuleviteh,5.V.…了FEBSLett一1991,293(i一2)一25一25〔译自DBA,1992,11(4),92一01452」 采用亲和纯化的抗CryIG纯蛋白单特异血清进行筛选,从噬菌体卜pSLS基因文库中分离出B.t.gll一67的杀虫晶体蛋白CryIG的基因即crylg基因。对3种呈免疫反应的克隆进行限制性作图。含全长crylg基因的质粒pOC10经Xbal切除后删去噬菌体部分。所得质粒pOK10作图后,将其Kpnl一Xbal插入子(含有全长基因及两翼序列)克隆到pUC18内,产生pKP7。如此即可在大肠杆菌中经lac启动子调… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922949在特定杆状病毒表达系统中生产具生物学活性的跳胺化eeeropin〔英〕/Andersons,H.…2 Bioe-liem.J一1091,250,Pt.1一219~224〔译自DB-A,1992,11(3),92一01388〕 构建了表达质粒pVL941一22一ceoA,其中含有:组织血纤维蛋白溶酶原激活子(t一PA)的信号肤、从金黄色葡萄球菌蛋白一A(22)衍生的合成性抗体结合部分、编码cecropin一A天然部分的合成片段(附加C末端甘氨酸密码子)。将此融合基因转入首着银纹夜蛾核多角体病毒载体基因组,再用重组病毒感染草地贪夜蛾Sfg细胞。对从细胞培养基获取的蛋白进行SDS一PAGE和blotting检测。采… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924596用吸岭界素N一乙酸转移蔺(P AC)作为转基因动物中新的报道甚因〔英〕/Lah。:,E .G.“·,Nu-e leie Aeids Researeh。一1991,19(12)。一3465[译自ANI,1992,4(7),3321〕 PAC通过使嚷吟霉素酪氨酸部分的氨基乙酸化,可使嚷吟霉素失活。将白黑链霉菌pac基因与子宫珠蛋白5产侧区部分和SV40多聚腺普化信号一起导入小鼠。PAC在转基因小鼠子宫中表达,但不在家畜或家禽中表达。(朱遐)924587爪幼成体和招蚌专性珠蛋白基因在转基因小砚中的表达〔英〕/Dillon,N.…/Nueleie Aeids Re-seareh一1901,i。(22)一6227~6230〔译白ANI,1992,4(… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(6)
核酸及蛋白质合成、提取、纯化931888ONA侧序反应纯化的固相方法〔英〕/Tong,X.…/Anal。Chem一1992,6魂(22)。一2672~2677〔译自DBA,1993,12(i),。3一00002〕 在酶促延伸反应中采用了5尸末端用吕:P标记、中间位置含生物素类的引物寡核昔酸,形成的产物与抗生蛋白链菌素包被的磁性珠拉结合。通过变性并洗涤珠粒除去模板链和其它反应污染物,通过在EDTA/甲酞胺混和物中加热,洗脱残留的纯单链片段。将珠粒固定于具固定磁铁的样品管之后,洗涤珠粒以除去各种污染物(如蛋白、盐类、模板DNA及未掺入或降解的三礴酸脱氧和双脱氧核昔。通过在9… 相似文献
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《生物技术通报》1986,(2)
860675分泌素的生产〔专,德」/Konig,W.…了//European Patent. Appl. EP0136472 .Pub .10。 04.85. APPI 。 DE3328793.filed 10.08 .83〔译自CBA-1985,(6),1752〕只翻译了题目。(陈玉梅)8606了6一个经修改的抗生素抗性基因〔专,英〕/Ingolia,T .D.…了European PatentAPPI.EP 0135291。Pub.27.03.85.Appl .US 516222,filed 22.07.83〔译自CBA,1985,(6),1753〕 相似文献
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《生物技术通报》1988,(1)
880062针对速衰因子(OAF)的单克隆抗体,制备方法与使用〔专,英」/Kinoshita,T。…了PCT Patent Appl.WO 86/07062.Pub。04。12.86.Appl.US 738171,file-d 24.05.55〔译自CBA,1957,(4),1529〕 用凝胶过滤法和一系列层析步骤纯化速衰因子,用以免疫小鼠,获得适于产生杂交瘤和单克隆抗体的脾细胞。(魏钧)380063,J、鼠杂交瘤Lym一1及其产生的诊娇抗体〔专.英〕/Epstein,A.l.,“PcTP-atent Appl.WO 86/O了。只R.P一,1〕.04.12.86.Appl.US 738084 filed 24.05.85〔译自CBA,1 987,(4),15:;n〕 杂交瘤Lym一1(A rrCC No.llBS曰2)产… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(11)
924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(… 相似文献