裂褶菌胞内多糖的分离纯化鉴定及其性质

裂褶菌菌丝体用热水提取,乙醇沉淀,Ｓｅｖａｇ法脱蛋白,逆向流水透析,得胞内多糖粗品,经ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析纯化,得胞内多糖纯吕,称ＳＰＧ。纯度经纸层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析、高效液相色谱分析、聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,结果表明ＳＰＧ为单一均匀组分。ＳＰＧ水解物经纸层析、薄层层分析证实它是由葡萄糖组成的一种葡聚糖结构,ＳＰＧ的部分水解、酶解、红外光谱,     

甲型副伤寒菌O—特异性多糖与破伤风类毒素结合菌苗的制备 …

以脱毒后去除类脂Ａ的甲型副伤寒杆菌高分子量Ｏ－ＳＰ１和低分子量Ｏ－ＳＰ２为特异笥抗原,以破伤风类毒素（ＴＴ）为蛋白质载体,用已二酸二肼（ＡＤＨ）作为连接剂制备的两种结合物及其多糖免疫ＮＩＨ小鼠,结果显示单独注射Ｏ＿ＳＰ１或Ｏ－ＳＰ２免疫小鼠后,均不能刺激小鼠产生抗ＬＰＳ抗体;而用Ｏ－ＳＰ１－ＴＴ和Ｏ－ＳＰ２－ＴＴ结合物免疫后,小鼠血甭中均产生了特异性抗－ＬＰＳ－ＩｇＧ抗体,且Ｏ－ＳＰ１－ＴＴ免疫组     

羊肚菌多糖的分离纯化及组成结构分析

液体深层发酵所得的羊肚菌（Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ ｅｓｓｕｌｅｎｔａ Ｌ．）营养液经超过滤法去掉小分子量组分,脱脂,脱色,脱蛋白质,减压低温浓缩,用超速离心法分离提纯,再用乙醇沉淀法反复多次将所要的多糖沉淀提纯,得到羊肚菌多糖（ＭＥＰ）。对其中分子量为１００００￣１０００００的多糖（ＭＥＰ－ＳＰ）,采用ＤＥＡＥ－纤维素离子交换柱,以不同浓度ＮａＣｌ为洗脱液,进行纯化分离,再经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－     

重组人糖基化尿型纤溶酶原激活剂中试产品抗原特异性的分析

尿型纤溶酶原激活剂（ｕ－ＰＡ）是新一代的基因工程溶栓药物。建立了重组人糖基化尿型纤溶酶原激活剂的中试生产工艺。中试产品的结构正确性和一致性分析是证明产品质量的重要依据,所以,对三批产品进行了抗原特异性分析。结果,ｕ－ＰＡ三批中试产品ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示的蛋白区带与免疫印迹显示的免疫活性区带没有批次判别说明ｕ－ＰＡ三批中试产品表现了一致的ｕ－ＰＡ的免疫原性。     

紫云英根瘤菌107菌株酸性胞外多糖的分离纯化及结构分析

用化学沉淀法和柱层析法,分离纯化了紫云英根瘤菌野生型１０７菌株,胞外多糖合成缺陷型变种ＮＡ０２及其回复子ＮＡ０２（Ｒ‘－１１）产生的酸性胞外多糖（ＥＰＳ）。结构组成分析表明：菌株１０７与ＮＡ０２（Ｒ’－１１）产生的ＥＰＳ糖组分均由葡萄糖、半乳糖、核糖和葡萄糖醛酸构成,而变种ＮＡ０２产生的ＥＰＳ只含葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸,与野生型显著不同。３个菌株的ＥＰＳ均有乙酰基取代,而无其它形式的取代基。Ｅ     

枸杞子糖蛋白的分离纯化,物化性质及糖肽键特征

从宁夏枸杞子提取得到的粗多糖,经ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析,得到均一的枸杞子糖蛋白ＬｂＧＰ。分子量由ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定为８８ｋｄ,糖含量为７０％,糖组成为Ａｒａ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ＝２．５：１．０：１．０,并含有其他１８种天然氨基酸。初步分析表明ＬｂＧＰ是Ｏ－连接的糖蛋白。     

短裙竹荪多糖Dd—S3P的分离纯化及其性质研究

短裙竹荪子实体经２％Ｎａ２ＣＯ３溶液提取,用蛋白酶法和Ｓｅｖａｇ法相结合除去蛋白,乙醇分级沉淀,级分３经ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５柱层析纯化得到的短裙竹荪多糖Ｄｄ－Ｓ３Ｐ。经测定该多糖为均一组分,分子量约为３．８×１０＾５,红外光谱呈现出典型的多糖吸收峰,含有α－型糖苷连接键,紫外扫描无核酸和蛋白质的特征吸收峰。     

紫云英根瘤菌菌株107exo基因簇的遗传互补分析

紫云英根瘤菌菌株１０７经Ｔｎ５插入诱变,得到１２株胞外多糖缺陷型变种,以质粒ｐＭＮ２为载体,从其中７株ＥＰＳ－变种内分别构建了７个Ｒ－Ｐｒｉｍｅ质粒（ｅｘｏＲ＇）,大部分变种的ＥＰＳ－表型可被ｅｘｏＲ＇互补,恢复野生型表型（ＥＰＳ＋）。互补表明,１２株ＥＰＳ－变种可分为６个不同的互补群,其中５个在遗传上连锁。ｅｘｏＲ＇酶切分析,除ｅｘｏＲ＇－０２,ｅｘｏＲ＇－０４外,其余５只的外源片段均整合于ＰＭＮ２的两同向重复序列ＩＳ２１之间。     

两种黄精多糖衍生物的制备及其抗病毒活性比较研究

从传统中药黄精属的两个种中分别提取到两种小分子粗多糖（ＰＤ,ＰＰ）,用吡啶－氯磺酸法分别制取到这两种粗多糖的硫酸酯（ＰＤＳ,ＰＰＳ）。产物经红外、紫外鉴定,证实多糖羟基上连上了硫酸基。用离子交换,凝胶色谱提纯得到这两种粗多糖的纯化产物（ＲＰＤ,ＲＰＰ）。体外实验研究了这６种物质对非洲绿猴肾细胞（Ｖｅｒｏ）的细胞毒性和抗单纯疱疹病毒２型（ＨＳＶ－Ⅱ）的活性。结果表明,粗多糖ＰＰ的细胞毒性是由其中的杂     

紫云英根瘤菌菌株107exo基因簇的遗传互补分析

紫云英根瘤菌菌株１０７经Ｔｎ５插入诱变,得到１２株胞外多糖缺陷型变种,以质粒ｐＭＮ２为载体,从其中７株ＥＰＳ＾－变种内分别构建了７个Ｒ－ｐｒｉｍｅ质粒（ｅｘｏＲ）大部分变种的ＥＰＳ＾－表型可被ｅｘｏＰ互补,恢复野生型表型（ＥＰＳ＾＋）。互补表明,１２株ＥＰＳ＾－变种可分为６个不同的互补群,其中５个在遗传上连锁,ｅｘｏＰ酶切分析,除ｅｘｏＲ－０２,ｅｘｏＲ－０４外,其余５只的外源片段均整合于ｐＭＮ２     

细菌细胞壁肽聚糖—多糖聚合物的致炎特性

本文对细菌细胞壁肽糖－多糖聚合物的结构特性、生物学特性、致关节炎与复发关节炎作用进行重点介绍,并简要介绍了肠道炎症、ＰＧ－ＰＳ全身分布与关节和肝脏炎症的关系。     

洛巴口蘑滤液中多糖蛋白复合物的抗肿瘤机制

从洛巴口蘑培养滤液中分离出一种具有抗肿瘤活性的多糖蛋白复合物（ＰＳＰＣ）,ＰＳＰＣ在细胞水平有能力恢复和增强带瘤鼠腹腔浸出细胞的吞噬功能和Ｔ细胞的促分裂活性。在分水平,ＰＳＰＣ能恢复儿腹腔浸出细胞内ＩＦＮ－γ基因的表达水平。另外,ＰＳＰＣ能够下调带瘤鼠脾细胞内“抗细胞因子”ＴＧＦ－β的表达水平。因此,ＰＳＰＣ的抗肿瘤机制可归咎于寄主介导的免疫调节作用。     

一种在超薄切片上定位不溶性多糖的方法──PA－TCH－SP（Thiery反应）

一种在超薄切片上定位不溶性多糖的方法──ＰＡ－ＴＣＨ－ＳＰ（Ｔｈｉｅｒｙ反应）在光镜水平对组织和细胞进行多糖定位的细胞化学技术已经非常成熟。近年来利用塑料包埋的半薄切片进行染色已获得非常清晰的图象。但在电镜水平进行多糖的细胞定位目前在国内还做得很少。...     

枸杞子糖蛋白的分离纯化、物化性质及糖肽键特征

从宁夏枸杞子提取得到的粗多糖,经ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析,得到均一的枸杞子糖蛋白ＬｂＧＰ。分子量由ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定为８８ｋｄ,糖含量为７０％,糖组成为Ａｒａ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ＝２．５：１．０：１．０（摩尔比）,并含有其他１８种天然氨基酸。初步分析表明ＬｂＧＰ是Ｏ－连接的糖蛋白。     

浒苔多糖的分离、纯化和分析

浒苔（Ｅｎｔｅｒｏｍｏｒｐｈａｐｒｏｌｉｆｅｒａ）经热水提取,Ｓｅｖａｇｅ法除去蛋白质,用乙醇沉淀,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析,得浒苔多糖（简称ＥＰ）精制品。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析鉴定为单一对称性洗脱峰。红外光谱分析具有多糖特征吸收峰,紫外光谱分析未见有核酸和蛋白质的特征吸收峰。总糖含量为８８．８％,其中糖醛酸含量为３３．６％。单糖组成为Ｌ－阿拉伯糖、Ｌ－岩藻糖、Ｄ－甘露糖、Ｄ－半乳糖及Ｄ－葡萄糖,平均分子量为２５０００。     

浒苔多糖的分离,纯化和分析

浒苔经热水提取,Ｓｅｖａｇｅ法除去蛋白质,用乙醇沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００柱层析,得浒苔多糖（简称ＥＰ）精制品。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱导析鉴定为单一对称性洗脱峰。红外光谱分析具有多糖特征吸收峰,紫外光谱分析表未见有核酸和蛋白质的特征及吸上峰,总糖含量为８８．８％,基中糖酸酸含量为３３．６％。单糖组成为Ｌ－阿拉伯糖,Ｌ－岩藻糖,Ｄ－甘露糖,Ｄ－半乳糖及Ｄ－葡萄糖。平均分子量为２５００     

以痘苗病毒天坛株为载体的表达单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D的重组活疫苗的建立

从我国分离到的一株单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－１－１６８株）病毒基因组中,分离出含有糖蛋白Ｄ（ｇＤ）基因的１．２ｋｂ片段,插入带有痘苗病毒天坛株ＴＫ区的质粒ｐＪＳＢ１１７５Ｐ７．５ｋ启动子下游,转染无白血病鸡胚原代细胞,获得带有ＨＳＶ－１－１６８ｇＤ基因的重组痘苗病毒。此株重组病毒在感染细胞膜上表达ＨＳＶ－１－１６８ｇＤ糖蛋白抗原,能与特异性单克隆抗体反应。在感染细胞中表达的膜抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,表达分子量为５４ｋＤ糖蛋白。用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析了重组病毒ＤＮＡ中特异的ｇＤ基因,对作为活疫苗的重组痘苗病毒株进行了一些微生物学活性、免疫原性和毒力等方面的研究。     

丝瓜籽中蛋白质生物合成抑制蛋白的分离,纯化及性…

丝瓜种籽,经捣碎,抽提,硫酸铵分级沉淀,ＣＭ－５２离子交换层析,Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－１００分子筛,阳离子交换ＦＰＬＣ等步骤,分离到两种单链蛋白质生物合成抑制蛋白：Ｌｕｆｆｉｎ－Ａ和Ｌｕｆｆｉｎ－Ｂ。它们都是等电点接近１０的碱性蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定分子量分别约为２７ｋｄ和２８ｋｄ,氨基酸组成分析表明两者具有很大同源性,但免疫双扩散及ＥＬＩＳＡ检测证明两者的免疫原性有差异。Ｌｕｆｆｉｎｓ对兔     

乙型肝炎表面抗原S—蛋白糖化位点序列的人工变异及其哺乳动物细胞表…

利用末端重叠ＰＣＲ法和定点突变技术，获得了去除Ｎ－连接多糖结构的乙肝表面抗原Ｓ突变基因，将乙肝表面抗原Ｓ－蛋白中结合Ｎ－连多糖结构序列Ａｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ中的第１４８苏氨酸的密码子ＡＣＴ，改变为编码甘氨酸的密码子ＧＧＴ。构建了该突变基因的表达载体并在ＣＨＯ细胞中表达，筛选到两株表达水平较高的细胞系。对其中的一株细胞系Ｃ４１的表达产物做了初步纯化和鉴定，纯化样品经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析，只含有２３ｋ     

嗜盐隐杆藻胞外多糖的分离、纯化及理化特性

嗜盐隐杆藻（Ａｐｈａｎｏｔｈｅｃｅ ｈａｔｏｐｈｙｔｉｃａ）培养液经离心,浓缩、透析、有机溶剂沉淀得胞外多糖（Ｅｘｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ,ＥＰＳ）粗品,经ＤＥＡＥ－纤维素二次柱层析纯化得ＥＰＳ精品。葡聚糖Ｇ－２００凝胶过滤表明其为单一组份。对其进行理化测试并对各组分进行定量分析,多糖、已糖醛酸、硫酸根含量分别为４０．９６％２３．２７％和３４．４６％,元素分析你测得Ｃ、Ｈ、Ｎ、Ｓ含量分别为