不同组分胶原多肽抗氧化作用的比较研究

研究发现:碱性蛋白酶+中性蛋白酶+木瓜蛋白酶三酶水解工艺(Ⅱ法)的胶原多肽中,小分子肽的比率较碱性蛋白酶+中性蛋白酶双酶水解(Ⅰ法)的胶原多肽要多;在浓度为12 mg/mL时,前者对DPPH·的清除率为78.71%,后者为57.05%;在40 mg/mL时,二者清除·OH的能力分别为27.37%和89.12%.在相同给药剂量时,Ⅱ法多肽提高小鼠GHS-Px活力和降低MDA和LF含量的效果明显优于Ⅰ法多肽.     

硫酸软骨素对慢性酒精中毒大鼠脑损伤的保护作用

目的:探讨硫酸软骨素对慢性酒精中毒脑损伤的作用及可能机制.方法:雄性 Wistar 大鼠60只随机分为6组,酒精模型组以剂量为8ml·kg-1·d-150%的酒精每天灌胃一次,纳洛酮药物组给予乙醇半小时后腹腔注射纳洛酮0.08mg·k-1·d-1,硫酸软骨素低、中、高剂量干预组在酒精模型组的基础上分别给予硫酸软骨素50、100、150mg·kg-1·d-1,空白对照组给予等体积的蒸馏水,持续2周;第三周把50%的酒精的剂量递增为12mg·kg-1·d-1,持续灌胃6周.在第八周末实验结束后取血,分离血清,留取脑组织.HE染色观察各组大鼠神经细胞的变化.生化测定各组大鼠血清及脑组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及脂质过氧物终未产物丙二醛(MDA);并测定脑皮质中β-内啡肽含量(β-EP).结果:模型组大鼠大脑皮质和海马区神经元数量明显减少,神经细胞排列紊乱.硫酸软骨素中剂量组大鼠大脑皮质和海马区神经细胞排列层次较清晰.与酒精组相比较,硫酸软骨素中剂量组大鼠血清和脑组织匀浆中MDA含量明显降低(P<0.01),脑皮质中β-内啡肽含量明显降低(P<0.01);GSH-PX含量及SOD活性显著升高(P<0.01).结论:硫酸软骨素对大鼠慢性酒精中毒脑损伤具有保护作用.     

人参低聚肽对急性酒精中毒大鼠的保护作用

目的：探讨吉林人参低聚肽（GOP）对酒精诱导的大鼠急性酒精中毒的防治作用及其可能机制。方法：采用SPF级SD雄性大鼠,随机分为7组,每组10只,包括1个空白对照组、1个模型对照组、1个乳清蛋白对照组（0.250 0g/kg）和4个GOP剂量组（0.062 5、0.125 0、0.250 0、0.500 0g/kg）。连续灌胃30d后,采用体积分数50%的酒精以7g/kg BW 剂量灌胃,观察大鼠翻正反射,测定大鼠血清ALT、AST、TC、TG、HDL-C和LDL-C的含量,及肝组织ADH与大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平。结果：与模型对照组相比,人参低聚肽干预组大鼠翻正反射消失的比率、血清TNF-α、IL-6、IL-1β的水平明显降低（P＜0.05）,血清ALT、AST及肝组织ADH活性显著升高（P＜0.05）,但TC、TG、HDL-C和LDL-C含量与模型对照组相比无统计学差异（P＞0.05）。结论：人参低聚肽可有效保护机体免受急性酒精中毒的伤害和防治急性肝损伤。     

蜂蜜对急性酒精中毒大鼠的解酒作用研究

目的：研究蜂蜜对急性酒精中毒SD大鼠的解酒作用及其对酒精代谢关键酶的影响。方法：用75%食用级无水乙醇按10mL/kg一次性灌胃法构建急性酒精中毒大鼠模型,以解酒护肝鼎久口服液为阳性药物对照,采用蜂蜜高、中、低3个浓度进行灌胃干预。以大鼠血清乙醇浓度、肝脏乙醇脱氢酶（Alcohol Dehydrogenase,ADH）和乙醛脱氢酶（Acetaldehyde Dehydrogenase,ALDH）、胃ADH和ALDH为考察指标。结果：与模型组比较,蜂蜜低、中浓度组大鼠血清乙醇浓度均显著降低(P<0.05),蜂蜜高浓度组大鼠血清乙醇浓度极显著降低（P<0.01）,蜂蜜中、高浓度组极显著提高大鼠肝ADH和胃ALDH活性（P<0.01）,蜂蜜各浓度组可显著提高胃ADH和肝ALDH活性（P<0.05或P<0.01）。结论：蜂蜜能够通过提高肝脏和胃的ADH和ALDH活性从而显著降低大鼠血清乙醇浓度,具有明显的解酒作用。     

胶原多肽铬对四氧嘧啶致小鼠肝脏损伤的保护作用

目的:研究胶原蛋白多肽铬螯合物对小鼠四氧嘧啶致肝损伤在形态结构方面的保护作用.方法:30只昆明小鼠随机分为正常对照组、四氧嘧啶模型组及胶原蛋白多肽铬螯合物(CPCC)组.胶铬组灌胃(Cr3 40μg/kg BW)28d,正常组和模型组给予等体积蒸馏水.腹腔注射四氧嘧啶造模,3d后观察肝脏形态学变化、测定肝指数并分析肝脏可溶性蛋白的变化.结果:CPCC处理使四氧嘧啶处理后小鼠肝脏肿大、肝小叶粘连现象明显改善;肝指数降低;减轻肝细胞变形、肝窦淤血、炎症细胞浸润及肝细胞空泡样变、血管内皮细胞损伤,核变性程度.同时CPCC能有效防止四氧嘧啶所致小鼠肝脏可溶性蛋白的变化.结论:CPCC对四氧嘧啶致小鼠肝脏损伤具有明显的保护作用.     

人参低聚肽对急性酒精中毒大鼠的作用研究

目的：评价人参低聚肽（ginseng oligopetides,GOPs）对急性酒精中毒大鼠的作用效果。方法：根据体重将大鼠随机分为酒精模型组、乳清蛋白组（250 mg/kg·BW）和4个GOPs剂量组（62.5、125、250、500 mg/kg·BW）,另设1个正常对照组,每组10只。GOPs灌胃30 d后,以4 g/kg·BW浓度灌胃染毒造成大鼠急性酒精中毒模型（翻正反射实验为7 g/kg·BW）,进行行为学实验（包括翻正反射、转棒和网上攀附实验）、检测血乙醇浓度,并检测大鼠肝脏乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶（ALDH）的活性。结果：GOPs干预能明显减少急性酒精中毒大鼠的翻正反射消失比率,延长网上攀附时间,增加醉酒大鼠在转棒上的停留时间,降低血乙醇浓度及提高肝脏ADH、ALDH活性。结论：GOPs可以通过加速酒精在体内的代谢,加强肝脏乙醇代谢酶活性,改善酒精引起的行为异常,从而对急性酒精中毒大鼠具有保护作用。     

硫酸软骨素对慢性酒精中毒氧化损伤的保护作用

目的:研究硫酸软骨素时慢性酒精中毒氧化损伤的保护作用.方法:60只Wistar大鼠随机分成六个组:空白组给予蒸馏水,酒精模型组给予50%的酒精8 ml·kg-1·d-1灌胃,纳洛酮组在给予酒精三十分钟后腹腔注射纳洛酮0.08mgkg-1·d-1,硫酸软骨素低、中、高剂量组在酒精模型组的基础上分别给予硫酸软骨素50,100和150mg·kg-1·d-1.两周后酒精的剂量增加到12mg·kg-1d-1.在第八周末,分离大鼠脑组织,观察大鼠神经细胞.用生物方法测定大鼠脑组织中GSH-PX、SOD、MDA以及Ache的活性.结果:模型组大鼠大脑皮质和海马区神经细胞的数量明显减少并且排列紊乱;和酒精模型组相比较,硫酸软骨素中剂量组大脑皮质和海马区神经细胞排列较整齐,酒精+Chondroitin组脑组织中MDA的含量和Ache降低(P＜0.01),GSH-PX的含量和SOD的活力均明显增加(P＜0.01).结论:硫酸软骨素时慢性酒精中毒氧化损伤具有保护作用.     

胰多肽对急性胰腺炎大鼠的细胞保护作用

用5%牛磺胆酸钠-胰蛋白酶溶液直接注入大鼠胰导管,制备成急性出血坏死性胰腺炎模型。由腹腔于制备前预防性地和制备后治疗性地结合注射剂量为3μg/kg 的牛胰多肽,能使病鼠的死亡率由对照的100%降到33%,已死鼠平均存活时间由对照的13±3小时延长到20±2小时,血清淀粉酶浓度升高的峰值降为对照的35%,胰腺组织学切片呈轻度急性胰腺炎或向慢性胰腺炎转化。单纯在制备前预防性地注射牛胰多肽或仅在制备后作治疗性注射,也有同样作用,但效果较差。这项结果提示,胰多肽对急性出血坏死性胰腺炎具有预防和治疗两方面的功效,即对胰腺有细胞保护作用。抑制胰酶的分泌和释放可能是它的作用机制之一。     

葵粕多肽抗皮肤光老化作用的研究

本文以昆明小鼠为研究对象,研究了用葵粕分离蛋白加工的多肽,即葵粕多肽(SMP)对紫外线诱导的小鼠光老化皮肤的保护作用。试验动物分为五组,基础对照组不进行紫外线照射,模型组紫外线照射并涂抹蒸馏水,阳性对照组照射并涂抹Vc,大小剂量组照射并涂抹多肽样品,样品浓度分别为15%和30%。通过对小鼠皮肤组织形态的观察和皮肤生化指标分析,发现模型组小鼠皮肤表面有明显红斑,皮肤粗糙,有粗深的皱纹,葵粕多肽大剂量组小鼠皮肤皱纹已不明显,接近正常组小鼠皮肤;多肽大剂量组可降低皮肤组织中丙二醛的含量和增加羟脯氨酸的含量,差异极显著(P0.01)。研究表明:葵粕多肽有抗氧化和抗皮肤光老化的作用。     

硫酸软骨素对慢性酒精中毒氧化损伤的保护作用(英文)

目的:研究硫酸软骨素对慢性酒精中毒氧化损伤的保护作用。方法:60只Wistar大鼠随机分成六个组:空白组给予蒸馏水,酒精模型组给予50%的酒精8ml·kg-1·d-1灌胃,纳洛酮组在给予酒精三十分钟后腹腔注射纳洛酮0.08mgkg-1·d-1,硫酸软骨素低、中、高剂量组在酒精模型组的基础上分别给予硫酸软骨素50,100和150mg·kg-·1d-1。两周后酒精的剂量增加到12mg·kg-1d-1。在第八周末,分离大鼠脑组织,观察大鼠神经细胞。用生物方法测定大鼠脑组织中GSH-PX、SOD、MDA以及Ache的活性。结果:模型组大鼠大脑皮质和海马区神经细胞的数量明显减少并且排列紊乱;和酒精模型组相比较,硫酸软骨素中剂量组大脑皮质和海马区神经细胞排列较整齐,酒精+Chondroitin组脑组织中MDA的含量和Ache降低(P<0.01),GSH-PX的含量和SOD的活力均明显增加(P<0.01)。结论:硫酸软骨素对慢性酒精中毒氧化损伤具有保护作用。     

茶多酚对慢性酒精中毒大鼠肝损伤的保护作用

目的：建立慢性酒精诱导的成年大鼠肝损伤动物模型,并进行茶多酚的干预,观察茶多酚的干预对慢性酒精诱导的肝损伤大鼠的防护作用及其可能的机制。方法：将36只SD大鼠适应性喂养一周后,随机分为对照组、酒精损伤组和茶多酚干预组（每组12只）。对照组大鼠用0.9%生理盐水按7 g/kg灌胃,酒精组用体积分数56%的红星牌白酒同剂量灌胃,茶多酚干预组在酒精灌胃同时给予0.25 g/kg剂量的茶多酚。每天定时灌胃一次,连续8周。8周后处死大鼠,取内脏脂肪和肝脏组织,以脂体比衡量内脏脂肪含量,以肝体比和油红O染色结果衡量肝脂质沉积,测定超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力等氧化应激指标,测定肝脏组织中脂肪酸转位酶（FAT/CD36）蛋白水平。结果：与对照组相比,酒精损伤组大鼠内脏脂肪含量、SOD/MDA比值、T-AOC和GSH-Px活力显著下降（（P<0.05或P<0.01）,肝体比、FAT/CD36蛋白水平显著提高（P<0.01）,肝细胞中脂滴增加;与酒精损伤组相比,茶多酚干预组大鼠内脏脂肪含量、SOD/MDA比值、T-AOC和GSH-Px活力显著增加（（P<0.05或P<0.01）,肝体比、FAT/CD36蛋白水平显著下降（P<0.01）,肝细胞中脂滴减少。结论：茶多酚干预能改善慢性酒精中毒大鼠肝脏的脂质沉积和氧化应激状态,并伴有肝细胞膜上FAT/CD36表达的减少。     

黑豆多肽分离及其抗氧化活性的研究

采用凝胶柱层析法分离具有抗氧化活性的黑豆多肽,并分析其分子量分布;同时还采用DPPH·清除法研究各分离肽段的抗氧化活性,对抗氧化活性最佳的肽段进行动力学分析.结果表明:黑豆多肽经分离后得到3个片段,黑豆小分子肽BSP3对DPPH·自由基具有最强清除作用,其半清除浓度(HSC50)为0.664 mg/mL.所以,分子量小于1000 Da的黑豆小分子肽具有很好的抗氧化活性.     

鹿茸多肽对缺铁性贫血大鼠的治疗作用及机制研究

摘要 目的：研究鹿茸多肽（PAP）对缺铁性贫血（IDA）大鼠的治疗作用并探讨其可能机制。方法：使用缺铁饲料诱导IDA大鼠模型,将40只IDA大鼠随机分为模型组（灌胃等体积的生理盐水）,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组（分别灌胃30、60和120 mg/kg的PAP）,每组10只,另选取10只正常饲料喂养的同龄健康大鼠作为对照组（灌胃等体积的生理盐水）。每天灌胃1次,疗程为4周。末次给药24 h后,测量各组大鼠的体重、肝脏和脾脏指数,对肝脏和脾脏组织进行苏木素伊红（HE）染色。通过ELISA法检测血红蛋白（Hb）和促红细胞生成素（EPO）含量,通过比色法检测血清铁（SI）含量,通过透射电子显微镜观察肝脏和脾脏线粒体超微结构。使用相应试剂盒检测血清氧化应激指标水平。通过Western blot检测骨髓转铁蛋白受体（TFR）蛋白表达水平。结果：与模型组相比,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组大鼠体重均升高,肝脏和脾脏指数均降低（P<0.05）,且大鼠的肝脏和脾脏形态和线粒体超微结构明显改善,Hb、EPO和SI水平均升高（P<0.05）。与模型组相比,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组大鼠的血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）水平均升高,而丙二醛（MDA）降低（P<0.05）。与模型组相比,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组大鼠的骨髓TFR蛋白相对表达量降低（P<0.05）。结论：本研究表明PAP可有效减轻IDA大鼠的临床症状,促进红细胞生成,增强造血功能,改善铁代谢,提高抗氧化能力,促进线粒体合成。     

牛胰多肽对大鼠胰外分泌的抑制作用

在大鼠观察了牛胰多肽(BPP)对由蛋白胨和雨蛙素引起的大鼠胰外分泌的影响。向十二指肠灌入25%蛋白胨后90min 时,对照组的蛋白排出量约为其基础值的10倍,而1、3、5及10ug/kg BPP 剂量组的蛋白排出量分別为对照组的47%、33%、29%及29%。在灌注剂量为3μg/kg 雨蛙素后60min 时,对照组的蛋白排出量约为其基础值的14倍,但3、5及10μg/kgBPP 剂量组的蛋白排出量分別为对照组的74%、68%及55%。各组胰淀粉酶浓度的变化和其蛋白排出量变化相平行。胰液量的增加不受 BPP 影响。结果提示,BPP 能抑制胰酶的大量分泌,并有剂量依从关系,但不抑制胰液量。     

氧化苦参碱对阿霉素所致大鼠心肌损伤的保护作用研究

目的：研究氧化苦参碱对阿霉素致大鼠心肌损伤的保护作用。方法：SD大鼠随机分成4组,阿霉素级（adriamycin,ADM）、阿霉素＋氧化苦参碱组（oxymatrine,OMT）,氧化苦参碱组,正常对照组。免疫组化染色法检测大鼠心肌Ⅰ Ⅲ型胶原的表达,用光镜及电镜观察心肌组织的病理改变及超微结构变化。结果：ADM组中大鼠心肌Ⅰ Ⅲ型胶原的表达显著增加,ADM＋OMT组也有相似改变,但较ADM组有显著下降,两组之间有显著差异（P〈0．05）;正常对照组与OMT组无变化。光镜及电镜结果显示ADM组与ADM＋OMT组大鼠心肌组织,均有损伤,但ADM＋OMT组较ADM组损伤明显减轻。OMT组动物未观察到心肌组织病理变化。结论：氧化苦参碱对阿霉素所致大鼠心肌损伤具有保护作用。     

固态发酵苦荞制备多肽菌种的筛选

【目的】筛选固态发酵苦荞高产多肽及发酵产物液具有抗菌、抗氧化活性的菌株。【方法】采用米曲霉、酱油曲霉、雅致放射毛霉和少孢根霉分别对苦荞进行固态发酵,以蛋白酶活力、水解度、可溶性肽得率、抑菌率和体外自由基清除率作为筛菌指标。【结果】米曲霉固态发酵苦荞的可溶性肽得率最高达38.83%±1.18%,发酵产物液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别为96.62%±1.66%和97.54%±0.54%,同时羟自由基(·OH)清除率和二苯基苦味酰基苯肼自由基(DPPH·)清除率分别为55.65%±1.25%和10.84%±1.03%。对米曲霉发酵2 d发酵产物液的不同分子量分布及活性分析表明,分子量大小对抗菌及抗氧化活性有一定的影响。【结论】米曲霉可作为固态发酵苦荞制备多肽且发酵产物液具有抗菌及抗氧化活性的最佳菌株,并在多肽产量提升及抗菌、抗氧化活性的研究上具有巨大空间。     

I型胶原对巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白的作用

为探讨胶原的存在对细胞摄取氧化低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）的影响,本研究在体外制成Ｉ型胶原凝胶和巨噬细胞实验体系,ＬＤＬ经Ｃｕ＾２＋催化氧化,丙二醛（ＭＤＡ）及乙酰化修饰后,与胶原的结合能力明显增强,但４－羟基壬烯醛（ＨＮＥ）修饰的ＬＤＬ与胶原的结合能力反应不如天然ＬＤＬ。当小鼠腹腔巨噬细胞培养在胶原凝胶上时,其对ｏｘ－ＬＤＬ的摄取明显减少,这时大部分ｏｘ－ＬＤＬ为胶原凝胶所结合,如用细胞松弛素Ｄ     

白藜芦醇甙对慢性酒精中毒大鼠前额叶皮质cdk5表达的影响

目的:研究白藜芦醇甙对慢性酒精中毒大鼠学习记忆及前额叶皮质区细胞周期依赖性蛋白激酶5(cdk5)表达的影响。方法:建立大鼠慢性酒精中毒模型,Y-型迷宫测试空间学习与记忆成绩,实时定量PCR分析前额叶皮质组织cdk5 mRNA的表达;免疫组织化学方法检测大鼠前额叶皮质区cdk5表达。结果:学习记忆测试显示模型组大鼠学习记忆成绩比正常组明显下降,白藜芦醇甙各剂量组与模型组相比,学习记忆成绩明显上升;免疫组化结果表明模型组大鼠前额叶皮质区cdk5阳性表达较正常组明显增多,各剂量组与模型组相比,cdk5阳性表达明显减少;实时定量PCR结果表明模型组大鼠前额叶皮质区cdk5 mRNA表达较正常组明显上升,各剂量组与模型组相比,cdk5 mRNA表达明显下降。结论:白藜芦醇甙可能通过对cdk5表达的调节而发挥抗酒精中毒作用。     

大鼠软骨Ⅱ型胶原体外胶原原纤维的形成

建立了Ⅱ型胶原的提取和纯化方法,观察大鼠软骨Ⅱ型胶原体外胶原原纤维形成的动力学、胶原原纤维的稳定性和超微结构。结果表明,Ⅱ型胶原静止期、增长期分别为15、120min,增长期凝胶化速率0.0060,凝胶可复性13.58％,胶原原纤维呈典型的具有64nm周期横纹的自然纤维结构,但纤维直径较体内增长。这些对研究体内胶原原纤维的形成过程及调节机制具有重要意义。     

苦荞多肽的纯化、结构与体外抗氧化活性研究CSCD

为了探究苦荞多肽粗提液抗氧化活性的主要来源,需要进一步对苦荞多肽进行分离纯化,通过结构鉴定来分析抗氧化活性与多肽结构之间的关系。该研究以苦荞功能提取物废渣为原料提取苦荞粗蛋白辅以植物乳杆菌发酵法制备苦荞多肽,采用大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶、液相色谱对苦荞多肽粗提液进行分离纯化,并以抗氧化活性为指标,筛选抗氧化活性较强的组分,利用液相色谱-质谱联用技术鉴定抗氧化多肽结构。结果表明,纯度不同的苦荞多肽抗氧化能力也不同,经过Sephadex G-15葡聚糖凝胶分离纯化得到的T-3组分ABTS和DPPH自由基清除能力最优,清除率分别为96%、94%。纯化后苦荞多肽的抗氧化活性显著高于粗提液(P<0.05),但是抗氧化活性并没有完全与苦荞多肽纯度呈正相关,通过液相色谱进一步分离纯化T-3组分后得到的组分T-3-1,苦荞多肽纯度虽然达到了98%,但是对DPPH和ABTS抑制率不再增强,反而稍有下降,抑制率分别为89%和90%。由质谱鉴定结果得到,主要抗氧化肽的氨基酸序列为苯丙氨酸-脯氨酸-酪氨酸Phe-Pro-Tyr(FPY)和酪氨酸-亮氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸Tyr-Leu-Pro-Phe(YLPF)。研究结果以期为苦荞多肽的进一步开发利用提供一定的理论基础。