L-型细菌蛋白表达系统

L-型细胞由于缺乏细胞壁以及具有的其它特殊生物学特性,通过连接合适的信号肽,可以用于许多外源蛋白的可溶性,功能活性形式的分泌表达,表达产物在培养基中,表达的产量依赖于不同的基因序列,载体,宿主和诱导表达条件等因素,此外,L-型细菌还能将具有功能活性的蛋白展示在胞浆膜表面。     

芽孢染色法

芽孢染色法芽孢是细菌细胞的特殊结构，是产生芽孢菌的重要特性．芽孢染色在细菌鉴定上有重要意义。因芽孢壁厚透性差．故不易染色。通常用孔雀绿长时间加热，才能使芽孢着色。这种方法往往很难将所有的芽孢着色。现介绍一种新的染色法。材料：在肉汤琼脂培养基上培养２４...     

神经细胞外染色法--NiCl2逆行染色法

以咖啡双点蟋(Gryllus bimacuratus)产卵瓣运动肌肉上的传出神经细胞外染色为例介绍一种神经细胞外染色方法。     

甲基营养型L-丝氨酸产生菌的选育

以甲基营养型假单胞菌J-12为出发菌株,经硫酸二乙酯（DES）和亚硝基胍（NTG）诱变处理,D-丝氨酸结构类似物平板和高浓度甘氨酸平板定向筛选,获得1株三-丝氨酸高产菌N-13,其发酵液中L-丝氨酸产量较出发菌株提高97．9％。在含有20g/L甘氨酸和7mL／L甲醇的培养基中,L-丝氨酸积累可达4．81g／L。     

细菌的荚膜染色法

有些细菌在细胞壁外包围一层粘液性物质,主要成份是多糖类,是细菌细胞结构的一部分,不易被染色.通常用绘图墨水或黑色素将     

水螅的活体染色法

本文介绍一种简单易行的水螅活体染色法。水螅体放入一定浓度范围的亚甲基蓝和中性红染液中,经过一定时间,细胞染一颜色而被标记,通过观察着色情况的变化而指示出水螅细胞迁移的规律。对水螅其他方面如移植、嫁接等研究也有一定实用价值。詹纳斯绿染料用本法染色效果较差。     

L-精氨酸对任意型皮瓣成活的影响

目的　探讨L 精氨酸对任意型皮瓣的成活的影响。方法　以Wistar大鼠为实验对象 ,在其背部设计 7cm×2cm任意型皮瓣 ,于术后给予腹腔注射L 精氨酸 30 0mg/kg ,对照组给予 0 9%生理盐水。术后 7d ,通过图像分析技术观察皮瓣成活率 ;通过生物化学技术、组织学和免疫组织化学技术对不同时间皮瓣组织中一氧化氮含量、组织形态学变化、白细胞计数以及ICAM 1的表达进行观测。结果　外源性L 精氨酸可提高皮瓣组织一氧化氮含量 ,L 精氨酸组ICAM 1表达呈弱阳性、术后 12h皮瓣组织真皮中性粒细胞计数减少 ,L 精氨酸组皮瓣成活率明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论　外源性L 精氨酸可提高皮瓣组织NO含量 ,ICAM 1表达下调 ,中性粒细胞浸润减少 ,提高任意皮瓣成活率。     

温度敏感型突变细菌生产L-谷氨酸

新发明的一种好气性培养用的培养基,除去富含生物素而外,还含有油酸一类的高度不饱和脂肪酸。在这样的培养基上发酵培养谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutanicum和乳酸发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)温     

L-酪氨酸合成L-多巴的研究

<正> L-酪氨酸是许多农副产品的蛋白质的组成之一,在利用某些农副产品作原料生产所需产品时,往往有大量酪氨酸从废液、废渣中被丢弃,例如:用毛发制备胱氨酸,国内已年产胱氨酸几百吨,而毛发中含2—3％的酪氨酸,大都从废液中排掉,茧丝工业的废水中和蚕蛹中都含有不少酪氨酸。L-多     

吖啶橙荧光染色法和Giemsa染色法对微核的比较观察

微核试验是筛选环境诱变物和化学致癌物的一种快速、经济的测定方法。到目前为止,只有小鼠骨髓细胞微核试验发展为标准的试验方法。并为国际环境致突变物和致癌物防护委员会所肯定。近年来,日本国立卫生试验所林真等人研究了能     

蛇床子素对L-和N-型钙通道的影响

目的:比较蛇床子素对不同钙通道亚型的作用差异方法:首先在tsA201细胞上瞬时转染Cav1.2,Cav1.3,Cav2.2e[37a],和Cav2.2e[37b]通道,然后采用全细胞膜片钳技术,记录tsA201细胞上的钙电流,并观察蛇床子素对各种钙通道亚型的影响结果:蛇床子素可以浓度依赖性抑制Cav1.2和Cav1.3电流,抑制的半有效浓度分别为162.1μmol·L^-1和56.2μmol·L^-1。此外,蛇床子素对Cav2.2通道也有一定的抑制作用,在300μmol·L^-1的浓度下,抑制38%的Cav2.2e[37a]电流和61%的Cav2.2e[37b]电流蛇床子素对钙电流的抑制是快速可逆的蛇床子素在各个测试电位水平均能抑制上述四种钙通道电流,但不改变电流的激活阈值和最大峰值电流的激活电压。结论:蛇床子素以浓度依赖的方式抑制多种钙通道亚型并表现出不同的亲和力     

星形胶质细胞存在L-型钙通道的新证据

以纯化培养的小鼠星形胶质细胞(Astrocyte,AS)为实验材料,采用激光共聚焦钙成像和荧光分光光度计技术,探讨钙激动剂Bay k8644和钙拮抗剂nimodipine对星形胶质细胞胞内钙离子浓度的影响。结果显示,Bay k8644在0.0001、0.001和0.01mmol/L浓度下均可显著增加星形胶质细胞的细胞内钙水平,而nimodipine在0.001、0.01和0.1mmol/L浓度下均可显著降低星形胶质细胞胞内钙水平,并阻止KCl引起的细胞内钙升高。上述结果表明星形胶质细胞对L-型钙通道激动剂和拮抗剂的反应与神经元的反应相似,提示星形胶质细胞胞膜上也存在L-型钙通道。     

蛇床子素对L-和N-型钙通道的影响

目的：比较蛇床子素对不同钙通道亚型的作用差异。方法：首先在tsA201细胞上瞬时转染Cavl．2,Cav1.3,Cav2．2e[37a],和Cav2．2e[37b]通道,然后采用全细胞膜片钳技术,记录tsA201细胞上的钙电流,并观察蛇床子素对各种钙通道亚型的影响。结果：蛇床子素可以浓度依赖性抑制Cav1．2和Cav1.3电流,抑制的半有效浓度分别为162．1μmol·L-1和56．2μmol·L-1．此外,蛇床子素对Cav2．2通道也有一定的抑制作用,在300μmol·L-1。的浓度下,抑制38％的Cav2．2e[37a]电流和61％的Cav2．2e[37b]电流,蛇床子素对钙电流的抑制是快速可逆的。蛇床子素在各个测试电位水平均能抑制上述四种钙通道电流,但不改变电流的激活阂值和最大峰值电流的激活电压。结论：蛇床子素以浓度依赖的方式抑制多种钙通道亚型并表现出不同的亲和力。     

日立L-8900型氨基酸分析仪用缓冲液的研究

为立足于氨基酸分析仪所用缓冲液国产化,论证其可行性和可靠性,确定缓冲液的最佳配方,采用进口和自配两套缓冲液对各氨基酸的分离度、试剂的稳定性和定量分析的准确性进行比较。使用自配缓冲液,各氨基酸的分离度较好,自配试剂能够较长时间保持稳定,定量分析准确。结论:日立L-8900型氨基酸分析仪所用自配缓冲液保存时间长、分离效果好、定量准确、经济、适用,有一定的应用价值。     

一种简单快速的聚丙烯酰胺凝胶电泳染色法——铜染色法

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)作为分离鉴定生物大分子的有效手段已广泛用于分子生物学和医学临床工作,迄今为止,用于该技术的染色法多沿用考马斯亮蓝(CBB)和银染色。但上述两法均有其局限性,如蛋白凝胶染色前须经酸醛固定,不易洗脱且操作繁琐,脱色耗时。最近,Lee等报道一种SDS-PAGE负染色法,利用氯化铜分别与凝胶中     

骨胳标本的染色法

骨胳标本若经过染色处理后,就制成“彩色骨胳标本”。彩色骨胳标本,具有色彩鲜艳夺目的艺术效果。制作彩色骨胳标本时,标本不用脱脂和漂白,利用染料把骨胳染上某种颜色即成。彩色骨胳标本采用单一染色法,即一具骨胳标本只染上某一种颜色。染料要选用明度高的暖调色彩(如红色、橙色),或中间调的色彩(如黄色、绿色)。染色要轻、浅、淡。这样处理,既不影响对骨胳的构造及质地的观察和使用,又能使骨胳标本具有工艺美术品的独特效果。     

快速简便的NOR染色法

自Good pasture等(1975)",首先用Ag-As银染 技术对9种动物中期染色体的核仁组织者(NOR)进 行了特异性染色以来,Ag染色已日趋广泛。M川er 等‘,,“。’认为,A g- As选择地染中期及前间期染色体 上转录活化的RNA 基因（18S和28S rRNA基因） rDNA的位点。这些结果与Hsu等t37用DNA/RNA 原位杂交定位核糖体的作用子所得的结果是一致的。 但Henderson等‘3,+,及Howell等【‘,则认为A g- As 是染核仁组织者上和rRNA转录相联系的特异酸性蛋 白质,而不是染rDNA, NOR研究正在不断地深人,方 祛也在不断地改进。同时,由于它可得到燕似于原位 杂交的结果,所以Ag染色法现已成为表征一个基因 功能的一种准确方法。在动、植物细胞遗传学、临床及 肿瘤细胞遗传学、体细胞遗传学以及在进化与发育等 研究中。都有着十分重要的意义。但目前所用的染色 方法耗时较长,一般需3-24小时。同时,由于氨银及 甲醛显影液不稳定,使显影时间不易标准化,故需对 Ag-NOR的显影进行显微镜检。因此操作较繁杂。找 们在Goodpasture"’和Howell等‘,’的实验基础上, 摸索了NOR快速、简便（只用1.5-2分钟,一步操作） 的染色法,得到较理想的结果。这在国内尚未见报道, 现简介如下。     

细菌芽孢的简易染色法

现有的细菌芽孢染色法,如孔雀绿法和石炭酸复红法等,虽然效果不错,但都需要使涂片锻火加热一定时间和不断添加染液,学生操作不便;芽孢边沿不清晰;同时,菌体中如有异染粒时,用孔雀绿法就易使异染粒的颜色与芽孢相混,不便观察。为解决以上问题,我们在教