激光扫描共聚焦显微术在生物医学中的研究

激光扫描共聚焦显微技术的发展,为形态学、分子细胞生物学、神经科学、肿瘤医学、药理学、遗传学等领域的研究提供了新的先进研究方法和手段。本文对激光扫描共聚焦显微术在粘附细胞分选,动态荧光分析测定,显微细胞外科和光陷阱技术,荧光光漂白恢复技术以及三维图像重建功能等方面的研究进展进行了综述。     

一种新型的DNA荧光染料—DAPI的光学特性及其应用

近年来,由于荧光显微镜的改进,荧光染料的不断增多以及免疫荧光技术的发展,荧光显微术已在细胞生物学的研究中广泛应用。荧光显微术用于研究细胞核和染色体已有较长的历史,不过目前除了哺乳类染色体分带荧光技术和孚尔根型荧光染色有所发展外,曾经使用过的一些核的荧光染色方法已应用不多。     

一种新型的DNA荧光染料-DAPI的光学特性及其应用

近年来,由于荧光显微镜的改进,荧光染料的不断增多以及免疫荧光技术的发展,荧光显微术已在细胞生物学的研究中广泛应用。荧光显微术用于研究细胞核和染色体已有较长的历史,不过目前除了哺乳类染色体分带荧光技术和孚尔根型荧光染色有所发展外,曾经使用过的一些核的荧光染色方法已应用不多。最近,一种新型的DNA荧光染     

显微光度术简介

显微光度术(Microphotometry)又称显微分光光度术(Microspectrophotometry),又称细胞光度术(Cytophotometry)。它是显微镜的一个分支;又是光度术的一个分支,是显微镜技术和光度技术巧妙结合的产物。在一台普通的显微镜上加上一些不同的机械的、光学的和电学的组件,以达到对于透射光、反射光以及干涉技术中的光程差和荧光等的测量,这样一种技术称为显微光度术。它能对显微镜分辨范围之内的微小物体(如细胞等)用光度法进行定量测量,从而在生物学、医学和其他领域内获得了广泛的应用。     

荧光显微技术在酿酒酵母细胞研究中的应用

为了探讨荧光显微技术在酿酒酵母细胞不同研究方面的作用,通过GFP标记目标蛋白的同源重组的方法和免疫荧光技术标记两种蛋白,最后利用荧光显微镜观察酵母细胞中某种蛋白定位及两种蛋白共定位情况;分别用荧光染液DAPI、FM4-64、BODIPY、Filipin、DHE和Annexin V试剂处理酵母细胞之后,利用荧光显微镜观察细胞中的细胞核、液泡、脂滴、麦角固醇、ROS和细胞凋亡的情况。结果显示,荧光显微技术在酵母细胞蛋白定位、细胞器观察及细胞中ROS和细胞凋亡等研究方面具有重要作用。     

酶法分离胚囊的荧光显微观察

用荧光显微技术对酶法分离的胚囊进行了三方面的研究:(1)利用与DNA结合的荧光染料Hoechst 33258对金鱼草、蚕豆、芝麻、烟草、龙葵等植物的分离胚囊??染色,可以观察胚囊中各组成细胞的核以及合子和胚乳的核。(2)用金胺O和樱草黄两种荧光染料染色,证明胚囊壁中含有耐果胶酶与纤维素酶作用的成分,可能是角质,因而虽经上述酶处理仍能保持胚囊的整体性。(3)用脱色苯胺蓝染色观察了被果胶酶分离的泡桐大孢子发生的各期材料,对这一过程中胼胝质的动态作了描述。以上各项实验表明:酶法分离技术与荧光显微技术相结合,是研究胚囊细胞生物学的一种简便有效的方法。     

生物光子学应用

生物光子学是光学技术与生命科学的交叉学科,可以在分子水平上研究细胞的功能和结构,包括生物系统的光子辐射以及这些光子携带的信息,用光子及其技术对生物系统进行检测、加工和改造等。激光扫描共焦显微术、双光子荧光显微术、近场光学扫描显微术和光镊等显微技术在生命科学研究中的应用非常重要。     

无血清培养中小鼠神经母细胞瘤细胞老化的研究

本文报道应用倒置相差显微术和显微荧光光度术观察无血清培养条件对ＮＢＡ２细胞突起数目和细胞内脂褐素荧光值的影响，以建立神经细胞老化实验研究模型。结果发现：存在着随无血清培养天数的增加，细胞内脂褐素荧光值累积性增加（Ｐ＜０．０１）和培养５天后细胞突起数目渐次性减少（Ｐ＜０．０１）的趋势。结果表明：这一趋势与哺乳类动物和人类老化研究中的神经细胞内脂褐素含量随增龄而增加及神经细胞突起在衰老过程逐渐少消失的     

原子力显微术在生物研究中的应用

原子力显微术不仅能够提供样品表面纳米级别分辨率的三维图像数据,而且能够对pN级微小力进行测量,同时将两者结合发展出的TREC（topography and recognition）显微术还能够在进行高分辨成像的同时实现对特定分子的定位。原子力显微术的这些特点使之成为生物化学、细胞生物学等生物研究的有利工具。本文主要介绍了原子力显微镜高分辨成像和检测生物分子识别的原理,以及TREC显微术在生物学上的应用。     

脑啡肽对小鼠神经母细胞瘤细胞脂褐素影响的实验研究

本文应用小鼠神经母细胞瘤细胞Ａ２（ＮＢ－Ａ２）无血清培养建立的神经细胞老化实验研究模型,以显微荧光分光光度术测定单个细胞内脂褐素荧光值作为细胞老化指标,观察了脑啡肽（ＬＥ）对ＮＢＡ２细胞内脂褐素荧光值的影响。结果表明ＬＥ可显著降低细胞内的脂褐素荧光值（Ｐ〈０．０１）。提示ＬＥ可延缓ＮＢＡ２细胞的老化进程。     

沙门菌CWDMs脂代谢检测

采用毛地黄皂苷敏感试验和菌细胞胆固醇、甘油三脂及胆碱酯酶定性与定量分析法,检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌经L 型变异后形成的细胞壁缺陷突变株(CW DM )的脂类代谢活性,了解这些CW DM 变异的性质和探讨细菌细胞壁缺陷突变与细菌演变的关系。结果表明,沙门菌CW DM s 具有显著的胆固醇和甘油三脂代谢活性、对毛地黄皂苷高度敏感并且还具有与白色念珠菌相似的胆固醇和甘油三脂的含量,但未能检出胆碱酯酶活性。CW DM s返祖菌丧失了脂类代谢酶类和胞浆膜不含胆固醇,恢复了与其亲代细菌型相似的代谢特征。提示在沙门菌天然即存在有与脂类及胆固醇代谢相关的基因,细胞壁的缺陷导致这些脂类及胆固醇代谢基因活化,以致 CW DM s 能够表达固醇和甘油三脂代谢活性和胞浆膜含有胆固醇     

沙门菌CWDMs乳酸脱氢酶同功酶的观察

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的ＣＷＤＭｓ及其宁代细菌型和伤寒杆菌粗糙型的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同功酶,以了解沙门菌ＣＷＤＭｓ生物氧化的特点和机制,探讨ＣＷＤＭｓ变异的性质。结果表明,伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的细菌型及伤寒杆粗糙型在聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出相同的４种具有不同泳动速率的ＬＤＨ同功酶,但ＣＷＤＭｓ仅显示２种ＬＤＨ。ＣＷＤＭｓ的２种ＬＤＨ同功酶与其亲代细菌型及伤寒杆     

沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测

采用氨基氨利用生长试验和谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、谷草转酶（ＧＯＴ）、乳酸脱氨酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶（ＣＫ）、α－闳丁酸脱氢酶（α－ＨＢＤ）、γ－谷志肽酶（γ－ＧＴ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰ）定性与定量分析法,检测伤ＣＷＤＭｓ变异的特点及其机制,探讨ＣＷＤＭｓ变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌ＣＷＤＭｓ变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌ＣＷＤＭｓ在仅含蛋氨酸或脯氨     

光照对蕨类植物配子体假根向重力性的影响

对８种蕨类植物配子体假根向重力性反应的研究结果表明,除卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ Ｓｐｒｉｎｇ配子体假根无向重力性反应并且其生长方向与光照方向无关外,其它７种的配子体假根均有向重力性反应,并且假根的向重力性反应在配子体发育初期,因光照的方向不同而异,表现为负向光性。随着配子体发育至片状体阶段,光对其向重力性反应的影响逐渐减弱,而重力的影响增强。在蕨类植物配子体发育初期,光对     

中国鳐类脑颅的研究

作者解剖观察了33种,隶于4目、7亚目、15科、19属的中国鳐类脑颅的形态。研究结果认为:锯鳐目和鳐目是原始类群,它们均具吻软骨,其中圆犂头鳐科和团扇鳐科是特化类群。电鳐目亦具吻软骨,它们是特化和退化类群。在较高等的鲼目则无吻软骨。依据鳐类不同的分类阶元,其脑颅亦各具有不同的式型。     

两种蚤的幼虫形态

关于蚤类幼虫形态的研究,进展比较缓慢,我国王敦清1956年首次描述7种蚤的幼虫形态以后,由柳支英,虞以新(1957),孙昌秀(1965),叶瑞玉(1982,1986),费荣中(1986)等学者先后共描述过约29种蚤的幼虫形态。到目前为止,我国已知蚤类幼虫形态约36种,隶属6科19属。本文描述未见报道的无棘鬃额蚤Frontopsylla aspiniformis Liu etWu(1960)和青海双蚤Amphipsylla qinghaiensis Ren et Ji(1979)两种蚤山幼虫形态。