双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较

通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代NIH动物法.将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12～14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关系图并计算出疫苗效力值E-NIH.结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M-NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2.41～5.85之间,而相应的M-NIH值在5.11～10.19之间.从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的.     

双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较

通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫 苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代 NIH动物法。将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12～14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹 心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关 系图并计算出疫苗效力值E-NIH。结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M- NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2．41～5．85之间,而相应的M-NIH值在5．11～ 10．19之间。从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、 成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的。     

保存温度和时间对狂犬病疫苗效力稳定性的影响

对人用精制狂犬病疫苗和浓缩狂犬疫苗分析在－33℃,2－8℃,25℃,37℃保存0－6个月进行效力的稳定性观察,结果表明随存放时间及温度增加,两者的生物活性均有不同程度的降低。在2－8℃条件下疫苗的效力明显比其它温度稳定（P＜0．02）;精制疫苗与浓缩疫苗比较,其效力有更稳定的趋势。     

精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立

分别用Srpharose4B、Sephacryl-200HR和Sepharose6-Fastflow柱色谱进行地鼠肾细胞狂犬病疫苗浓缩原液纯化试验,试制精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗.对疫苗的残余牛血清含量、效力、收获率和安全性进行检测,优化和建立了精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺.     

粗制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立

分别用Sepharose 4B、Sephacryl-200HR和Sepharose6-Fast flow柱色谱进行地鼠肾细胞狂犬疫苗浓缩原液纯化试验,试制精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗。对疫苗的残余牛血清含量、效力、收获率和安全性进行检测,优化和建立了精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗纯化工艺。     

人用狂犬病疫苗过敏性反应探讨

采用超滤浓缩技术生产人用狂犬病疫苗后,疫苗效力得到明显提高;胆在使用中,包括过敏反应等在内的不良反应等有所增多且严重程度明显增大。以豚鼠为实验动物模型,探讨人用狂犬病疫苗引起过敏反应的原因。结果显示,地鼠民分是引起过敏的重要物质,过敏的严重程度随制品浓缩倍数的增大而增大。     

白细胞介素—2在狂犬病免疫保护及细胞免疫检测上的作用

狂犬病疫苗免疫人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）分泌白细胞介素－２（ＩＬ－２）。ＩＬ－２具有增强狂犬病疫苗保护力的佐剂效能,在疫苗免疫后对机体免疫系统发挥调节作用。ＩＬ－２在狂犬病免疫保护和免疫检定上的作用尤为重要。在接种疫苗后,狂犬病免疫对象的ＰＢＬ,在体外受特异性抗原刺激产生的ＩＬ－２水平,是检定狂犬病疫苗免疫原性与保护效力及评价机体免疫状况－－细胞介导免疫（ＣＭＩ）水平的简易科学新指标。ＩＬ－２诱生     

白细胞介素-2在狂犬病免疫保护及细胞免疫检测上的作用

狂犬病疫苗免疫人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）分泌白细胞介素－２（ＩＬ－２）。ＩＬ－２具有增强狂犬病疫苗保护力的佐剂效能,在疫苗免疫后对机体免疫系统发挥调节作用。ＩＬ－２在狂犬病免疫保护和免疫检定上的作用尤为重要。在接种疫苗后,狂犬病免疫对象的ＰＢＬ,在体外受特异性抗原刺激产生的ＩＬ－２水平,是检定狂犬病疫苗免疫原性与保护效力及评价机体免疫状况──细胞介导免疫（ＣＭＩ）水平的简易科学新指标。ＩＬ－２诱生水平测定,可能替代经典ＮＩＨ小鼠攻毒试验,而与病毒中和抗体（ＶＮＡｂ）水平测定和糖蛋白含量分析,一并用于评价狂犬病疫苗保护力。     

冻干人用狂犬病纯化疫苗稳定剂的筛选

取同一批人用狂犬病纯化疫苗纯化液,分别加入筛选出的A、B、C和D稳定剂,按已确定的适宜冻干曲线进行冻干后,分别检测其安全、效力、外观、水分等,效力结果显示,使用A、B、D稳定剂的制品在37℃放置3个月,效价降低了48%～60%;使用C稳定剂的制品在37℃放置3个月效价仅下降了16.1%。表明C稳定剂为冻干人用狂犬病纯化疫苗适宜的稳定剂配方。     

每次稀释后减少试验动物数量对人用狂犬病疫苗效力评价的影响

正狂犬病疫苗质控中最重要的参数是效力,效力参数是通过接种大量试验动物小鼠后检测得到的。因为目前全世界进行动物实验时普遍遵循"3Rs"原则[Reduction (减少) Replacement (替代) Refinement(优化)],所以有必要制定一个替代方法在保证疫苗具有生产持续性的同时还可以减少实验动物的用量。因此,本研究观察了在NIH实验中减少小鼠用量对疫苗效力评价的影响。     

精制原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗灭活工艺的改进

为了提高精制原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗（ＰＰＨＫＲＶ）的质量,在甲醛浓度,温度和时间相同的条件下,对静置法和转瓶法灭活狂犬病毒后制成的疫苗进行了效力测定比较,结果表明采用转瓶灭活的ＰＰＨＫＲＶ效力高于静置灭活法。     

对狂犬病预防的贡献

<正>第二次世界大战结束以后,狐狂犬病的流行侵入欧洲,人和家畜为免疫预防感染的野生动物传播狂犬病的危险,则需要一种更有效、更安全的狂犬病疫苗来取代第一代狂犬病疫苗,(神经组织疫苗)。欧洲的疫苗厂与从事狂犬病研究的研究所紧     

防治和根除狂犬病的新途径

灭活的完整狂犬病毒(RV)颗粒是最安全和最有效的抗原,适合用作狂犬病的免疫治疗;灭活RV疫苗,例如HDCV疫苗,仍然是金标准。但是若干种正在研究的实验性疫苗(如以G蛋白为基础的DNA和重组疫苗),也有可能替代灭活病毒。为了达到可与金标准疫苗相当的效力,在这些新型疫苗中的G蛋白必须以与在完整病毒颗粒中相似的方式出现,即是锚定在膜上并有很高的密度。     

应用对流免疫电泳试验作为超免狂犬病血清的鉴定

<正>引言 为严重感染狂犬病的人推荐预防治疗,即联合注射有效疫苗和高效抗狂犬病血清。关于感染后的被动抗体治疗,马源或人源狂犬病抗体都同样有效。虽然在大多数国家仍用马源抗狂犬病血清,但采用同源狂犬病免疫球蛋白有减少过敏与血清病的可能性,且可能比异源制品更为有效。以前,采用小鼠法借制品与国际参考血清(不低于100IU)相对比的中和滴度以测定制品的效力。 以前的研究表明,以抗原-抗体结合反应为基础的对流免疫电泳技术(CIE)在检验狂犬病抗体方面是有价值的。发现这种方     

地鼠肾细胞培养的CTN株狂犬病新疫苗研究

应用细胞毒种代替豚鼠脑毒种制备狂犬病地鼠肾细胞纯化疫苗。将狂犬病毒CTN株在原代地鼠肾细胞（PHKC）传代适应,用病毒培养液上清作为生产用毒种,结果通过在PHKC传10多代,适应后病毒滴度达到了7.0LogLD50/ml,并应用适应株（CTN－LS－HK）细胞毒种制备三批疫苗,其效力在6.11-6.55IU/ml,高于用aG株豚鼠脑毒种制备的三批疫苗效力（3.77-5.85IU/ml)。     

国产199培养基制备狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗及麻疹疫苗的质量研究

用国产１９９培养基,以进口１９９培养基和自配维持液为对照,制备狂犬病疫苗、乙型肝脑炎疫苗、麻疹疫苗。从这三种疫苗的毒力、效力、稳定性三个方面,比较国产１９９培养基作为疫苗维持液能否改进疫苗质量。试验结果表明：国产１９９培养基作为疫苗维持液制备这三种疫苗的质量和进口１９９培养基制备疫苗的质量几乎无差别,但优于自配维持液制备疫苗的质量。以国产１９９培养基作为疫苗维持液能提高疫苗的质量     

国产199培养基制备狂犬病疫苗,乙型脑炎疫苗及麻疹疫苗的质 …

用国产１９９培养基,以进口１９９培养基和自配维持液为对照,制备狂犬病疫苗、乙型肝脑炎疫苗、麻疹疫苗。从这三种疫苗的毒力、效力、稳定性三个方面,比较国产１９９培养基作为疫苗维持液能否改进疫苗质量。试验结果表明：国产１９９培养基作为疫苗维持液制备这三种疫苗的质量和进口１９９培养基制备疫苗的质量几乎无差别,但优于自配维持液制备疫苗的质量。以国产１９９培养基作为疫苗维持液能提高疫苗的质量。     

狂犬病病毒Vero细胞适应株的建立及其应用于疫苗生产的可行性探讨

将狂犬病病毒７ａＧ固定毒适应于Ｖｅｒｏ细胞,建立了稳定的ＶＲＧ适应株。病毒滴度可达７．６９ｌｏｇＬＤ５０／ｍｌ,病毒最适增殖时间５—７天,最适种毒比例１：１０￣３。应用转瓶培养Ｖｅｒｏ细胞增殖病毒,收获病毒液经β—丙内脂灭活,超离浓缩制备疫苗,效力试验结果（ＮＩＨ法）较原制疫苗成倍增高,且都大于２．５ＩＵ／２ｍｌ,表明ＶＲＧ适应株可应用于制备Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗。     

人狂犬病免疫球蛋白使用效果观察

为了解人狂犬病免疫球蛋白的作用效果,我们将观察对象随机分成了A、B、C三组,分别采用三种措施进行狂犬病的预防治疗,即：A组联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白;B组联合使用狂犬病疫苗与抗狂犬病血清(马源);C组仅注射狂犬病疫苗,并采用小鼠中和试验对这三组成员在免疫后3、7、14、45天及1年时的中和抗体水平进行检测。结果表明：狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白或抗狂犬病血清联合使用,可使体内更早出现抗狂犬病的中和抗体。注射人狂犬病免疫球蛋白后未发生临床副反应。     

预防狂犬病的新途径(国外进展综述)

对于狂犬病已有近一百年的研究历史,狂犬病疫苗推广后虽已使发病率大幅度降低,但至今在不少国家仍危害严重。据近年报导,全世界每年有一百万人接种狂犬病疫苗,无狂犬病发生的国家或地区仅有三十余个。目前尚缺乏有效的治疗方法。疫苗生产仍多沿用老方法,在用疫苗预防方面尚存在不少问题。主要如:(1)经过疫苗全程注射的受感染者中仍有少数发病,以鸭胚疫苗较为多见,脑组织疫苗亦不少见;(2)疫