发酵液中L-苹果酸批量定量测定研究

摸索出发酵液中L-苹果酸批量定量测定的简单快速方法。该方法为(1)采用微量注射器将发酵液定量点样,在展开剂中进行纸层析;(2)用显色剂喷雾显色;(3)剪下已显色的L-苹果酸斑,置5ml去离子水中洗脱3小时;(4)取出1ml过滤洗脱液,加入6ml 96×10^-2硫酸和0.1ml 1.0×10^-2α-萘酚摇匀;(5)置100℃水浴中加热60分钟;(6)冷却后在波长476nm处比色测定。     

盐酸胺碘酮注射液与4种输液的配伍稳定性考察

目的:研究探讨盐酸胺碘酮注射液与其他输液(包括浓度分别为5%与10%的葡萄糖注射液,浓度为0.9%的氯化钠注射液,以及葡萄糖氯化钠注射液四种)配伍过程中具有的稳定性。方法:以当前的临床用药标准为依据,将四种注射液分别注入到一次性灭菌注射器中,随后分别往灭菌注射器中加入20ml的舒血宁注射液后摇匀倒置,在配伍8h内观察混合液外观性状、含量以及PH的变化情况。结果:通过实验,观察到在完成与浓度为10%的葡萄糖注射液,浓度为0.9%的氯化钠注射液,以及葡萄糖氯化钠注射液配伍后,盐酸胺碘酮的PH值与含量均出现比较明显的变化,但是在与5%葡萄糖注射液配伍后,溶液的各项指标并未发生明显的变化,溶液相对比较稳定。结论:在临床用药中,将盐酸胺碘酮与5%葡萄糖注射液配伍后,保持溶液在常温下的一段时间内使用,可有效保证混合溶液的性质,药效不会发生改变。     

植物原色浸制标本的保存

不同植物、不同器官其颜色种类各有不同 ,制成标本如采用一般方法想长久保存原先颜色也很困难。笔者通过查资料 ,长期实践、摸索 ,终于找到较满意的制作方法。现介绍如下 :1　保存绿色　将标本浸入 30 % Cu SO4 溶液中 ,5～ 10天取出 ,用清水冲洗 ,再放入 0 .2 %～ 0 .3%的 H2 SO3溶液标本瓶中 ,密闭瓶盖。2　保存红色　用 2 2 0 g硼酸、150 ml福尔马林、10 0 ml75%～ 90 %酒精、2 0 0 ml蒸馏水制成保存溶液 ,将红色标本 ,如红枣、枸杞子或番茄等洗净浸入 ,然后密封容器口。3　保存紫色　将饱和精盐水 50 0 ml,福尔马林 2 50 ml、蒸馏水 …     

用固定化黑曲霉完整细胞连续生产柠檬酸

本研究比较了两种固定化黑曲霉完整细胞的方法:黑曲霉KCU520在30℃培养5天,用无菌水制成分生孢子悬液(10~7—10~8孢子/ml)。①在400ml80％海藻酸钠溶液中加入孢子悬液600ml,然后逐滴加到1％CaCl_2溶液中,形成的颗粒在10℃固定1小时备用。②聚丙烯酰胺凝胶(PAG)固定化,在64ml孢子悬液(4℃)中加丙烯酰胺12克,双丙烯酰胺     

医药其它

923316特异于B细胞的诺卡氏菌产生的新型多辘类分裂素E一15[英〕/Kurisaki,T.…/Agrie.Biol.Chem一1991,55(12)一2957~2091〔译自DBA, 1992,11(5)92一02615〕 从星状诺卡氏菌(Noca,咤￡a aste,o￡己。。)E 一15中分离出能诱导小鼠脾细胞发生胚细胞样转变的新型分裂素E一15。细胞培养在百分含量为2葡萄糖、1淀粉、0.1肉膏、o.4NaCI、0.4干酵母、2.5豆粉和。。oo5KZHPO‘的6oml培养基(pH7.4)中,28℃下持续3天,然后移至含151培养基的小型发酵罐(501)内,于25℃保温4天。用DiaionHP一10层析、乙醇沉淀等方法从发酵液中提纯E-15,则从31…     

动物骨髓细胞染色体标本制片法

本文介绍一种染色体制片方法,是把秋水仙素直接加入到骨髓冲液中,不需要注入动物腹腔,可节省时间,获得良好的效果。 1.取材实验课时将家兔或小白鼠处死,取出剥净肌肉的股骨,剪去两端,用带6号针头的5ml注射器吸取0.85%NaCl溶液3ml,冲洗骨髓腔数次,将骨髓细胞冲至10ml刻度离心管内,再加1ml0.1%的秋水仙素溶液,用吸管混均置37℃温箱或水浴锅内温浴05-1小时。     

离体茎尖培养快速繁殖番石榴苗

本文报道一种快速繁殖番石榴幼苗的简单方法及其有希望的培养基。 将番石榴幼苗种植在装有蛭石的容器中,生长条件为:温度25±2℃、相对湿度85％,光周期16小时(7μmol·m~(-2)·s(-1),日光灯)。在无菌条件下制备100～150mm长的茎尖,置于含低浓度溴化物(10PPm)的10％次氯酸钠溶液中杀菌10分钟,然后用无菌水冲洗3次。外植体在(?)5mm×150mm的培养管(内含10ml琼脂培养基)中生长。将培养物转入250ml锥形瓶(内含100ml相同的培养基)中。在剪取供进一步增殖或生根的梢后,将剩下的组织(基础团块)转移到相同的培养基(内含2mg/l BA)中。     

标本采集、实验观察材料准备工作月历(3月)

准备时间工作内容和方法所需时间l使用时间用途使用方法备注三月上旬1.醉母菌的培养:配制浓度为5一10%的葡萄糖溶液(或蔗糖溶液)放在20℃左右条件下即可2.青霉的培养:取新鲜的桔皮暴露在空气中数小时,然后放在培养皿内,外表面向下,培养皿中稍放一些水,上罩一个盖,置于18一20℃条件下,并保持一定的湿度,先生长出白色的“毛”后变成青绿色,可用于观察课前10天左右三月下旬实脸课课前10一12天左右观察醉母菌和青霉组织课外活动小组培养或让学生在家培养育霉三月上旬1.向浓度为10一15写的葡萄糖溶液中加入10一15PPm的翻酸溶液数滴,将此溶液倒人…     

对蒸腾作用实验的改进

用250ml的广口瓶、胶塞、长250mm的细玻璃管、杠杆尺(可自制)、三棱柱(做支点用)、适当的重物和天竺葵做实验材料。根据选择天竺葵枝条和细玻璃管的直径,在胶塞上打2个孔。实验时,广口瓶内装满水,把玻璃管和带叶天竺葵枝条分别插入胶塞孔内,用棉花塞紧,并     

酒精发酵的简单示教装置

(一) 原理下图A瓶中的发酵液发酵后产生的CO_2聚集于瓶顶部,压迫1号管中的液位上升,待发酵完毕后,打开2号管中的夹子,CO_2由于受到1号管中静水压而进入盛Ca(OH)_2的B试管,若有浑浊现象产生,即可证明有CO_2生成。取出发酵液4ml,滴入B管,再加入2～3滴碘液和适量10％NaOH溶液至碘液的黄色消失为止,稍停片刻,则可嗅到碘仿的特殊臭味,即证明发酵液中产生了酒精。     

真菌单孢子快速分离法

取一支2ml的注射器,用4号或5号注射针,将注射针的针尖部分用铁钳夹断去掉,以铁锤锉平断口,然后进行滴水试验,使滴下的水滴大小不超过80—150倍低倍镜的视野,这样改制后的注射器即为单孢分离注射器。以无菌的单孢分离注射器吸取制备好的真菌孢子悬液,滴在培养皿盖的里面,用低倍镜检     

用正交试验法筛选樟芝菌适宜发酵培养基

用正交试验法对樟芝菌 (AntrodiacamphorataZang&Su)的发酵培养基进行了研究。选取马铃薯淀粉、葡萄糖、麦芽糖、酵母膏、蛋白胨、麸皮、KH2 PO4 、MgSO4 ·7H2 O等作为试验因素 ,采用L2 7(31. 3)正交表设计五因素、三水平的正交试验 ,对所选各因素的添加量分别作了试验 ,对菌丝干重和发酵液多糖含量结果作了方差分析 ,确定了合适的发酵培养基。试验结果表明 :樟芝菌的深层发酵适宜培养基是 :马铃薯淀粉 1 .0 0 % ,葡萄糖2. 0 0 % ,酵母膏 0 . 10 % ,蛋白胨 0 . 10 % ,麸皮 1 .0 0 % (或 0. 5 0 % ) ,KH2 PO4 0 . 10 % ,MgSO4 ·7H2 O 0 . 0 5 %。     

PEG诱导人类细胞和元麦原生质体融合初步尝试

本实验尝试以PEG诱导Hela细胞与元麦原生质体融合进行了初步观察。 实验方法是将Hela细胞悬液250万/0.25 ml和元麦原生质体悬浮液500万/0.25 ml混合,然后加入0.125 ml PEG溶液(PEG 6,000分子量0.09M,CaCl_2·2 H_2O 10.5 mM,葡萄糖0.25 M,KH_2PO_4·7H_2O 0.7mM,pH 5.5)于37℃孵育30分钟,接着以RPMI-1640培养液洗掉PEG,离心收集细胞培养于小玻瓶中。实验分两组:一组细胞培养在Nagata培养液中,另一组培养在RPMI-1640培养液中。初步观察结果如下:     

凝胶层析在发酵液中分离提纯透明质酸中的应用

采用葡聚糖凝胶G-100,以0.1 mol/L氯化钠溶液为洗脱剂,在优化的凝胶层析条件(层析柱高度30 cm、进样量2 ml、洗脱流速1 ml/4 min)下,对透明质酸发酵液进行分离纯化,得到了高纯度的透明质酸.HA提取率达到79.85%,蛋白质去除率为84.93%.     

磷酸甘油氧化酶的菌种选育及发酵条件

利用含甘油的斜面培养基连续传代、诱导筛选的方法,从大量链球菌中选育到一株产磷酸甘油氧化酶(L-α-Glycerophosphate Oxidase EC 1.1.3.21)活性较高的粪链球菌(Streptococcus faecalis) GPO 605。培养及产酶最佳条件表明,最适培养基组成(％):酪蛋白胨1,酵母提取物1.5,甘油0.2,葡萄糖0.1,K_2HPO_40.5,无机盐0.25ml,pH7.5。最适培养条件:250ml三角瓶中装100ml培养基,30℃,200r/min旋转摇床振荡培养8h。在最适培养及产酶条件下,每毫升发酵液的酶活力提高10倍以上。     

舒血宁注射液与五种注射液配伍后的稳定性考察

目的:研究探讨舒血宁注射液与复方氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液以及0.9%氯化钠注射液五种注射液配伍后的稳定性。方法:根据临床用药标准,将五种注射液分别注入到一次性灭菌注射器中,随后分别往灭菌注射器中加入20ml的舒血宁注射液后摇匀倒置,研究分析混合液在15min、30min、1h、1.5h以及2h后外观、微粒以及配伍后PH的的变化情况。结果:观察发现,混合液并未出现沉淀,且颜色均未发生改变;而舒血宁注射液与10%葡萄糖注射液和复方氯化钠注射液进行配伍后,混合液的PH值与微粒计数均有升高的趋势;与此同时还观察到0.9%的氯化钠注射液与5%的葡萄糖氯化钠注射液微粒计数比较高;而5%葡萄糖注射液各项指标并没有发生很明显的变化。结论:将舒血宁注射液与5%葡萄糖注射液在配伍使用后,应当在一定时间内使用完毕,其他的注射液应单独使用效果较佳。     

2-酮基-L-古龙酸的高效液相色谱分析

目的:鉴定发酵液中的产物是2-酮基-L-古龙酸(2-KLG);方法:用高效液相色谱(HPLC)法测定氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)混合发酵液中的2-KLG。采用Aminex A 27柱46×250mm;流动相为十二烷基硫酸钠(0.01mol/L)/乙腈(3%)=2/3,流速1.0mL/min,柱温30℃;用L-7420 UV检测器检测。同时还研究了流速对检测的影响。结果:该方法回收率为94.21%,RSD为4.2%。     

兔不同急性肝衰竭模型的建立与评价

目的:探讨一种理想的急性肝衰竭(AHF)模型建立方法.方法:36只实验兔随机分为3组:①改良药物手术诱导组(A组,n=12),先用D-氨基半乳糖(D-Gain)和脂多糖(LPS)腹腔注射,同时加用乳果糖,注射后2h以氟烷作为麻醉剂,切除约50%肝脏组织.术中经肝静脉注入5%葡萄糖氯化钠溶液10ml/kg体重;②传统手术诱导组(B组,n=12),切除约95%肝脏组织,术中不行肝静脉穿刺注射5%葡萄糖氯化钠溶液;③药物诱导组(C组,n=12),用D一氨基半乳糖(D-Gain)和脂多糖(LPS)一次性腹腔注射.比较建模死亡率、建模后24h兔存活率、血谷丙转氨酶(ALT)、血氨(NH3)、总胆红素(TB)和血糖(BS).结果:B组手术死亡率高于A组死亡率(41.77%vs0%),A组、B组兔建模成功后24h存活率及C组兔建模成功后72h存活率分别为0%,0%,25%,A组ALT和NH3水平显著高于C组(P＜0.05),TB和BG水平低于C组,但差异无显著性.结论:通过改进的50%肝切除术可建立较理想的兔AHF模型,以氟烷作为麻醉剂,药物诱导注射同时加用乳果糖,术中经中叶肝静脉注入5%葡萄糖氯化钠溶液可减少手术死亡率.     

D-葡萄糖串联发酵生产2-酮基-L-古龙酸的工艺条件

研究了在10L发酵罐中D-葡萄糖串联发酵生产维生素C前体——2-酮基-L-古龙酸的发酵工艺条件。第一步发酵采用欧文氏菌(Erwinia sp.)的突变株SCB247,培养36小时,可将D-葡萄糖转化成中间体2,5-二酮基-D-葡萄糖酸,在发酵液中约累积180mg/ml。第二步发酵采用棒状杆菌(Corynebacterium sp.)SCB3058,可将2,5-二酮基-D-葡萄糖酸专一性地还原生成2-酮基-L-古龙酸。在细胞生长进入对数生长期后期时,加入经十二烷基硫酸钠处理的第一     

分离和鉴别脑膜炎球菌的培养基

一般认为脑膜炎球菌必须在含有天然动物蛋白(血液、血清、腹水及鸡蛋)的培养基上才能生长。而我们用黄豆代替动物蛋白用于脑膜炎球菌培养和鉴别,结果满意。培养基制备方法分离用培养基(黄豆—玉米淀粉抗菌素培养基):(1)基础培养基(g):胰胨6、胨6、牛肉膏3、氯化钠3、葡萄糖1、琼脂25、蒸馏水800ml,加热溶化。(2)玉米淀粉液:玉米淀粉3g(或玉米粉5g),用10ml蒸馏水拌成糊状,再用90ml煮沸的蒸馏水边倒边搅拌,微